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Diversidad Celular: Análisis y Técnicas

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La Célula: Diversidad de tipos celulares

Mariángel De La Cruz Osorio & María José Angulo Rojas

Dos estudiantes de medicina apasionadas por la investigación.

Abstract
The report detailed the study carried out in the laboratory Objetivos
on cellular diversity, with the aim of observing and Objetivos.
analyzing different types of cells. The process of observing
and analyzing samples is described in detail, including the Distribución y ubicuidad de los microorganismos
use of reagents and stains to obtain accurate observations. •Identificar la presencia de microorganismos en distintos
The samples were examined under the microscope, ambientes.
allowing the identification of their structures with the help
Técnicas de coloración bacteriana (tinción simple y diferencial)
of the material provided by the teacher. This study has
allowed an exhaustive exploration of the cellular diversity •Aplicar la tinción simple para observar bacterias.
present. •Comparar la tinción de Gram en bacterias Gram positivas y
Resumen negativas.
El informe detalla el estudio llevado a cabo en el Metabolismo bacteriano
laboratorio sobre diversidad celular, con el objetivo de •Investigar las vías metabólicas de distintas bacterias.
observar y analizar distintos tipos de células. Se describe en
•Evaluar el efecto de condiciones ambientales en el crecimiento
detalle el proceso de observación y análisis de las muestras,
bacteriano.
incluyendo el uso de reactivos y tinciones para obtener
observaciones precisas. Las muestras fueron examinadas Sensibilidad bacteriana
bajo el microscopio, permitiendo la identificación de sus •Determinar la susceptibilidad bacteriana a agentes
estructuras con la ayuda del material proporcionado por el antimicrobianos.
docente. Este estudio ha permitido una exhaustiva
•Analizar patrones de resistencia bacteriana.
exploración de la diversidad celular presente.
METODOLOGIA
INTRODUCCION
Materiales
El estudio de los microorganismos es fundamental para
1. .Colorantes (Azul de metileno, Cristal violeta, Carbol
comprender la diversidad y las capacidades de los organismos
fucsina)
que habitan en nuestro entorno. En este informe de laboratorio
2. 1 asa de inoculación
se explorarán cuatro temas esenciales: la distribución y
3. 1 aguja de inoculación
ubicuidad de los microorganismos, las técnicas de coloración
4. 1 Mechero de alcohol
bacteriana (tinción simple y diferencial), el metabolismo
5. 1 encendedor
bacteriano y la sensibilidad bacteriana.
6. Cinta de rotular
7. Marcador (Sharpie)
Primero, se analizará la distribución y ubicuidad de los 8. Microscopio
microorganismos, destacando su presencia en diversos hábitats 9. Puente de coloración
y las implicaciones ecológicas y médicas de esta diversidad. A 10. Frasco lavador
continuación, se describirán las técnicas de coloración 11. Aceite de inmersión
bacteriana, herramientas cruciales para la identificación y 12. Papel de arroz
caracterización de bacterias, con énfasis en la tinción simple y 13. Papel toalla
la tinción diferencial. Seguidamente, se estudiará el 14. Láminas o portaobjetos
metabolismo bacteriano, explorando las vías metabólicas que 15. Cultivos en agar de 24 horas de E. coli y Bacillus sp.
permiten a las bacterias crecer y adaptarse a diferentes suministrados por el profesor
condiciones ambientales. Finalmente, se abordará la 16. Cultivos en caldo de 24 horas de S.aureus suministrados por
sensibilidad bacteriana, evaluando cómo las bacterias responden el profesor
a diversos agentes antimicrobianos y las técnicas utilizadas para 17. Reactivos requeridos para la coloración de Gram: Cristal
determinar su susceptibilidad. violeta, Safranina, Lugol y alcohol acetona.
18. Cultivos de estreptococos, estafilococos, bacilos Gram (+) y
Gram (-)
Este informe busca proporcionar una comprensión integral de 19. Cajas de Petri con agar Muelller-Hinton o nutritivo
estos aspectos fundamentales de la microbiología, destacando 20. Escobillón de algodón estéril
su relevancia en la investigación científica y su aplicación en 21. Incubadora
campos como la medicina, la biotecnología y la ecología 22. Cultivo de 24-48 horas de Escherichia coli, Staphylococcus
aureus, Klebsiella spp en caldo nutritivo.
Palabras claves: gram positivo, ubicuidad, microorganismos,
23. Sensidiscos para antibiograma
resistencia bacteriana, microbiología, identificación bacteriana.
24. 2 cajas con agar almidón
25.

25. tubos con campana de Durham y 5mL de cada uno de sobre la superficie de la mesa de trabajo. Después, se
los siguientes medios: glucosa rojo de fenol, lactosa rojo de aplicó el escobillón sobre un extremo de la superficie
fenol, sacarosa rojo de fenol y manitol-rojo de fenol. de agar en una caja de Petri, haciendo estrías con el
26. 2 tubos con 7mLde medio SIM (Sulfuro, Indól, asa estéril. Se tapó la caja, se invirtió y se marcó
Motilidad) adecuadamente, luego se incubó a 37°C durante 24 a
48 horas. Se utilizó un escobillón estéril para frotar
27. 2 tubos con 7mL de medio TSI (triple azúcar hierro) o sobre cualquier parte de la superficie del cuerpo o
Klinger (dos azucares, hierro) solidificados en forma para insertarlo en la nariz o carrillo de la boca,
inclinada frotando suavemente la mucosa. Luego se inoculó
28. 2 tubos con 7mL medio de citrato de Simmons una caja de agar nutritivo y se incubó a 37 °C durante
solidificados en forma inclinada 24 a 48 horas.
29. 2 tubos con 7mL de caldo urea TÉCNICAS DE CULTIVO.
30. H202 (Peróxido de hidrógeno) Se realizaron las siembras en cajas de agar de l a
siguiente manera:
31. Suero humano o de conejo
- Se dividió la parte posterior externa de la caja en
Paso a Paso cuatro cuadrantes con un marcador.
TÉCNICAS DE COLORACIÓN BACTERIANA - Con un asa previamente flameada y enfriada, se
(TINCIÓN SIMPLE Y DIFERENCIAL) inoculó la muestra haciendo 4-5 estrías simples muy
1) El procedimiento de preparación de muestras consistió en juntas de lado a lado sobre el primer cuadrante de la
depositar una gota de cultivo bacteriano en un portaobjetos caja, luego se cerró.
limpio, cubrirla con un cubreobjetos y observarla al - Se procedió a girar la caja, enfriar el asa y realizar un
microscopio, haciendo esquemas y describiendo lo segundo grupo de estrías en el segundo cuadrante. Se
observado. Si la muestra estaba en medio sólido, se repitió este procedimiento en el tercer cuadrante y se
colocaba una gota de solución salina sobre el portaobjetos, realizó la siembra en el último cuadrante sin flamear
se tocaba una colonia de cultivo con el asa estéril y se hacía el asa y haciendo estrías más abiertas.
una emulsión en la gota, para luego observarla al
microscopio. - Las cajas se incubaron a 37°C durante 24 a 48 horas,
colocándolas invertidas para evitar que la
.Para las preparaciones coloreadas, se seguían instrucciones condensación caiga sobre el cultivo.
específicas para cada colorante básico, como carbol fucsina,
cristal violeta o azul de metileno. Se cubrían los frotis con Para el cultivo en tubos con caldo nutritivo:
el colorante indicado durante un tiempo específico, se - Se tomó el tubo que contenía el cultivo puro, se retiró
lavaban con agua para remover el exceso de colorante, se la tapa del tubo y se flameó la boca del mismo.
secaban con papel toalla y se examinaban bajo el objetivo - Se introdujo el asa en el tubo sin tocar las paredes y
de inmersión. se tomó un poco del cultivo. Luego se flameó
(El procedimiento consistió en preparar, secar y fijar la nuevamente la boca del tubo, se tapó y se dejó en una
muestra, luego se cubrió con cristal violeta y se dejó actuar gradilla.
durante un minuto. Después, se cubrió con solución yodada - Posteriormente, se tomó un tubo de caldo nutritivo
de Gram (Lugol) durante un minuto, se lavó con agua, se estéril, se destapó y flameando la boca del tubo con
decoloró con alcohol acetona durante 20 a 30 segundos y se un mechero, se introdujo el asa con la muestra
volvió a lavar con agua. Posteriormente, se cubrió el obtenida. Se realizaron movimientos de rotación con
extendido con safranina, se dejó actuar durante un minuto, el asa para emulsionar con el caldo las paredes del
se lavó con agua, se secó y finalmente se observó al tubo. Luego se retiró el asa, se flameó la boca del
microscopio con el objetivo de inmersión. tubo y se tapó.
CULTIVO BACTERIANO - Los tubos se incubaron a 37°C durante 24 horas para
Se esterilizó la aguja de inoculación observar el crecimiento obtenido.
Se tocó una colonia de la muestra a analizar. Finalmente, para el cultivo en tubos con agar
Se inoculó el TSI o Kliger, introduciendo la aguja hasta el inclinado, se procedió de manera similar a la siembra
fondo, luego se sacó y se hizo una estría en zig-zag en la anterior, pero utilizando una aguja de inoculación
superficie del bisel.Sin tomar una muestra y sin flamear la para realizar una punción y estría en el plano
aguja, se inoculó el agar citrato de Simmons haciendo inclinado
estrías en la superficie del bisel. Luego, sin flamear se SENSIBILIDAD BACTERIANA
introdujo la aguja hasta la mitad del contenido del agar Se procedió a humedecer el hisopo en la suspensión
SIM. Se inoculó el agar blando procediendo como en el de cultivo, eliminando el exceso de caldo mediante
paso anterior. Finalmente y sin flamear la aguja, se inoculó presión y giro sobre la pared interna del recipiente,
el caldo urea agitándola se incubaron todos los tubos de manteniéndolo por encima del nivel del caldo.
estas pruebas a 37°C por 24 horas.
Posteriormente, se estrió el medio en tres o cuatro
DISTRIBUCION Y UBICUIDAD DE LOS direcciones sobre la totalidad de la superficie del agar
MICROORGANISMOS con el fin de obtener un inóculo uniforme, y se
Se colocó una caja de Petri en el laboratorio y se dejó permitió un período de secado de 3 a 4 minutos.
expuesta al medio ambiente durante 15 minutos. Luego se Luego, utilizando pinzas estériles, se dispusieron los
tapó y se marcó adecuadamente, y se incubó a 37 °C sensidiscos en un lapso no mayor a 15 minutos
durante 24 a 48 horas.Se tomó un escobillón y se frotó después de haber inoculado la caja. Se ejerció una leve
presión sobre los discos para asegurar el contacto con la
superficie, evitando la sobreposición de las zonas de
inhibición mediante una distribución adecuada y RESULTADOS
manteniendo un límite no inferior a 15 cm desde los bordes 1. OBSERVACION DE CELULA VEGETAL
de la placa. La Cebolla: Gracias a este reactivo que se le aplico a la
Finalmente, las cajas fueron invertidas e incubadas a 37 ˚C muestra se logró ver con más profundidad las partes de esta
durante un periodo de 16 a 18 horas para el crecimiento célula, así como el núcleo y su pared celular, como su
del cultivo. conformación y organización en los tejidos se puede
observar las células vegetales de la epidermis en el
microscopio en formas de celdas y alargadas, donde se
RESULTADOS puede diferenciar la membrana y el citoplasma.

Fig 1. Cebolla OBJ 4X


TOMATE: Se observo las células de la pared celular
bastante definidas, también se notó la presencia de los
cromoplastos logrando ver detalladamente la estructura

Fig,2 Pulpa del tomate Fig. 3 Cascara del tomate


1) PAPA: Se logró apreciar las células teñidas de color
morado se logró ver la presencia de un polisacárido que se
llama almidón y la papa posee una gran cantidad de
almidón se pudo visualizar los amiloplastos donde las
células de la papa almacenan el almidón. Por efecto de la
tinción con solución de Lugol, han virado del color blanco
al azul- violáceo.

}
Fig. 4 Papa Fig. 4 Papa obj
2) Elodea: 4x se logró observas las células rectangulares
BACILOS: Se logro mirar distintas estructuras fueron
que simulan una pared en forma de ladrillos luego se
teñidas y las gram negativas que son las que están
observó al 10x pudiendo observar las células aumentadas
decoloradas.
logrando ver con mayor claridad los cloroplastos dentro de
las células.
Fig 12 Bacilos

Fig 6 Elodea Obj


Fig 5 Elodea Obj
DISCUSION
CELULAS EPITELIALES En la discusión de este informe de laboratorio sobre la
Mucosa bucal: En el microscopio donde se logró diversidad celular, es importante resaltar la variedad de
identificar la cantidad de células de la mucosa bucal, se muestras utilizadas y las diferencias observadas entre
pudo observar con claridad algunas estructuras como los células animales, células vegetales, células epiteliales y
núcleos los cuales se tiñeron de un color azul oscuro y un microorganismos. Las muestras de mucosa bucal y sangre
azul pálido en el citoplasma el cual también se pudo proporcionaron un claro contraste entre células animales,
observar de una manera clara. con su membrana celular flexible y ausencia de pared
Fig 7 Mucosa bucal Fig 8 Mucosa bucal celular, en comparación con las células vegetales de la
papa, cebolla y tomate, que presentan una pared celular
rígida y cloroplastos en el caso de las células vegetales.
Estas diferencias estructurales son fundamentales para
comprender las distintas funciones y adaptaciones de cada
tipo celular. Además, la observación de bacterias (cocos y
bacilos) permitió apreciar la diversidad morfológica en
microorganismos, así como sus diferentes modos de
reproducción y adaptación a distintos ambientes.
La identificación y comparación de estas diversas muestras
Sangre: se lograron ver células epiteliales, como glóbulos resaltan la importancia de comprender la diversidad celular
rojos, plaquetas se puede identificar que las células (de en el contexto biológico, así como su relevancia en
color rosado) tiene una membrana celular muy delgada, aplicaciones prácticas en campos como la medicina, la
propio a las características de las células eucariotas. biotecnología y la investigación científica.
CONCLUSION
Teniendo en cuenta todas las practicas realizadas se llega a
la conclusión que se puede logar observar y reconocer la
forma, tamaño y estructura de los distintos tipos de células.
Hablando un poco de las células eucariotas se permitió la
visualización y poder señalar lo que las hace distinta a las
células procariotas logrando comparar sus morfologías y
estructuras de los distintos tipos de células. Se pudo
Fig 9 Sangre Fig 10 Sangre establecer que para tener una clara identificación y un
resultado más profundo de este laboratorio a la hora de
BACTERIAS estudiar las muestras, por lo general se debe emplear el uso
de reactivos y que las muestras sean cortadas en cortes muy
LOS COCOS: Se logro apreciar la característica delgados que pueden ser colocados en un portaobjetos de
morfológica de la bacteria con mayor claridad y detalle, vidrio y después sean teñidos para así revelar diferentes
como su forma, tamaño, de los cocos bacterianos. componentes de las célula. Gracias a la intervención del
microscopio, quedó claro que las plantas y los animales son
conjuntos de células, que las células también puede existir
como organismos independientes y que cada célula está
viva en el sentido de que puede crecer, reproducirse, y
formarse de una manera distinta.
El estudio detallado de estas muestras nos ha permitido
apreciar y comprender la amplia variedad de estructuras
celulares presentes en los diferentes organismos estudiados,

Fig 11 cocos Fig 11 cocos


destacando su importancia tanto a nivel teórico como Cuadro comparativo célula animal y vegetal
práctico en el ámbito científico.
PREGUNTAS ADICIONALES
-¿Cuáles son las características generales de las células
procariotas? Las células procariotas, como las bacterias y
arqueas, se caracterizan por la ausencia de un núcleo
definido, teniendo su material genético disperso en el
citoplasma. Su ADN es circular, carecen de organelos
membranosos y poseen ribosomas más pequeños. Además,
muchas tienen una pared celular que les proporciona
soporte y protección. Estas características reflejan una
organización celular más simple en comparación con las
células eucariotas.
¿Qué tan diferente podría ser la vida en la tierra, y para ¿Cómo se originaron los organismos multicelulares?
los seres humanos, si no hubiesen surgido las bacterias?
El origen de los organismos multicelulares es un tema
La ausencia de bacterias tendría un impacto masivo en la
complejo con varias hipótesis propuestas. Estas incluyen la
vida en la Tierra y en la existencia humana. Las bacterias
asociación colonial, la simbiosis y la evolución concertada
son vitales para los ciclos biogeoquímicos, el sostenimiento
como posibles mecanismos que llevaron a la evolución de
de la vida, la salud humana, los ecosistemas acuáticos y
organismos multicelulares a partir de formas de vida
muchos otros aspectos fundamentales de la vida en el
unicelulares. Es probable que múltiples factores hayan
planeta. Su contribución es crucial para el equilibrio general
contribuido al surgimiento de los organismos
de la vida en la Tierra.
multicelulares, y la investigación continua proporciona
¿Cómo se originaron las células eucariotas? Analice las nuevas perspectivas sobre este fascinante tema.
hipótesis consideradas actualmente. ¿Cuáles son las ventajas que tienen los organismos
Las células eucariotas, con su compleja estructura interna, multicelulares sobre los unicelulares?
han sido objeto de varias hipótesis sobre su origen. Las Los organismos multicelulares presentan ventajas sobre los
teorías actuales incluyen la endosimbiosis seriada, la unicelulares, como la especialización celular, el tamaño y
endosimbiosis única y la fusión celular como posibles complejidad, la división del trabajo y la capacidad de
procesos que condujeron a la evolución de las células respuesta adaptativa. Estas ventajas les permiten prosperar
eucariotas. Estas hipótesis se basan en evidencia genómica, en una variedad de entornos y desafíos evolutivos.
bioquímica y comparativa, y es probable que múltiples Características del tejido Epitelial observado (Fig 9, y
eventos hayan contribuido al surgimiento de las células Fig 10)
eucariotas. El tejido epitelial observado en las células de la mucosa
Cuadro comparativo célula eucariota y célula procariota bucal y de la sangre corresponde al epitelio escamoso, qué
es un tipo de tejido epitelial caracterizado por tener células
planas y delgadas.
Las células epiteliales de la mucosa bucal son células
escamosas que recubren la superficie interna de la boca.
Estas células se caracterizan por su forma aplanada y su
disposición en capas, lo que les permite proporcionar
protección y facilitar procesos como la masticación y la
deglución. diferentes formas y funciones específicas dentro
del sistema inmune.
Por otro lado, las células epiteliales de la sangre son los
glóbulos blancos, que forman parte del sistema.
Inmunológico y se encargan de defender el organismo
contra infecciones y agentes patógenos.
En cuanto sus principales organelos presentes en las células
epiteliales se encuentran:
1. Núcleo: Contiene el material genético de la célula y
controla sus funciones biológicas.
2. Citoplasma: Contiene organelos como mitocondrias,
ribosomas, retículo endoplasmático y aparato de
Golgi, que desempeñan funciones vitales para el
metabolismo celular.
3. Membrana celular: Regula el intercambio de sustancias
entre la célula y su entorno, así como la comunicación
celular.
Si desaparece todo el tejido epitelial de una persona.
¿Qué efectos tendría esto en el cuerpo y en su capacidad
de funcionamiento?
La desaparición total del tejido epitelial tendría
consecuencias devastadoras para el cuerpo humano,
incluyendo la pérdida de la barrera protectora, problemas en
la absorción de nutrientes y excreción de desechos, así
como impactos graves en la respiración y la digestión. En
resumen, el cuerpo enfrentaría serios problemas de salud e
incluso riesgo de muerte debido a la ausencia de tejido
epitelial.
Describa cuáles son las características que permiten
diferenciar bacterias, protozoarios y hongos.
Las bacterias son organismos unicelulares procariontes con
pared celular de peptidoglicano, reproducción por fisión
binaria y pueden ser aerobias o anaerobias. Los protozoarios
son organismos unicelulares eucariontes que se desplazan
por pseudópodos, cilios o flagelos, y muchos son
heterótrofos. Los hongos son organismos eucariontes con
pared celular de quitina, se reproducen sexual y
asexualmente, y obtienen nutrientes por absorción, siendo
mayoritariamente heterótrofos. Estas características
permiten diferenciar claramente bacterias, protozoarios y
hongos.

Referencias
Para las referencias se utilizará una fuente Times New
Roman 9. Deberán figurar en el mismo orden en el cual han
aparecido en el texto.
[1] M. Autin, M. Biey, M. Hasler, “Order of discrete time
nonlinear systems determined from input-output
signals”, Proc. IEEE Int. Symp. Circ. Syst., San Diego,
1992, pp. 296-299
[2] L. Ljung, System Identification-Theory for the User,
Prentice Hall, 1987
[3] S.K. Rao, T. Kailath, “Orthogonal digital filters for
VLSI implementation”, IEEE Trans. Circuits Syst.,
CAS-31, 1984, pp. 933-945

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