UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

AGRONOMIA

ASIGNATURA:

Biotecnología

DOCENTE:

Q.F. Sandra Recalde Luna. [Link].

TEMA:

Medios de cultivo de tejidos vegetales

ALUMNOS:

Anthony Gabriel Troncoso Tonato

CURSO:

AGR MA 7-1

Séptimo Semestre

2024-2025
 Introducción

Los medios de cultivo son soluciones nutricionales diseñadas para apoyar el

crecimiento y desarrollo de células, tejidos y órganos vegetales en condiciones controladas

in vitro. Estos medios proporcionan los nutrientes esenciales, vitaminas, hormonas y otros

factores necesarios para la regeneración y proliferación celular. La composición de los

medios de cultivo varía dependiendo de las necesidades específicas del tejido vegetal y el

tipo de estudio que se realice (George, Hall & De Klerk, 2008). Los componentes básicos de

un medio de cultivo incluyen macro y micronutrientes, vitaminas, aminoácidos,

carbohidratos, reguladores de crecimiento, y a veces, componentes orgánicos complejos

como extractos de levadura o caseína hidrolizada (Murashige & Skoog, 1962).

Medios de Cultivo

1. Medio de Murashige y Skoog (MS)

Historia: El medio de Murashige y Skoog (MS) fue desarrollado por Toshio

Murashige y Folke Skoog en 1962, y es uno de los medios más utilizados en el cultivo de

tejidos vegetales (Murashige & Skoog, 1962). Su desarrollo surgió de la necesidad de un

medio más eficiente para la proliferación de cultivos de tabaco en laboratorio.

Ingredientes:

- Macronutrientes: Nitrato de amonio (NH4NO3), nitrato de potasio (KNO3), fosfato

de potasio (KH2PO4), sulfato de magnesio (MgSO4), sulfato de calcio (CaSO4).

- Micronutrientes: Sulfato de hierro (FeSO4), EDTA de hierro sódico, ácido bórico

(H3BO3), sulfato de manganeso (MnSO4), sulfato de zinc (ZnSO4), molibdato de sodio

(Na2MoO4), sulfato de cobre (CuSO4), y cloruro de cobalto (CoCl2).

- Vitaminas: Tiamina (B1), piridoxina (B6), ácido nicotínico.

 - Azúcares: Sacarosa.

- Reguladores de crecimiento: Auxinas y citoquininas.

Aplicaciones: Utilizado extensivamente para la propagación de un amplio rango de

especies vegetales, incluyendo cultivos alimentarios y ornamentales, así como en la

investigación genética y de desarrollo (Murashige & Skoog, 1962).

2. Medio de Gamborg (B5)

Historia: El medio de Gamborg (B5) fue desarrollado por Oluf Gamborg y sus

colegas en 1968. Inicialmente diseñado para el cultivo de cultivos celulares de soja, se ha

adaptado para diversas especies vegetales (Gamborg et al., 1968).

Ingredientes:

- Macronutrientes: Nitrato de potasio (KNO3), sulfato de magnesio (MgSO4),

sulfato de calcio (CaSO4).

- Micronutrientes: Sulfato de hierro (FeSO4), EDTA de hierro sódico, ácido bórico

(H3BO3), sulfato de manganeso (MnSO4), sulfato de zinc (ZnSO4), molibdato de sodio

(Na2MoO4), sulfato de cobre (CuSO4), cloruro de cobalto (CoCl2).

- Vitaminas: Tiamina (B1), piridoxina (B6), ácido nicotínico.

- Aminoácidos: Glicina.

- Azúcares: Sacarosa.

- Reguladores de crecimiento: Auxinas y citoquininas.

Aplicaciones: Ampliamente utilizado en la inducción de callos y la regeneración de

plantas a partir de tejidos vegetales (Gamborg et al., 1968).

 3. Medio de White

Historia: El medio de White, desarrollado por Philip White en 1943, fue uno de los

primeros medios de cultivo de tejidos vegetales. Su formulación fue utilizada originalmente

para el cultivo de raíces de plantas (White, 1943).

Ingredientes:

- Macronutrientes: Nitrato de potasio (KNO3), fosfato de potasio (KH2PO4), sulfato

de magnesio (MgSO4), cloruro de calcio (CaCl2).

- Micronutrientes: Sulfato de hierro (FeSO4), EDTA de hierro sódico, ácido bórico

(H3BO3), sulfato de manganeso (MnSO4), sulfato de zinc (ZnSO4).

- Vitaminas: Tiamina (B1), piridoxina (B6), ácido nicotínico.

- Azúcares: Sacarosa.

- Reguladores de crecimiento: Auxinas y citoquininas.

Aplicaciones: Utilizado principalmente para el cultivo de raíces y tejidos vegetales

en estudios de desarrollo y metabolismo (White, 1943).

4. Medio de Nitsch y Nitsch (NN)

Historia: Desarrollado por Jean Nitsch y Claudette Nitsch en 1969, este medio fue

específicamente formulado para la inducción de embriogénesis y organogénesis en cultivos

vegetales (Nitsch & Nitsch, 1969).

Ingredientes:

- Macronutrientes: Nitrato de amonio (NH4NO3), nitrato de potasio (KNO3), fosfato

de potasio (KH2PO4), sulfato de magnesio (MgSO4).

 - Micronutrientes: Sulfato de hierro (FeSO4), EDTA de hierro sódico, ácido bórico

(H3BO3), sulfato de manganeso (MnSO4), sulfato de zinc (ZnSO4).

- Vitaminas: Tiamina (B1), piridoxina (B6), ácido nicotínico.

- Azúcares: Sacarosa.

- Reguladores de crecimiento: Auxinas y citoquininas.

Aplicaciones: Frecuentemente utilizado en la embriogénesis somática y la

regeneración de plantas completas a partir de callos (Nitsch & Nitsch, 1969).

5. Medio de Schenk y Hildebrandt (SH)

Historia: El medio de Schenk y Hildebrandt fue desarrollado por Rupert Schenk y

Alan Hildebrandt en 1972, diseñado específicamente para el cultivo de células y tejidos

vegetales (Schenk & Hildebrandt, 1972).

Ingredientes:

- Macronutrientes: Nitrato de amonio (NH4NO3), nitrato de potasio (KNO3), fosfato

de potasio (KH2PO4), sulfato de magnesio (MgSO4), sulfato de calcio (CaSO4).

- Micronutrientes: Sulfato de hierro (FeSO4), EDTA de hierro sódico, ácido bórico

(H3BO3), sulfato de manganeso (MnSO4), sulfato de zinc (ZnSO4).

- Vitaminas: Tiamina (B1), piridoxina (B6), ácido nicotínico.

- Aminoácidos: Glicina.

- Azúcares: Sacarosa.

- Reguladores de crecimiento: Auxinas y citoquininas.

Aplicaciones: Utilizado en la inducción de callos, la regeneración de plantas y el

cultivo de suspensiones celulares (Schenk & Hildebrandt, 1972).

 Efecto de la desinfección con hipoclorito de sodio y multiplicación con

bencilaminopurina en musa spp.

El medio basal Murashige y Skoog (MS) es uno de los medios más utilizados en el

cultivo de tejidos vegetales. Contiene sales inorgánicas como nitrato de amonio, nitrato de

potasio, fosfato de calcio, sulfato de magnesio, entre otros. También incluye vitaminas como

tiamina, piridoxina, ácido nicotínico y glicina. La fuente de carbono es sacarosa (Mamani-

Sánchez et al., 2021).

Para el establecimiento inicial de los explantes de banano y plátano, se suplementó

el medio MS con 2 mg/L de bencilaminopurina (BAP) y 1 mg/L de ácido naftalenacético

(ANA). La BAP es una citoquinina que promueve la división celular y formación de brotes,

mientras que el ANA es una auxina que regula el crecimiento (Mamani-Sánchez et al.,

2021).

En la etapa de multiplicación, se evaluaron dos medios:

MC1 = MS + 2.5 mg/L BAP + 1 mg/L ANA

MC2 = MS + 5 mg/L BAP + 1 mg/L ANA

Se encontró que el MC2 con mayor concentración de BAP (5 mg/L) favoreció la

formación de 8 brotes en promedio en ambas variedades de banano y plátano (Mamani-

Sánchez et al., 2021).

El documento también menciona que para los explantes de plátano se adicionó al

medio 0.5 ml/L de una mezcla antimicrobiana llamada PPM (Plant Preservative Mixture)

para reducir la contaminación (Mamani-Sánchez et al., 2021).

 "Optimización de medios de cultivo agroindustriales para el crecimiento del

ñame espino mediante multiplicación de rizo bacterias"

Se seleccionaron tres medios de cultivo óptimos para cada rizo bacteria:

- Medio B para DSC1 B. licheniformis: 17.5 g/L azúcar común, 0.3 g/L levadura

seca, 0.5 g/L harina de frijol, 0.2 g/L sulfato de magnesio y 0.5 g/L cloruro de sodio (Luna

Castellanos & Sánchez López, 2022).

- Medio D para DSC21 B. laterosporus: 15 g/L azúcar común, 0.4 g/L levadura

seca, 0.5 g/L harina de frijol, 0.2 g/L sulfato de magnesio y 0.5 g/L cloruro de sodio (Luna

Castellanos & Sánchez López, 2022).

- Medio C para DCR11 A. vinelandii: 20 g/L azúcar común, 0.3 g/L levadura seca,

0.5 g/L harina de frijol, 0.2 g/L sulfato de magnesio y 0.5 g/L cloruro de sodio (Luna

Castellanos & Sánchez López, 2022).

La aplicación de estas rizobacterias multiplicadas en los medios de cultivo

optimizados tuvo efectos beneficiosos en el crecimiento de plántulas de ñame espino,

estimulando la producción de biomasa fresca aérea, radicular, peso seco aéreo y la

producción de pigmentos fotosintéticos (Luna Castellanos & Sánchez López, 2022).

Bibliografía
Mamani-Sánchez, B., Nova-Pinedo, M. L., & Bosque-Sánchez, H. (2021). Efecto de
la desinfección con hipoclorito de sodio y multiplicación con bencilaminopurina en Musa spp.
Revista de Investigación e Innovación Agropecuaria y de Recursos Naturales, 8(1), 37-44.
[Link]

Luna Castellanos, L. L., & Sánchez López, D. B. (2022). Optimización de medios de

cultivos con fuentes agroindustriales para el crecimiento del ñame espino (Dioscorea
rotundata Poir). Revista FAVE - Ciencias Agrarias, 21(1), 67-83. 1666-7719-fave-21-01-
[Link] ([Link])

Murashige, T., & Skoog, F. (1962). A revised medium for rapid growth and bio assays
with tobacco tissue cultures. Physiologia Plantarum, 15(3), 473-497.
[Link]

Nitsch, J. P., & Nitsch, C. (1969). Haploid plants from pollen grains. Science,
163(3871), 85-87.
[Link]

Schenk, R. U., & Hildebrandt, A. C. (1972). Medium and techniques for induction and
growth of monocotyledonous and dicotyledonous plant cell cultures. Canadian Journal of
Botany, 50(1), 199-204.
[Link]

White, P. R. (1943). *A Handbook of Plant Tissue Culture*. Ronald Press Company.

[Link]

George, E. F., Hall, M. A., & De Klerk, G. J. (2008). Plant Propagation by Tissue
Culture (3rd ed.). Springer.
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Gamborg, O. L., Miller, R. A., & Ojima, K. (1968). Nutrient requirements of

suspension cultures of soybean root cells. Experimental Cell Research, 50(1), 151-158.
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