LABORATORIO BIOQUIMICA CLINICA II 2023
ANALISIS CUANTITATIVO PARA PROTEINAS
METODO DE EXTON-ROSE
INTRODUCCION
El método de ácido sulfosalicílico para proteínas en
líquidos biológicos es una técnica utilizada para
determinar la cantidad total de proteínas presentes en
líquidos biológicos u orina. Se utiliza principalmente
para evidenciar pequeñas cantidades de estas en LCR.
Para líquidos de serosos, se recomienda utilizar otros
métodos para medir mayores cantidades de proteínas, tal
como el reactivo de Biuret.
Este método se basa en la capacidad del ácido
sulfosalicílico para precipitar las proteínas presentes en
la muestra, formando complejos insolubles en agua.
En este paso práctico desarrollaremos esta técnica
cuantitativa, cuyo fundamento es que las proteínas en
presencia de ácido sulfosalicílico precipitan, ya que se
trata de un ácido de tipo aniónico que se une a las cargas
positivas de la molécula de proteína. La turbidez es
proporcional a la cantidad de proteínas presentes en la
orina
Para llevar a cabo el método de ácido sulfosalicílico, se
toma la muestra y se le añade una cantidad conocida de
ácido sulfosalicílico, según un protocolo definido. La
mezcla se agita y se deja reposar durante unos minutos
para permitir que las proteínas se precipiten.
La cantidad de proteínas se puede determinar mediante
espectrofotometría. En la espectrofotometría, se mide la
absorbancia de la solución a una longitud de onda entre
620y 660 nm , la que es proporcional a la cantidad de
proteínas presentes en el líquido.
El método de ácido sulfosalicílico es una técnica simple y
económica para determinar la cantidad total de proteínas
en un líquido. Sin embargo, es importante tener en cuenta
que este método no distingue entre diferentes tipos de
proteínas presentes en la muestra, por lo que no es
adecuado para determinar la concentración de proteínas
específicas.
TMESC Rev. 2023
LABORATORIO BIOQUIMICA CLINICA II 2023
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
En cada uno de dos tubos:
Tubo 1 2 muestra
standard
STANDARD (ul). 50 0
LCR/Orina(ul). 0 50
Ácido sulfosalicílico 5 % 500 500
(ul).
Agitar por inversión, esperar 10 minutos y leer la
absorbancia del tubo problema 620- 660 mm en el
espectrofotómetro, ajustando el cero del instrumento con
el blanco de agua destilada.
Si la orina/LCR es muy coloreado se prepara un blanco de
muestra para descartar la posible interferencia del color
en la reacción.
Continúe con la técnica descrita anteriormente.
TECNICA: PUNTO FINAL
LONGITUD DE ONDA: 620
T1: 6
T2: 6
UNIDAD: mg/dl
BLANCO REACTIVO: NO
TEMPERATURA: 37
DIRECCION: AUMENTO
VOL ASPIRACION 350
DECIMAL: 0,1
CALIBRACION: INDICAR CONCENTRACION DE STANDARD EN EQUIPO
(TERCERA PESTAÑA, LINEAL 1 PUNTO)
TMESC Rev. 2023
