UTS PRACTICA 7

PERMEABILIDAD MEMBRANAL
OBJETIVO
Observar el comportamiento de las células vegetales y animales frente a soluciones con
diferente concentración de soluto. En la segunda parte de la práctica se observará el
fenómeno de la permeabilidad en una membrana artificial.

INTRODUCCIÓN
La célula, para llevar al cabo sus funciones vitales, requiere de un intercambio constante de
materia y energía con su entorno.
Para esto, las moléculas, requieren atravesar la membrana que la recubre.
La membrana plasmática, por el tipo de moléculas que la componen, es de naturaleza no
polar. Las moléculas no polares tendrán libre paso a través de ella, dependiendo de su grado
de solubilidad en lípidos y de su tamaño; a mayor liposolubilidad, la penetración es más
rápida. Una molécula debe satisfacer dos condiciones para difundir al interior de una célula
a través de la membrana plasmática: Debe estar presente en concentración más elevada
fuera de la célula, y la membrana debe ser permeable a ella. Una membrana puede ser
permeable a un soluto determinado porque pasa directamente a través de la bicapa de
lípidos, o porque es capaz de atravesar un poro situado en el espesor de la membrana que
impide el contacto del soluto con las moléculas lipídicas de la bicapa.
Otro factor que determina la velocidad de penetración de un compuesto a través de una
membrana, es su tamaño. Las moléculas de menor tamaño tienden a penetrar en la bicapa
de lípidos de una membrana con mayor rapidez en comparación con la molécula más
grande. Las moléculas de agua se desplazan con mucha mayor rapidez a través de una
membrana celular que los iones y pequeños solutos polares comúnmente presentes en las
células. Debido a esta diferencia de penetrabilidad del agua en comparación con solutos se
dice que las membranas son semipermeables.
El agua se mueve rápidamente a través de una membrana semipermeable desde una región
de baja concentración hasta otra de alta concentración de soluto. Este proceso se denomina
ósmosis y puede demostrarse fácilmente colocando la célula en una solución con una
concentración de soluto diferente de la presente en el interior de ella.
Cuando se colocan las células en una solución con una concentración salina similar a la de
su medio (isotónica), la concentración de agua permanece constante dentro y fuera de la
célula, por lo que su volumen y forma no se alteran. Los eritrocitos humanos pueden
conservarse por largos periodos en una solución de cloruro de sodio al 0.9% sin presentar
alteración ni hemólisis.
Cuando las células son colocadas en soluciones de menor concentración de soluto que la
propia (hipotónicas), el agua tiende a pasar hacia donde está la mayor concentración, dando
lugar a que las células se hinchen. Por otra parte, cuando se
colocan en soluciones de mayor concentración de soluto que la de ellas (hipertónicas), el
agua tiende a salir ocasionando la concentración celular.
En las células vegetales, la presencia de una pared celular rígida, les ayuda a evitar un
incremento excesivo de volumen ante soluciones hipotónicas, sin embargo, en soluciones
hipertónicas, sí se puede apreciar la contracción del citoplasma por la pérdida de agua.

Material
Proporcionado por el laboratorista a cada equipo:
1 vaso de precipitado de 500 ml
1 microscopio de campo claro
4 vidrio de reloj
Papel seda
3 pipetas graduadas de 1 mL
4 matraces aforados de 100 mL
4 espátulas
5 ml de las soluciones de NaCl 0.15 M (0.9%), 0.075 M, y 0.3 M (100 mL por cada una)
2 ml de fenolftaleína
2 ml de lugol: Pesar 0.5 g de yodo y 1 g de yoduro de potasio, disolver en 50 mL de agua
destilada y transferirlo a un matraz aforado de 100 mL y aforar.
15 ml de solución de almidón con hidróxido de amonio (Disolver 50g de almidón en 250
ml de agua destilada y 25 g de hidróxido de amonio).
Piceta con etanol
Piceta con agua destilada
Una preparación fija
Papel celofán dulce.

Proporcionados por el alumno:

Etiquetas adheribles
Lanceta para toma de glucosa para diabéticos
Hilo
Portaobjetos
Cubreobjetos
Elodea (es un alga que se mete en las peceras)

Figura 3. Elodea canadensis.

Nota: vean si pueden conseguirla en un acuario de su localidad.
Algodón
Regla graduada en cm.
Bolsas de celofán
Por sección:
1 vaso de precipitado de 2 litros
Parrilla de calentamiento
Varilla de vidrio
Tijeras.
En la farmacia del Doctor Simi compren unas lancetas para toma de muestra de sangre
estéril
NOTAS:
a) Tenga cuidado de utilizar la pipeta correspondiente para cada solución y de no
confundirlas, de hacerlo, se alterará la concentración de las soluciones.
b) Etiquete debidamente los portaobjetos para evitar confusiones en sus observaciones y
resultados.
c) Evite la desecación de sus preparaciones.

Método
I.- Estudio microscópico
1. Haga la iluminación de Köhler utilizando una preparación fija.
2. Con una lanceta estéril pique la yema de cualquiera de sus dedos y deposite una gota de
sangre en un vidrio de reloj perfectamente limpio y etiquetado que contenga 2 ml de la
solución de NaCl 0.15 M (0.9%), deje reposar un minuto. Con ayuda de una pipeta de 1 mL
coloque una gota de esta suspensión celular en un portaobjetos, después coloque el
cubreobjetos y observe. Enfoque con el objetivo de 10X y pase al objetivo de 40X para
hacer sus observaciones.
3. Repetir el mismo procedimiento con la solución de NaCl 0.075 M, y con la de 0.3 M.
4. En un vidrio de reloj que contenga 2 ml de la solución de cloruro de sodio 0.15 M,
deposite una hoja de elodea, déjela reposar de 2 a 3 min. Coloque la hoja en un
portaobjetos, cúbrala con el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X.
Ponga atención en el movimiento de los cloroplastos.
5. Repita el paso anterior con las otras dos concentraciones.
II.- Estudio macroscópico con una membrana artificial
1. Por sección: En un vaso de precipitado coloque 2 litros agua de la llave, ponga en él un
cuadro de papel celofán de 20 x 20 cm por equipo y hiérvalo por 15 minutos (Figura 1).
Sáquelo y déjelo enfriar.
2. Una todas las orillas del papel celofán y coloque en su interior 15 ml de la solución de
almidón con hidróxido de amonio y amárrelo con hilo de tal manera que la bolsa que se
forma quede perfectamente cerrada (Figura 2).
3. Enjuague la bolsa con agua de la llave.
4. Agite la bolsa dentro de un vaso de precipitado de 500 mI que contenga agua de la llave
y 5 gotas de fenolftaleína durante 5 minutos. Observe si cambia el color del agua.
5. Abra la bolsa y agregue 4 gotas de la solución de lugol, observe si aparece color.
6. Agregue 4 gotas de lugol al agua del vaso de precipitado y compare con la coloración
observada en el punto anterior.
Resultados
1. Esquematice el comportamiento de las células vegetales y animales frente a las
concentraciones de NaCl.
2. De acuerdo en las observaciones, llene la siguiente tabla:

Con base en sus resultados y tomando como guía los siguientes enunciados, redacte la
discusión de la práctica:
1. Diga qué propósito tiene colocar las células en una solución isotónica.
2. ¿Qué diferencias observó entre las células animales y vegetales en presencia de la
solución hipotónica? Explique la causa.
3. ¿Qué efecto observó en las células al colocarlas en una solución hipertónica?
4. De las sustancias utilizadas (almidón, hidróxido de amonio y fenolftaleína), diga
cuál(es) atravesaron la membrana de celofán y cómo se demostró esto. Diga cuáles no
atravesaron y a qué se debe.
5. Si los resultados obtenidos en su práctica no fueron los esperados, explique a qué pudo
deberse.

Conclusiones
Con base en sus resultados y discusión, indique cuáles serían las conclusiones de esta
práctica.

Bibliografía
 Alberts, B., Bray, D., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., Watson, J. D. 2004. Biología
Molecular de la Célula. Omega. España.
 Becker, W. M., Kleinsmith, L. J., Hardin, J. 2006. El Mundo de la Célula. Pearson-
Addison Wesley, México.
 Karp, G. 2009. Biología Celular y Molecular: conceptos y experimentos. McGraw
Hill. México.
 Lodish, H., Beerk, A., Zipursky, L., Matsudaira, P., Baltimore, D., Darnell, J. 2002.
Biología Celular y Molecular. Médica Panamericana. México.