FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA
PRÁCTICA Nro. 07
Laboratorio de: Fecha:
Microbiología y Parasitología
Temática:
Bacilos Gramnegativos:
Escherichia coli, Klebsiella spp, Salmonella spp, Shigella spp, Yersinia pestis, Pseudomonas
aeruginosa, Vibrio cholerae, Helicobacter pylori, Bordetella pertussis, Bartonella bacilliformis, Chlamydia
trachomatis,
Gardnerella vaginalis Espiroquetas: Treponema pallidum, Leptospira interrogans.
Sesión:7 Resultado de aprendizaje:
Aplica el conocimiento de la interacción
entre las bacterias y virus con el ser
humano, considerando su relación con el
medio ambiente.
Estudiante: Tiempo desarrollo de la práctica:
150 minutos
I. INTRODUCCIÓN
“La familia de las enterobacterias (Enterobacteriaceae) incluye múltiples géneros y
especies de bacilos gramnegativos, algunos de los cuales son patógenos para el ser
humano. Tienen una amplia distribución: en el agua, el suelo, las plantas y la flora
intestinal de muchos animales y del hombre. Algunas especies (Shigella spp., varias
serovaresde Salmonella, Yersinia pestis) se han adaptado al ser humano y se consideran
patógenos primarios, mientras que otras (Escherichia coli, Klebsiella spp., Citrobacter spp.,
Enterobacter spp., Morganella morganii, Proteus spp., Providencia spp., Serratia spp., etc.)
forman parte de la microbiota normal, pero pueden comportarse como patógenos
oportunistas. El principal mecanismo de transmisión de estos microorganismos se produce
a través de las manos del personal sanitario, que se coloniza cuando entra en contacto con
pacientes que a su vez están colonizados”.
“El género Pseudomonas incluye múltiples especies con amplia distribución en diversos
ambientes, en especial los húmedos. La especie más importante en patología humana es
P. aeruginosa, que causa infecciones graves, con elevada morbimortalidad, en pacientes
inmunosuprimidos, principalmente en el ámbito hospitalario, en UCI y en unidades de
críticos oncohematológicos; además, es la causa más frecuente de infección respiratoria
crónica en pacientes con fibrosis quística. Las infecciones nosocomiales generalmente
incluyen neumonías, bacteriemias, infección de herida quirúrgica e infecciones de vías
urinarias. P. aeruginosa logra sobrevivir en ambientes y temperaturas propias del entorno
clínico y crece fácilmente en medios de cultivo habituales, pues sus requerimientos
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nutritivos son escasos. Su identificación en el laboratorio y la determinación de su
sensibilidad a los antimicrobianos no suelen plantear dificultades, con la excepción de los
fenotipos mucosos que suelen identificarse en pacientes con fibrosis quística”.
“Vibrio cholerae 01 es un anaerobio facultativo. En presencia de oxígeno respira, y en su
ausencia es capaz de fermentar. Puede crecer en medios que contienen carbohidratos,
particularmente glucosa, así como nitrógeno, azufre, fósforo y sodio y se adhiere a
sedimentos para obtener estos nutrientes. Tiene un requerimiento absoluto de Na+ para el
crecimiento. Dos estudios de laboratorio han revelado que las cepas toxígenas de V.
cholerae 01 biotipo El Tor requieren Na+ para sobrevivir en ausencia de otros nutrientes y
para crecer más rápido en presencia de ellos. Se encontró que el requerimiento de Na+ no
se podía satisfacer mediante la sustitución con los metales alcalinos Li+ o K+ . Sin embargo,
la adición de los metales alcalinotérreos Ca2+ y Mg2+ en presencia de Na+ contribuyó a
prolongar su supervivencia”
II. OBJETIVOS:
Aislar bacterias Gramnegativas de distintas fuentes
Reconocer características macroscópicas y microscópicas de bacterias Gramnegativas
III. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
¿Qué bacilos Gramnegativos conocen?
¿Qué bacilos Gramnegativos producen enfermedades en el hombre?
IV. MATERIAL
1. Material de Laboratorio (por mesa de práctica).
• 02 Microscopios
• Láminas montadas de bacilos Gramnegativos
• Placas con Agar Mc Conkey y Agar SS
• Placas con Agar Mc Conkey sembradas con Escherichia coli, Salmonella, Pseudomonas
aeruginosa.
• Placas con Agar SS sembradas con Salmonella
2. Material individual
• Guía de prácticas
• Guantes descartables, mascarilla descartable y gorro
• 01 Marcador indeleble
V. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
Actividad 1. Aislamiento de bacilos Gramnegativos
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A partir de muestras de fómites, se sembrará en placas de Petri conteniendo Agar Mc Conkey
y se incubarán a 37°C por 24 horas, posteriormente se describirá las colonias que desarrollen.
• Características culturales
Pseudomonas aeruginosa
en Mc Conkey
• Características microscópicas
Enterobacteriaceae Vibrio cholerae
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1 PUNTO Observación:
Bacilos Gramnegativos
Muestra:
Coloración:
Aumento:
_________________________________________________________
1 PUNTO
Observación:
Escherichia coli
Características culturales:
1 PUNTO
Observación:
Klebsiella sp.
Características culturales:
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1 PUNTO
Observación:
Salmonella sp.
Características culturales:
Actividad 2. Reconocimiento de características culturales de Pseudomonas aeruginosa
1 PUNTO
Observación:
Pseudomonas aeruginosa
Características culturales:
VI. PRECAUCIONES Y BIOSEGURIDAD
Aprender el manejo cuidadoso de muestras que pueden contener organismos vivos
peligrosos.
Portar la bata y equipo de protección (guantes)
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Trabajar siguiendo cuidadosamente el protocolo de la práctica.
Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio.
Avisar al responsable de la práctica de cualquier accidente por insignificante que parezca.
No usar equipo que desconozcas su manejo o del cual se tengan dudas.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Código de LIBROS/REVISTAS/ARTÍCULOS/TESIS/PÁGINAS WEB.TEXTO
biblioteca
616.01 / M95c Murray P, Rosenthal K, Pfaller M. Microbiología Médica. 6ta. ed. Madrid: Elsevier España; 2009.
616.01 / B84E Brooks G, Morse S, Batel J. Microbiología Médica de Jawetz, Melnick y Adelberg. 19na ed. Mexico:
El Manual Moderno: 2008.
Fariñas MC, Martínez-Martínez L. Infecciones causadas por bacterias gramnegativas
multirresistentes: enterobacterias, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii y otros
bacilos gramnegativos no fermentadores. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2013;31(6):402-9.
Borroto RJ. Ecology of Vibrio cholerae serogroup 01 in aquatic environments. Rev Panam Salud
Pública. 2007;1(1):3-8.
