UNIVERSIDAD NACIONAL MUTIDISCIPLINARIA
RICARDO MORALES AVILES
SEDE - MASAYA
BIOANALISIS CLINICO
Determinación del Sistema ABO
Objetivo General
Determinar los antígenos y anticuerpos del sistema ABO
Objetivos Específicos
1. Aplicar los conocimientos teóricos en la práctica
2. Analizar muestras de pacientes para la investigación del grupo sanguíneo ABO
3. Aplicar en la lectura de los resultados la graduación de la reacción antígeno anticuerpo.
4. Interpretar los resultados obtenidos en las muestras clínicas.
Introducción
El sistema ABO posee dos rasgos característicos únicos que no se encuentran en ningún otro sistema de grupos
sanguíneos 1) la presencia usual de aglutininas fuertemente reactivas en el suero de aquellos que carecen de los
antígenos correspondientes. Y 2) la presencia regular de antígenos ABH en muchas células y de sustancias ABH en las
secreciones de los secretores. Estas dos características únicas hacen del sistema ABO el sistema más importante, con
mucho, de los grupos sanguíneos en la transfusión sanguínea y transplantes de órganos.
La presencia regular de potentes anticuerpos anti-A y anti-B, o ambos, en el suero convierte la tarea de demostrar los
antígenos A Y B en los eritrocitos en una labor fácil. Esta puede ser la razón por la que el sistema de los grupos
sanguíneos fue el primero en ser descubierto. Es el único sistema en el cual puede utilizarse el examen del suero en la
seguridad de confirmar los resultados de la determinación directa de los eritrocitos.
La determinación de este sistema se realiza por medio de 2 procedimientos:
• La determinación de antigenos o prueba globular
• La determinación de anticuerpos o prueba sérica
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MATERIALES Y REACTIVOS
• Muestra de sangre. • Anti-A
• Solución Salina 0.85% pH 6.5-7.5 • Anti-B
• Tubos 12 x 75 mm • Anti-AB
• Pipetas pasteur plásticas o de vidrio. • Celulas A1
• Bulbos • Celulas B
• Marcador ARtline #70 • Lámpara visualizadora
• Centrífuga Serofuge • Recipientes para descartar material
• Refrigerador para muestras • Hipoclorito de sodio
• Gradillas para tubos 12 x 75 mm
BIOSEGURIDAD
• Aplique en todo momento las normas de bioseguridad
• Limpie el área antes y después de finalizar el laboratorio o cuando suceda algún derrame.
• Utilice guantes y gafas en los procedimientos.
• Evite contaminar el área de trabajo o los guantes con material biológico.
ORGANIZACIÓN DEL TRABAJO
En una gradilla coloque los tubos de la siguiente manera:
Muestra Control Rh
Suspensión
Anti-AB Células O
Anti-B Células B
Anti-A Células A
Prueba celular Prueba sérica
PROCEDIMIENTO
Para realizar esta técnica se requiere preparar una suspensión de células del paciente al 4% de acuerdo al
procedimiento antes mencionado
Prueba Celular (Directa)
Fundamento
Los antigenos presentes en la membrana del glóbulo rojo van a reaccionar con los anticuerpos presentes en el
reactivo lo cual se hará visible a través de una reacción de aglutinación
1. Rotular tres tubos: A, B, AB.
2
2. Colocar una gota del reactivo Anti-A, al tubo rotulado A
3. Colocar una gota del reactivo Anti-B, al tubo rotulado B
4. Colocar una gota del reactivo Anti-AB, al tubo rotulado AB
5. Agregar a cada tubo una gota de suspensión al 2-4% de los eritrocitos del paciente.
6. Mezclar suavemente el contenido de los tubos y colocarlos ordenadamente en el rotor de la centrífuga.
7. Centrifugar durante 15-20 segundos aproximadamente a 3.400 rpm
8. Resuspender suavemente los botones celulares de los tubos y examinar para detectar aglutinación.
9. Realizar lectura sobre una lámpara visualizadora, tubo en mano, interpretar y registrar los resultados de
acuerdo a la intensidad de la reacción. (Ver tabla)
10. Identificar el grupo sanguíneo del paciente (ver tabla 2)
11. Comparar los resultados con los obtenidos en la prueba sérica.
Prueba sérica
Fundamento
Los anticuerpos presentes en el suero del paciente reaccionaran con su correspondiente antígeno presente en las
células reactivas.
1. Marcar 2 tubos de ensayo limpios como A1 y B
2. Agregar dos gotas de suero del paciente a cada uno.
3. Colocar una gota de células del reactivo A1 al tubo marcado A1.
4. Colocar una gota de células del reactivo B, al tubo marcado B.
5. Mezclar suavemente el contenido de los tubos y colocarlos ordenamente en el rotor de la centrífuga.
6. Centrifugar durante 15-20 segundos aproximadamente a 3.400 rpm.
7. Examinar el suero sobrenadante que cubre los botones celulares, para detectar evidencia de hemólisis.
8. Resuspender suavemente los botones celulares de los tubos y examinar para detectar aglutinación.
9. Realizar la lectura sobre una lámpara visualizadora tubo en mano y registrar los resultados de acuerdo a la
intensidad de la reacción.
10. Comparar los resultados con los obtenidos en la prueba celular.
CAUSAS DE ERROR
• Colocación de antisueros y células en los tubos equivocados
• Contaminación de los reactivos
• Empleo de material sucio
• Error en la interpretación
• Perdida de actividad de los reactivos
• Suspensión de células muy concentradas o muy débiles
• Movimientos fuertes del tubo al realizar la lectura.
TABLA N°1
Intensidad de la reacción Descripción de la aglutinación
H Hemólisis, presencia de hemoglobina libre (buscar antes de agitar el
tubo de ensayo; indica reacción intensa
4+ Un agregado sólido que puede romperse en 2 o 3 grumos grandes sin
glóbulos libres, fondo claro
3+ Un agregado grande y muchos agregados pequeños o varios de regular
tamaño, fondo claro
2+ Pequeños agregados y eritrocitos libres con un fondo ligeramente turbio
1+ Pequeños agregados con un fondo turbio
3
+/- Pocos agregados pequeños, con muchos hematíes sin aglutinar, fondo
turbio
Negativo Ausencia de agregados
TABLA N°2
Reacción de las células Interpretación Reacción del suero Interpretación
investigadas con a investigar contra
Anti-A Anti-B Anti-AB Células A1 Células B
4+ Neg 4+ A Neg 4+ A
Neg 4+ 4+ B 4+ Neg B
Neg Neg Neg O 4+ 4+ O
4+ 4+ 4+ AB Neg Neg AB
1. ¿EXPLIQUE BREVEMENTE COMO SE MANIFIESTA LA REACCION AG-AC?
2. LOS ANTIGENOS DEL SISTEMA ABO SE ENCUENTRAN EXCUSIVAMENTE EN LA MEMBRANA DEL ERITROCITO
3. SE PUEDE ESTABLECER CON LAS PRUEBAS DE LABORATORIO OS FENOTIPOS Y GENOTIPOS DE LOS INDIVIDUOS.
4. QUE DETERMINANOS EN LA PRUEBA GLOBULAR Y SERICA
5. INVESTIGUE FALSOS POSITIVOS Y NEGATIVOS QUE PUEDEN DARSE AL DEARROLLAR ESTE PROCEDIMIENTO.
BIBLIOGRAFIA
Manual Técnico, AABB, 10º Edición, 1990
John Bernard Henry, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el Laboratorio
clínico, 9ª. Edición,1993
• OPS/OMS. Estándares de Medicina Transfusional.
• Ministerio de Salud. Manual de procedimientos de Medicina Transfusional, 2002,
Linares Jesús, Principios de Inmunohematología y Transfusión
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HOJA DE REGISTRO DE RESULTADOS
INTERPRETACION
INTERPRETACION
PRUEBA CELULAR SISTEMA Rh VARIANTE DU PRUEBA SERICA
NOMBRE Y APELLIDOS
CONTROL Rh Ó
ANTI ANTI ANTI AUTO ABO y Rh CELULAS CELULAS
Nº A B ANTI AB D CONTROL ALB 37º AGH CCC A1 B ABO
