“reacción de transaminación y su reconocimiento por cromatografía en papel”
Arteaga Arellano Katrina Ryane, Hurtado Mancilla Jesús Daniel | 3FV2 | Sección II
Introducción
Las reacciones de transaminación ocupan un
lugar central en el metabolismo de los
aminoácidos. son catalizadas por enzimas
llamadas transaminasas y su función es
remover el grupo amino de los aminoácidos,
Esquema a escala del cromatograma obtenido
el cual se puede transformar, dependiendo del
aminoácido, en acetil-s-CoA, piruvato o algún
intermediario del ciclo de Krebs. Así, estos
átomos pueden ser degradados hasta agua y
dióxido de carbono, o convertirse en
carbohidratos o lípidos.
En estas reacciones de transaminación
intervienen como sustrato un aminoácido y un
cetoácido, un grupo alfa amino de un
aminoácido pasa a un carbono alfa de un alfa
cetoácido.
Objetivos
➢ cuantificar la actividad de la ALAT/
TGP presente en un extracto crudo de
hígado empleando un método de
cromatografía y espectrofotómetro.
Resultados
Cálculo de los valores de Rf
M Dr Ds Cálculo de Rf
(cm) (cm) Rf
0 26 42 26/42 0.619
5 25.5 42 25.5/42 0.607
10 25 42 25/42 0.595
15 26 42 26/42 0.619
20 24 42 24/42 0.571
P1 24 42 24/42 0.571
P2 33 42 33/42 0.786
T 34 42 34/42 0.810
A 32 42 32/42 0.762 Cálculo de unidades de absorbancia y micro
moles de ácido glutámico
Frente 42
µLitros de µMoles de
glutámico glutámico
0 0
30 0.6
60 1.2
120 2.4
150 3.0
180 3.6
210 4.2
“reacción de transaminación y su reconocimiento por cromatografía en papel”
Arteaga Arellano Katrina Ryane, Hurtado Mancilla Jesús Daniel | 3FV2 | Sección II
Discusión:
Se obtuvo a la enzima TGP macerado el
hígado de rata en un mortero y, con ayuda
del pistilo y la arena, rompimos las células
hepáticas, también utilizamos un
regulador de acetatos para mantener un
pH óptimo de 7.4.
“reacción de transaminación y su reconocimiento por cromatografía en papel”
Arteaga Arellano Katrina Ryane, Hurtado Mancilla Jesús Daniel | 3FV2 | Sección II
Esta enzima es necesaria para lograr que o El frente de glutámico coincidió
el grupo amino del donador, en este caso con la relación del tubo problema,
la alanina, sea transferido al aceptor que demostrándonos la presencia de
es el ácido alfa-cetoglutarato para lograr acido glutámico
obtener glutamato y un piruvato
Bibliografía:
- McKee, T; McKee, J, R. (2003).
Bioquímica: la base molecular de la vida. 2a
edición, editorial McGraw-Hill. Pp.185-186
Strayer, Lumbert; Tymoczko, (2004).
Para que esta reacción se lleve a cabo, Bioquímica (5ta edición). Barcelona: Reverte
también necesitamos la presencia de un
cofactor, este es el trifosfato piridoxal
(vitamina B6) y se encargara de atrapar al
grupo alfa-amino de la alanina y
transferirlo a alfa-cetoglutarato.
Gracias a las distancias recorridas por las
muestras en la prueba de cormatografia,
podemos demostrar a presencia de
alanina y acido glutámico en los tubos.
Después de realizar los cálculos
necesarios, obtuvimos un valor de
649.9590 µmoles/hr*g que es la actividad
enzimática.
Conclusión:
o Estas reacciones son muy
importantes pues están implicadas
en rutas metabólicas como el ciclo
de la urea que se da entre el tejido
muscular y el hepático, y el ciclo
de Krebs
o El tubo testigo nos ayuda a
aproximarnos a un valor mas
preciso sobre la velocidad real de
la enzima, debido a que su
contenido viene directamente del
hígado de rata, por lo que también
se encontrarían otras sustancias.
