FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE MEDICINA HUMANA
Taller Práctico de Biología Celular
Informe N° 2
TEMA: Permeabilidad del tejido membrana citoplasmática
(difusión y diálisis)
GRUPO N°: “2”
Integrantes Apellidos y nombres Porcentaje de
participación
1 Araujo Quispe Elvis Wilder 100%
2 Castro Gaona Lizbeth Kely 100%
3 Latorre Molinedo Anghely Liliana 100%
4 Perez Velasquez Jhareth Ariana 100%
5 Rivera Llanos Micaella Andrea 100%
SECCIÓN: 1K
HORARIO: 9:30-11:10 a.m.
DOCENTES: Tuya Salas Jonathan David
Aquije Dapozzo Carmen Luisa
LIMA, PERÚ
2024
ÍNDICE
I. INTRODUCCIÓN……………………………………….
- Marco teórico…………………………………..
- Objetivos………………………………………
II. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL……………….
- Materiales…………………………
- Metodología…………………………
III. RESULTADOS……………………………………….
IV. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS….
V. CONCLUSIONES……………………………………..
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………..
I. INTRODUCCIÓN
En esta investigación comprenderemos y observaremos la diferencia de
los procesos de difusión y diálisis, el objetivo de este informe es poder
entender cómo la célula realiza estos procesos en nuestro cuerpo, para
adentrarnos en el tema primero conoceremos las definiciones de cada
una de ellas. Primero definiremos a la permeabilidad celular, es una
cualidad de las membranas celulares que permite el paso de solventes y
solutos hacia dentro y hacia fuera de la célula. La difusión es el
movimiento de moléculas de una región de alta concentración a otra de
menor concentración producida por la energía cinética de las moléculas,
todas las moléculas de gases y líquidos tienden a moverse o difundirse
en todas las direcciones hasta que se encuentran distribuidas
regularmente por todo el espacio disponible. La diálisis es la difusión de
moléculas de bajo peso molecular a través de una membrana
semipermeable, estas se desplazan desde la solución más concentrada
a la más diluida. En esta investigación, emplearemos métodos de
observación, análisis crítico, experimentación con soluciones para poder
lograr diferenciar cada una de ellas utilizando un buche de pollo como
representación de membrana celular con el cual realizaremos 3
procedimientos: la difusión (factor temperatura), la diálisis 1 (de afuera
hacia adentro) y la diálisis 2 (de adentro hacia afuera) para determinar la
permeabilidad.
A través de esta serie de experimentos iremos explicando
detalladamente la permeabilidad de la membrana citoplasmática a través
de la difusión y la diálisis.
1.1 MARCO TEÓRICO
PERMEABILIDAD
La permeabilidad se refiere a la capacidad de una molécula particular
para cruzar la membrana plasmática de una célula por difusión.
● Si una molécula puede atravesar la membrana, se dice que la
membrana es permeable a esa molécula.
● Si una molécula no puede cruzar la membrana, la membrana no
es permeable (es impermeable) a esa molécula.
La permeabilidad también se presenta con diferentes intensidades. Es
decir, una membrana puede ser más permeable a un tipo de molécula
que a otra (aunque es "permeable" a ambas). Si una membrana es más
permeable a una molécula, es más fácil que esa molécula se difunda a
través de la membrana. Si una membrana es menos permeable a otra
molécula, es más difícil que esa otra molécula se difunda a través de la
membrana. (Kandel, E.R., Schwartz, J.H. y Jessell, T.M., 1995, pp.
133-147).
DIFUSIÓN
La difusión es un fenómeno físico en el que moléculas en disolución se
desplazan a favor de un gradiente de concentración. La difusión permite
el movimiento de moléculas de zonas de mayor concentración a zonas
de menor concentración, sin gasto de energía. Hay dos mecanismos que
permiten que las moléculas se transportan a través de las membranas
celulares:
● Difusión simple: Mecanismo por el cual las moléculas pequeñas,
hidrofóbicas y sin carga pueden difundirse libremente a través de
una bicapa de fosfolípidos, a favor de un gradiente de
concentración, sin ningún gasto de energía.
● Difusión facilitada: Mecanismo por el cual proteínas de membrana
transportan moléculas, a través de una bicapa de fosfolípidos, a
favor de un gradiente de concentración, sin ningún gasto de
energía.
La difusión simple y facilitada son dos formas de transporte pasivo,
puesto que las moléculas se transportan sin necesidad de energía (de
forma pasiva). (Sharyn A. Endow, Adam P. Russell, 2015)
DIÁLISIS
La diálisis es el método utilizado para separar las moléculas de
diferentes tamaños presentes en una disolución, por la diferencia en sus
índices de difusión o presión osmótica, a través de una membrana
semipermeable. Se coloca una solución de varias moléculas en una
bolsa sellada de diálisis (membrana semipermeable) por ejemplo en
nuestro caso el buche de pollo. La bolsa se coloca en un recipiente con
una disolución diferente o agua pura. Las moléculas lo suficientemente
pequeñas para atravesar los poros (a menudo agua, sales y en nuestro
caso lugol y Cloruro de Sodio) tienden a salir o entrar a la bolsa de
diálisis en la dirección de la disolución menos concentrada y las
moléculas más grandes son retenidas en la bolsa de diálisis. (Cardona,
F., 2020)
FUENTE: Diálisis de proteínas para cambiar el disolvente. Modificado de Wikimedia Commons.
1.2 OBJETIVOS
Objetivo general:
Entender el proceso de difusión del azul de metileno en base a
diferentes rangos de temperatura y diálisis con respecto a la
permeabilidad que sucede en el buche de pollo que representa el
tejido de la membrana citoplasmática.
Objetivos específicos:
● Identificar la característica de permeabilidad de la
membrana celular.
● Describir los mecanismos de difusión y diálisis a nivel
molecular.
● Enumerar factores que afectan la velocidad de difusión.
● Desarrollar habilidades en el trabajo de laboratorio y
analizar si se entendió con claridad el tema.
II. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
2.1 MATERIALES
● 40mL de agua helada
● 40mL de agua caliente
● 100 mL de Reactivo de Biuret
● 50 mL de colorante azul de metileno
● 100 mL de nitrato de plata
● 150 mL de solución de lugol
● 100 mL de cloruro de sodio al 30%
● 40 mL de solución de almidón al 10%
● 3 beakers de 100mL
● 20 cm de pabilo
● 2 palitos de anticucho
● 1 hoja de afeitar
● 2 buches limpios de pollo
2.2 METODOLOGÍA
● Diálisis #1 (de afuera hacia adentro):
Al principio tuvimos que lavar el buche con cuidado de no romperlo. Se
ató con pabilo un extremo del buche y por el otro lado añadimos, usando
un embudo, 40 mL de solución de almidón al 10%. Cerramos el orificio
del buche que quedó abierto con pabilo y con ayuda de un palito de
anticucho, se colocó en un beaker con 150 mL de Lugol. Lo dejamos
durante 40 minutos en reposo. Cumplido esto retiramos el beaker y
anotamos los cambios de color dentro del buche.
● Diálisis #2 (de adentro hacia afuera):
Al principio tuvimos que lavar el buche con cuidado de no romperlo.
Atamos con pabilo un extremo del buche, por el otro extremo se añadió,
usando un embudo, 40 mL de solución de Cloruro de Sodio al 30% y 40
ml de solución de albúmina al 0.5%. Cerramos con pabilo el extremo que
quedó abierto, se mezcló y con ayuda del palito de madera, colocamos
en un beaker 150 mL de agua destilada. Lo dejamos durante 40 minutos
en reposo. Al cumplir el tiempo, retiramos del beaker y procedimos a
verter 6 mL de la mezcla de dentro del buche a un tubo de ensayo y se
adiciono 4 gotas de reactivo de Biuret. Repetimos el procedimiento con
la solución del beaker. Después anotamos los cambios de color en cada
uno de los tubos. Además, a la solución del beaker se añadió cinco
gotas de solución de nitrato de plata (AgNO3) y luego anotamos los
cambios respectivos de color.
● Difusión (factor temperatura):
Colocamos en un beaker, 40 mL de agua a temperatura ambiente; en
otro, 40 mL de agua helada y en un tercero, 40 mL de agua caliente. Se
añadió al mismo tiempo a cada uno de ellos una gota de colorante azul
de metileno (tratar de no mover el agua) y observamos el
comportamiento de la gota en el agua. Anotamos los resultados
observados.
III. RESULTADOS
● Diálisis #1 (de afuera hacia adentro):
Una vez realizado el proceso de experimentación se observó un teñido
amarillento fuerte al exterior de la capa del buche. Al abrir el buche, se
evidencia presencia de Lugol, puesto que la muestra de agua destilada a
10% de almidón posee un color violeta; indicador que refleja el ingreso
de cierto porcentaje de Lugol al interior reaccionando con el almidón, y
por ende produciendo dicho cambio de coloración.
Fig 1. Comportamiento de Almidón y lugol
● Diálisis #2 (de adentro hacia afuera):
Al reaccionar el Nitrato de plata, con el líquido exterior para identificar la
presencia de NaCl, se obtuvo cloruro de plata el cual fue reflejado por el
color blanquecino lechoso, confirmando el paso del Cloruro de sodio al
exterior, por estar compuesto de iones de bajo peso molecular. Sin
embargo, al someter el reactivo de Biuret al solvente exterior del buche
se obtuvo una respuesta negativa sin cambio de color. Mientras al
someter el reactivo de Biuret al líquido del interior del buche, se obtuvo
una respuesta positiva con un color violeta, indicador que demuestra que
la albúmina al ser una proteína(polisacárido) muy grande no pudo pasar
al exterior.
Fig 2. Comportamiento de la albúmina y ClNa
● Difusión (factor temperatura)
Al insertar colorante de azul de metileno, en tres beakers con agua a
diferentes niveles de temperatura se obtuvo lo siguiente. El beaker con
agua caliente; con promedio de temperatura de 90 a 100 °C; tuvo la
difusión a mayor velocidad. Seguidamente, el beaker con temperatura
ambiental promedio de 18 a 25 °C tuvo una difusión moderada.
Finalmente, la que tendió a tener una lenta difusión fue el recipiente que
contenía agua helada a temperatura aproximada de 0 a 5 °C. La difusión
observada en las diferentes muestras se produce por la energía cinética
presente en las moléculas, donde a mayor calor mayor energía
presente.
Fig 3. Comportamiento de moléculas de Azul de Metileno
IV. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS
Experimento 1:
Tras verter 40 mL de almidón al 10% en el buche, sumergirlo en 150 mL
de lugol y esperar 40 minutos a aproximadamente 20°C. Se llega a
observar que solo una parte del almidón dentro del buche había
reaccionado de forma positiva con el lugol, mostrando un color azul
oscuro, mientras que en el exterior no había ningún cambio, estos
resultados demuestran que cómo el almidón resulta ser muy grande ya
que mide más de 15000 daltons no pudo pasar por los tejidos del buche,
más el lugol al ser pequeño se logró difundir para brindar un equilibrio,
aunque no fue de forma completa, ya que la reacción positiva solo se
noto en una pequeña proporción lo que puede ser debido a que como
menciona, Corrales y Caicedo (2020). el lugol es una mezcla de I2 y KI
y que si bien el I2 al ser una molécula no polar y pequeña puede pasar
fácilmente por difusión simple no se llegó a reconocer todo el almidón al
interior debido a que el KI si se llega a diluir en cargar K+ e I- por que al
ser iones necesitaron una difusión facilitada lo que hace que el proceso
sea más lento y más si la membrana del buche era aún un tanto gruesa,
por eso se nota reacción pero no en gran medida.
Experimento 2:
Tras incluir una solución de Albúmina con NaCl al 30% en el interior del
buche y sumergirlo en 150 mL de agua destilada y esperar 40 minutos
bajo una temperatura ambiente de 20°C aproximadamente, se realizaron
3 pruebas la primera fue sacar muestras de la solución que inicialmente
sólo contenía agua destilada y mezclar con nitrato de plata, las segunda
fue tomar de la misma agua y mezclarla con biuret. De las primera
muestra tras su mezcla con nitrato de plata se pudo observar un color
blanquecino característico del precipitado de cloruro de plata
demostrando como dice Gonzales y Restrepo ( 2011) que hubo una
reacción positiva. Por lo que se demuestra que el NaCl logró pasar de
adentro hacia afuera y esto debido a que el NaCl al tener contacto con
agua se disuelve en Na+ y Cl- que si bien no pueden transportarse por
simple difusión como el agua, estos se pueden difundir mediante
canales específicos activados a causa de la gradiente de concentración
de solutos en el interior de la membrana que para buscar su balance
querrán salir. Por otro lado la prueba de biuret en la solución de afuera
salio negativa más en el interior positiva ya que la albúmina es una
molécula grande con más de 15 000 daltons por lo que resulta muy difícil
su salida es por eso que para el balance solo el soluto de NaCl salió y la
albúmina se quedó adentro ya que en general al ser grande esta solo se
llega a excretar dentro de la célula mediante exocitosis.
Experimento 3:
Tras los 1,02 minutos de insertar el azul de metileno en lo bikers con
agua caliente, temperatura ambiente y helada, se determina que la
muestra con agua caliente se llega a disolver casi en totalidad, mientras
que la de agua al tiempo media y la helada casi nada y esto debido a
que una vez que se incrementa el calor las partículas comienzan a
moverse más rápido por lo tanto estas llegan a colisionar entre ellas y en
ese caso a disiparse de forma mucho más rápida haciendo que se
disuelva rápidamente en el agua mientras que en los demás debido a
que fueron expuestos a menor calor las partículas no se movían como
las otras.
V. CONCLUSIONES
Logramos cumplir los objetivos planteados inicialmente ya que identificamos la
permeabilidad de la membrana celular y sus características, cualidad que
permite el paso de solventes y solutos dentro y fuera de la célula. Además
identificamos los mecanismos de difusión y diálisis. La difusión, es el
movimiento de moléculas de una región de alta concentración a una de menor
concentración, producido por la energía cinética de las moléculas. La diálisis es
la difusión de moléculas de bajo peso molecular a través de la membrana
semipermeable. A su vez identificamos los factores que afectan a la velocidad
de la difusión.
En la diálisis (de afuera hacia dentro), observamos un teñido amarillento en la
parte externa del buche, al ser abierto se mostró un color azul oscuro indicando
que el Lugol llegó a ingresar al interior, demostrando que el almidón al ser muy
grande no pudo pasar por los tejidos del buche, por otro lado el lugol al ser
pequeño pudo difundirse. En la diálisis (de adentro hacia afuera), evidenciamos
que al reaccionar el Nitrato de plata, con el líquido exterior para identificar la
presencia de NaCl, se obtuvo cloruro de plata el cual fue reflejado por un color
blanquecino, confirmando el paso del Cloruro de sodio al exterior, ya que este
último se disuelve en iones de Cl- y Na+ con bajo peso molecular y poseen
canales específicos. Por otra parte el solvente exterior del buche al ser
sometido al reactivo de Biuret, mostró una respuesta negativa sin presentar
cambio de color y al ser sometido a la solución interna del buche, se obtuvo
una respuesta positiva presentando un cambio a color violeta, manifestando la
presencia de una proteína (albúmina), caracterizada por ser de gran tamaño
molecular y por ello no logró pasar al exterior. Finalmente la difusión, fue
puesta a prueba usando 3 tipos de temperatura de agua: ambiente, caliente y
helada, las cuales fueron sometidas a un colorante azul de metileno,
comprobando que la exposición al agua caliente tuvo una mayor difusión con
respecto al tiempo. Confirmando que la difusión en las diferentes muestras
fueron producto de la energía cinética presente en las moléculas, la cual se ve
fuertemente influenciada por el calor, en ese sentido a mayor calor, mayor
energía cinética y como resultado una rápida difusión.
Finalmente es importante reconocer que hubieron ciertas variables
dependientes como el grosor del buche que no se tomaron en cuenta que se
recomienda en siguientes experimentaciones se tome más en consideración,
ya que cada grupo limpio el buche según lo que podía y muchos aún tenían
tejido conectivo, por ello es que existieron ciertos sesgos en los datos, aunque
en general los experimentos cumplieron con los objetivos.
En cuanto al trabajo grupal tuvimos la participación activa de cada uno de los
integrantes del grupo a la hora de realizar la parte práctica y la elaboración del
informe, llegando así a cumplir todos las competencias planteadas inicialmente.
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Cardona Serrate, F. (2020). Ósmosis y presión osmótica. Implicaciones
en química, biología y tecnología de alimentos.
https://riunet.upv.es/handle/10251/140064
Corrales Ramírez, L. C., & Caycedo Lozano, L. (2020). Principios
físicoquímicos de los colorantes utilizados en microbiología. NOVA:
Publicación Científica En Ciencias Biomédicas, 18(33).
Difusión Celular . (s/f). StudySmarter ES. Recuperado el 6 de mayo de
2024, de
https://www.studysmarter.es/resumenes/biologia/base-molecular-y-fisico
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Kandel, E.R., Schwartz, J.H. y Jessell, T.M. (1995). Membrane potential
(Potencial de membrana). En Essentials of neuroscience and behavior
(pp. 133-147). Norwalk, CT: Appleton & Lange.
Sharyn A. Endow, Adam P. Russell, Basics: Biophysics-A-step-by-step
Introduction to concepts for students. Lesson plan: Diffusion. 2015.
VII. ANEXOS
1.- Se lava el buche quitando las capas de tejido. 2.-Se inserta el embudo
3.- Se introducen 40mL de almidón al 10% al interior del buche
4.-Insertando concentración de 10% de almidón dentro del buche
5.-Extracción del líquido interno del buche
1.-Difusión del azul de metileno a diferentes niveles de temperatura de agua
COMPETENCIAS:
· Trabajo en equipo: Interactúa con empatía y asertividad en equipos de trabajo guiando
su comportamiento hacia la meta.
· Aprendizaje autorregulado de bases científicas y médicas: Interioriza los
conocimientos, experiencias y vivencias que le permiten construir las bases del conocimiento,
utilizando estrategias de aprendizaje.
CRITERIO LOGRO DESTACADO LOGRADO NO LOGRADO
1. CARÁTULA Se ajusta Se ajusta al No incluye todos los
(indicando completamente al formato datos solicitados y los
porcentaje de formato institucional y establecido, pero presentados están
participación) Y posee toda la omite datos desordenados. No se
PRESENTACIÓN información requerida relevantes de la ajusta al formato de
para la presentación del presentación. presentación.
informe.
1 punto 0.5 puntos 0 puntos
2. Las fuentes de La mayoría de los Algunos supuestos están
INTRODUCCIÓN información están conceptos están evidenciados y
(marco teórico y excelentemente sustentados. justificados. Las citas se
objetivos de la integradas con el Presentan alguna integran de modo
práctica) material práctico, desconexión en la deficiente, pobre o débil
coherente redacción. redacción y no integración de fuentes
Muy buen uso de las están del todo secundarias. Redacción
fuentes secundarias. Lo claras respecto a insuficiente de objetivos,
presentado argumenta lo desarrollado en se omite algunos
totalmente el tema. el laboratorio. propósitos del
Redacción de los Objetivos del laboratorio. Uso no
objetivos experimento adecuado de verbos.
completamente ajustada redactados con
al desarrollo pequeños
experimental de la omisiones y
práctica de laboratorio. errores de
Correcto uso de verbos. redacción.
1 punto 0.5 puntos 0 puntos
3. Describe en tiempo Describe en No utiliza el tiempo
PROCEDIMIENTO pasado y en primera primera persona pasado ni redacta en
EXPERIMENTAL persona los materiales y los materiales y primera persona los
(materiales y metodología utilizadas metodología materiales y metodología
métodos usados) en el desarrollo de sus utilizadas en el utilizada en el desarrollo
experiencias. desarrollo de sus de sus experiencias, la
experiencias sin información es
utilizar el tiempo incompleta.
pasado.
1 punto 0.5 puntos 0 puntos
4. RESULTADOS Todas las figuras, Figuras, tablas y La mayor parte de las
gráficos y tablas están gráficos son en figuras, gráficos y tablas
bien diseñadas, general correctos, son correctas, pero en
numeradas y tituladas. aunque presentan varios casos presentan
algún problema limitaciones de
menor que podría importancia.
ser mejorado.
5 puntos 3 puntos 0 puntos
5. ANÁLISIS Y Todos los resultados Casi todos los Parte de los datos se han
DISCUSIÓN DE comparativos y las resultados han interpretado y discutido
LOS tendencias presentes en sido interpretados correctamente, pero se
RESULTADOS los datos han sido y discutidos identifican errores e
interpretados y correctamente. Se imprecisiones de
discutidos identifican importancia.
correctamente. Buena imprecisiones
comprensión de lo menores.
indicado por los
resultados.
5 puntos 3 puntos 0 puntos
6. Se exponen con Se exponen todas Aunque recojan los
CONCLUSIONES claridad, concisión y las conclusiones principales aspectos
acierto todas las básicas, pero se estudiados, se explican y
conclusiones podría mejorar la comentan errónea o
importantes. Excelente formulación. ambiguamente. Pobre
comprensión. Algunos aspectos comprensión.
vagos.
5 puntos 3 puntos 0 puntos
7. REFERENCIAS Referencias bibliográfica Referencias Presenta una bibliografía
BIBLIOGRÁFICAS completa y bien bibliográficas incompleta, obviando
Redacta según formulada, con completa, pero sin algunas referencias
sistema APA las excelentes citas en el utilizar dentro del obligatorias (guías y
referencias citadas informe de laboratorio. marco teórico. apuntes personales, etc.)
en el informe
2 puntos 1 punto 0 puntos
