UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MANABÍ

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE LABORATORIO CLÍNICO

A.- DATOS GENERALES DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO

Asignatura: Parasitología 1

N° de Guía: 13 Código Materia: LABC17

Fecha:………………Hora de inicio:……………Hora de finalización:………….

Profesor Responsable: Lcda. Zulbey Rivero de Rodríguez PhD

Nivel al que va dirigido la Guía: 2do Paralelo: A-B

B.- DATOS ESPECÍFICOS DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO

 TÍTULO DE LA PRÁCTICA

PRUEBAS COPROQUIMICAS O COPROCUALITATIVAS

 CONTENIDO
Generalidades de las pruebas coproquímicas. Determinación de Sangre
oculta, Azucares reductores y Grasas totales.

Objetivo general:

Identificar y aplicar las pruebas coproculitativas de uso en el laboratorio

clínico

Objetivos específicos:

1.- Definir la utilidad clínica de cada una de las pruebas coprocualitativas e

interpretar su significado, diagnóstico fisiológico y patológico.
2.- Enunciar las recomendaciones mínimas para una correcta recolección de
la muestra fecal para la realización de Sangre Oculta, Azúcares Reductores y
Grasas Totales.
 3.- Efectuar correctamente las pruebas coprocualitativas de mayor solicitud
en los laboratorios.

 TIEMPO PLANIFICADO PARA LA PRÁCTICA DE LABORATORIO.

180 minutos.

 RECURSOS PARA REALIZAR LA PRÁCTICA DE LABORATORIO:

 Microscópio
 Placas porta y cubreobjetos
 Kit de sangre oculta
 Reactivo de Benedict
 Mechero o cocinilla electrica
 Glucosa grado reactivo o solución glucosada
 Reactivo de Sudan III (Shaatoff)
 Tubos de ensayo
 Centrífuga
 Toallín
 Muestras de heces

 INSTRUCCIONES PARA REALIZAR LA PRÁCTICA (BIOSEGURIDAD).

NORMAS GENERALES DE BIOSEGURIDAD:

1. Usar mandil durante la estancia en el laboratorio.

2. Evitar maquillarse, fumar, comer o beber en el sitio de trabajo.
3. Utilizar de forma sistemática guantes plásticos o de látex.
4. Manejar con estricta precaución la muestra fecal.
5. Desinfectar y limpiar las superficies y los equipos de trabajo, en caso
de contaminación.
7. En caso de que se rompa material de vidrio contaminado con heces
o cualquier líquido corporal, recoger los trozos con escoba y
recogedor (nunca con las manos) y depositarlos en el contenedor
para punzocortantes.
8. Descartar muestras y material contaminado en fundas rojas.

 SIGNIFICACIÓN CLÍNICA
 Con este término se reúnen una serie de pruebas que no buscan
directamente a los parásitos intestinales. Estas técnicas permiten detectar
de manera cualitativa cualquier elemento o sustancia química que no forme
parte de los constituyentes de la muestra de heces y elementos normales
que se encuentren anormalmente aumentados, lo que pudieran ser
indicativo de algún trastorno y/o patología del tracto gastrointestinal y sus
glándulas anexas.

 DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

SANGRE OCULTA: La sangre en las heces es de suma importancia diagnóstica;

puede ser el único signo de padecimientos ulcerativos, neoplásicos o inflamatorios
del aparato digestivo. Para que se produzca melena (sangrado profuso del tracto
gastrointestinal superior) son necesarios 100ml o más de sangre, provenientes del
tubo digestivo. La demostración química de cantidades menores de sangre
(sangre no visible macroscópicamente) depende de la realización de técnicas para
la demostración de hemoglobina fecal. La principal utilidad clínica de la prueba es:
• Detectar sangrados no apreciables a simple vista
• Detectar sangrados o hemorragias profusas
• Útil para el diagnóstico de cáncer colorectal
Existe una gran variedad de técnicas para la determinación de sangre oculta en
heces, se dividen principalmente en aquellas que detectan hemoglobina y
compuestos similares a esta (pruebas inespecíficos):
• Técnica de Thevenon-Roland o Piramidón
• Kits comerciales comunes:
1. Hematest stool
2. Hema Screen
3. Hemoccult
4. Dencoccoult
Métodos que detectan específicamente hemoglobina humana (pruebas
específicas):
• Métodos Inmunocromatográficos:
1. Hexagon obti-test
2. Prueba rápida FOB
Cuando se utilizan métodos inespecíficos, es necesario solicitar que el paciente
cumpla con ciertos requisitos para la toma de la muestra de heces, estas incluyen:
1. Cepillado suave de los dientes
2. No ingerir carnes rojas, ni vegetales verdes, remolacha, zanahoria, rábano
y ciruelas pasas. (3 días previos).
3. La muestra debe ser espontánea.
4. No se debe mezclar con orina, ni con sangre menstrual.
 5. No ingerir medicamentos con Hierro, Vitamina C, Aspirinas ni
Antiinflamatorios
Generalmente el fundamento de estas pruebas es el siguiente:
El grupo Hem de la hemoglobina actúa como una peroxidasa, desdoblando el
H2O2 en H2O y O2; este último al liberarse es capaz de oxidar una sustancia
reducida (piramidón, toluidina, bencidina, guayaco), la cual al oxidarse produce un
cambio de color a azul violeta.

HEM
HEMOGLOBINA
(PEROXIDASA)

H2O2

H2
+
O2

PIRAMIDON

El procedimiento para la realización de la prueba, se muestra a continuación:

La muestra de heces se aplica en la almohadilla de la cajita, luego se agrega una
gota del reactivo provisto por el kit (agua oxigenada) y se espera ver cambio de
color hacia azul intenso (positivo) y si permanece igual es negativo.
Aquí se muestran las imágenes de algunos de estos kits comerciales:

Los métodos específicos incluyen técnicas inmunocromatográficas, donde se

busca la hemoglobina (Hb) en las heces, mediante anticuerpos antiHb humana; en
el punto donde se da la reacción antigeno-anticuerpo, se observa una banda de
color. Tambien debe onservarse banda de color en el control positivo. El
fundamento es el siguiente: La hemoglobina humana reacciona con un conjugado
formado por partículas coloreadas de azul (o rojo) y cubiertas con anticuerpo
monoclonal contra la hemoglobina humana. El complejo inmune así formado migra
a la zona de la prueba donde es capturado por un segundo anticuerpo dirigido en
contra de la hemoglobina formando una línea azul que indica la positividad de la
prueba. Las partículas azules que no reaccionan, se unen en una segunda línea, a
un anticuerpo-anticonjugado inmovilizado. A continuación el procedimiento para
realizarla:
Lectura de la prueba:

Figura 1: Muestra negativa, Figura 2: Muestra positiva, Figura 3: Dudosa, repetir

prueba y Figura 4: Tira defectuosa

AZUCARES REDUCTORES: Los almidones constituyen la principal fuente de

hidratos de carbonos para el hombre. Entre el 50 y 90% de los hidratos de
carbono que se consumen proceden de los granos, vegetales y legumbres, tales
como arroz, trigo, maíz y papas, en los que están en forma de almidón. Otras
fuentes importantes de hidratos de carbono incluyen las frutas que tienen un alto
contenido de glucosa, fructosa y pentosas; la leche y los productos lácteos, que
contienen lactosa, y la caña de azúcar y la remolacha que constituyen la principal
fuente de sacarosa. Estos hidratos de carbono una vez ingeridos, son
transformados todos ellos en glucosa para poder ser transportados a través de la
mucosa intestinal y llegar a la sangre y tejidos, donde se constituye en el
combustible predominante. El proceso de transformación de los poli y disacáridos
en el intestino ocurre como sigue:

Disacáridos Disacaridasa Monosacáridos

 Sacarosa Sacarasa Glucosa + fructosa

Se absorben en la
 Lactosa Lactasa Glucosa + galactosa
 mucosa intestinal

 Almidón Amilasa 6 moléculas de glucosa

La prueba de azucares reductores permite el diagnóstico de trastornos en el

metabolismo de los carbohidratos, tales como:
1.-Trastornos enzimáticos (déficit total o parcial de alguna de las disacaridasas
intestinales)

 Negativo (sin cambio de color).

 Trazas (color amarillo-verdoso)

 Positivo (color amarillo-ladrillo, que puede ser

reportado en cruces según la intensidad del
color).

2.-Intolerancia a la lactosa:
 Congénita
 Deficiencia primaria o secundaria
3.-Intolerancia a la sacarosa:
 Trastornos de digestión y absorción
4.-Mala absorción de monosacáridos

Fundamento técnica de Benedict: Los azúcares reductores (glucosa, fructosa y

galactosa) bajo la acción del calor, reducen los iones de cobre presentes en el
reactivo de Benedict, lo cual se evidencia por un color del reactivo hacia tonos
amarillo-ladrillo.

Procedimiento:

1.-Preparar suspensión de heces, 1mg en 5ml de agua

2.- Centrifugar a 1000rpm por 5 minutos
3.- Trasvasar 2 ml del sobrenadante a otro tubo
4.- Agregar 3 ml del reactivo de Benedict
5.- Colocar en baño de María hirviente por 10 minutos
6.- Montar controles positivo y negativo
7.- Leer resultados
Kits comerciales: El homogeneizado de heces se mezcla con la pastilla del kit y se
espera cambio de color, según la misma escala del Benedict

La prueba de azucares reductores debe hacerse en conjunto con la determinación

del pH fecal. El pH fecal está condicionado por la naturaleza química de los
alimentos que ingerimos. Este pH generalmente esta alrededor de 7.0-7.5. Una
ingestión abundante de lactosa puede producir un pH bajo (reacción ácida).En las
diarreas por bacterias invasivas, generalmente es ácido (menor de 6.0); en
diarreas de origen tóxico, es neutro y en diarreas virales, siempre es ácido.
Determinación de pH fecal: La presencia de diferentes sustancias en las heces,
conllevan a una disminución o aumento del potencial de hidrogeniones en la
misma, lo cual se determina por tiras de medición de pH produciéndose un cambio
de color, que indicará los valores aproximados de éste al comparar con una escala
de valores
Procedimiento:
Colocar un trozo de la tira medidora de pH en contacto con la muestra fecal,
esperar se humedezca para ver cambio de color, colocar el valor de pH en base a
la escala de color.

Lectura:
Colocar en el reporte el resultado de la prueba de azucares reductores y el pH
obtenido.

GRASAS TOTALES: Esta prueba permite el diagnóstico de las esteatorreas:

aumento desproporcionado de la cantidad de grasa en las heces, que le confiere a
la muestra un color blanquecino, aumento del volumen y un aspecto espumoso.
Esteatorreas patológicas:
- Insuficiencia pancreática de lipasa (Fibrosis quística-Pancreatitis crónica)
- Insuficiencia biliar
- Hipermotilidad intestinal (provoca aumento de grasas neutras)
- Parasitosis (giardiasis,estrongiloidiasis y coccidiosis intestinales)
- Lupus Eritematoso Sistémico (LES)
Esteatorreas fisiológicas:
- Dieta rica en grasa (provoca aumento de grasas neutras)
- Dieta casi o totalmente láctea (niños menores de seis meses)
Fundamento Técnica de Saathoff: Las grasas totales (grasa neutra, ácido grado,
jabones) al reaccionar con el reactivo de Saathoff se tiñen de color rojo brillante y
adquieren la forma redondeada al fundirse por el calor (jabones y ácidos grasos).
Procedimiento:
1.- Agregar una gota de solución salina fisiológica en una lámina portaobjetos,
más 3 gotas del reactivo de Saathoff
2.- Agregar 1mg heces y mezclar
3.- Colocar cubreobjeto
4.- Pasar sobre un mechero hasta que comience a emitir vapores
5.- Dejar refrescar y revisar al microscópio
6.- Leer en promedio 20 campos microscópicos con 40x, buscando esferas rojas
de diferentes tamaño y promediar.

Reporte: Negativo: de 0 a 10 gotas por campo, Positivo: más de 10 gotas por

campo.

 CÁLCULOS DE LOS RESULTADOS (no aplica)

  VALORES DE REFERENCIA: Sangre y azucares no deben existir en la
muestra de heces. Las grasas totales son normales hasta cierta cantidad,
en promedio menos de 10 gotas/campo

 PRECAUCIONES Y RECOMENDACIONES

C.- EVALUACIÓN DEL APRENDIZAJE

Se realizará un postest o pretest, para evaluar los conocimientos adquiridos
durante la discusión de la práctica y lectura previa.

D.- BIBLIOGRAFÍA

Botero y Restrepo, Parasitosis Humanas, 5ta Edición. 2012

E.- VIDEOGRAFÍA

https://www.youtube.com/watch?v=x4cCcNLEEtA (sangre oculta)

https://www.youtube.com/watch?v=gKXqeS6u0gg (azucares reductores)

https://www.youtube.com/watch?v=0bYjxHaG40w (Sudan III o Saathoff)