CALOR

ESTERILIZACIÓN POR CALOR HÚMEDO.

El calor húmedo destruye los microorganismos por coagulación de sus proteínas celulares. El principal método de
esterilización que emplea calor húmedo es la esterilización por vapor a presión. Existen otros métodos de
descontaminación que emplean este tipo de calor los cuales, aunque no permiten la destrucción total de los
microorganismos, disminuyen la carga microbiana que posee un material. (1)
Entre estos métodos podemos citar:
 Tindalización (esterilización fraccionada).
 Agua hirviendo.
 Pasteurización.
 Olla de presión.
La esterilización por vapor a presión se lleva a cabo en un autoclave. Estos equipos emplean vapor de agua saturado, a una
presión de 15 libras lo que permite que la cámara alcance una temperatura de 121ºC. El tiempo de esterilización
usualmente es de 15 minutos, sin embargo, en algunas oportunidades, dadas las características del material, es necesario
variar el tiempo de esterilización.
Cuando se utiliza este método es importante controlar en el autoclave la relación entre la temperatura, la presión y el
tiempo de exposición, ya que éstos son factores críticos en el proceso. Sólo cuando el vapor se coloca bajo presión, es
cuando su temperatura aumenta por encima de los 100ºC y esto permite alcanzar las temperaturas de esterilización
(121ºC).
Entre las ventajas de este método de esterilización tenemos que no deja residuos, los autoclaves modernos son sencillos de
manejar y es un método rápido de esterilización. Éste es el método de elección para esterilizar materiales termoestables y
no sensibles a la humedad como medios de cultivo, cultivos de microorganismos para descartar, lencería, uniformes,
instrumentos quirúrgicos, etc. (2)
Entre sus desventajas están que no permite la esterilización de materiales sensibles al calor y materiales no miscibles con
el agua como es el caso de polvos, aceites y grasas.
PRECAUCIONES:
 Antes de comenzar el proceso de esterilización es necesario remover todo el aire de la cámara del autoclave,
porque de lo contrario no se podrán alcanzar las condiciones de esterilización requeridas debido a que la cámara
interna del equipo no podrá ser saturada por el vapor de agua.
 El tiempo de esterilización se debe comenzar a contar una vez que se han alcanzado los 121ºC en la cámara
interna del autoclave.
 Si se van a esterilizar materiales tales como instrumentos quirúrgicos, equipos, etc. no se deben cubrir con
materiales impermeables al agua como por ejemplo el papel de aluminio, porque éste no permite que el vapor
tenga acceso al material y por lo tanto no se logrará la esterilización.
 Cuando se coloca el material a esterilizar en el interior del equipo se debe garantizar la libre circulación del vapor
de agua alrededor de todo el material.
Para controlar la esterilización por vapor a presión se emplean indicadores físicos tales como medidores de presión,
termómetros, o termógrafos. Aunque estos controles son ampliamente utilizados, actualmente se consideran métodos
secundarios para el control del proceso y son los indicadores biológicos los que permiten determinar si realmente se llevó
a cabo en forma efectiva la esterilización. Entre los indicadores biológicos más utilizados para controlar el proceso de
esterilización por vapor a presión, se encuentran las esporas de Bacillus stearothermophilus que son altamente resistentes
a este proceso. Se recomienda el uso de controles biológicos por lo menos una vez a la semana para verificar el buen
funcionamiento del autoclave. En caso de que se sospeche de alguna falla se debe colocar un indicador biológico en cada
carga de esterilización. (3)
ESTERILIZACIÓN POR CALOR SECO
La esterilización por calor seco produce la destrucción de los microorganismos por oxidación de sus componentes
celulares. Éste es un proceso menos eficiente que la esterilización por calor húmedo, porque los microorganismos mueren
con mayor rapidez cuando se encuentran en presencia de agua, ya que éste permite que se altere con mayor facilidad la
configuración de sus proteínas y proporciona un medio para distribuir el calor uniformemente en toda la cámara interna
del equipo de esterilización. Por esta razón, para lograr la esterilización del material empleando el calor seco, se deben
aplicar temperaturas más altas durante mayor tiempo. (4)
La esterilización por calor seco se puede realizar por varios métodos:
 Aire caliente.
 Llama directa.
 Incineración
 AIRE CALIENTE:
El aire caliente es uno de los métodos de esterilización por calor seco más utilizados. Este proceso se lleva a cabo en
hornos especiales que permiten la distribución uniforme del calor en su interior, donde el material se expone a
temperaturas de aproximadamente 170ºC durante 2 horas. El tiempo de esterilización se debe determinar para cada tipo de
material, por ejemplo, en el caso de materiales muy resistentes al calor, se pueden usar temperaturas más altas por tiempos
más cortos.
Entre las ventajas de este método de esterilización están que no deja residuos, y es un método rápido y económico.
Además, permite la esterilización de materiales no miscibles con el agua como es el caso de polvos, aceites y grasas. Su
principal desventaja es que sólo debe emplearse para esterilizar materiales termoestables.
Para controlar este proceso de esterilización se utilizan indicadores físicos tales como los termómetros, los cuales
permiten medir la uniformidad de la temperatura de la cámara interna del horno, indicadores químicos como las cintas
adhesivas e indicadores biológicos como las esporas de Bacillus subtilis.
Este método se emplea para la esterilización de material de vidrio, instrumentos quirúrgicos, agujas de metal, materiales
no miscibles con el agua, etc.
 LLAMA DIRECTA.
Consiste en colocar el material directamente al fuego hasta que éste se ponga al rojo vivo. De esta forma se queman los
contaminantes hasta reducirlos a cenizas. Su eficacia depende de la calidad de la llama.
Es un procedimiento muy sencillo que se realiza de rutina en los laboratorios de microbiología para esterilizar el asa o el
filamento con la llama del mechero. Cuando se realiza este procedimiento se debe evitar la formación de aerosoles
(pequeñas gotas liberadas al aire) que podrían contaminar el ambiente.
 INCINERACIÓN.
El material a esterilizar se coloca en cámaras especiales que alcanzan elevadas temperaturas. Con este método se queman
los contaminantes hasta reducirlos a cenizas. Es una forma efectiva de esterilizar el material contaminado a descartar tales
como bolsas, papel, uniformes desechables, cadáveres de animales, etc. (5)

MÉTODOS DE DESINFECCIÓN. Se trata de métodos de limpieza que reducen de forma más intensa la contaminación

microbiana, destruyendo agentes patógenos tanto en ambientes como en superficies y objetos. (6) Los métodos de

desinfección de material de laboratorio más habituales

Frotado y fregado manual. Especialmente utilizado tras usar cualquier utensilio del laboratorio, muy útil para evitar que
la suciedad presente después de usar el mismo, quede impregnada en este. Usando una esponja que no sea abrasiva,
damos varias pasadas al objeto aplicando agua y un detergente suave.

 Método de inmersión
 Limpieza en lavadora de laboratorio
 Desinfección por luz UV