MICROBIOLOGÍA

UNIVERSIDAD DE CARTAGENA – F.C.N.E.

INFORME #4 - LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

PROGRAMA DE BIOLOGIA

PRUEBAS BIOQUÍMICAS

Pérez-Izquierdo, Andrea Sofia; Pérez Izquierdo, Adrián David; Dumett-Guzmán, Gabriela

Fernanda; Vega-Angulo, Jhosua David; Mercado-Pájaro, Dara Gabriela.

Docente: Yaleyvis Amparo Buelvas Montes

RESUMEN
La presente práctica de laboratorio se realizó con el objetivo de emplear técnicas bioquímicas para
identificar y caracterizar microorganismos. Estos ensayos suelen determinar la actividad de una vía
metabólica mediante un sustrato incorporado en el medio de cultivo y cómo la bacteria lo
transforma al crecer, demostrando ciertas características bioquímicas en específico como la
presencia o ausencia de cierta actividad enzimática, grupos de enzimas, entre otros. Por
consiguiente, se aplicaron pruebas coagulasa, oxidasa, fermentación de la lactosa, SIM, ureasa,
citrato, entre otras. Para ello, se utilizaron las bacterias Staphylococcus aureus, Serratia
marcescens, Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli. Posteriormente, los resultados fueron
discutidos y se pudo concluir que existe una relación entre el metabolismo de los microorganismos
y el sustrato en el que se encontraban.

PALABRAS CLAVE: actividad enzimática, bacterias, medio de cultivo, vía metabólica.

ABSTRACT
This laboratory practice was carried out with the objective of using biochemical techniques to
identify and characterize microorganisms. These assays usually determine the activity of a
metabolic pathway by means of a substrate incorporated in the culture medium and how the bacteria
transform it as they grow, demonstrating certain specific biochemical characteristics such as the
presence or absence of certain enzymatic activity, groups of enzymes, among others. Therefore,
coagulase, oxidase, lactose fermentation, SIM, urease, citrate, among others, tests were applied. For
this purpose, Staphylococcus aureus, Serratia marcescens, Klebsiella pneumoniae and Escherichia
coli bacteria were used. Subsequently, the results were discussed and it was possible to conclude
that there is a relationship between the metabolism of the microorganisms and the substrate in
which they were found.

KEYWORDS: bacteria, culture medium, enzyme activity, metabolic pathway.

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INTRODUCCIÓN
La bioquímica es una ciencia que permite comprender los sucesos que ocurren a pequeñas
escalas por moléculas biológicas, que como consecuencia producen reacciones químicas, es
esta área se estudia los componentes de la vida a nivel molecular y las reacciones que
sufren y él por qué de su comportamiento como lo son el metabolismo, la reproducción y
almacenamiento de energía (Macías Alvia et al., 2018). La bioquímica es denominada con
una ciencia interdisciplinar, y en relación con la biología se desarrollan conocimientos con
organismos unicelulares y virus en la determinación de rutas metabólicas y mecanismo de
regulación, esto específicamente en el área de la microbiología (Mathews et al., 2013).
La bioquímica utiliza los bioelementos que constituyen a los seres vivos para estudiarlos,
los bioelementos son aquellos que participan en la conformación y función de la vida y que
también son hallados en la naturaleza, en síntesis, son los bioelementos primarios (C, H, O,
N, O y S) que forma el 99% de la materia viva y los bioelementos secundarios (Na, K, Ca y
Cl) que representa el 1% (Fernández Gama & Fuertes Gama, 2019).
La bioquímica como ya se ha mencionado sirve para identificar el trabajo que ocurre en un
organismo a nivel molecular, esto lleva a otra área de la Bioquímica como lo son las
pruebas Bioquímicas para identificación de bacterias o microorganismos, estas pruebas
permiten identificar un organismo por medio de su metabolismo o su sensibilidad a una
sustancia que se suministra en un medio de cultivo (Cercenado et al., 2010). Estas pruebas
también son catalogadas como pruebas fenotípicas, y estos organismos pueden presentar
diferentes comportamientos frente a un medio de cultivo como la producción de ácidos a
partir de la degradación de azúcares, algunos pueden resistir altas concentraciones de NaCl,
pueden presentar actividad oxidasa, peroxidasa, pueden tener motilidad como también
crecer anaeróbicamente, hidrolizar caseína, esculina, gelatina etc. Estos comportamientos
provocan la liberación y/o producción de diversas sustancias que pueden colorar el medio,
además de la forma en que crece el microorganismo. Rasgos visuales fenotípicos
(bioquímico) que permiten su distinción con respecto a los demás microorganismos
(Carrasco et al., 2020).
Según el artículo Métodos de identificación bacteriana en el laboratorio de microbiología
(2011), se propone desde experiencia en microbiología una secuenciación de pruebas
basadas en la duración de cada una para dar un resultado, así:
“1) Pruebas que se utilizan en la identificación preliminar y con lectura inmediata como la
catalasa y oxidasa; 2)otras pruebas rápidas, con lectura en menos de 6 horas tal y como la
hidrólisis del hipurato, la beta-galactosidasa (ONPG), las aminopeptidasas, la uresa y el
indol; 3)pruebas lentas, con lectura de 18 a 48 horas que incluirían la óxido-fermentación,
reducción de nitratos, rojo de metilo, Voges-Proskauer, Agar hierro de Kligler,
fermentación de azúcares, hidrólisis de la esculina, coagulasa, fenilalanina-desaminasa,
DNasa, hidrólisis de la gelatina, decarboxilasas, lipasa, lecitinasa, utilización de citratos,
utilización de malonato, y prueba de CAMPentre las más frecuentes, y 4)pruebas basadas

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en caracteres de resistencia a ciertas sustancias tal y como optoquina, bacitracina,

solubilidad en bilis, y crecimiento en caldo hipersalino”.
Para trabajos de laboratorio es de vital importancia identificar los microorganismos con los
que se trabaja, este es el principal objetivo de esta práctica, conocer la reacción de un
organismo frente a medios de cultivos que provocan un resultado, si este medio le
proporciona lo que necesita, siendo comprobado por medio del crecimiento distintivo en el
medio y la coloración provocada por la sustancia o el pH resultante del metabolismo del
mismo.
MATERIALES Y MÉTODOS
Las pruebas bioquímicas que se describirán a continuación, se llevaron a cabo utilizando
Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y Serratia marcescens como organismos de
prueba, cada uno inoculado individualmente. Sin embargo, las pruebas de oxidasa y
coagulasa se realizaron utilizando Staphylococcus aureus. Las colonias bacterianas fueron
recolectadas de cultivos axénicos que fueron preparados con anterioridad.
Antes de iniciar, se esterilizó el área de trabajo con alcohol. Luego, se encendió el mechero
y se trabajó cerca a este para evitar contaminación. Posteriormente, se esterilizó el asa de
siembra en la llama del mechero hasta que el metal se tornara de color rojo intenso y se
dejó enfriar. Posteriormente, se tomó una pequeña cantidad de colonia bacteriana con el asa
estéril e inoculó el medio agar TSI (Triple Sugar Iron) que estaba contenido en tubos de
ensayo, sumergiendo el instrumento hasta el fondo del tubo y después estriando la
superficie inclinada.
Para la prueba de urea, se inoculó el medio sumergiendo y agitando sutilmente el asa con la
colonia bacteriana previamente recolectada de la placa de agar para poder liberarla en el
caldo.
En la prueba SIM (Sulfide Indole Motility), se inoculó el medio mediante punción en el
centro del tubo hasta aproximadamente dos tercios de su profundidad.
Para la prueba LIA (Lysine Iron Agar), se inoculó el medio con una picada en el fondo y
estriación en la superficie. Para la prueba de citrato, se inoculó el agar citrato mediante
estriación en la superficie inclinada.
En la prueba MacConkey, se inoculó la placa de agar MacConkey con un asa de siembra
estéril, efectuando siembra por agotamiento.
Con la prueba de catalasa, se utilizó un portaobjeto limpio y, con un asa estéril, se agregó
una pequeña colonia de bacterias. Después, se añadieron tres gotas de agua oxigenada y se
dejó actuar.
En la prueba de oxidasa, se colocó una colonia bacteriana en una cinta indicadora hasta
observar variaciones con respecto al color de la cinta. Se procedió a sembrar la bacteria en
agar de manitol salado por estriación.

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Por último, en la prueba de coagulasa, se preparó una emulsión bacteriana mezclando una
pequeña cantidad de la colonia recolectada con 0.5 ml de plasma de conejo en un mini tubo
de ensayo estéril y se selló el recipiente.
Al terminar, todas las muestras se incubaron a 37 °C durante 24 horas.

RESULTADOS

CATALASA
Al añadir el peróxido de hidrogeno se produjeron burbujas, por lo que se dedujo que la
especie empleada para la prueba era catalasa positiva, dado que esta reacción indica la
presencia de la enzima. También se registró crecimiento microbiano en el agar manitol
salado, el cual pasó de ser de color rojo a amarillo (imagen 1). Este hallazgo permitió
determinar que la especie catalasa positiva era Staphylococcus aureus.

Imagen 1. Cultivo puro de Staphylococcus aureus. Se

obtuvieron colonias de muy juntas por efectuar la siembra por
estriado a la hora de realizar la inoculación. Fuente: elaboración
propia.

OXIDASA
Al añadir la colonia bacteriana, la cinta indicadora utilizada se tornó de color azul (imagen
2), indicando que S. aureus produce oxidasa.

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Imagen 2. Cambio de color observado en la cinta

indicadora por la presencia de oxidasa en S. aureus.
Fuente: elaboración propia.

COAGULASA
La mezcla de bacterias y plasma de conejo adquirió una consistencia bastante gelatinosa al
integrar completamente los componentes (imagen 3), por lo que se dedujo que S. aureus es
capaz de producir la enzima coagulasa.

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Imagen 3. Pruebas bioquímicas de coagulasa, por medio de

la cual, se determinó que S. aureus es coagulasa positiva.
Fuente: elaboración propia.

FERMENTACION DE LACTOSA
Las colonias de Serratia marcescens presentaron forma irregular, borde ondulado y
coloración rojiza. Además, el medio de cultivo adquirió una coloración amarillenta al
transcurrir el periodo de incubación (imagen 4). Dicha variación es un claro indicador de
que la enterobacteria en cuestión es fermentadora de lactosa (lactosa +).

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Imagen 4. S. marcescens cultivada en agar MacConkey, un medio selectivo-

diferencial. Generalmente, es visualmente rojo cuando en ausencia de bacterias
fermentadoras de lactosa. Fuente: elaboración propia.

No se observó este cambio de coloración en el medio en donde se cultivó E. coli; sin

embargo, se registró un elevado crecimiento microbiano. Las colonias mostraron forma
circular y una coloración rojiza. En virtud de que el agar no se tornó de color amarillo
(imagen 5), se determinó que E. coli es una Gram- no fermentadora de lactosa (lactosa -) al
igual que K. pneumoniae, quien también se proliferó en gran proporción, pero sin presentar
un cambio notable con respecto a la coloración del medio (imagen 6).

Imagen 5. colonias E. coli obtenidas por siembra en estrías por agotamiento. Fuente:
elaboración propia.

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Imagen 6. colonias de K. pneumoniae en agarMacConkey; siembra en estriado por

agotamiento. Fuente: elaboración propia.

CITRATO
S. marcescens provocó que la superficie del medio se tornara de color azul. Este cambio no
se dio en el extremo inferior del tubo, por lo que en esta zona se mantuvo la coloración
verdosa que presentaba el agar inicialmente (imagen 7). La variación descrita indicó que la
Gram- presente en la muestra, metaboliza citrato como única fuente de carbono.

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Imagen 7. Cambio de coloración generado por S.

marcescens al metabolizar citrato. Fuente: elaboración
propia.

Con respecto a K. pneumoniae, el agar en el que se inoculó no presentó un cambio tan

drástico, puesto que solo hubo una ligera variación de color. De hecho, el azul era tan tenue
que contrastaba con el color verde del medio (imagen 8). A raíz de esto, se cree que K.
pneumoniae puede metabolizar citrato, pero no de forma tan rápida.

Imagen 8. Leve cambio de coloración generado por

K. pneumoniae en el medio de cultivo. Fuente:
elaboracion propia.

En cambio, E. coli no produjo cambios

visualmente significativos en la
coloración del medio.

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SIM
E. coli no solo creció en el espacio que se originó al introducir el asa en punta durante la
siembra dado que también se observó crecimiento en los alrededores (imagen 10). Esta
dispersión indica que la bacteria es móvil. Además, la prueba dio negativa con respecto a la
producción de H2S porque no se evidenció precipitado negro en el medio; no obstante, dio
positiva para la producción de indol porque se formó un anillo rojo en la superficie del
medio. En cambio, S. marcescens (imagen 11) no produjo H2S ni indol porque no
observaron estas señales, pero la prueba si dio positiva para movilidad. K. pneumonie no
dio indicios de producir H2S e indol, tampoco de ser capaz de desplazarse a través del
medio (imagen 12).

Imagen 10. Crecimiento extendido de E. coli. Siembra en tubo por picadura en agar
semisólido. Fuente: elaboración propia.

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Imagen 12. S. marcescens en agar semisólido. Siembra en tubo por picadura. Fuente:
elaboración propia.

LIA

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En un principio, el medio en el que se sembró K. pneumoniae era de color café. No

obstante, la bacteria provoco que la superficie del agar se tornara de color purpura, el
centro de color violeta y el extremo superior de color café claro (imagen 13). El color
purpura indica que el microorganismo presente puede descarboxilar la lisina porque cuenta
con la enzima que interviene en este proceso. Lo mismo ocurrió con el medio en el que
estaba presente S. marcescens (imagen 14). E. coli fue la única que no generó cambios en el
color del agar, por lo que se concluyó que es incapaz de descarboxilar la lisina (imagen 15).

Imagen 13. Cambio drástico de la coloración del Imagen 14. Variación de la coloracion del medio,
medio, generado por K. pneumoniae al descarboxilar la generada por S. marcescens al descarboxilar la lisina.
lisina. Fuente: elaboración propia. Fuente. elaboración propia.

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UREASA
Todos los caldos en los que se realizó la inoculación de las bacterias en cuestión,
adquirieron una coloración amarillenta (imagen 16). Teniendo en cuenta esto, se asumió
que las especies son no son capaces de producir ureasa.

Imagen 16. Resultados de la prueba de ureasa. A la izquierda se

muesta el medio con S. marcescens, en el centro el que contiene E.
coli, y a la izquierda el que cuenta con presencia de K.
pneumoniae. Fuente: elaboración propia.

TSI
Se observo que el medio en el que se inoculó K. pneumoniae se tornó de color amarilllo
(imagen 17). Esto indicó que la especie bacteriana fermenta los tres azucares que contenía
el agar (glucosa, lactosa y sacarosa). Con respecto a E. coli (imagen 18) y S. marcescens

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(imagen 19), el agar de ambas adquirió una coloración amarillenta solo en la superficie,
pues el fondo conservó el color rojo característico que presenta el agar en ausencia de
microorganismos fermentadores de azúcares. Se cree que las bacterias mencionadas no
colonizaron esas zonas.

Imagen 17. Agar TSI con coloración amarillenta a raíz de la fermentación de azucares
realizada por K. pneumoniae. Fuente: elaboración propia.

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Imagen 18. Agar TSI con coloración amarillenta solo en la superficie por una posible
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Imagen 19. Agar TSI con coloración amarillenta solo en la

superficie por una posible proliferación localizada de S.
marcescens. Fuente: elaboración propia.

DISCUSIÓN
CITRATO

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El citrato es un medio selectivo, este tipo de medios generalmente contienen antibióticos y

antisépticos que inhiben el crecimiento de algunas bacterias y favorecen el de otras. Son de
gran utilidad para el aislamiento microbiano a partir de una población bacteriana mixta
(Fernández et al., 2010). Contiene agar y azul de bromotimol como indicador de pH; el
citrato sirve como fuente de carbono, las sales de amonio como fuente de nitrógeno y el
cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. El agar bacteriológico sirve como agente
solidificante y el sulfato de magnesio sirve como cofactor de reacciones metabólicas. Los
microorganismos que metabolizan el citrato alcalinizan el medio y crecen de manera
abundante, además, el medio cambia de verde a azul. Los microorganismos que no pueden
utilizar el citrato no generan cambios en el medio (Britania, 2021). Los resultados
obtenidos en la práctica concordaron con los que postulan otros autores en el ámbito
científico, ya que como se puede observar en la imagen 7, las bacterias citrato-positivas
crecen y hacen virar el indicador a azul intenso. Estas bacterias tienen la capacidad de usar
el citrato como única fuente de carbono, y compuestos amoniacales como única fuente de
nitrógeno. E. coli es citrato negativo, ya que no utiliza el citrato como fuente de carbono
(Laboratorio Microkit, 2020) (Chinen, 2022).
PRUEBA TSI
Se emplea para detectar la fermentación de lactosa, sacarosa y glucosa, con formación de
ácido y gas, y también para detectar producción de ácido sulfhídrico. En el agar TSI, la
concentración de glucosa es la décima parte de la concentración de la lactosa y la sacarosa.
La pequeña cantidad de ácido producido por la fermentación de la glucosa es rápidamente
oxidada en el bisel donde hay abundancia de oxígeno, quedando el color rojo
correspondiente a un medio alcalino; por el contrario, en el taco donde la tensión de
oxígeno es baja, la reacción ácida se mantiene (Universidad central de Venezuela, 2011).
En esta fermentación de azúcares, las bacterias anaerobias o anaerobias facultativas a
menudo, fermentan carbohidratos generando ácidos orgánicos y gas (H2 o CO2). Estos
pueden detectarse incluyendo en el medio un indicador de pH (Fernández et al., 2010). En
la prueba de TSI de E.coli, se obtuvo un pico ácido/fondo ácido (amarillo) con producción
de gas, SH2 negativo (Chinen, 2022) como se puede apreciar en la imagen 18. Para K.
pneuminiae, se debía obtener un pico y fondo ácido, con producción de gas (Britania,
2021); sin embargo, en este caso se obtuvo un fondo alcalino (rojo) y pico ácido (imagen
17), esto se puede interpretar de la siguiente manera: cuando hay un bisel ácido (amarillo)
es porque se fermentó la lactosa o la sacarosa al tener el fondo de color rojo quiere decir
que no se fermentó ninguna de las tres azúcares en esa área (Universidad central de
Venezuela, 2011), esto se puede dar porque la bacteria no llego a esa parte del medio a
causa de un mal sembrado. En cuanto a S. marcescens, su pico debe ser alcalino y su fondo
debe estar fermentado de manera ácida (amarillo) y generalmente es negativo para la
producción de gas, no obstante, se obtuvo el resultado contrario; el fondo no estuvo
fermentado y el pico fue un pico ácido como se aprecia en la imagen 19. En otras palabras,
se fermentó la lactosa o la sacarosa y fue negativo para la producción de gases; esto se
puede dar porque la bacteria no llego a esa parte del medio a causa de una mala siembra.

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LIA
Se utiliza para diferenciar los microorganismos entéricos a partir de su capacidad para
descarboxilar o desaminar lisina y formar H2S. La lisina puede ser descarboxilada por
microorganismos LD-positivos, que la transforman en amina cadaverina. Esto produce un
viraje al violeta del indicador de pH púrpura de Bromocresol. Los microorganismos LD-
negativos, pero fermentadores de la glucosa, producen un viraje al amarillo de la totalidad
del medio de cultivo (Medios de diagnóstico microbiológico, 2021). Para E.coli, la
descarboxilación de lisina es positiva y tiene una producción de SH2 negativa (Chinen,
2022). Sin embargo, la prueba no fue positiva al momento de realizarla, esto pudo deberse a
un error en la preparación de la prueba, error en la inoculación o un problema con la cepa
escogida (imagen 15). K. pneumoniae suele tener un pico/fondo (color violeta) alcalino
(imagen 13), lo que indica que la descarboxilación de lisina es positiva en la prueba
(Medios de diagnóstico microbiológico, 2021). En el caso de S. marcescens, el resultado de
la descarboxilación de la lisina fue positivo (Valle, 2018), con un pico alcalino (imagen 14).
SIM
Mediante esta prueba se detecta la producción de indol en un cultivo bacteriano. Dicha
sintesis se debe a la degradación del aminoácido triptófano mediante el enzima triptofanasa
(Fernández et al., 2010). Las bacterias reductoras de sulfato producen sulfhídrico el cual
reacciona con el amonio ferroso y se produce un sulfato ferroso (H2S) que se forma como
un precipitado oscuro a lo largo de la línea de inoculación. La movilidad es visible, ya que
es un medio semisólido y siendo positivo, el crecimiento se ve por fuera de la línea de
siembra, mostrándose como una ligera turbidez alrededor del canal de siembra. La no
movilidad se caracteriza por el crecimiento exclusivamente a lo largo de dicho canal
(Medios de diagnóstico microbiológico, 2021). Para la E.coli la prueba de SIM fue SH2
negativo, indol positivo, movilidad positiva (imagen 10), ya que esta es un bacilo Gram
negativo, anaerobio facultativo, móvil con flagelos perítricos (Chinen, 2022). Para la S.
marcescens, la prueba de SIM dio negativa para H2S, indol negativo y movilidad positiva
(Chavarría, 2018) como se puede observar en (imagen 12); K. pneumoniae todo negativo
(Britania, 2021) como se ilustra en la imagen 11; por lo tanto, se puede afirmar que los
resultados obtenidos son acordes a la literatura científica.
UREASA
Esta prueba determina la capacidad de un organismo de desdoblar la urea formando dos
moléculas de amoniaco por acción del enzima ureasa. Esta actividad enzimática es
característica de todas las especies de Proteus y se usa sobre todo para diferenciar este
género de otras enterobacterias que dan negativo o positivo retardado (Fernández et al.,
2010). Los microorganismos que hidrolizan la urea provocan que el medio de cultivo se
torne de color rosado-rojizo y los microorganismos que no hidrolizan la urea generan una
coloración amarillenta (Britania, 2021). De acuerdo a los resultados obtenidos dedujo que
las tres especies bacterianas no son productoras de ureasa, pues los medios no presentaron
variaciones con respecto a su coloración. Sin embargo, autores que realizaron la misma

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prueba, como Reyna (2018) y Britania (2021), obtuvieron que el medio donde se cultivó S.
marcescens se tornó de color rosado, indicando así, que la bacteria es capaz de producir
ureasa. Hipotéticamente, se piensa que pudo haber ocurrido una confusión a la hora de
tomar las colonias de las placas de agar para realizar la siembra; es posible que se haya
tomado una placa con colonias de alguna de las otras dos bacterias que sí arrojan un
resultado negativo al no generar cambios en el medio.
este quedo de color rojizo (imagen 18) esto pudo haber ocurrido por contaminación en el
asa, lo que hizo que al inocular se contaminara el medio y reaccionara de esta manera. Para
la Klebsiella el resultado fue positivo (Reyna, 2018) (Britania, 2021), es decir que el color
del caldo es de color rojizo (imagen19). Refiriéndonos a la Serratia esta obtuvo un
resultado positivo (variable) (Valle, 2018).
AGAR MACCONKEY
El agar MacConkey es un medio sólido que permite el crecimiento de bacilos
gramnegativos fermentadores y no fermentadores de lactosa. Los primeros adoptan una
coloración rosada que la diferencia de los segundos. Los medios diferenciales, además,
pueden poner de manifiesto mezclas y contaminaciones en los cultivos (Fernández et al.,
2010). Los microrganismos fermentadores de lactosa generan colonias rosadas-rojizas; las
de los microorganismos que no fermentan lactosa son incoloras, por lo tanto, tiene el color
del medio (Britania, 2021). Las colonias de E.coli tuvieron un crecimiento satisfactorio, dio
positiva para ser fermentadora de lactosa, por lo tanto, las colonias mostraron una
coloración rojiza; las colonias de K. pneumoniae tuvieron de igual manera un crecimiento
satisfactorio, la especie es positiva para fermentar lactosa, de tal manera sus colonias son de
color rojizo (Britania, 2021). Por su parte, S. marcescens forma colonias lactosa negativa en
el agar McConkey (Duarte et al., 2001), por ende, el medio se torna de color amarillo,
como se puede observar en la imagen 4.
AGAR MANITOL SALADO
Es selectivo para bacterias del género Staphylococcus y diferencial para S. aureus. En este
medio, la bacteria fermenta el manitol y sus colonias se muestran de color amarillo sobre el
agar como resultado de la acidificación del medio (Fernández et al., 2010), como se puede
ver en (imagen 1).
CATALASA
La catalasa es un enzima que se encuentra presente en la mayoría de los microorganismos
que poseen citocromos. Las bacterias que sintetizan catalasa hidrolizan el peróxido de
hidrógeno en agua y oxígeno gaseoso que se libera en forma de burbujas. (Fernández et al.,
2010). En la prueba, se generaron múltiples burbujas al mezclar peróxido de hidrogeno con
colonias de S. aureus (ULPGC, 2005); hecho que terceros también han registrado al
momento de realizar la prueba.
OXIDASA

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Esta prueba sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reacción de la

oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromooxidasa que activa la oxidación del
citocromo, el cual es reducido por el oxígeno molecular produciéndose agua o peróxido de
hidrógeno según la especie bacteriana. Asimismo, la presencia de oxidasa va ligada a la
producción de catalasa, ya que esta degrada el peróxido de hidrógeno que se produce como
consecuencia de la reducción del oxígeno y cuya acumulación es tóxica (Fernández et al.,
2010).

CONCLUSIÓN
La correcta aplicación de diversas pruebas bioquímicas permitió la identificación y
caracterización de microorganismos. Además, mediante el conocimiento y el uso de
distintos tipos de claves diagnósticas, se estableció una relación directa entre la actividad
metabólica de los microorganismos, los sustratos utilizados y los cambios observados en las
pruebas bioquímicas; esto ayudo a identificar la aparición de diferentes metabolitos en los
microorganismos, lo que proporciona información valiosa sobre su fisiología y
comportamiento en diferentes condiciones ambientales.

REFERENCIAS

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