UNIVERSIDAD CIENTIFICA DEL SUR
FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD
PRACTICA DE LABORATORIO
CURSO: Bioquímica Práctica SECCIÓN: 3T1
DOCENTE: Salazar García, Yojani Bereniz
INFORME DE PRACTICA
PRACTICA N°: 2 MESA N°: 5
TEMA: Determinación De Proteínas Totales Y Fraccionadas
INTEGRANTES
AGUILAR GOMEZ, Daniel Luis - 100126321@[Link] - 100%
AGUILAR GOMEZ, Diego Antonio - 100126323@[Link] - 100%
CAMACHO CARHUAPUMA, Darleny Yovanna - 100042545@[Link] - 100%
GRANADOS ALCA, Liz Andrea - 100088030@[Link] - 100%
HORARIO DE PRÁCTICA
FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 11 de abril de 2024
FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: 15 de abril de 2024
LIMA – PERÚ
INTRODUCCIÓN
La determinación de proteínas plasmáticas es un aspecto fundamental en el análisis
clínico y de investigación biomédica, proporcionando información valiosa sobre el
estado de salud y la función fisiológica de un individuo. Las proteínas plasmáticas
desempeñan roles cruciales en el transporte de nutrientes, la defensa inmunológica, la
coagulación sanguínea, entre otras funciones vitales. Por lo tanto, su evaluación precisa
es esencial para el diagnóstico y seguimiento de diversas enfermedades, incluyendo
trastornos renales, hepáticos, inmunológicos y nutricionales.
Los métodos para la determinación de proteínas plasmáticas han evolucionado
considerablemente a lo largo del tiempo, desde técnicas tradicionales como la
espectroscopia hasta enfoques más avanzados como la electroforesis y la
cromatografía líquida de alta resolución. Estos métodos ofrecen una amplia gama de
sensibilidad y especificidad, lo que permite la detección precisa de diversas proteínas
plasmáticas en concentraciones variables.
Este trabajo pretende determinarlas mediante el uso del espectrofotómetro, aplicando
cálculos e identificando sus variaciones.
OBJETIVOS
Determinar la concentración en suero de proteínas totales y fraccionadas.
Interpretar los resultados obtenidos en la determinación de proteínas, albúminas
y globulinas de acuerdo con los valores de referencias.
MATERIALES
Gradilla Micropipeta
Espectrofotómetro Puntas descartables para micropipetas
Cubetas Tubos de ensayo
Reactivo Biuret Reactivo BCG
Estándar Albumina Estándar Proteína
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Determinación de Proteína. La determinación de las proteínas totales se realiza
utilizando iones cúpricos que en medio alcalino reacciona con las proteínas
formando compuestos de coordinación de color violeta, cuyo pico de máxima
absorción es de 540 nm y su intensidad es proporciona la concentración de
proteínas.
Con estándar de proteína:
Añadir 0.02 ml de Proteína (Biuret) +
0.001 ml de estándar de proteína.
*Incubar durante 5 min a
temperatura ambiente*
Con Muestra Problema (MP) de proteína:
Añadir 0.02 de Proteína (Biuret) +
0.001 ml de MP de proteína
*Incubar durante 5 min a
temperatura ambiente*
RESULTADOS
Los 4 tubos de ensayo se llevan al espectrofotómetro:
Determinación de proteína: λ=540
Proteína + estándar Proteína + MP
Longitud de onda (nm) 540 540
Lectura (abs) 1,361 2,746
2. Determinación de Albumina. La albúmina reacciona con el Bromo
Cresolftaleína a pH 3.8 formando un compuesto coloreado que absorbe a 625
nm.
Con estándar de albumina:
Añadir 0.02 de Albumina + 0.001 ml
de estándar de albumina.
*Incubar durante 3 min a
temperatura ambiente*
Con Muestra Problema (MP) de albumina:
Añadir 0.02 de Albumina + 0.001 ml
de MP de albumina.
*Incubar durante 3 min a
temperatura ambiente*
RESULTADOS
Los 4 tubos de ensayo se llevan al espectrofotómetro:
Determinación de Albúmina: λ=620
Albúmina + estándar Albúmina + MP
Longitud de onda (nm) 620 620
Lectura (abs) 1,462 2,853
Cálculos:
DISCUSIÓN
En el primer ensayo de determinación de proteínas séricas totales, se sabe que el
Intervalo de referencia de las proteínas totales séricas es entre 6.0 - 8.3 g/dL. En la parte
experimental observamos que nos da como resultado 6,445 g/dL, lo que nos indica que
se encuentra en el rango normal. Estos exámenes a menudo se hacen para diagnosticar
las proteínas séricas totales pueden variar debido a diferentes condiciones médicas. Por
ejemplo, niveles bajos de proteínas séricas totales pueden indicar desnutrición,
enfermedades hepáticas, renales o intestinales, mientras que niveles elevados pueden
ser indicativos de inflamación, infección, mieloma múltiple, entre otras condiciones. los
resultados de la determinación de proteínas séricas totales se interpretan en conjunto
con otros hallazgos clínicos y pruebas diagnósticas para llegar a un diagnóstico preciso
i se sospecha una enfermedad hepática, se puede comparar el nivel de albúmina (una
proteína producida principalmente por el hígado) con el de las globulinas (proteínas
producidas por el hígado y el sistema inmunológico). Aunque la determinación de
proteínas séricas totales es una herramienta útil en el diagnóstico médico, no
proporciona información específica sobre la causa subyacente de los cambios en los
niveles de proteínas. Se requiere una evaluación adicional para determinar la causa
exacta de cualquier anomalía observada en los niveles de proteínas séricas totales.
(Martínez Martin et al., 2010)
En el segundo ensayo en el cual se determinó la concentración en suero de la albúmina,
se logró observar en los valores obtenidos, que la persona padece de una
hipoalbuminemia, dado que la concentración normal de esta proteína va de 3,5 a 4,8
g/dL sin embargo en este caso el resultado obtenido fue de 3,126 g/dL, muy por debajo
de lo esperado. Esto se puede deber a algún tipo de patología la cual podría llegar a ser
una afección hepática, afecciones gastrointestinales, nefrosis, etc. La determinación de
albúmina en análisis médicos es una prueba comúnmente realizada para evaluar la
función hepática y el estado nutricional de un paciente. La albúmina es una proteína
producida por el hígado y es la proteína más abundante en el suero sanguíneo. Tiene
varias funciones importantes en el cuerpo, incluyendo el mantenimiento de la presión
oncótica del plasma, el transporte de sustancias como hormonas y nutrientes, y la
regulación del pH sanguíneo. (Arrieta et al., 2006)
En el caso de la globulina hay un valor por encima de lo normal (3,29 g/dL.), puesto que
el rango normal es de 2.0 a 3.5 g/dL. Las globulinas son un grupo de proteínas que se
encuentran en el suero sanguíneo y desempeñan varias funciones clave en el cuerpo
humano, como transportar nutrientes, hormonas y otras sustancias, así como ayudar en
la defensa inmunológica. como también la medición de las globulinas en los análisis de
sangre se realiza generalmente como parte de un perfil de proteínas séricas o un perfil
metabólico completo. Algunas afecciones relacionadas a niveles de globulina altos
pueden ser infecciones crónicas, enfermedades autoinmunes, cirrosis hepática,
mieloma múltiple, como también enfermedades del riñón, etc. (Cordero et al., 2008)
CONCLUSIONES
Se determinó que las proteínas séricas totales y fraccionada sirve para el
diagnóstico de distintas enfermedades que alteran las proteínas de la sangre,
orina o del líquido cefalorraquídeo.
Se determinó que hay proteínas, como la albumina y la globulina, que
desempeñan funciones vitales en el organismo. Su purificación, se puede llevar a
cabo mediante la utilización de una serie de técnicas de separación, tales como
el Salting-Out que es la técnica más común para precipitar proteínas y el método
de espectrofotometría usando el reactivo de Biuret con el cual se puede estimar
cuantitativamente las proteínas totales y albumina presentes en una muestra
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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marcadores de peso molecular. Bistua: Revista de la Facultad de Ciencias
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Irausquin, Belkis, & Molero, Gladys. (2006). Efecto del consumo de cultivo de
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15 de abril de 2024, de
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