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PCR: Reacción en Cadena de La Polimerasa Kari Mullis (Premio Nobel 1993)

La PCR es una técnica que permite amplificar segmentos de ADN. Utiliza la Taq polimerasa y ciclos repetidos de desnaturalización, apareamiento de primers y extensión para generar millones de copias de una secuencia de ADN. La PCR se usa para diagnóstico, filiación, medicina forense y más.

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PCR: Reacción en Cadena de La Polimerasa Kari Mullis (Premio Nobel 1993)

La PCR es una técnica que permite amplificar segmentos de ADN. Utiliza la Taq polimerasa y ciclos repetidos de desnaturalización, apareamiento de primers y extensión para generar millones de copias de una secuencia de ADN. La PCR se usa para diagnóstico, filiación, medicina forense y más.

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PCR: reacción en cadena de la

polimerasa

Kari Mullis (Premio Nobel 1993)


CICLO Nº 1
DNA doble cadena
Segmento de secuencia del genoma que

Primers de
DNA
se quiere amplificar

Taq DNA
polimerasa

dNTPs

Desnaturalización Apareamiento de los Extensión (síntesis de DNA)


(95ºC) primers (72ºC)
(60ºC)
CICLO Nº 2
Productos
del ciclo Nº1 Primers de
DNA

Taq DNA
polimerasa

dNTPs

Desnaturalización Apareamiento Extensión


(95ºC) de los primers (síntesis de DNA)
(60ºC) (72ºC)
Productos
CICLO Nº 3
del ciclo Nº2
Primers de
DNA

Apareamiento
de los primers
(60ºC)
Desnaturalización (95ºC)
Taq DNA
polimerasa
dNTPs

Extensión
(síntesis de DNA)
(72ºC)
Productos
del ciclo Nº3
CICLO Nº 4

Desnaturalización
Apareamiento
(95ºC)
de los primers
(60ºC)
CICLO
Nº 4
(cont.)

Taq DNA
Extensión
polimerasa
(síntesis de DNA)
dNTPs (72ºC)
CICLO Nº 5
Desnaturalización
(95ºC)
Apareamiento
de los primers
(60ºC)

Extensión
(síntesis de DNA)
(72ºC)

CICLO Nº 30
Producto de
PCR
Miles de millones de moléculas
de DNA de cadena doble, todas
con la misma secuencia, acotada
por los 2 primers
Termociclador o máquina de PCR, o "pecerrera"
¿Qué pasa cuando la muestra a
analizar no es DNA sino RNA?
RT-PCR = reverse transcriptase PCR
3' 5' RNA
5' 3'
Primer de Transcriptasa reversa: DNA
DNA polimerasa dependeinte de
RNA
3' 5' RNA
5' 3'
Primer de cDNA
DNA
Degradación del RNA molde

3' 5' RNA


5' 3'
Primer de
DNA
cDNA
Primer de Apareamiento del segundo
DNA primer
3' 5'
5' 3'
Primer de Taq-DNA polimerasa
DNA
3' 5'
5' 3'
PCR
ALGUNAS APLICACIONES DE LA PCR

- Diagnóstico de presencia de virus, bacterias, parásitos

- Diagnóstico de mutaciones que causan enfermedades hereditarias (pre-natal,


pre-sintomático, portadores)

- Filiación, paternidad

- Medicina forense, identificación de sospechosos de crímenes

- Determinación de contaminación de alimentos

- Determinación de predisposiciones genéticas a enfermedades que no lo son

-otras.

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