INTRODUCCION AL MEJORAMIENTO GENETICO
GUÍA DIDÁCTICA PARA CLASES TEÓRICAS Clase 5
Mutaciones cromosómicas– Poliploides aplicados a la MG
En la clase anterior hemos iniciado el análisis de fuentes de variabilidad con algunas consideraciones
sobre las denominadas mutaciones génicas, que implican cambios en la secuencia de bases del ADN,
cuyo origen puede espontáneo o artificial y con numerosas aplicaciones en la MG. También aportan
a la variabilidad genética las denominadas mutaciones cromosómicas estructurales y numéricas.
Estos cambios cromosómicos han generado la evolución de muchas especies vegetales. Los cambios
cromosómicos estructurales implican cambios que afectan a sectores de cromosomas provocando
alteraciones en su estructura las cuales generan cambios en el ordenamiento de los genes. Ellos
pueden ser deficiencias o deleciones, duplicaciones, inversiones y translocaciones. Los cambios
cromosómicos numéricos suelen clasificarse en aquellos que afectan parcialmente a los genomas o
series de cromosomas (aneuploides) y aquellos que afectan a genomas completos (euploides). De
ellos, los más involucrados en la evolución de las plantas y el MG vegetal son los euploides.
Conceptos de citogenética:
El número básico de cromosomas (x) es el n° de cromosomas de 1 genoma o dotación básica de
cromosomas. Los euploides son organismos que poseen múltiplos del n° básico de cromosomas. Así,
según el n° de genomas presente en las células somáticas los organismos se clasifican en: diploides
(2x); triploides (3x); tetraploides (4x); pentaploides (5x); hexaploides (6x) etc. Los organismos que
presentan más de 2 genomas en sus células somáticas son poliploides. Además, considerando el
n°cromosómico gamético (n) y el n°cromosómico somático (2n), la fórmula cromosómica de un
organismo diploide es (2n=2x; n = x) o de un tetraploide (2n=4x; n = 2x). En la mayoría de las plantas
y animales que se han estudiado, el n° gamético y básico coinciden (x=n) siendo por lo tanto (2n=2x)
o sea, son diploides. En algunas plantas como el trigo pan (Triticum aestivum) es (2n=6x=42), por lo
tanto, es un hexaploide cuyo n° básico es (x=7) y su n° gamético será (n=3x=21) Monoploides. Son
haploides de un diploide (2n=x). En la naturaleza se originan con muy baja frecuencia por
alteraciones en la meiosis. Artificialmente se los puede obtener mediante “cultivo de anteras”. Son
altamente infértiles debido a que la meiosis es totalmente irregular por la ausencia de cromosomas
homólogos. Si se duplica su n° cromosómico pasan a ser organismos diploides con unas meiosis
regular y totalmente fértiles. Ej mitosis de un monoploide normal y con duplicación cromosómica:
Aplicaciones principales de los monoploides en MG:
-Obtención de líneas puras en 1 sola generación sin recurrir a la autofecundación. Si se realiza un
cruzamiento entre parentales elegidos por sus caracteres complementarios de interés, se obtiene
un híbrido que combina las mejores características de ambos parentales. Mediante la aplicación de
la técnica de cultivo de anteras, que implica lograr la germinación de los granos de polen, se
obtienen plantitas monoploides. Estos monoploides presentan diferentes combinaciones génicas
que son producto de la segregación gamética (granos de polen) del híbrido. Se cultivan las plantas
monoploides obtenidas y se identifican aquellas que presentan combinaciones génicas favorables.
Como ya sabemos, los monoploides son estériles. Luego, se duplica el n° cromosómico mediante la
aplicación de colchicina y así se obtiene un diploide que constituye una línea pura perfecta (100 %
de homocigosis), perfectamente fértil y en 1 sola generación. Recordemos que como planteamos
en la clase 3, a partir de una F1 (híbrido/heterocigota) necesitamos al menos 4 generaciones de
autofecundación (S4) para que la proporción de homocigotas supere el 90%.
-También los monoploides son utilizados en los procesos de mutagénesis artificial para facilitar las
aplicaciones de mutantes beneficiosos. Así, se obtienen monoploides de interés, se aislan y se
elimina la pared celular de sus células, se tratan con un agente mutagénico, se siembran en un medio
selectivo (ej. un herbicida). A partir de las células sobrevientes (que son las resistentes), se
regeneran por cultivo in vitro plantas que son monoploides. Finalmente, se duplica el n°
cromosómico con colchicina y se obtiene una LP resistente al agente selector (herbicida).
Haploides: son organismos cuyo n° cromosómico somático coincide con el n°cromosómico gamético
(2n= n). Un haploide de un organismo diploide es un monoploide (tiene un solo genoma en sus
células somáticas, (2n=n=x), mientras que los haploides de los poliploides (2n=n) son los
polihaploides. Los haploides pueden aparecer espontáneamente o se pueden producir
artificialmente mediante la técnica in vitro “cultivo de anteras”. La duplicación cromosómica de los
haploides origina “doble haploides” con aplicación en MG (ver más adelante el método de obtención
de “doble haploides”.
Autopoliploides: poliploides cuyos genomas tienen su origen en una misma especie.
Alopoliploides: poliploides cuyos genomas tienen su origen en distintas especies.
Triploides: generalmente son autopoliploides y se originan del cruzamiento entre individuos 2n=4x
(tetraploide) y 2n=2x (diploide) de la misma especie. Gametas 2x y x se unen para dar individuos 3x
(triploides). Los triploides presentan muy elevada esterilidad debido a anormalidades en el
apareamiento y la disyunción de cromosomas homólogos durante la meiosis, lo cual produce una
segregación gamética desequilibrada. La probabilidad de que un triploide forme gametas
equilibradas o fértiles (2n o n) es < a medida que es > el n° de cromosomas del genoma. Esta
probabilidad se calcula como (1/2) x-1 siendo x el n° de cromosomas del genoma. Una aplicación
práctica de esta situación de alta esterilidad de los triploides es la producción de frutos sin semillas
como en las sandías y los bananos.
Los triploides son estériles: El apareamiento de cromosomas homólogos en un triploide presenta
dos posibilidades durante la 1ª división meiótica: trivalente o bivalente + univalente a nivel de cada
cromosoma homólogo. Ambas generan una segregación cromosómica desequilibrada a nivel del
genoma completo, originando gametas no viables.
Fuente: A.J.F. Griffiths et al.
Como ejemplos de triploides cuya esterilidad presenta una aplicación práctica se pueden mencionar
los plátanos y algunas variedades de sandías sin semillas.
Autotetraploides: Se producen naturalmente por duplicación accidental (formación de gametas no
reducidas) en un organismo diploide (2n=2x) o también pueden ser producidos artificialmente. Para
la producción artificial de poliploides el agente químico más utilizado es la colchicina. Se aplica en
dosis apropiadas, que deben ser ajustadas para c/especie, en las zonas meristemáticas (yemas o
ápices de raíces). Este agente poliploidizante afecta la normal división mitótica de las células. Hay
separación de cromátidas hermanas pero sin migración a los polos. Esto ocurre como consecuencia
de que la colchicina produce un efecto inhibitorio de la formación o ensamblado de los microtúbulos
de las fibras del huso o aparato mitótico. En ausencia del aparato mitótico ocurre duplicación
cromosómica sin división celular y, como consecuencia, la célula madre queda con los cromosomas
duplicados y pasa a ser tetraploide (2n=4x). A partir de este cambio en el n° cromosómico esta célula
tendrá sucesivas mitosis normales originando un tejido tetraploide del cual se podrá regenerar un
individuo 2n=4x. La colchicina normalmente se aplica en tejidos meristemáticos como las yemas
donde se podrán formar quimeras que constituyen un mosaico de tejidos diploides y tetraploides
que originarán ramas 2x y 4x, respectivamente. Luego se aplican técnicas de multiplicación agámica
a partir de las ramas 4x que por ej. se colocan en condiciones de enraizamiento para obtener varias
repeticiones de la planta tetraploide buscada. También se podría multiplicar mediante cultivo in
vitro
Comparativamente con los diploides los autopoliploides presentan mayor tamaño en sus órganos
(flores, hojas, frutos) y células. Es característico que los estomas y granos de polen sean de mayor
tamaño. Otra importante diferencia es que los autopoliploides son menos fértiles que los diploides
Posibilidades de apareamiento cromosómico durante la meiosis de un autotetraploide
¿Por qué los autopoliploides tienen la fertilidad muy reducida?
Posibilidades de apareamiento cromosómico durante la meiosis de un autotetraploide:
- Dos bivalentes: originan gametas funcionales
- Un cuatrivalente: origina gametas funcionales
- Un univalente + un trivalente: originan gametas no funcionales
Las gametas serán realmente funcionales cuando se formen dos bivalentes o cuatrivalentes en todo
el genoma. Esto explica la baja fertilidad de los autotetraploides
Fuente: A.J.F.
Griffiths et al.
Un ejemplo de halopoliploide natural es el Triticum aestivum (trigo pan) El siguiente cuadro muestra
un diagrama propuesto por Griffiths et all que intenta explicar el origen y evolución del Triticum
aestivum.
Fuente: A.J.F. Griffiths et al.
Alopoliploidía artificial.
El ejemplo del Triticale : es un cereal forrajero, primer alopoliploide artificial creado por el
hombre, producto del cruzamiento artificial entre el trigo y el centeno. El Triticale combina el
potencial de rendimiento y buena calidad del trigo con la tolerancia a enfermedades y rusticidad del
centeno. N° cromosómico y fórmulas genómicas para los triticales hexaploide y octoploide y sus
especies parentales
Especies Núm. Genomas Nombres comunes
Cromosómico (2n)
Secale cereale 14 RR Centeno
Triticum turgidum 28 AABB Trigo duro
Triticum aestivum 42 AABBDD Trigo pan
Triticocereale 42 AABBRR Triticale
(hexaploide)
Triticocereale 56 AABBDDRR Triticale
(octoploide)
Técnicas biotecnológicas aplicadas a la poliploidía inducida
Las mismas ya fueron estudiadas en Genética y Fisiología Vegetal. Se destacan:
➢ Rescate de embriones, cultivo in vitro y duplicación cromosómica
➢ Germinación de polen, cultivo in vitro, obtención de monoploides, duplicación cromosómica,
obtención de diploides LP
➢ Hibridación somática o hibridación de protoplastos
Rescate de embriones: si el embrión no desarrolla normalmente en la planta se lo extrae
tempranamente, se lo cultiva in vitro hasta completar la madurez y luego se lo multiplica in vitro.
Para esto se aplican protocolos de laboratorio especialmente diseñados y ajustados para cada
especie.
Multiplicación in vitro del embrión desarrollado normalmente en la planta: Si el embrión
desarrolla normalmente en la planta pero la semilla híbrida no germina, se puede utilizar el cultivo
de tejidos y la duplicación cromosómica con colchicina para obtener una planta híbrida fértil. Por
ej.:
Fuente: A.J.F. Griffiths et al.
Obtención de una planta monoploide mediante cultivo de anteras
Hibridación somática o hibridación de protoplastos
La hibridación de células somáticas implica la fusión fusión de protoplastos vegetales (células
desprovistas de paredes celulares) de diferentes especies y la posterior regeneración de plantas
híbridas a partir de los protoplastos fusionados. El uso de este método en MG está recomendado
para obtener híbridos en los casos en que no es posible obtener semillas por hibridación sexual .
Fuente: J.M. Poehlman y D.A.Sleper A: células de las especies parentales; B: protoplastos
(eliminación de pared celular); C: suspensión en PEG; D: protoplastos híbridos; E: planta híbrida
regenerada a partir de protoplastos híbridos.
Bibliografía
1- Cubero, J.I. 2003. Introducción a la mejora genética vegetal. 2da edición. Ed. Ediciones Mundi-
Prensa. Madrid, España. ISBN 84-8476-0995. 649 pp.
2- Griffiths A. J. F., J. H. Miller, D.T. Suzuki, R.C. Lewontin y W.M. Gelbart. 1998. Genética. 5ta
edición. Ed. McGraw-Hill / Interamericana de España, S.A. . Madrid, España. ISBN 84-486-0106-8
3- Harlan J. R. . 1992. Crops & Man. 2a edición. Ed. American Society of Agronomy, Inc., Crop
Science Society of America, Inc.. Wisconsin, USA. ISBN 0-89118-107-5. 284 pp.
4- Lacadena J.R. 1999. Genética General. ConceptosFundamentales. Madrid. Editorial Síntesis S.A.
ISBN: 84-7738-645-5. 623 pp.
5- Sleper, D.A. y J.M. Pohelman. 2006. Breeding field crops. 5ta edición. Ed. Blackwell Publishing.
Iowa, USA. ISBN 978-0-8138-2428. 424 pp.
6- Strickberger, M.W..1993. Evolución. Ediciones Omega S.A. ISBN:84-282-0905-7. 573 pp.
