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Práctica de Microbiología: Cultivos y Esterilización

Este informe describe una práctica de laboratorio microbiológica donde se observaron diferentes tipos de bacterias y se cultivaron en medios de cultivo. Se aprendió sobre la preparación de medios, técnicas de esterilización y siembra diferencial y masiva de muestras.

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Práctica de Microbiología: Cultivos y Esterilización

Este informe describe una práctica de laboratorio microbiológica donde se observaron diferentes tipos de bacterias y se cultivaron en medios de cultivo. Se aprendió sobre la preparación de medios, técnicas de esterilización y siembra diferencial y masiva de muestras.

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Informe de laboratorio microbiología

Nombre de la practica: microscopia, preparación de medios de cultivo & diluciones


Informe #1: fecha de la practica: 08/09/2022 fecha de entrega: 21/09/2022
Autores: Kerly Fernanda López Loaiza, Karen Dayana Gómez paredes & Jefferson gilberto Sogamoso

Resumen

En el siguiente informe se describe la experiencia adquirida en esta práctica. Se pudieron

observar diferentes tipos de bacterias microbianas. Al igual que los humanos, los

microorganismos también necesitan proporcionar nutrientes de acuerdo con sus necesidades en el

proceso de su ciclo de vida, los cuales pueden ser proporcionados por su entorno, al que se puede

llamar medio de cultivo. En la práctica microbiológica, el objetivo es cultivar microorganismos

para estudiar sus propiedades inherentes, el desarrollo y la capacidad reproductiva para formar

colonias y estudiarlas de una manera aislada ya que la apariencia de las colonias ayuda a

distinguir las diferentes especies microbianas. La comprensión de los procesos involucrados en

esta práctica es un componente esencial, que por supuesto no es lo mismo que las precauciones

que se toman en los laboratorios de química orgánica e inorgánica. En este tipo de práctica, es

necesario esterilizar el ambiente y los objetos, haciendo que el ambiente esté libre de

bacterias o microorganismos, ya que el desarrollo de la actividad se basa en la inoculación de un

medio rico en cultivo con organismos específicos. La conceptualización se desarrolló en el

contexto de un laboratorio de microbiología como parte de los objetivos a alcanzar en

la práctica, los principios generales de preparación de materiales, medios y técnicas

de esterilización.

Por otro lado, la bioseguridad es un enfoque estratégico e integrado que incluye políticas y un
marco regulatorio (incluyendo herramientas y actividades) para el análisis y gestión de

riesgos relacionados con la vida y la salud humana, animal y vegetal y los riesgos relacionados

con el medio ambiente. Que La bioseguridad incluye la inocuidad de los alimentos, la

introducción de zoonosis, plagas y enfermedades. animales y plantas, la introducción

y distribución de organismos vivos modificados (OVM) y sus productos (tales como organismos

modificados genéticamente u OMG) y su importación y manipulación. Por lo tanto,

la bioseguridad es un concepto global de importancia inmediata para la humanidad.

Sostenibilidad agrícola y aspectos generales de la salud pública y la protección del medio

ambiente incluida la biodiversidad.

Palabras claves: Medios de cultivo, esterilización, microbiología, bioseguridad

Introducción

El medio de cultivo es una mezcla de nutrientes, en suficiente concentración y en niveles más

bajos las condiciones físicas óptimas aseguran el crecimiento microbiano. Estos medios son

esenciales en laboratorios microbiológicos para controlar su producción, almacenamiento y uso

para garantizar su precisión, confiabilidad y reproducibilidad de los

resultados obtenidos. En los laboratorios de microbiología se utilizan diferentes tipos de medios

de cultivo, los cuales se pueden preparar en forma líquida o sólida. También es un material

alimenticio que una vez de haber sido preparado puede ser contaminado y procede a incubarse

En condiciones que favorezcan el crecimiento microbiano.

En 1881, Koch inventó un método para cultivar bacterias en un medio sólido hecho de gelatina e

introdujo el método de la placa para asegurar un cultivo puro. Inoculó una mezcla de bacterias en

gelatina, fundió el medio calentándolo y vertió el inóculo y endurecieron en recipientes de vidrio


esterilizados y fríos. Las bacterias quedan atrapadas allí cuando el medio se solidifica y se

multiplica en un grupo llamado colonia macroscópica, que debe estar limpia, es decir,

contiene un solo tipo de bacteria. Para asegurar un cultivo puro, es necesario muestrear las

colonias con un hilo estéril y transferirlas a un tubo con medio estéril fresco. Este método

de purificación es esencialmente el que se usa hoy en día, excepto que se usa agar en lugar

de gelatina. Para el cultivo en placas, utilizamos pequeñas cajas de vidrio llamadas

cápsulas o placas de Petri. En 1882, uno de los mayores logros de la

microbiología relacionada con los medios: el médico alemán Walter Hesse introdujo el agar

como agente solidificante.

Objetivos

 reconocer el laboratorio de microbiología como un espacio de trabajo único que puede

presentar riesgos de adquirir enfermedades.

 Identificar que procedimientos permiten proteger al medio ambiente externo de la

exposición de materiales infecciosos con los que se trabaja en el laboratorio

 Aprender a realizar una siembra diferencial y masiva acatando cada uno de los pasos.

 Observar algunas de las reacciones que producen los microorganismos cuando se

cultivan.

 Conocer algunos medios de cultivo deshidratados.

Marco teórico

Muchos microorganismos son inofensivos y juegan un papel vital en la biosfera, desde la fijación
de nitrógeno para la absorción de plantas hasta la descomposición y conversión de materia

orgánica para que sea absorbida nuevamente por la naturaleza; algunos microorganismos

son patógenos por la razón de que su investigación es muy importante. La supervivencia

y el crecimiento continuos de los microorganismos depende de un suministro adecuado de

nutrientes y de un entorno propicio para su crecimiento. Un medio de cultivo es una

solución que contiene los nutrientes necesarios para que los microorganismos crezcan en

condiciones adecuadas de pH y temperatura.

 Disponibilidad de nutrientes adecuados

Un medio adecuado para estudios microbianos debe contener al menos carbono, nitrógeno,

azufre, fósforo y sales inorgánicas. En algunos casos se requieren ciertas vitaminas y otras

sustancias promotoras del crecimiento. Siempre debe haber las sustancias adecuadas para actuar

como donantes o colectores de electrones para que se produzcan las reacciones químicas. Todas

estas sustancias estaban disponibles originalmente en forma de infusiones de carne, extractos de

carne o extractos de levadura.

 Esterilidad del medio

Todos los medios de cultivo deben ser completamente estériles para evitar la aparición de formas

de vida que puedan alterar, oscurecer o incluso inhibir el crecimiento microbiano normal de las

muestras a inocular en este medio. El sistema clásico para esterilizar cultivos es la

autoclave (utilizando vapor a presión como desinfectante).

 Propiedades de los medios de cultivo

 Humedad

Necesario para el crecimiento microbiano, su deficiencia puede conducir a la muerte de

los microbios.
 Fertilidad

Se refiere a los elementos o


compuestos básicos que
permiten el

Se refiere a los elementos o


compuestos básicos que
permiten el
Se refiere a los elementos o compuestos básicos que permiten el crecimiento bacteriano.

 pH

La concentración de iones de hidrógeno es importante para el crecimiento microbiano. La

mayoría crece mejor en suelos con pH neutro, aunque algunos requieren suelos más o menos

ácidos. No hay que olvidar que la presencia de ácidos o bases en cantidades no impide el

crecimiento de bacterias, sin embargo, puede inhibirlas o incluso alterar los procesos metabólicos

normales.

 Transparencia

 Permite la observación bacteriológica, evidenciar morfología y su crecimiento

Metodología

para dar inicio a la práctica tuvimos en cuentas las normas de bioseguridad y el manejo de cada

uno de los instrumentos del laboratorio, desinfectamos el lugar de trabajo en el cual colocamos
un papel en el área desinfectada para luego sobre el poner el mechero y encenderlo con una llama

azul después de realizar lo más importante dimos inicio a la técnica de aislamiento que es reducir

su concentración para poder observar colonias individuales y a partir de ellas realizar pruebas que

permitan la identificación taxonómica, de igual manera dimos inicio a la siembra masiva la cual

consistía que la muestra se distribuyera uniformemente sobre todo el medio de cultivo para luego

ser observada y finalizamos con la inoculación es el proceso de agregar microorganismos a un

medio de cultivo con el ánimo de que estos crezcan en él y puedan ser estudiados.

Discusión de resultados

La muestra de cultivo que seleccionamos fue de suelo, de los muchos microorganismos

infecciosos que se encuentran en el medio ambiente, y en este se pueden hallar bacterias, Los

microorganismos del suelo son entidades que influencian varios aspectos del suelo y

cada uno desempeña diferentes actividades.

resultados

 Masiva

Descripción

se observó en la siembra másica las siguientes características: un circular de color naranja con

una altura elevada, una filamentosa color amarillo con una altura convexa y doce machas de

color blancas con alturas elevadas, una umbilicada y una circular color blanca encendido, otra

circular color verde fosforescente cuatro onduladas de color blancas con una altura convexa y

sus bordes de ondulados.


Diferencial
Descripción

En la siembra deferencial se observo de color café claro con una alrura convenxa con bordos

filamentosos.

Preguntas:

¿qué entiende por resiembra o pase bacteriano?

La resiembra es una técnica que permite la supervivencia de los cultivos en cortos periodos de

tiempo, por eso se reconoce como un método de conservación a corto plazo.

Y el pase bacteriano consiste en la separación de un determinado microorganismo del resto de

microorganismos que le acompañan.

¿cómo se regula el calor de la llama del mechero de bunsen? ¿Cuál es la llama ideal para

trabajar y por qué?

para regular la llama del mechero utilizamos un anillo perforado que nos permite regular la

entrada de aire, la cantidad de gas y por lo tanto de calor de la llama puede controlarse ajustando

el tamaño del orificio en la base del tubo. Si la llama es azul es la llama ideal por que indica que

la combustión de gas está haciendo nuestro artefacto es la correcta.

¿Cuál es la utilidad del asa recta y redonda?

Asa recta nos sirve para trasladar una sola colonia a medios de identificación, o subcultivos.

Y el asa redonda nos sirve para la siembra por estrías e inoculaciones en general.

¿qué características debe tener el vidrio utilizado para elaborar el material de

microbiología?

El vidrio de boro silicato es el más común para la fabricación de material de laboratorio, pues es

un vidrio que contiene óxidos de silicio y boro, cuyos componentes lo hacen mucho más

resistente al choque térmico, le añade mayor resistencia química, así como le da un bajo
coeficiente de dilatación.

¿Cuáles son los objetivos de bioseguridad?

El objetivo primordial de la bioseguridad consiste en prevenir, combatir y/o gestionar los riesgos

para la vida y la salud, cuando proceda, para un sector particular de la bioseguridad.

Contención

El término “contención” se utiliza para describir los métodos que hacen segura la manipulación

de los productos en el laboratorio. Su objetivo es reducir al mínimo la exposición del personal y

del entorno a agentes potencialmente patógenos.

Contención primaria

Comprende las mediadas y equipos de seguridad que permiten al personal potenciar la práctica de

prevención de riesgos, complementando las prácticas y técnicas de laboratorio.

Contención segundaria

Comprende el diseño y la construcción de las instalaciones del laboratorio, contribuye a la

protección de quienes trabajan en el laboratorio y protegen a las personas o animales de

la comunidad de agentes infecciosos que pueden ser liberados accidentalmente del laboratorio.

¿Como se debe descartar el material contaminado en el laboratorio?

deberán trasladarse al área de esterilización, lavado y preparación en carros diseñados para

transportar material.

Conclusiones

 Se empleo las técnicas adecuadas respetando los parámetros que se deben seguir

para obtener medios de cultivos en óptimas condiciones.


 Se observo que hay diferentes tipos de colonias

 En el ambiente hay muchos microorganismos que no podemos apreciar a simple

vista.

En general La práctica no enseña que la vida en nuestro planeta no existiría sin bacterias, las

cuales permiten muchas de las funciones esenciales de los ecosistemas.

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