Tema 01: NUTRICÓN MICROBIANA
Nutrición: Definición
• Nutrición es el proceso de absorción de los nutrientes para que la célula microbiana
lleve a cabo su metabolismo y su reproducción.
• La nutrición es el proceso por el cual los seres vivos toman del medio donde habitan,
los compuestos químicos que necesitan para llevar a cabo sus procesos energéticos
(reacciones de mantenimiento o catabolismo); y biosintéticos (reacciones plásticas o
anabolismo) que les permiten crecer y reproducirse.
Requerimientos Nutricionales
• Los requerimientos nutricionales de cada grupo microbiano están dados os por la
composición química de las células que los constituyen y por sus características
genéticas las que determinan sus propiedades fisiológicas y su capacidad para utilizar
y transformar los compuestos que se encuentran en el ambiente en que se desarrollan.
• En general los requerimientos nutricionales de los microorganismos reflejan el
ambiente natural en que viven;
• Este conocimiento y el uso de medios de cultivo de composición química definida
son de primordial importancia en el estudio de la nutrición microbiana cuyas
características varían ampliamente entre los microorganismos.
Los requerimientos químicos son diferentes en cada especie:
Unos pueden ser totalmente inorgánicos u orgánicos o la mezcla de ambos
Algunas tienen requerimientos nutricionales muy simples, obtienen su energía de
compuestos inorgánicos y utilizan CO, o carbonatos como fuente de carbono; otros
sus requerimientos son más complejos como compuestos orgánicos con diferentes
grados de complejidad (ejemplo aminoácidos, vitaminas etc.)
Fuente de Energía
Todos los organismos vivos requieren de una fuente de energía:
• Unos pueden utilizar la energía radiante y se denominan fotótrofos, como las
plantas, cianobacterias
• Otros incapaces de utilizar la energía radiante, obtienen la energía de las oxidaciones
de compuestos químicos, se llaman quimiótrofas, como los animales, bacterias
Nota: Entre las bacterias se dan ambos tipos nutritivos
EL AGUA
Las bacterias necesitan grandes cantidades de agua, salvo excepciones. Requieren cierto
grado de humedad para crecer. Y constituye un porcentaje elevado de la célula.
Función del agua es:
Transporte:
El medio universal donde ocurren las reacciones biológicas;
Un reactante en exceso (es decir, un producto resultante de algunas reacciones bioquímicas).
Las fuentes de agua pueden ser:
• Endógena: procedente de procesos de óxido-reducción;
• Exógena (la más importante): procedente del medio
EL Anhidrido Carbónico (CO₂)
Todos los organismos vivos requieren de carbono en forma de CO2, y algunos necesitan,
además de compuestos orgánicos de carbono como los azucares y otros hidratos de carbono.
Algunas bacterias pueden utilizar el CO, como única fuente de carbono, mientras que otras
requieren compuestos carbonados orgánicos complejos
• Ciertas bacterias pueden utilizar el CO2 como origen exclusivo de carbono (autótrofas) y
otras necesitan utilizar una forma orgánica de carbono (heterótrofas)
Otros, aunque no usan el CO, como fuente de C ni como aceptor de electrones, necesitan
pequeñas cantidades para las carboxilaciones en determinadas rutas anabólicas y catabólicas.
El origen del CO pueda ser:
Endógenos: procedente de descarboxilaciones que ocurren al degradar la fuente orgánica de
carbono;
Exógeno: el CO, de la atmósfera o disuelto en las soluciones acuosas.
De acuerdo con los requerimientos del microorganismo el carbono puede ser satisfecho:
• Simple compuesto de dos carbonos: acetato
• Moléculas más complejas: celulosa
Nota: Puede oxidar los monosacáridos (Glucosa) y polisacáridos complejos (dextrana,
pectina, celulosa)
Existen microorganismos genéticamente deficientes
Nitrógeno
• Concretamente, los elementos Nitrógeno (que requieren todos los seres vivos) pueden
ser captados por las bacterias de modos muy distintos, dependiendo de sus
capacidades biosintéticas.
• La fuente de nitrógeno, la obtienen a partir de aminoácidos o nitrógeno inorgánico en
en diferentes estados de oxidación incluyendo el nitrógeno molecular.
Las bacterias tienen la habilidad para utilizar las diferentes fuentes de nitrógeno:
• Nitrógeno atmosférico,
• Algunos lo toman de compuestos inorgánicos (amonio, nitratos) y otras lo derivan de
las proteínas o de todo compuesto orgánico nitrogenado que se encuentra
en la naturaleza
Azufre
Constituyente importante de los aminoácidos: cisteína y metionina. El azufre se encuentra en
la célula en estado reducido: el radical -SH interviene en determinados aminoácidos y en
coenzimas como la CoA.
La mayoría de las bacterias fotosintéticas y muchas heterótrofas asimilan estos elementos en
forma combinada inorgánica oxidada: como SO2. Este sulfato se activa con ATP, y luego se
reduce hasta sulfito y finalmente sulfhídrico, que ya tiene el estado de reducción adecuado
para la incorporación del azufre.
Muchas bacterias heterótrofas pueden usar alguna forma reducida:
• Azufre inorgánico: sulfuros (SH2-, SH-)
• Azufre orgánico: cisteína.
Fósforo
Suele requerirse en forma de fosfatos, sea orgánico o inorgánico. Las bacterias que
pueden usar los fosfatos orgánicos (merced a la posesión de fosfatasas) no dependen
absolutamente de ellos, ya que pueden recurrir igualmente a los fosfatos inorgánicos.
• Los fosfatos orgánicos son hidrolizados por fosfatasas extracelulares o (en las
Gramnegativas) periplásmicas ([Link], la fosfatasa alcalina).
• Importancia: Metabolismo de los ácidos nucleicos y de a molécula del ATP
• El fosforo inorgánico es el más usado como fuente para la célula, eventualmente los
fosfatos provienen de molécula de ATP
SALES MINERALES
Las sales minerales son la fuente de aniones y de cationes para la célula. Los
siguientes cationes, concretamente, se necesitan en cantidades relativamente grandes:
K+, Mg++, Ca++, Fe++.
Intervienen en el transporte activo.
- Mantienen el equilibrio coloidal en la célula
-Son constituyentes de los enzimas
-Mantienen el equilibrio ácido-básico
Nota: Aparte de estos iones que se requieren en cantidades relativamente grandes, las
bacterias necesitan minúsculas cantidades de otros elementos (oligoelementos), a los
que también se denomina micronutrientes o elementos traza: Mn++,
Co++, Zn, Mo, Ni
FACTORES DE CRECIMIENTO
Los factores de crecimiento son moléculas orgánicas específicas que, en muy
pequeña cantidad, algunas bacterias necesitan para crecer, Salvo excepciones no
tienen función plástica (no son sillates de macromoléculas) ni sirven corno fuente de
energía.
• Suelen ser coenzimas o sus precursores, vitaminas, que determinadas
bacterias no pueden fabricar por si mismas, al carecer de parte o toda una ruta
biosintética. Ejemplos, Brucella requieren como factores de crecimiento en
sus medios de cultivo la biotina, niacina, tiamina y ácido pantoténico.
Se dividen en 3 grupos:
• Vitaminas: compuestos de muchas enzimas (coenzimas)
• Aminoácidos
• Bases nitrogenadas: Purinas, pirimidinas
Estos factores de crecimiento pueden ser adicionados en los medios de cultivo en
cantidades mínimas. Los factores de crecimiento son sustancias que en mínima
proporción requieren los microrganismos para su crecimiento que no lo pueden
sintetizar.
Tipos De Nutrición
1. De acuerdo con su fuente de carbono (punto de vista biosintético), las bacterias
pueden ser:
• Autotróficas o Autótrofas: Fuente de carbono es el CO, (inorgánico) y
necesitan sustancias químicas inorgánicas. Ejm. Nitrosomonas
• Heterotrófica o heterótrofa: Fuente de carbono es orgánico, además necesitan
algunos factores de crecimiento. Los microrganismos unos son más exigentes
que otros
• Ejemplo: E. coli se desarrolla en sales inorgánicas y como fuente de carbono:
glucosa
• Ejm: Lactobacillus, Fuente de carbono: glucosa; necesitan de vitamina B
2. De acuerdo con su Fuente de energía:
Las bacterias pueden ser:
• Fotosintético o Fotótrofos: Fuente de energía luz, obtiene mediante un
pigmento: (bacteriofilas)
• Quimiosintéticos o Quimiótrafos Fuente de energía: sustancias químicas.
Ejemplo: Thiobacilles thioxidans
Pueden ser:
-Quimiolitotróficas, obtienen su energia como consecuencia del metabolismo
de sustancias inorgánicas sencillas SH, SO, NH, NO, Fe, etc.) Ejemplo:
Bacterias nitrificantes
-Quimiorganotróficas, obtienen su energia por metabolismo de sustancias
orgánicas (hidratos de carbono, hidrocarburos, lipidos, proteinas, alcoholes...)
Ejemplo: todas las bacterias heterótrofas
ASOCIACIONES MICROBIANAS EN ECOSISTEMAS
Asociaciones Microbianas
Los microorganismos de un ecosistema presentan asociaciones e interacciones:
• Entre microorganismos
• Entre microorganismos y organismos superiores
g
Una asociación se considera negativa cuando un organismo se beneficia a expensas del otro.
Esto puede incluir:
-Parasitismo, amensalismo y competencia
una asociación se considera positiva cuando ambos organismos se benefician de la
interacción. Esto se conoce como mutualismo
Interacciones Nutricionales entre microorganismos
• Simbiosis, Asociación de microrganismos en el cual ambos colaboran para poder
desarrollarse. Rhizobium
• Mutualismo, cuando ambas especies se benefician con la asociación y son incapaces
de sobrevivir separadamente. Liquenes, micorrizas
• Cooperación (sinergismo). Cooperación +/ (relación no obligada): Los dos
miembros acumulan beneficios reciprocos.
• Comensalismo, Es una relación en la cual dos especies viven juntas habitualmente y
una de ellas (llamada comensal) tiene beneficios de la asociación, mientras que la otra
no es perjudicada. Las bacterias heterotrofas producen iones amonio necesarios
para Nitrosomonas
• Sinergismo, cuando dos especie producen un cambio que ninguno de los dos
separadamente pueden realizar.
• Competencia, los organismos que se establecen el mismo nicho ecológico, necesitan
los mismos alimentos y condiciones ambientales, tienen gran influencia entre si. El
mejor adaptado predomina o elimina completamente a los otros.
• Amensalismo (Antagonismo), cuando una especie inhibe el crecimiento de otro.
Ejemplo: hongo Penicillium notatum produce penicilina (antibiótico), que inhibe el
crecimiento de las bacterias Gram (+). Parasitismo, un organismo vive a
expensas de otro.
MEDIOS DE CULTIVO
Introducción
• Para el estudio adecuado de los microorganismos es necesario cultivarlos en
condiciones de laboratorio.
• Para ello se ha podido desarrollar numerosos medios artificiales para su cultivo,
teniendo en cuenta Las necesidades nutritivas y las condiciones fisicas que necesitan
para su crecimiento.
DEFINICIONES
• Todo material en el cual los microorganismos encuentran alimento y en el que
pueden reproducirse es un medio de cultivo.
• Un medio de cultivo es una solución acuosa (bien como tal, o bien
incorporada a un coloide en estado de gel) en la que están presentes todas las
sustancias necesarias para el crecimiento de un(os) determinado(s)
microorganismo(s).
• Se llaman así a las distintas mezclas de sustancias nutritivas empleadas en el
laboratorio para el cultivo de microorganismos
• Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y
otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de
los microorganismos
En general:
Los medios de cultivos son sustratos o soluciones estériles de sustancias
nutritivas, que se emplean para el cultivo de microrganismos en el laboratorio.
Medio De Cultivo: Condiciones Generales
1. NUTRIENTES ADECUADOS y proporciones/ cantidades necesarias
2. PH ADECUADO, que facilite el crecimiento o cultivo de los
microorganismos. La mayoría de las bacterias crecen mejor en an medio con při
próximo a la neutralidad entre los límites de 6,5 - 7,4. Los medios de cultivo
deben tener una sustancia reguladores (tampón) para controlar el pH. Algunos
microorganismos prefieren medios ácidos o alcalinos, los hongos prefieren při
3. FACTORES DE CRECIMIENTO Todo medio de cultivo debe tener un
factur de crecimiento que puede añadirse al medio un material natural como
extracto animal o vegetal o microbiano. Entre los factores que se han descubierto
como factores esenciales se encuentran: biotina,
ácido lipoicz, acido pantoténico (son esenciales para organismos superiores
4. SER ESTERIL, estar esento de microorganismos contaminantes
5. MEDIO FRESCO, ya que se desecan y pierden humedad, concentrándose el
resto de los componentes.
Medio de Cultivo: Componentes
• AGUA
• PEPTONA, Proteina parcialmente digerida, Sirve como fuente de energia y de C
Constituye una fuente principal de nitrógeno orgánico; contiene también algunas
vitaminas y a veces carbohidratos.
• INFUSIONES Y EXTRACTOS. Contienen las sustancias solubles en agua de tejidos
animales (carbohidratos, compuestos orgánicos nitrogenados, vitaminas solubles en
agua y sales).
Caldo: tejidos+ agua: hervir liquido
Infusiones: "colado" del caldo liquido se deshidrata
Extractos es un concentrado de un caldo pasta o polvo.
se usan en medio de cultivo
Los más utilizados son el extracto de carne, de levadura y el de malta.
• AZUCARES, actúan como fuente de energia (cuando su proporción es de 1g/L) o
como sustrato de prueba (1-2%)
• SALES MINERALES, se distinguen 2 tipos atendiendo a la función que
desempeñan: -Sales para el mantenimiento de la presión asmótica (NaCl)
-Tampones: carbonatos y fosfatos (este ultimo mas eficaz)
• SUPLEMENTOS (Factores de crecimiento), compuestos orgánicos que el mo no
puede sintetizar a partir de fuentes de carbono sencillos, y debe ser administrado
como nutriente. Hay 3 clases: Vitaminas, aminoácidos y Bases nitrogenadas
(pirimidinas)
• INDICADORES DE PH, son sustancias que cambian de color cuando el medio
alcanza un valor determinado de pH. Los más utilizados son: Azul de timol, purpura
de bromocresol, rojo fenol, rojo neutro, etc.
• INDICADORES REDOX, son sustancias que cambian de color cuando se
producen este tipo de reacciones, ejmplo:azul de metileno(azul-incoloro),cloruro de
trifenil(incoloro-rojo).
Diseño de los medios de cultivo
Al diseñar un medio cultivo, no solo hay que tener en cuenta los nutrientes, sino también
las condiciones fisicas que permitan el crecimiento de los microorganismos.
• APORTE DE NUTRIENTES, la adición de una fuente especifica de carbono puede
ser efectivo como agente selectivo
• pH, un m.o puede alterar el při del medio como resultado de su metabolismo. Estos
cambios pueden prevenirse controlando el pit mediante sistemas tampón.
• Ajuste del pH, dependiendo a quienes se les quiere favorecer su crecimiento las
bacterias crecen en un rango de ph de 6,5 a 7,2, los hongos prefieren un pH entre 4 y
6
• NECESIDADES DE GAS, los gases principales que afectan el desarrollo microbiano
son el oxigena y el CO2
• Ajuste de la tensión del oxígeno, Incrementando o decreciendo la tensión del oxígeno
o CO2, es importante en la selección de anaerobios y aerobios. Algunos
Microorganismos requieren de CO, para crecer, y no pueden ser cultivados a menos
que la tensión del CD, sea elevado sobre el nivel atmosférico normal
Las bacterias de acuerdo con el uso de oxígeno libre se clasificándose en:
• aerobias, se incuban los medios de cultivos en agitación constante
• anaerobias, la adición al medio de cultivo de un compuesto reductor como el
tioglicolato sódico, para disminuir el contenido de oxígeno.
• anaerobias facultativas,
• anaerobias aerotolerantes,
• Microaerófilos, necesitan poca cantidad de oxígeno (2 a 10%)
CLASIFICACIÓN DE LAS BACTERIAS DE ACUERDO CON LAS NECESIDADES
DEL OXIGENO
LL
PARA AISLAMIENTO DE BACTERIAS ANAEROBICAS
Figura 3.22 El oxígeno debe ser suministrado, eliminado o restringido dependiendo de los
requerimientos de los microorganismos. Para los microaerófilos (que requieren bajas
tensiones de oxígeno) y para los anaerobios aerotolerantes (que pueden crecer en presencia
de oxígeno o en su ausencia) se utilizan recipientes cerrados con una vela en su interior.
Diseño de los medios de cultivo
• CONTROL DE TEMPERATURA, Cada especie microbiana posee una temperatura
óptima de crecimiento, clasificándose en:
Psicrófilos, mesófilas, termófilas.
psicrófilos: Temperatura optima 10-15 °C
Mesófilos: Temperatura optima 30-40°C
Termófilos: Temperatura optima 55-65 °C
• Otros requerimientos:
- Ajuste Osmótico, las propiedades osmóticas del medio pueden incrementarse a
través de un compuesto no metabolizable semejante al cloruro de sodio. La selección
de bacterias halófilas se realiza por este procedimiento
Bacterias Halófilas, bacterias que para su crecimiento requieren altas
concentraciones de sal 10-15%. Son bacterias aisladas del mar y de ciertos alimentos.
Otras bacterias como aquellas aisladas de las fosas marinas, requieren presiones
superiores a las normales
MEDIOS DE CULTIVO: Clasificación
1. De acuerdo con su naturaleza, se clasifican en:
• Vivos:
-Cultivos de tejidos de diferentes orígenes
-Animales de experimentación (ratón, cobayo, mono,conejo,etc)
• Inertes
-Medios sintéticos (caldos o Agar)
2. De acuerdo con su composición química en:
• Sintéticos a definidos: son aquellos que tienen una composición química conocida y
definida con precisión. Esto significa que se sabe exactamente qué compuestos
químicos están presentes en el medio y en qué cantidades.
• No sintéticos o indefinidos, o complejos: son aquellos que tienen una composición
química no definida con precisión. Esto significa que no se conoce exactamente qué
compuestos químicos están presentes en el medio ni en qué cantidades
[Link] acuerdo con su función, uso o aplicación
• Comunes: también conocidos como medios de cultivo básicos o generales, son
aquellos que se utilizan para cultivar una amplia gama de microorganismos, tanto
bacterias como hongos. Estos medios suelen tener una composición relativamente
simple y contienen los nutrientes esenciales que la mayoría de los microorganismos
necesitan para crecer y reproducirse. Ejemplo: medio de caldo de carne
• Enriquecidos: son un tipo de medio de cultivo que contiene nutrientes adicionales
para favorecer el crecimiento de microorganismos específicos, especialmente
aquellos que son exigentes o se encuentran en pequeñas cantidades en la muestra
original. Ejemplo: medio de cultivo enriquecido para el aislamiento de Bacillos
céreas: un medio enriquecido se úede considerar un medio definido
• Especiales: son aquellos que se formulan específicamente para el cultivo de un tipo
particular de microorganismo o para un propósito específico.
- Medios selectivos: Inhiben el crecimiento de la mayoría de los microorganismos,
permitiendo el crecimiento del microorganismo de interés.
Ejemplos:
o Agar MacConkey: Inhibe el crecimiento de bacterias Gram positivas,
permitiendo el crecimiento de enterobacterias.
o Agar Sabouraud Dextrosa: Inhibe el crecimiento de la mayoría de las
bacterias, permitiendo el crecimiento de hongos y levaduras.
- Medios diferenciales: Permiten la diferenciación visual del microorganismo de
interés de otros microorganismos similares.
Ejemplos:
o Agar sangre: Permite diferenciar bacterias hemolíticas (que destruyen los
glóbulos rojos) de bacterias no hemolíticas.
o Agar EMB: Permite diferenciar bacterias con diferentes tipos de
fermentación.
- Medios de enriquecimiento especial: Favorecen el crecimiento de
microorganismos que son exigentes o se encuentran en pequeñas cantidades en la
muestra original.
Ejemplos:
o Medio de Selenito de Sodio: Enriquecido para el crecimiento de Salmonella.
o Medio de Thiobacillus Thioparus: Enriquecido para el crecimiento de
bacterias oxidantes del azufre.
4. De acuerdo con su consistencia (Estado físico) en:
• Líquidos:
-Caldo nutritivo: Es un medio de cultivo básico y universal que contiene peptona, extracto
de carne y cloruro de sodio. Se utiliza para el crecimiento de una amplia gama de bacterias.
-Caldo tioglicolato: Es un medio líquido bifásico, con una zona aerobia en la parte superior
y una zona anaerobia en la parte inferior. Se utiliza para cultivar bacterias aerobias,
anaerobias y microaerófilas.
-Caldo de enriquecimiento: Son medios líquidos enriquecidos con componentes como
sangre, suero o extractos de tejidos, que favorecen el crecimiento de microorganismos
exigentes o presentes en bajas cantidades en la muestra. Ejemplos: caldo de Selenito de
Sodio (para Salmonella) o caldo tetrationato (para bacterias microaerófilas).
• Solidos
- Agar nutritivo: Contiene los mismos nutrientes que el caldo nutritivo pero con la
adición de agar, una sustancia gelificante que permite solidificar el medio. Se utiliza
para el crecimiento y aislamiento de una amplia variedad de bacterias.
- Agar sangre: Es un medio de cultivo sólido que contiene agar nutritivo y sangre
animal (generalmente de oveja o caballo). Se utiliza para diferenciar bacterias
hemolíticas (que destruyen los glóbulos rojos) y observar el tipo de hemólisis.
- Agar chocolate: Similar al agar sangre, pero con la adición de sangre calentada y
extracto de chocolate. Se utiliza para el aislamiento de bacterias fastidiosas, como
Neisseria spp.
- Agar McConkey: Es un medio de cultivo selectivo y diferencial que contiene
lactosa y otros azúcares fermentables. Se utiliza para diferenciar entre bacterias
lactosa positivas (fermentan lactosa) y lactosa negativas (no fermentan lactosa).
- Agar Sabouraud Dextrosa (SDA): Es un medio sólido rico en nutrientes que se
utiliza para el cultivo de hongos y levaduras.
• Semisólidos:
- Agar movilidad: Contiene agar nutritivo a una concentración menor
(aproximadamente 0,3-0,5%) que los medios sólidos. Se utiliza para observar la
motilidad bacteriana.
- Agar Koser: Similar al agar movilidad, pero con un gradiente de pH para estudiar el
crecimiento bacteriano a diferentes niveles de acidez.
- Agar profundo: Contiene agar nutritivo a una concentración intermedia
(aproximadamente 0,7-1%). Se utiliza para estudiar el crecimiento bacteriano en
diferentes profundidades del medio, permitiendo la observación de bacterias aerobias,
Ejemplos de medios de cultivos de acuerdo con su composión
Sintéticos o definidos
G
No sintético o complejo: No se especifica que hay de cada material
Ejemplo de medio de cultivo complejo para microorganismos: Medio
Tripticaseína Soya (TSA)
• Peptona de caseína: 15 g/L
• Extracto de soja: 5 g/L
• Cloruro de sodio: 5 g/L
• Agar: 15 g/L
Algunos medios sintéticos de acuerdo con su función
• Medios de Mantenimiento, son medios de cultivo para conservar al microorganismo
durante un largo tiempo sin dañar su estructura. Estos medios suelen ser distintos a
los de crecimiento óptimo, ya que el crecimiento rápido y prolífico suele ocasionar la
muerte rápida de las células. Ejm: al añadir glucosa al medio y al ser utilizada por los
microorganismos, producen ácidos, acidificando el medio por lo que es preferible no
utilizar glucosa en los medios de mantenimiento.
• Medios de Prueba, para el ensayo de vitaminas, aminoácidos, antibióticos. Se utilizan
medios de composición experimental. También se utilizan este tipo de medios para
probar desinfectantes.
PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO
• En la actualidad, la mayoría de los medios de cultivo se encuentran comercializados;
normalmente bajo la forma de liofilizados a los que es preciso rehidratar.
• En estos casos la preparación del medio de cultivo es:
[Link] la cantidad deseada.
2. disolver en agua destilada
3. Hervir
4. enfriar
5. medir PH
6. Distribuir
7. Autoclavar
• Antes de su esterilización los medios líquidos se reparten en los recipientes
adecuados (tubos, matraces, etc.).
Nota: Si es un medio sólido y se ha de distribuir en tubos o en matraces, (no en placas
Petri) se tapa y se esteriliza en la autoclave.
PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO PROCESO
• Las placas de Petri se preparan vertiendo el medio fundido y estéril dentro de ellas y
en un ambiente aséptico (por ejemplo, en la proximidad de la llama de un mechero
Bunsen)
• Se puede conservar el medio en Erlenmeyer y cuando se necesite (para tubos o
placas, se procederá a fundirlo en baño maría y repartirlos.
• Los caldos y medios sólidos pueden conservarse, una ver esterilizados, a temperatura
ambiente. pero para reducir su deshidratación y el consiguiente cambio en las
concentraciones de sus componentes, y su esterilidad es preferible conservados a 4°C
• Una vez finalizada la esterilización los medios se dejarán enfriar a temperatura
ambiente y en el caso de medios sólidos contenidos en tubos deberán, en su caso,
inclinarse para que al solidificarse adopten la forma de agar inclinado (slant) o pico
de flauta, si tal es su finalidad
NOTA: Las sustancias termolábiles, se esterilizan por filtración y se añaden al resto
de los componentes después de que estos hayan sido previamente esterilizados en la
autoclave y enfriados a temperatura ambiente ó a 40-50°C si se trata de medios con
agar.
PREPARACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO FLUJOGRAMA
Según el recipiente en que se vaya a distribuir, se seguirá el siguiente orden:
• En tubo: se reparten en los tubos antes de ser esterilizados. Se reparten 2-4 ml en
caso de medios líquidos y unos 6-8 ml cuando sean tubos de agar inclinado. En
este último caso, tras la esterilización, se dejarán apoyados en una superficie
inclinada hasta que solidifiquen en forma de slant o punta de flauta.
• En placa de Petri: se esterilizan en botella o matraz Erlenmeyer. Una vez
esterilizados, se deja enfriar sin que llegue a solidificar para posteriormente
repartirlos en las placas en condiciones de esterilidad. Se almacenarán en posición
invertida.
Cultivo de bacterias
Para la elección del medio de cultivo y condiciones de incubación debemos tener en cuenta
las siguientes características de las bacterias:
a) Si son autotróficas o heterotróficas
b) Si son heterótrofas, considerar si son exigentes o no. Si tienen algún otro requerimiento
específico.
c) Si son aerobias, anaerobias o microaerófilos
d) Si son psicrófilos, mesófilas o termófilas.
TEMA 0.2: AISLAMIENTO DE CULTIVOS PUROS
Introducción
La identificación exacta de un microorganismo se realiza solamente con cultivos puros
(axénicos), ya que mucho carácter empleadas en la clasificación dependen de la actividad
poblaciones y no de células individual.
Cultivo
• CULTIVO, es cualquier preparación en la que ha habido crecimiento artificial de
microorganismos.
• Se denomina CULTIVO PURO O AXÉNICO al que contiene una población de un tipo
único de microorganismo o una sola especie microbiana, provenientes de una sola célula.
• LOS CULTIVOS PUROS son esenciales para poder estudiar las características de los
microorganismos y para poder identificarlos con seguridad.
• CULTIVO MIXTO, cuando dos o más especies o tipos de microorganismos desarrollan en
un medio. Ejemplo: cultivo mixto de Lactobacillus delbrueckii [Link] y
Steptococcus salivarius subesp. Thermophilus.
Aislamiento de cultivos Puros
• Para la identificación de un microorganismo obtención de CULTIVO PURO es necesario la
• El aislamiento de un cultivo puro se lleva a cabo al obtener los antecedentes genéticos de
una célula aislada.
• El aislamiento o separación de una sola especie microbiana a partir de una mezcla de
microorganismos es llamada: Técnica del cultivo puro o aislamiento de cultivo puro
Técnica del cultivo puro
Existen procedimientos que se siguen para obtener cultivos puros
• Siembra: Es el procedimiento de acondicionar el microorganismo a un medio de
cultivo de acuerdo con sus exigencias vitales. (Sembrar o inocular es Introducir
artificialmente una porción de muestra (inóculo) en un medio adecuado)
Se siembra con dos finalidades:
• Aislamiento separación de los microorganismos al estado de poreza a parte de una
muestra problema. Se requiere de un medio sólido
• Trasplante: separación primaria de la cepa a un medio de cultivo apropiado en tubo
(medio liquido a solido)
Se trasplanta en medios especiales para el estudio de las propiedades propiedades
bioquímicas, etc.
Métodos de aislamiento de Cultivos Puros
Técnicas de aislamiento:
1.Técnica de siembra en placa por agotamiento
- EN ESTRÍAS SIMPLE (ES LA MÁS USUAL)
Definición: Técnica de microbiología para aislar e identificar bacterias a partir de una
muestra.
Objetivo: Colinas aisladas
Cantidad de inoculo: Poca cantidad
Distribución en la placa Petri: Gradual
Procedimiento1. Esterilizar el asa de siembra. 2. Inocular la muestra. 3. Sembrar en el agar.
4. Realizar estrías. 5. Flamear el asa de siembra nuevamente. 6. Incubar la placa.
Ventajas: Simple y fácil de realizar, Económica, eficaz para el aislamiento de bacterias, util
para la identificación de bacterias.
Desventajas: Menos selectiva que otras técnicas y riesgo de contaminación
Aplicaciones: Aislamiento de bacterias de diversas fuentes, Identificación de bacterias,
Estudios de sensibilidad a antibióticos, Control de calidad microbiológico.
Materiales: Asa de siembra esterilizada, Muestra que contiene bacterias, Placa de agar. -
Mechero Bunsen.
Ejemplo de estría simple
- ESTRÍAS MÚLTIPLE
Definición: Técnica avanzada de microbiología para aislar e identificar bacterias.
Objetivo: Obtener colonias bacterianas aisladas para su estudio.
Ventajas: Mayor eficiencia en el aislamiento de colonias, mayor cobertura del agar, Útil
para muestras con alta carga bacteriana, reduce el riesgo de superposición de colonias.
Desventajas: Requiere mayor precisión,mayor riesgo de contaminación.
Procedimiento: 1. Esterilizar el asa de siembra 2. Inocular la muestra. 3. Dividir el inóculo,
4. Realizar estrías primarias (patrón en "V" invertida o "X"),5. Flamear el asa de siembra
después de cada patrón, 6. Realizar estrías secundarias (paralelas y perpendiculares a las
primarias), 7. Realizar estrías terciarias (opcional), 8. Flamear el asa de siembra
nuevamente,9. Incubar la placa.
Aplicaciones: Aislamiento de bacterias de muestras complejas, Aislamiento de bacterias
mixtas, Estudios de diversidad microbiana,Control de calidad microbiológico.
Materiales: Asa de siembra esterilizada, muestra que contiene bacterias, placa de agar,
mechero Bunsen
Patrones de estrías:
Patrón en "V" invertida o estría múltiple: Común, cubre un tercio de la placa
Ideal para aislar una sola bacteria, inóculo bajo, muestras líquidas y principiantes.
Patrón en "X"o técnica de los 4 cuadrantes: Divide la placa en cuadrantes, dos estrías
cruzadas en cada uno.
Útil para aislar bacterias mixtas, inóculo alto, muestras sólidas y técnicos experimentados.
Patrón en "W" o técnica de los 3 giros: Similar a "X", con estrías diagonales adicionales.
Cuando usamos una máxima cobertura, estudios de diversidad microbiana, inóculo alto y
técnicos experimentados.
1. Técnica de siembra en placa en superficie y en profundidad
- Superficie o llamado también diseminación
- Profundidad o "pour plate"
Nota: La técnica de siembra en placa en superficie y vaciado en placa puede realizarse en
forma cualitativa y cuantitativa.
-Para el aislamiento: el procedimiento es cualitativo (obtener colonias aisladas)
-Cuenta colonias: Procedimiento cuantitativo pueden emplearse medios selectivos y
diferenciales
Además, para el aislamiento de tipos bacterianos específicos: se usan medios de cultivos
selectivos y diferenciales. (Están dentro de los medio de técnicas de enrequcimientos).
Medios selectivos:
• Definición: Son medios de cultivo que favorecen el crecimiento de un tipo
específico de microorganismos e inhiben el crecimiento de otros.
• Mecanismo de acción: Contienen sustancias químicas que actúan sobre la
membrana celular, la síntesis de proteínas o el metabolismo de los
microorganismos, permitiendo el desarrollo solo de aquellos que son resistentes a
dichas sustancias.
• Ejemplos:
o Agar MacConkey: Inhibe el crecimiento de Gram positivos y favorece el
crecimiento de coliformes, como Escherichia coli.
o Agar EMB: Inhibe el crecimiento de la mayoría de los Gram positivos y
algunos Gram negativos no coliformes, y permite diferenciar entre coliformes
fermentadores de lactosa (color rojo) y no fermentadores (color rosa o
incoloro).
o Agar Manitol Sal Agar (MSA): Inhibe el crecimiento de la mayoría de los
microorganismos y favorece el crecimiento de Staphylococcus aureus, que
fermenta el manitol y produce colonias amarillas con halos amarillos.
Medios diferenciales:
• Definición: Son medios de cultivo que permiten distinguir entre diferentes tipos
de microorganismos en función de sus características metabólicas.
• Mecanismo de acción: Contienen sustancias químicas que cambian de color o
producen otros cambios visibles cuando son metabolizadas por los
microorganismos.
• Ejemplos:
o Agar EMB: Permite diferenciar entre coliformes fermentadores de lactosa
(color rojo) y no fermentadores (color rosa o incoloro) debido al cambio de
color del indicador azul de metileno.
o Agar sangre: Permite diferenciar entre tipos de Streptococcus en función de
su capacidad hemolítica (destrucción de glóbulos rojos), observando una zona
transparente alrededor de la colonia.
o Agar Drigalski-Agar (D-A): Permite diferenciar entre Enterobacteriaceae
fermentadoras de lactosa (color rojo) y no fermentadoras (color rosa o
incoloro) debido al cambio de color del indicador rojo de congo.
Ejemplos: De medio diferencial y selectivo en Agar MacConkey
Medio selectivo: Inhibe el crecimiento de la mayoría de las bacterias Gram +
Medio Diferencial: Detecta la fermentación de lactosa.
Ejemplo: Bacterias que crecen en Agar MacConkey (Enterobacterias Gram+ y Gram – en
agar MacConkey = medio diferencial y selectivos)
Fermentadoras de lactosa: escherichia colí, entercobacter aerogenes ,klebsiella
pneumoniae,salmonella enterica
No fermentadores de lactosa: Pseudomonas aeruginosa, proteus mirabilis,serratia
marcencens
Medio diferencial en Agar EMB (Eosina Azul de Metileno):
Escherichia coli: Color rojo oscuro
Salmonella enterica: Color Rosado
2. Técnica de las diluciones en serie
Usada para contar la cantidad de microorganismos
• Preparar el área de trabajo: Limpiar, desinfectar y flamear.
• Preparar las diluciones seriadas:
-Rotular tubos de ensayo.
-Agregar medio de cultivo a cada tubo.
-Inocular el primer tubo con la muestra.
-Realizar diluciones seriadas con transferencias de 100 µL.
• Siembra en placa:
-Flamear el asa de siembra.
-Tomar 10 µL de la dilución final con el asa.
-Sembrar en estría, cubriendo toda la superficie del agar.
-Flamear el asa nuevamente.
• Incubación:
-Cerrar la placa de Petri.
-Incubar a la temperatura adecuada para el microorganismo.
-Tiempo de incubación: 18-24 horas.
• Observación de colonias:
-Observar la placa bajo una fuente de luz.
-Contar las colonias en cada dilución.
• Registro de resultados:
-Anotar el número de colonias por dilución.
-Calcular el número total de bacterias en la muestra.
-Registrar observaciones relevantes
3. Técnica de enriquecimiento
Usada para aumentar la concentración de microorganismos de interés presente en una
muestra.
Desarrollo del proceso de la técnica de enriquecimiento:
Definición:
La técnica de enriquecimiento es un método microbiológico que se utiliza para aumentar la
concentración de un microorganismo específico en una muestra cuando este se encuentra
en baja cantidad o está mezclado con otros microorganismos. Esta técnica se basa en la
provisión de condiciones ambientales favorables para el crecimiento del
microorganismo de interés mientras que se inhibe o suprime el crecimiento de otros
microorganismos.
Tipos de técnicas de enriquecimiento:
Existen dos tipos principales de técnicas de enriquecimiento:
1. Enriquecimiento selectivo:
• Objetivo: Favorecer el crecimiento del microorganismo de interés mientras se inhibe
el crecimiento de otros microorganismos.
• Mecanismo de acción: Se basa en la utilización de un medio de cultivo selectivo
que contiene sustancias químicas que inhiben el crecimiento de algunos
microorganismos, pero no del microorganismo de interés.
• Ejemplos:
o Medio MacConkey: Inhibe el crecimiento de Gram positivos y favorece el
crecimiento de coliformes.
o Agar EMB: Inhibe el crecimiento de la mayoría de los Gram positivos y
algunos Gram negativos no coliformes, y permite diferenciar entre coliformes
fermentadores de lactosa (color rojo) y no fermentadores (color rosa o
incoloro).
o Agar Manitol Sal Agar (MSA): Inhibe el crecimiento de la mayoría de los
microorganismos y favorece el crecimiento de Staphylococcus aureus, que
fermenta el manitol y produce colonias amarillas con halos amarillos.
2. Enriquecimiento diferencial:
• Objetivo: Crear un ambiente que favorezca el crecimiento del microorganismo de
interés y permita su diferenciación de otros microorganismos.
• Mecanismo de acción: Se basa en la utilización de un medio de cultivo diferencial
que contiene sustancias químicas que cambian de color o producen otros cambios
visibles cuando son metabolizadas por el microorganismo de interés.
• Ejemplos:
o Agar EMB: Permite diferenciar entre coliformes fermentadores de lactosa
(color rojo) y no fermentadores (color rosa o incoloro) debido al cambio de
color del indicador azul de metileno.
o Agar sangre: Permite diferenciar entre tipos de Streptococcus en función de
su capacidad hemolítica (destrucción de glóbulos rojos), observando una zona
transparente alrededor de la colonia.
o Agar Drigalski-Agar (D-A): Permite diferenciar entre Enterobacteriaceae
fermentadoras de lactosa (color rojo) y no fermentadoras (color rosa o
incoloro) debido al cambio de color del indicador rojo de congo.
Procedimiento general:
El procedimiento general de la técnica de enriquecimiento varía según el tipo de
microorganismo que se busca aislar y la muestra que se analiza. Sin embargo, los pasos
básicos son los siguientes:
1. Selección del medio de enriquecimiento: Elegir el medio de cultivo adecuado en función
del microorganismo de interés y las características de la muestra.
2. Inoculación del medio: Agregar la muestra al medio de enriquecimiento y mezclar bien.
3. Incubación: Incubar el medio a la temperatura y durante el tiempo adecuados para el
crecimiento del microorganismo de interés.
4. Transferencia a otro medio: Después de la incubación, transferir una pequeña cantidad
del medio enriquecido a un medio de cultivo selectivo o diferencial para el aislamiento e
identificación del microorganismo.
5. Observación e identificación: Observar las características del crecimiento en el medio de
cultivo selectivo o diferencial y realizar las pruebas bioquímicas confirmatorias necesarias
para identificar el microorganismo.
5. Aislamiento de una sola bacteria
• Se utiliza el microscopio, con el manipulador, que permite tomar un solo microorganismo
de una preparación en gota pendiente, utilizando una micropipeta.
• Esta técnica se utiliza para estudios especializados como genética y se requiere de mucha
practica y habilidad para trabajar con ella
Métodos Especiales
Existen métodos especiales que van a ayudar al aislamiento de algunos microorganismos
• Obtención de una bacteria esporógena en forma pura: calentar la muestra a 85°C/15
min., o tratar con un desinfectante adecuado la suspensión mixta de gérmenes.
• Adicionar sustancias químicas inhibidoras o germicidas a los medios de cultivo: evita
el crecimiento de bacterias no deseadas, creciendo la bacteria deseada. Ejm: el
colorante verde brillante inhibe el crecimiento de bacterias Gram (+) y facilita el
crecimiento de las Gram (-) de las muestras mixtas.
TEMA 0.3: CARACTERÍSTICAS CULTURALES (CARACTERÍSTICAS DE
CULTIVO) DE LAS BACTERIAS
Características de cultivo
El aspecto general de los cultivos frecuentemente proporciona datos (características de
cultivo) tenemos: bacterianos en varios medios de cultivo sobre la identidad de los
organismos (Características de cultivo) tenemos:
Características en Agar
• El aspecto incluye: tamaño, forma, color, etc. de la colonia, tanto en:
- en agar en placa y
- en agar inclinado en tubo,
• También las características de cultivo en caldo tales como:
-turbidez,
-presencia o formación de sedimento en el fondo del tubo o
- una membrana o película en la superficie del medio, características que con
frecuencia son típicas de ciertas especies
Morfología de las colonias (características en agar en placa)
K
CC
Características de las colonias en Agar inclinado en tubo
Características de las colonias en agar plano inclinado en tubo
• Cantidad: escasa, moderada, o abundante.
Forma de crecimiento: filiforme, pino invertido, arborescente etc.
• Margen o borde de crecimiento: uniforme, liso o presentando irregularidades.
• Consistencia del crecimiento: igual al del agar en placa
• Cromogénesis o pigmentación: igual al del agar en placa
CROMOGÉNESIS O PIGMENTACIÓN
• Se usan términos comunes para definirlo Y se especifica si el pigmento
producido difusible o no.
• La cromogénesis se refiere a la capacidad de ciertas bacterias u otros
microorganismos para producir pigmentos coloridos a partir de los cromóforos
presentes en su estructura.
Ejemplos de bacterias que realizan cromogenesis
La taxonomía de Staphylococcus aureus es la siguiente:
• Dominio: Bacteria
• Filo: Firmicutes
• Clase: Bacilli
• Orden: Bacillales
• Familia: Staphylococcaceae
• Género: Staphylococcus
• Especie: Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus es una bacteria grampositiva, cocoide, anaerobia facultativa que se
encuentra comúnmente en la piel y en las fosas nasales de los humanos sanos. También es un
patógeno común y puede causar una variedad de infecciones, desde infecciones leves de la
piel hasta enfermedades graves que ponen en peligro la vida
Taxonomía de Pseudomonas fluorescens
Dominio: Bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase: Gammaproteobacteria
Orden: Pseudomonadales
Familia: Pseudomonadaceae
Género: Pseudomonas
Especie: Pseudomonas fluorescens
Características:
• Forma: Bacilo, recto o ligeramente curvado
• Tinción Gram: Negativa
• Motilidad: Móvil por flagelo polar
• Respiración: Aeróbica estricta
• Metabolismo: Quimioorganoheterótrofo
• Hábitat: Suelo y agua
• Características adicionales: Produce pigmento fluorescente en medios de cultivo
apropiados y enzimas pectolíticas. No forma esporas.
Nota: forman pigmentos fluorescentes amarillo y verde.
Cultivo en Caldo
En los medios líquidos como: los caldos, las bacterias presentar ciertas características:
• Turbidez: Opacidad más o menos densa, signo de crecimiento.
• Película: Crecimiento casi continuo sobre el líquido
• Sedimento: Depósito de células en el fondo del tubo que se re suspende al agitar.
• Cantidad de crecimiento, escaso moderado o abundante
• Olor: pútrido, a frutas, etc.
Bbh
Mantenimiento y conservación de cultivos puros
Se utilizan diversos procedimientos de acuerdo con las características y la tolerancia del
microorganismo.
• Resiembra periódica en medios frescos
• Preservación de cultivos en una capa de aceite mineral
• Liofilización
• Almacenamiento a temperaturas muy bajas: Nitrógeno liquido
Colección de cultivos
La primera colección conocida de cultivos tipo fue la de Krol en Praga (1900)
Estados unidos (ATCC) está en Rockville (Maryland)
Francia (CIP) está en el instituto Pasteur (Paris)
Holanda (CBS) está en Baarn
Japón (IFO) está en Osaka
Alemania (DSM) está en Darmstadt
España (CECT) está en Valencia
ATCC: American Type Culture Collection
Nota: Las cepas ATCC son microorganismos certificados utilizados en diferentes
disciplinas, para el control de calidad en microbiología. Este grupo de material biológico
de referencia certificado, son conocidos como American Type Culture
Collection (ATCC).
TEMA 0.4: METABOLISMO MICROBIANO
Introducción
• El metabolismo microbiano se define como el conjunto de reacciones químicas que
ocurren en la célula y que tienen por objetivo generar la energía y los componentes
necesarios para que ésta lleve a cabo sus funciones.
• Las reacciones químicas liberan o consumen energía, por tanto el metabolismo se
puede concebir como una función de equilibrio energético
• Todas estas reacciones están altamente coordinadas y dependen del perfecto
funcionamiento de los sistemas multienzimático
Enzimas
• Las enzimas son agentes catalíticos orgánicos, de naturaleza proteica, que se unen a
otra molécula llamada sustrato, son especificas.
Enzimas- Componentes
Hay enzimas compuestas exclusivamente por proteínas, pero la mayoría de ellas
consisten en:
• Fracción proteica
Apoenzima: No posen actividad propia y debe ser activada por cofactores
• Fracción no proteica
Cofactor: (Grupo prostético):
Pueden ser
inorgánicos: iones metálicos de Fe, Zn, Mg, Co, Mn, Cu, Ca
Cofactor orgánico: Coenzima
Apoenzima:
Cofactor:
Holoenzima:
Enzimas: Coenzima- Acción
Las Coenzimas: Aceptan átomos que provienen del sustrato o donan átomos que necesita el
sustrato
Algunas coenzimas actúan como: Transportadoras de electrones del sustrato y los donan a
otras moléculas
Contiene derivados
Coenzimas de importancia central para el metabolismo celular:
del ac. nicotínico
• NAD+: Reacciones catabólicas (liberadoras de energía)
• NADP+: Reacciones anabólicas (consumidoras de energía)
• FMN
Contiene derivados de la Transportadores de electrones
• FAD vit, riboflavina
Función: síntesis y degradación de
los lípidos y serie de reacciones de
• CoA: Contiene derivado de la vitarnina del ácido pantoténico
oxidación del ciclo de Krebs
Factores que influyen sobre la actividad de las enzimas
La actividad de una enzima depende de diversos factores los mas importantes son:
temperatura, pH, la concentración de sustrato y la presencia o la ausencia de inhibidores
• Temperatura: Cada enzima tiene una temperatura óptima, en el cual puede llevar a cabo sus
funciones catalíticas, normalmente varia entre 35°C y 40°C
• Frio: retarda la actividad enzimática (0ºC)
• Temperaturas elevadas: pierde su actividad (disminuye la velocidad de reacción) se
desnaturaliza (70-80°C)
• La desnaturalización de la enzima se debe a la perdida de su estructura tridimensional
Mecanismos de Control: Enzimas Alostéricos
• Los mecanismos de control consisten en que los niveles de algunos productos regulan la
actividad de algunas enzimas, de tal forma que su actividad se incrementa o disminuye
dependiendo de los niveles del producto. "Control de retroalimentación
negativa" (Feed – back)
METABOLISMO MICROΒΙΑΝΟ
Metabolismo Microbiano es el conjunto de transformaciones químicas que realizan los
microorganismos vivos para crecer y multiplicarse.
Se considera que en el metabolismo existen 2 etapas:
• Catabolismo: Produción de energía. Constituye la degradación del sustrato hasta
generalmente CO2 y H2O.
• Anabolismo, Síntesis de los componentes celulares a partir de CO2 y H2O. Son reacciones
de biosíntesis que consecuentemente requieren energía.
Como resultado: el crecimiento celular
Para poder llevar a cabo todas sus reacciones metabólicas, los seres vivos necesitan una
fuente de alimento y energía
a) Los nutrientes son fuentes de C, H, O, N.
b)La energía puede ser de diversa naturaleza: luz, compuestos orgánicos y
compuestos inorgánico
Los microorganismos dependiendo de la energía que toman del medio para crecer pueden
ser:
- Luz: fotótrofos
- Compuestos químicos: quimiótrofos.
Según sea el compuesto químico que utilizan. Ambos obtienen energía de la oxidación del
compuesto químico, por tanto, obtienen energía química:
• inorgánico: quimiolitótrofos
• orgánico: quimioorganótrofos
Dependiendo de la fuente de carbono (C) (fuente de moléculas con C para usarlo como
constituyente celular):
• Autótrofos (autosuficientes), sintetizan los constituyentes celulares a partir de dióxido
de carbono. Transforman compuestos inorgánicos en orgánicos.
• Heterótrofos, Utilizan compuestos orgánicos que ya han sido elaborados por otros
organismos, por ejemplo, la glucosa, que es una molécula mucho más
compleja que el CO2
La mayoría de los organismos autótrofos son los que obtienen su energía de la oxidación
de compuestos químicos inorgánicos o de la luz.
• FOTOAUTOTROFOS: Usan la luz como fuente de energía y el dióxido de
carbono como fuente de carbono. Este grupo Incluye a: cianobacterias y bacterias
verdes Y rojas.
• LITOAUTOTROFOS: Usan compuestos químicos inorgánicas como fuente de
energía y dióxido de carbono como fuente de carbono. Está formado
exclusivamente por procariotes.
• QUIMIOHETEROTROFOS: Usan compuestos orgánicos como fuente de energia
y fuente de carbono. Son: protozoos, hongos y la mayoría de las bacterias. Estos
son los grupos principales (y los microorganismos que están presentes en todos)
• FOTOHETERÓTROFOS: Usan la luz como fuente de energía y los compuestos
orgánicos como fuente de carbono. Pertenecen a este grupo algunas
bacterias rojas.
TIPOS DE METABOLISMO MICROBIANO
En la práctica, estos términos se combinan casi libremente. Los ejemplos típicos son como
sigue:
• Los quimiolitoautótrofos obtienen energia de la oxidación de compuestos inorgánicos
y el carbono de la fijación del CO2 Ejemplos: bacterias nitrificantes.
• Los fotoliteautotrofos obtienen energía de la luz y el carbono de la fijación CO2,
usando compuestos inorgánicos como equivalentes reductures.
Ejemplos: Cianobacteria.
Mecanismo De Obtención De Energía
En los seres vivos, la utilización de la energia potencial contenida en los nutrientes se
produce por reacciones de óxido-reducción.
• Oxidación, consiste en la eliminación o perdida de electrones de un átomo o
de una sustancia, pero también puede ser la eliminación de átomos de
hidrógeno de una sustancia.
• Reducción, ganancia de un electrón o de un átomo de H.
• Potencial Redox: nos indica la tendencia o facilidad de un compuesto para
ceder electrones y oxidarse, o para captar electrones y reducirse.
kl
1. CATABOLISMO
• Es la fase del metabolismo que descompone las moléculas grandes en pequeñas. Ejm: el
ácido láctico, el ácido acético, el dióxido de carbono, el amoniaco y la úrea.
• De estas (Reaccionas químicas) de degradación (Se obtiene) ENERGIA química
adenosintrifosfato(ATP)
Vital importancia en metabolismo organismo vivo
La degradación de los nutrientes: Las proteínas, los lípidos y los carbohidratos son
degradados mediante reacciones enzimáticas las cuales están dividido en tres etapas:
• La primera etapa consiste en la conversión de moléculas complejas a moléculas
simples; Ejm: Procesos degradativos
una proteína Aminoácidos No regulere de energia
(Moléculas simples) Ocurre en el interior del
microorganismo
a
• La segunda etapa: conversión de Molécula simple Moléculas mucho más simples
Carbohidratos
Llamada “Acetil coenzima A”
lípidos, proteínas
Consiste Ciclos metabólicos más
• La tercera etapa: En generar la energía importantes
ejemplo: Ciclo de Krebs
METABOLISMO ENERGETICO
Nota: Este último proceso está formado por un conjunto de enzimas complejas que
catalizan varias reacciones de óxido-reducción, donde el oxígeno es el aceptor
final de electrones.