Espectroscopia UV-Vis

La espectroscopia es una técnica utilizada para estudiar la interacción entre la

radiación electromagnética y la materia. Consiste en medir cómo la energía radiante
se distribuye en función de la longitud de onda o la frecuencia. Esto se logra
observando cómo la muestra absorbe, emite o dispersa la radiación electromagnética
en diferentes rangos de longitud de onda.

"UV-Vis" es una abreviatura de "Ultravioleta-Visible". Se refiere a la región del

espectro electromagnético que abarca desde la luz ultravioleta (UV), con longitudes de
onda más cortas que son invisibles para el ojo humano, hasta la luz visible (Vis), que
es la porción del espectro que podemos percibir con nuestros ojos. La espectroscopia
UV-Vis se utiliza para estudiar la absorción de radiación electromagnética por parte de
muestras, como compuestos químicos o biológicos.

La espectroscopia UV-Vis es una herramienta fundamental en el estudio de los

efectos biológicos de las sustancias químicas. Ésta, es la herramienta más utilizada en
la evaluación de los efectos tóxicos o proliferativos de las sustancias químicas en
cultivos celulares, lo que es de amplio interés en los estudios preclínicos para el
desarrollo de nuevos fármacos para tratar el cáncer.
La espectroscopia UV-Vis es un método indispensable en el laboratorio analítico
moderno.
Usando la espectroscopia UV-Vis

 Se puede identificar sustancias desconocidas

 Puede determinarse la concentración de sustancias conocidas

LA ABSORCIÓN DE RADIACIÓN ELECTROMAGNÉTICA se rige por varios principios

fundamentales:
Ley de Beer-Lambert: Esta ley establece que la cantidad de radiación absorbida por
un material es directamente proporcional a la concentración del material y a la
distancia que la radiación atraviesa a través del mismo.
Es decir, explica la relación entre la absorción de luz por una sustancia en solución y la
concentración de esta, y la longitud del cuerpo que la luz atraviesa.
En la espectroscopia UV-Vis, se utilizan instrumentos llamados espectrofotómetros
UV-Visibles. Estos instrumentos constan principalmente de:

 Fuente de luz: Una lámpara de arco de xenón o de deuterio, que emite

radiación en el rango UV y visible.
 Monocromador: Dispositivo que selecciona una longitud de onda específica
de la radiación incidente y la dirige hacia la muestra.
 Cubeta o celda de muestra: Contiene la muestra líquida o disuelta en un
solvente adecuado, a través del cual pasa la radiación.
 Detector: Detecta la intensidad de la radiación transmitida a través de la
muestra en función de la longitud de onda.
 Electrónica de control y procesamiento de datos: Controla el instrumento y
procesa los datos recopilados para generar el espectro de absorción.

APLICACIONES EN ANÁLISIS CUANTITATIVO Y CUALITATIVO

Análisis cuantitativo:
1. Determinación de concentración: Se utiliza para cuantificar la concentración
de compuestos en solución, utilizando la ley de Beer-Lambert, que establece
una relación lineal entre la absorbancia y la concentración de una sustancia.
2. Cinética de reacciones: Permite seguir la evolución de una reacción química
en el tiempo mediante el monitoreo de cambios en la absorbancia a diferentes
longitudes de onda.
 3. Control de calidad: Se emplea en la industria farmacéutica, alimentaria y
química para verificar la concentración de ingredientes activos, impurezas o
contaminantes en productos terminados.
Análisis cualitativo:
1. Identificación de compuestos: La absorción en el espectro UV-Vis proporciona
información sobre la estructura molecular de los compuestos. Los espectros
característicos permiten identificar compuestos desconocidos o verificar la
presencia de grupos funcionales específicos.
2. Estudio de interacciones moleculares: Se utiliza para investigar interacciones
entre moléculas, como la formación de complejos de coordinación o la
interacción entre un ligando y un receptor.
3. Determinación de pureza: Permite evaluar la pureza de una muestra
comparando su espectro con el de un estándar de referencia. Las impurezas o
contaminantes pueden alterar el espectro de absorción, lo que indica la
presencia de otros componentes en la muestra.

ESPECTROSCOPIA INFRARROJA (IR)

La espectroscopia infrarroja es una técnica analítica que se utiliza para estudiar las
vibraciones moleculares de las moléculas en una muestra. Se basa en la interacción
de la radiación infrarroja con las moléculas, lo que resulta en la absorción de energía
en ciertas regiones del espectro infrarrojo.
También es ampliamente utilizada en química orgánica e inorgánica para identificar
compuestos, determinar su estructura molecular, analizar mezclas y estudiar
reacciones químicas. También se utiliza en otros campos como la farmacología, la
biología, la ciencia de materiales y la industria para una variedad de aplicaciones
analíticas y de investigación.
Principios de observavion de vibraciones moleculares
Se basa en la interacción entre la radiación infrarroja y las moléculas en una muestra.
Cuando la radiación infrarroja pasa a través de una muestra, interactúa con las
moléculas y causa cambios en su estado vibracional.
Estos cambios ocurren porque las moléculas están formadas por átomos que están
unidos entre sí mediante enlaces químicos, y estos enlaces pueden vibrar o estirarse
en respuesta a la absorción de energía infrarroja. Cada tipo de enlace químico tiene
una frecuencia característica de vibración, determinada por la masa de los átomos
involucrados y la fuerza del enlace.
TIPOS DE ESPECTROSCOPIA (IR)
1. Espectroscopia de absorción IR: Este es el tipo más básico de
espectroscopia IR, donde se mide la cantidad de radiación infrarroja absorbida
por una muestra en función de la longitud de onda. Se utiliza para identificar
grupos funcionales en compuestos orgánicos e inorgánicos, así como para
analizar mezclas complejas.
2. Espectroscopia de reflectancia IR: En esta técnica, se mide la radiación
infrarroja reflejada por una muestra en lugar de la absorbida. Se utiliza
principalmente en el análisis de superficies sólidas, como polímeros, minerales
y materiales metálicos, para estudiar su composición y estructura superficial.
3. Espectroscopia de transmisión IR: En este caso, la muestra se coloca entre
una fuente de radiación infrarroja y un detector, y se mide la radiación que pasa
a través de la muestra. Se utiliza para analizar muestras líquidas y sólidas
transparentes, así como para estudiar la composición de películas delgadas y
materiales transparentes.
4. Espectroscopia de reflectancia difusa IR: Similar a la reflectancia IR, pero
en este caso se analiza la radiación infrarroja dispersada por la muestra en
lugar de la radiación reflejada directamente. Se utiliza para analizar muestras
pulverizadas, sólidos porosos y superficies rugosas.
INSTRUMENTACION UTILIZADA
Estos son los componentes principales de un sistema de espectroscopia IR, pero la
instrumentación específica puede variar según el fabricante y el modelo del
instrumento, así como según las necesidades de la aplicación específica.

 Fuente de radiación IR: Puede ser una lámpara de tungsteno, un filamento de

níquel-cromo, una fuente de cerámica o un láser de diodo, dependiendo de la
técnica y el rango de longitudes de onda requerido.
  Monocromador o interferómetro: Se utiliza para seleccionar una longitud de
onda específica de la radiación infrarroja y dirigirla hacia la muestra.
 Celda de muestra: Contiene la muestra que se va a analizar. Puede ser una
celda líquida, una celda de gas o una platina para muestras sólidas.
 Detector: Detecta la radiación infrarroja transmitida, reflejada o dispersada por
la muestra y convierte esta información en una señal eléctrica que puede ser
registrada y procesada.
 Electrónica de control y procesamiento de datos: Controla el
funcionamiento del instrumento y procesa los datos obtenidos para generar un
espectro IR.
 Software de análisis: Se utiliza para interpretar los espectros IR y realizar
análisis cuantitativos y cualitativos de las muestras.

APLICACIONES DE LA IDENTIFICACION DE GRUPOS FUNCIONALES Y

ANALISIS DE MATERIALES