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Recuento de Reticulocitos en Anemias

Este documento describe la técnica de coloración de reticulocitos para su recuento y clasificación de anemias. Explica el procedimiento de coloración con Azul Brillante de Cresilo y observación microscópica para identificar y cuantificar reticulocitos.

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Recuento de Reticulocitos en Anemias

Este documento describe la técnica de coloración de reticulocitos para su recuento y clasificación de anemias. Explica el procedimiento de coloración con Azul Brillante de Cresilo y observación microscópica para identificar y cuantificar reticulocitos.

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PROGRAMA DE CAPACITACIÓN PARA TÉCNICOS

DE LABORATORIO BIOQUÍMICO

Reticulocitos
RETICULOCITOS
 Junto al hemograma y el examen morfológico de
los hematíes, el recuento de reticulocitos es el
parámetro de mayor valor en el estudio de las
anemias,
 Se usa para clasificar las anemias como
 Anemias arregenerativa (“mecanismo central”)
 Anemias regenerativas (“mecanismo periferico”)

 Los reticulocitos son hematíes que aún


conservan restos de RNA.
COLORACIÓN DE RETICULOCITOS
 El ARN residual precipita en presencia de colorantes
"vitales", como el Azul Brillante de Cresilo o el Azul
de Metileno, dando lugar a imágenes filamentosas
fácilmente visibles al microscopio óptico (coloración
supravital, es decir, de células viables, no fijadas).
TÉCNICA
Material necesario:
 1. Sangre total.
 2. Solución de Azul Brillante de Cresilo
 Azul Brillante de Cresilo: 1 g
 Solución Fisiológica: 80 mL
 Citrato de sodio 3,8 g/dl 20 mL

 3.Microscopio óptico.
MÉTODO
 En un tubo de hemólisis colocar tres gotas de
colorante y tres gotas de sangre total
(anticoagulada). En caso de hematocritos bajos,
colocar sangre total en relación 2:1 con el
colorante.
 2.-Mezclar suavemente (para evitar hemólisis) e
incubar a 37ºC durante 15 minutos.
 3.-Con una gota de la suspensión anterior
realizar un extendido.
 4.-Se deja secar el extendido en posición
horizontal.

OBSERVACIÓN
 Con objetivo de inmersión buscar el área
adecuada para el recuento de reticulocitos, que
será aquella donde los hematíes se encuentren
bien individualizados y regularmente
distribuidos.

 El recuento de reticulocitos es importante para


evaluar la capacidad regenerativa medular.
CAUSAS DE ERROR
 1.- Empleo de una relación sangre
anticoagulante insuficiente (anemia
intensa).
 2.-La sangre anticoagulada debe ser
procesada dentro de las dos primeras horas
de la extracción. Los reticulocitos
continúan madurando in vitro, por lo que el
recuento realizado a partir de sangre
conservada varias horas resultará erróneo.
3.- Realizar el recuento sobre un número
reducido de hematíes.
 4.- Realizar el recuento en un área donde
los hematíes se hallan mal distribuidos o
mal individualizados.
VALORES DE REFERENCIA
EDAD RETICULOCITOS % RETICULOCITOS
(x109/L)

Sangre de 3-7 110-330


cordon
1-3 dias 3-7 110-330
4-19 años 0,2-2,2 25-89
Adultos 0,5-2,5 25-100
RESULTADOS DE UNA BUENA TÉCNICA
RETICULOCITOS PSEUDONUCLEARES

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