Uric Acid liquicolor Cálculo de la concentración del ácido úrico

Suero, plasma
Método PAP A muestra
Análisis enzimático colorimétrico por acido C=8x [mg/dl] o
A [STD]
urico con factor aclarante de lípidos (LCF)
A muestra
Presentación del estuche C = 476 x [µmol/l]
[REF] 10690 4 x 30 ml Estuche completo A [STD]
10691 4 x 100 ml Estuche completo Orina
[IVD] A muestra
1,2
C = 88 x [mg/dl] o
Método A [STD]
Determinación del ácido úrico por reacción con la uricasa. El peróxido de
hidrógeno formado reacciona por la acción catalítica de la peroxidasa con A muestra
ácido 3,5-dicloro-2-hidroxibenzenesulfónico (DCHBS) y 4-aminofenazona C = 5235 x [µmol/l]
(PAP) para producir un complejo rojo-violeta de quinoneimina como A [STD]
indicador.
Características de la ejecución
Principio de la reacción Linealidad: la prueba es lineal hasta concentraciones de 20 mg/dl ó
uricasa 1190 mmol/l. Diluir las muestras con más altas concentraciones 1+1 con
Acido úrico + O2 + 2 H2O allantoína + CO2 + H2O2 solución salina fisiológica (NaCl 0,9%). Multiplicar el resultado por 2.
Las características de ejecución de la prueba pueden ser encontradas en
peroxydasa
el informe de verificación, accesible via:
2 H2O2 + DCHBS + PAP quinoneimina+ HCl + 4 H2O
[Link]/data/gb/vr/[Link] o
Contenidos [Link]/data/gb/vr/[Link]
[RGT] 4 x 30 ml o 4 x 100 ml Reactivo enzimático
Buffer fosfato (pH 7,5) 50 mmol/l Valores de referencia 3
4-aminofenazona 0,3 mmol/l Hombres: 3,4 – 7,0 mg/dl ó 200 - 420 mmol/l
DCHBS 4 mmol/l Mujeres: 2,4 – 5,7 mg/dl ó 140 - 340 mmol/l
Uricasa ≥ 200 U/l Orina: 250 - 750 mg/24h ó 1,5 – 4,5 mmol/24h
Peroxidasa ≥ 1 kU/l
[STD] 3 ml Estándar Control de calidad
Todos los sueros controles con valores de ácido úrico determinados por
Acido úrico 8 mg/dl ó 476 µmol/l este método pueden ser empleados.
Azida de Sodio 0,095 %
Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal
Preparación de reactivos HumaTrol o nuestro suero de origen humano SERODOS.
El [RGT] y el [STD] están listos para el uso.
Automatización
Estabilidad de reactivos Propuestas de aplicación de este kit de reactivo en diferentes analiza-
Los reactivos son estables, aún después de abiertos, hasta su fecha de dores estarán disponibles a petición del cliente. Cada laboratorio es res-
caducidad cuando son almacenados de 2...8°C. Debe evitarse la ponsable de validar la aplicación que ponga en práctica.
contaminación de los reactivos.
Notas
Almacenado de 15...25°C, protegido de la luz, el [RGT] es estable por 2 El estándar contiene azida de sodio (0,095%) como preservante. No
semanas. ingerirlo. Evitar el contacto con la piel y membranas mucosas.
Muestras Literatura
Suero, plasma con heparina ó EDTA, orina. 1. Barham, D., Trinder P., Analyst 97, 142 (1972)
Diluir la orina 1 + 10 con agua destilada. 2. Fossati P. et al., Clin. Chem. 26/2, 227 (1980)
Nota: Las muestras lipémicas generalmente generan turbidez en la 3. Thefeld, L. et al., Dtsch. med. Wschr. 98, 380-384 (1973)
mezcla del reactivo con la muestra, lo que lleva a resultados
elevados falsos. La prueba URIC ACID liquicolor evita estos
resultados elevados falsos a través del Factor Aclarante de SU-URAC INF 106901 E 02-2011-17 |
Lípidos (LCF). El LCF aclara completamente la turbidez causada
por muestras lipémicas.

Ensayo
Longitud de onda : 520 nm, Hg 546 nm
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 20...25°C ó 37°C
Medición: Frente a un blanco de reactivo. Sólo se requiere
un blanco de reactivo por serie.

Esquema de pipeteo
Usar sólo el estándar recomendado por HUMAN (incluido en el estuche).
Pipetear en las cubetas Blanco de reactivo Muestra ó [STD]
Muestra / [STD] 20 µl
[RGT] 1000 µl 1000 µl
Mezclar, incubar 10 minutos de 20...25°C ó por 5 min. a 37°C. Medir la
absorbancia de la muestra / [STD] frente al blanco de reactivo antes de
15 min. ( A).

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Creatinine liquicolor 2. Orina
A muestra
Reacción de Jaffé C = 100 x [mg/dl]
A [STD]
Prueba fotométrica colorimétrica para
mediciones cinéticas de creatinina Concentración de creatinina en orina de 24 horas:
C = mg/dl x ml orina / 24 horas x 0,01 [mg / 24h]
Método sin desproteinización C = mg/24 h x 0,00884 [mmol/24h]
Presentación del estuche
[REF] 10051 200 ml Estuche Completo Depuración de mg creatinina/dl orina x ml orina / 24h
creatinina = [ml/min.]
[IVD] mg creatinina/dl suero x 1440
Método1,2 Conversión de [mg/dl] a [µmol/l] y viceversa:
La creatinina en solución alcalina forma un complejo coloreado rojo-
naranja con ácido pícrico. La absorbancia de este complejo es directa- [mg/dl] x 88,402 = [µmol/l]
mente proporcional a la concentración de creatinina en la muestra. [µmol/l] x 0,0113 = [mg/dl]

Principio Características de la ejecución

Creatinina + Acido Pícrico Complejo Creatinina - picrato Linearidad
La prueba es lineal hasta una concentración de creatinina en suero de
Contenidos, composoción de los reactivos
13 mg/dl ó 1.150 µmol/l, en orina hasta una concentración de 500 mg/dl
[PIC] 1 x 100 ml Acido Pícrico 26 mmol/l ó 44.200 µmol/l.
[NaOH] 1 x 100 ml Hidróxido de Sodio 1,6 mol/l Diluya las muestras con concentración superior en suero, plasma u orina
Corrosivo (R35) (S 26-37/39-45) diluida 1+5 con solución salina (0,9%) y repita la prueba.
[STD] 1 x 5 ml Patrón Multiplique los resultados por 6.
Creatinina 2 mg/dl ó 176,8 mmol/l Las características de ejecución de la prueba pueden consultarse en el
0 0
informe de verificación, accesible vía
Preparación del reactivo (25 C/37 C)
[Link]/data/gb/vr/[Link] o
Medición a 25°C: Diluya [NaOH] con agua destilada en proporción 1+4.
[Link]/data/gb/vr/su-creapdf
Medición a 37°C: Diluya [NaOH] con agua destilada en proporción 1+7.
Almacene la solución en un recipiente plástico. Valores de referencia3,4
Para preparar el reactivo de trabajo, mezcle [PIC] y [NaOH] diluido en Suero [mg/dl] [µmol/l]
proporción 1+1. Hombres 0,6 – 1,1 53 – 97
El [STD] está listo para usar. Mujeres 0,5 – 0,9 44 - 80
Orina 1000 - 1500 mg / 24 horas
Estabilidad de los reactivos
Los reactivos y el hidróxido de sodio diluído permanecen estables hasta la Depuración de creatinina:
fecha de caducidad, aún después de abrir, si se almacenan de 15...25°C. Hombres 98 - 156 ml/min.
Mujeres 95 - 160 ml/min.
Se debe evitar la contaminación.
El reactivo de trabajo, protegido de la luz, permanece estable por Control de calidad
4 semanas de 15...25°C. Se pueden utilizar todos los sueros control con valores de creatinina
determinados por este método. Recomendamos el uso de nuestros
Muestra controles de calidad HumaTrol de orígen animal o SERODOS de orígen
Suero, plasma heparinizado u orina. humano.
Evite la hemolisis!
Automatización
Estabilidad: 24 horas de 2...8°C Proposiciones para la aplicación de los reactivos sobre analizadores están
Diluya la orina 1 + 49 con agua destilada disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la
aplicación en su propia responsabilidad.
Ensayo
Longitud de onda: Hg 492 nm (490 - 510 nm) Notas
Paso óptico: 1 cm 1. La reacción es altamente sensible a la temperatura. La temperatura de
reacción debe mantenerse constante.
Temperatura: 25°C / 37°C)
2. [PIC] es nocivo en contacto con la piel y las membranas mucosas,
Medición: contra aire (aumento de absorbancia) inhalado o ingerido. Si hay contacto con la piel o las membranas
Atempere los reactivos y las cubetas a la temperatura deseada. La mucosas lave con abundante agua. Si se sienta mal, consulte a un
temperatura debe permanecer constante ( 0,5°C) durante la prueba. médico.
3. La prueba puede ser afectada por la presencia de componentes
Esquema de Pipeteo
reductores. La interferencia puede eliminarse parcialmente calentando
Pipetee en las cubetas Semi - micro Macro la orina por un corto periodo de tiempo.
Muestra / [STD] 100 µl 200 µl 4. Un pequeño precipitado en la solución de hidróxido de sodio no tiene
Reactivo de trabajo 1000 µl 2000 µl importancia.
Mezcle e inicie el cronómetro. Después de 30 segundos lea la absor-
bancia A1. Lea la absorbancia A2 exactamente 2 minutos después. Literatura
A2 – A1 = A muestra o A [STD] 1. Mod. method of Bartels H. et al., Clin. Chim. Acta 32, 81 (1971)
2. Mod. method of Popper H. et al., Biochem. Zeitschr. 291, 354 (1937)
Cálculo
1. Suero / plasma 3. Schirmeister J. et al., Dtsch. med. Wschr. 89, 1018 and 1640 (1964)

Por favor use solamente el patrón suministrado con el estuche. 4. Sarre H., Nierenkrankheiten, Thieme-Verl. Stuttg. (1959)

C = 2,0 x
A muestra
[mg/dl] SU-CREA1 INF 105102 E 09-2010-17 |
A [STD]
A muestra
C = 176,8 x [µmol/l]
A [STD]

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Urea liquicolor Esquema de pipeteo
Pipetear en cubetas Blanco de Muestra o
Análisis enzimático colorimétrico para urea reactivo [STD]

Presentación del estuche Muestra /[STD] --- 10 µl

[REF] 10505 100 ml Estuche completo Reactivo enzmático 1a 1000 µl 1000 µl
10506 1000 ml Reactivo 1, enzima, patrón Mezclar, incubar por 5 min. a 20...25°C o por 3 min. a 37°C.
10507 1000 ml Reactivo 2 [RGT2] 1000 µl 1000 µl
10104 9 x 3 ml Patrón Mezclar, incubar por 10 minutos de 20...25°C o por 5 minutos a 37°C.
[IVD] Leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrón (A [STD]) frente a
un blanco de reactivo antes de 60 min.
Método 1,2,3
La urea se hidroliza por acción de la ureasa en presencia de agua para Calcular la concentración de urea y BUN
producir amoníaco y dióxido de carbono. En una reacción de Berthelot AMuestra
modificada, los iones de amonio reaccionan con hipoclorito y salicilato C= x Factor
para formar un complejo verde. El aumento de la absorbancia a 546 ó a A[STD]
578 nm es proporcional a la concentración de urea en la muestra.
Factor para C (UREA) C (BUN)
Contenidos Suero o plasma [mg/dl] [mmol/l] [mg/dl] [mmol/l]
[REF] 10505 10506 10507 10104 80 13,3 37,28 6,2
[RGT1] 100 ml 1000 ml Orina [g/l] [mmol/l] [g/l] [mmol/l]
[RGT2] 100 ml 1000 ml 80,8 1343 37,65 626,2
[ENZ] 1 ml 10 ml
[STD] 3 ml 3 ml 9 x 3 ml Factor de conversión de BUN, urea
C (BUN) = 0,466 x C (Urea)
[RGT1] Reactivo 1
C (Urea) = 2,14 x C (BUN)
Buffer fosfato (pH 7,0) 120 mmol/l
Salicilato de sodio 60 mmol/l Características de la prueba
Nitroprusiato de sodio 5 mmol/l Linealidad:
EDTA 1 mmol/l
Suero / plasma: hasta 400 mg/dl ó 66,6 mmol/l (urea)
[RGT2] Reactivo 2
Orina: hasta 400 g/l ó 6660 mmol/l (urea)
Buffer fosfatos (pH < 13) 120 mmol/l
Muestras con concentraciones superiores de urea deben ser diluidas 1+1
Hipoclorito ≈ 0,6 g/l Cl
con agua destilada. Repetir el ensayo y multiplicar el resultado por 2.
Irrita los ojos y la piel. Mantener fuera del alcance de los niños.
Las características de ejecución de la prueba pueden consultarse en el
En caso de contacto con los ojos, lavarse abundantemente con
informe de verificación, accesible vía
agua y consultar un médico.
[Link]/data/gb/vr/[Link] o
[ENZ] Enzima
[Link]/data/gb/vr/[Link]
Ureasa > 500 kU/l
[STD] Patrón Valores de referencia4,5
Urea 80 mg/dl ó 13,3 mmol/l Suero (urea): 10 - 50 mg/dl ó 1,7 – 8,3 mmol/l
Equivalente a BUN 37,28 mg/dl ó 6,2 mmol/l Orina (urea): 20 - 35 g/24 h ó 333 – 583 mmol/24 h
Azida de sodio 0,095 %
Control de calidad
Preparación de reactivos Todos los sueros control con valores de urea o BUN determinados por este
[RGT2] y [STD] están listos para el uso. método pueden ser empleados.
El reactivo enzimático 1a se prepara mezclando el contenido del frasco Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal
[ENZ] con el frasco [RGT1]. HumaTrol o nuestro suero de origen humano SERODOS como suero de
Por ejemplo 1 ml de [ENZ] + 100 ml de [RGT1] o control de calidad.
10 ml de [ENZ] + 1000 ml de [RGT1]
Automatización
Estabilidad de reactivos Proposiciones para la aplicación de los reactivos sobre analizadores están
Los reactivos y [STD] son estables hasta su fecha de caducidad cuando se disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la
transportan y almacenan de 2...8°C. [RGT1], [RGT2] y [ENZ] son estables aplicación en su propia responsabilidad.
después de ser abiertos por 6 semanas de 2...8°C o por 2 semanas de
Notas
15...25°C. Aún después de abierto, [STD] es estable hasta la fecha de
1. [STD] contiene azida de sodio (0,095%) como preservante. No ingerirlo.
caducidad.
Evitar el contacto con la piel y membranas mucosas.
El reactivo de trabajo (1a) es estable por 4 semanas de 2...8°C o por
2. [RGT2] contiene hipoclorito de sodio en solución alcalina. [RGT2] irrita
2 semanas de 15...25°C.
los ojos, la piel y las membranas mucosas. En caso de contacto con
Debe evitarse la contaminación de reactivos y patrón después de abiertos. ojos, piel y membranas mucosas, lavarse con abundante agua y
consultar un médico.
Muestras
Suero, plasma (todos los anticoagulantes excepto el heparinato de amo- 3. Una medición a los 546 nm es mucho más sensible a interferencias por
nio pueden ser usados) y orina. Diluir la orina 1 + 100 con agua destilada. hemoglobina que a los 578 nm. En este caso debe determinarse
separadamente la concentración de hemoglobina en la muestra.
No usar sueros lipémicos.
Suero o plasma se pueden almacenar hasta 3 días a +4°C. Para un alma- Literatura
cenamiento prolongado, congelar a -20°C. 1. Berthelot M., Report Chem. Applique 1, 284 (1859)
2. Fawcett J.K., Scott J.E.; J. Clin. Path. 13, 156 (1960)
Ensayo
Longitud de onda: Hg 578 nm, 570 - 600 nm, 546 nm 3. Tobacco A. et al., Clin. Chem. 25, 336 (1979)
Paso de luz: 1 cm 4. MacKay E.M., MacKay L.L., J. Clin. Invest. 4, 295 (1927)
Temperatura: 20...25°C, 37°C 5. Sarre H., Nierenkrankheiten, Georg Thieme Verlag Stuttgart (1959)
Medición: Frente a un blanco de reactivo. Solo se requiere un
blanco de reactivo por serie. SU-URLQC INF 1050501 E 09-2010-20 |

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Urea liquiUV Esquema de pipeteo
Por favor utilizar únicamente el estándar recomendado por HUMAN
Método GLDH (dentro del estuche o disponible por separado [REF] 10104)
Método completamente enzimático para Procedimiento partida con sustrato
determinaciones cinéticas de urea Pipetear en cubetas Blanco de reactivo (Br) Muestra o [STD]
Presentación del estuche Muestra / [STD] --- 10 µl
[REF] 10521 8 x 50ml Estuche completo [ENZ] 1000 µl 1000 µl
10104 9 x 3ml Estándar Mezclar, incubar por 1 minuto aproximadamente.
[IVD] [SUB] 250 µl 250 µl

Método 1,2,3 Mezclar, leer la absorbancia de la muestra/[STD] después de 30 segun-

dos (A1). Activar el cronómetro y leer exactamente 1 minuto después
La urea es hidrolizada en presencia de agua y ureasa para producir amo-
(A2). Calcular la diferencia de absorbancia:
nio y dióxido de carbono. El amonio producido en esta reacción se combi-
na con 2-oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato-deshidroge- AMuestra/[STD] = (A2 - A1) - ABr.
nasa (GLDH) para formar glutamato y NAD+. La prueba ha sido mejorada Procedimiento partida con muestra
de forma que la GLDH es la enzima límite. La disminución de la absorban-
Pipetear en las cubetas Blanco de reactivo (Br) Muestra ò [STD]
cia es proporcional a la concentración de urea dentro de los intervalos de
tiempo dados. Ya que la prueba cinética es muy rápida, ha sido diseñada Muestra / [STD] --- 10 µl
para ser realizada preferiblemente en analizadores. Reactivo de trabajo 1000 µl 1000 µl
Principio de la reacción Mezclar, leer la absorbancia de la muestra/[STD] después de 30 segun-
ureasa dos (A1). Activar el cronómetro y leer exactamente 1 minuto después
Urea + 2 H2O 2 NH4+ + CO32- (A2). Calcular la diferencia de absorbancia:
AMuestra/[STD] = (A2 - A1) - ABr.
GLDH
2-oxoglutarato + NH4+ L-glutamato + H2O + NAD+ Calculos de la concentración de urea
+ NADH Suero, plasma
C = 80 X A muestra / A [STD] [mg/dl] o
Contenidos
[ENZ] 8 x 40 ml Enzimas C = 13,3 A muestra / A [STD] [mmol/l]
Buffer Tris (pH 7,8) 125 mmol/l Orina
ADP 0,88 mmol/l C = 80,8 X A muestra / A [STD] [mg/dl] o
Ureasa 20 kU/l C = 1340 X A muestra / A [STD] [mmol/l]
GLDH 0,3 kU/l
Azida de sodio 0,095 % Factores de conversion para BUN / urea
[SUB] 8 x 10 ml Sustrato C (BUN) = 0,466 X C (urea) C (urea) =2,14 X C (BUN)
2-oxoglutarato 25 mmol/l Características de la ejecución
NADH 1,25 mmol/l Linealidad
Azida de sodio 0,095 %
La prueba es lineal hasta 300 mg/dl ó 50 mmol/l.
[STD] 1 X 3 ml Estándar
La linealidad depende del analizador utilizado.
Urea 80 mg/dl
Muestras con concentraciones superiores deben diluirse 1 + 1 con agua
ó 13,3 mmol/l
destilada y se debe repetir la prueba. Multiplicar los resultados por 2.
Azida de sodio 0,095 %
Las características de ejecución de la prueba pueden ser encontradas en
Preparación del reactivo el informe de verificación, accesible vía
[ENZ] y [STD] están listos para usar y se pueden aplicar directamente en [Link]/data/gb/vr/[Link] o
analizadores automatizados (procedimiento partida con sustrato). [Link]/data/gb/vr/[Link]
El reactivo de trabajo (procedimiento partida con muestra) se prepara
mezclando 4 partes de [ENZ] con 1 parte de [SUB]. Control de calidad
Se pueden emplear todos los sueros control con valores de urea
Ej: 40 ml [ENZ] + 10 ml [SUB].
determinados por este método.
Estabilidad del reactivo Recomendamos el uso de nuestro suero control HumaTrol de origen
Cuando se almacenan los reactivos entre 2...8°C, se mantienen estables animal o nuestros SERODOS de origen humano.
hasta la fecha de caducidad, aún después de abrir. Se debe evitar la con-
taminación de los reactivos. Automatización
Propuestas de aplicación de este kit de reactivo en diferentes analiza-
El reactivo de trabajo se mantiene estable por 5 días entre 15...25°C y por
dores estarán disponibles a petición del cliente. Cada laboratorio es res-
4 semanas entre 2...8°C.
ponsable de validar la aplicación que ponga en práctica.
Muestra
Notas
Suero, plasma, excepto plasma heparinato de amonio, o orina.
Todos los reactivos contienen azida de sodio (0,095%) como preservativo.
Diluir la orina 1 + 100 con agua destilada (resultados X 101) No ingerir, evitar el contacto con la piel y las membranas mucosas.
Ensayo Literatura
Longitud de onda: 340nm, Hg 334 nm, 365 nm 1. Kassirer, J. P., New Eng. J. Med. 285, 385 (1971)
Paso óptico: 1 cm
2. Talke, H., Schubert, G. E., Klin. Wochenschr. 43, 174 (1965)
Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C
Medición: Contra blanco de reactivo (Br). 3. Tietz, N. W., Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd. Edition (1987),
676 - 679, W. B. Saunders Company Philadelphia
Sólo se necesita un blanco de reactivo por serie.
Cinética de 2 puntos. 4. MacKay, E. M., MacKay, L. L, J. Clin. Invest. 4, 295 (1927)
4,5
5. Sarre, H., Nierenkrankheiten, Georg Thieme Verlag Stuttgart (1959)
Valores de referencia
Suero: 10 - 50 mg/dl
Orina: 20 - 35 g/24h
o
o
1,7 – 8,3 mmol/l
333 - 583 mmol/24h
SU-URLUV INF 1052101 E 02-2011-09 |

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Albumin liquicolor Factor de conversion
Para convertir los resultados obtenidos en concentraciones HUMAN
Prueba fotométrica colorimétrica para utilizadas anteriormente, aplique la siguente fórmula:
albúmina Concentración (CRM 470) x 1,218 = Concentración (Human)

Método BCG Características de la ejecución

Linearidad
Presentación del estuche
[REF] 10560 1 x 1000 ml Estuche completo La prueba es lineal hasta concentraciones de albúmina de 6,5 g/dl ó 65 g/l.
Para concentraciones más elevadas diluya la muestra 1+1 con solución
156004 4 x 100 ml Estuche completo
salina fisiológica (NaCl 0,9%). Multiplique el resultado por 2.
[IVD]
Las características de la ejecución de esta prueba pueden consultarse en el
Metodo1, 2 informe de verificación, accesible vía:
El verde de bromocresol forma con la albúmina en buffer de citrato un [Link]/data/gb/vr/[Link] o
complejo coloreado. La absorbancia de este complejo es directamente [Link]/data/gb/vr/[Link]
proporcional a la concentración de la albúmina en la muestra.
Valores de referencia en suero o plasma
Contenidos 3,8 – 5,1 g/dl ó 38 - 51 g/l
[RGT] 4 x 100 ml ó 1 x 1000 ml Reactivo de color
Buffer citrato (pH 4,2) 30 mmol/l Control de calidad
Verde de bromocresol 260 μmol/l Pueden ser empleados todos los sueros con valores determinados por este
[STD] 1 x 3 ml Patrón método. Recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal
Albúmina 4 g/dl ó 40 g/l HumaTrol o nuestro suero de origen humano SERODOS.
Azida de sodio 0,095 %
Automatización
[STD] se estandarizó con respecto al material de referencia certificado CRM-
Proposiciones para la aplicación de los reactivos sobre analizadores están
DA470k/IFCC.
disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la aplica-
ción en su propia responsabilidad.
Preparación de reactivos
[RGT] y [STD] están listos para usar. Notas
1. La prueba no es influenciada por valores de bilirrubina hasta 20 mg/dl.
Estabilidad de los reactivos
Por cada 100 mg/dl de hemoglobina se observa un incremento de
[RGT] y [STD] son estables hasta la fecha de caducidad cuando se
albúmina de 0,1 g/dl, por lo que debe evitarse la hemólisis marcada.
almacenan de 2...25°C.
2. La hemólisis y la lipemia marcada interfieren. Se debe realizar un blanco
Después de abiertos debe evitarse la contaminación.
de muestra pipeteando 10 μl de muestra con 1000 μl de solución salina
Muestras fisiológica (NaCl 0,9%) y medirse frente a agua destilada. La
absorbancia de este blanco de muestra debe restarse a la absorbancia
Suero, plasma con EDTA ó heparina.
de la muestra.
Estabilidad en suero: de 2...8°C hasta 1 mes,
3. El reactivo de color y el patrón contienen azida de sodio. No ingiéralos.
de 15...25°C hasta 1 semana. Evite el contacto con la piel y las membranas mucosas.
Ensayo Literatura
Longitud de onda: Hg 546 nm, 578 nm 1. Rodkey F. L., Clin. Chem. 10, 606 (1964)
Paso de luz: 1 cm 2. Doumas B. T. et al., Clin. Chim. Acta 31, 87 (1971)
Temperatura: 20...25°C
Medición: Frente a un blanco de reactivo. SU-ALBU INF 156001 E 06-2012-17 |
Se requiere un blanco de reactivo por serie.

Esquema de pipeteo
Pipetee en las cubetas
Blanco de reactivo Muestra ó [STD]
Muestra / [STD] --- 10 μl
[RGT] 1000 μl 1000 μl
Mezcle, incube por 5 minutos de 20...25°C. Mide la absorbancia de la
muestra y del patrón frente al blanco de reactivo antes de
30 minutos (ΔA).

Cálculo de la concentracion de la albumina

ΔAmuestra
C=4x ⎯⎯⎯⎯⎯⎯ [g/dl]
ΔA[STD]
ó
ΔAmuestra
C = 40 x ⎯⎯⎯⎯⎯⎯ [g/l]
ΔA[STD]

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Total Protein Iiquicolor Características de la ejecución
Linealidad
Prueba colorimétrica fotométrica por La prueba es lineal hasta concentraciones de 12 g/dl ó 120 g/l. Diluir la
proteinas totales muestra con altas concentraciones 1 + 1 con solución salina fisiologica
(0,9%). Multiplicar el resultado por 2.
Método de biuret Las características de la ejecución de la prueba pueden ser encontradas en
Presentación del estuce el informe de verificación, accesible vía
[REF] 10570 1 x 1000 ml Estuche completo [Link]/data/gb/vr/[Link] o
157004 4 x 100 ml Estuche completo [Link]/data/gb/vr/[Link]
[IVD]
Valores de referencia 2
1
Método Bebés con nacimiento normal: 4,6 - 7,0 g/dl ó 46 - 70 g/l
Los iones cúprico con las proteínas y peptidas en solución alcalina forman Niños de 3 años y adultos: 6,6 - 8,7 g/dl ó 66 - 87 g/l
un complejo púrpura. La absorbancia de este complejo es proporcional a la
concentración de proteínas en la muestra. Control de calidad
Todos los sueros controles con valores determinados por este método
Contenidos
pueden ser empleados.
[RGT] 4 x 100 ml ó 1 x 1000 ml Reactivo de color
Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal
Hidróxido de sodio 200 mmol/l HUMATROL o nuestro suero de origen humano SERODOS como control de
Tartrato de sodio y potasio 32 mmol/l calidad.
Sulfato de cobre 12 mmol/l
Yoduro de potasio 30 mmol/l Automatización
Irritante R 36/38 Proposiciones para la aplicación de los reactivos sobre analizadores están
[STD] 1 x 3 ml Estándar disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la
Proteínas 8 g/dl ó 80 g/l aplicación en su propia responsabilidad.
Azida de sodio 0,095 %
Notas
Preparación de reactivos 1. El blanco de muestra para sueros claros o incolores es equivalente a
[RGT] y [STD] están listos para su uso y son estables aún después de
0,2 g/dl y es por lo tanto insignificante. Un blanco de muestra debe ser
abiertos hasta su fecha de caducidad cuando son almacenados de 2...25°C. determinado para sueros visiblemente hemolíticos, ictéricos o lipé-
Evitese la contaminación después de abierto. micos, pipeteando 20 μl de muestra en 1000 μl de solución salina
fisiológica y leer frente a agua dest. La absorbancia del blanco de
Muestras muestra debe ser restada de la absorbancia de la muestra.
Suero, plasma con heparina ó EDTA. 2. El reactivo de color contiene hidróxido de sodio que es irritante. En caso
de contacto con la piel y membranas mucosas lavar con abundante
Estabilidad en suero agua.
De 2...8°C hasta 1 mes, 15...25°C hasta 1 semana. 3. [STD] contiene azida de sodio como preservante (0,095%). No inhalarlo.
Evitese el contacto con la piel y membranas mucosas.
Ensayo
Longitud de onda: Hg 546 nm, 520 – 580 nm 4. Con el tiempo, pueden formarse sedimentos en [RGT] que no tienen
ninguna influencia en su buen funcionamiento. No incluir estos
Paso de luz: 1 cm
sedimentos en la mezcla de reacción.
Temperatura: 20...25°C
Medicion: Frente al blanco de reactivo. Sólo un blanco de Literatura
reactivo es requerido por serie. 1. Weichselbaum, T. E., Amer. J. Clin. Path. 16, 40-48 (1946)
2. Josephson, B., Gyllenswärd, C., Scand. J. Clin. Lab. Invest. 9, 29 (1957)
Esquema de pipeteo
Pipetear en las cubetas Blanco de reactivo Muestra / [STD] SU-PROT INF 157001 E 05-2007-16 |
Muestra / [STD] ⎯ 20 μl
[RGT] 1000 μl 1000 μl
Mezclar, incubar por 10 minutos, de 20...25°C. Medir la absorbancia de
la muestra y del [STD] frente al blanco de reactivo dentro de 30 minutos
(ΔA).

Cálculo
1. Con factor

C = 19 x ΔA [g/dl] ó C = 190 x ΔA [g/l]

2. Con estándar

ΔA muestra
C = 8 x ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ [g/dl]
ΔA [STD]
ó
ΔA muestra
C = 80 x ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ [g/l]
ΔA [STD]

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GOT (ASAT) IFCC mod. Procedimiento 2 *
Pipetear en las cubetas 25°C, 30°C 37°C
Prueba liquiUV Muestra 200 µl 100 µl
Aspartato aminotransferasa (EC [Link]) Reactivo de trabajo 1000 µl 1000 µl
Presentación del estuche Mezclar, leer la absorbancia después de 1 minuto y al mismo tiempo
[²REF²] 12211 16 x 5 ml Estuche M-Test completo activar el cronómetro. Leer nuevamente la absorbancia exactamente
12011 10 x 10 ml Estuche completo después de 1, 2 y 3 minutos.
12021 8 x 50 ml Estuche completo * Método semi micro; para métodos macro duplicar los volúmenes.
12031 4 x 250 ml Estuche completo
Cálculos
[²IVD²]
Para cambios de absorbancia por minuto ( A/min.) de 0,06 a 0,08 (Hg
Método1 365 nm) o de 0,12 a 0,16 (Hg 334 nm, 340 nm) (procedimiento 1+2) sólo
emplear la medición de los 2 primeros minutos en el cálculo(1 minuto de
Método cinético para la determinación de la actividad de ASAT de
incubación, 2 minutos de medición).
acuerdo a las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC
(Federación Internacional de Química Clínica).Sin activación por U/l = A/min x partida con muestra partida con substrato
piridoxalfosfato. Longitud de onda 25°C, 30°C 37°C 25°C, 30°C 37°C
Principio de la reacción Hg 334 nm 971 1780 1173 2184
GOT 340 nm 952 1745 1151 2143
2-oxoglutarato + L-aspartato L-glutamato + oxalacetato Hg 365 nm 1765 3235 2132 3971
MDH Factor de conversión de unidades tradicionales U/l a unidades SI, kat/l:
Oxalocetato + NADH + H+ L- malato + NAD+ 1 U/l = 16,67 x 10-3 µkat/l
1 µkat/l = 60 U/l
Contenidos
[²REF²] 12211 12011 12021 12031 Características de la ejecución
Linealidad
[BUF] 16 x 4 ml 10 x 8 ml 8 x 40 ml 4 x 200 ml
Si la diferencia de absorbancia por minuto ( A/min.) o la actividad excede
[SUB] 1 x 16 ml 2 x 10 ml 8 x 10 ml 4 x 50 ml
[BUF] Buffer / reactivo enzimático Longitud de onda [nm] A/min 25°C, 30°C [U/l] 37°C [U/l]
Buffer TRIS (pH 7,9) 100 mmol/l Hg 365 0,080 170 320
L-aspartato 300 mmol/l Hg 334/340 0,160 190 350
LDH 1,13 kU/l
MDH 0,75 kU/l diluir 0,1 ml de muestra con 0,9 ml de solución salina fisiológica (NaCl
Azida de Sodio 0,095 % 0,9%) y repetir el ensayo usando esta dilución. Multiplicar el resultado por
10.
[SUB] Sustrato
En sueros con muy alta actividad, la absorbancia inicial puede ser muy
2-oxoglutarato 60 mmol/l
baja dado que la mayor parte del NADH ya puede haberse consumado
NADH 0,9 mmol/l
antes de la primera lectura. En este caso, diluir la muestra como descrito
Azida de Sodio 0,095 %
antes.
Preparación de reactivos y estabilidad Las características de ejecución de la prueba pueden ser encontradas en
Procedimiento 1, partida con sustrato el informe de verificación, accesible vía
[Link]/data/gb/vr/[Link] ó
Los reactivos están listos para usar.
[Link]/data/gb/vr/[Link]
Los reactivos son estables, aún después de abiertos, hasta su fecha de
caducidad cuando se almacenan de 2...8°C protegidos de la luz. Evitar la Valores de referencia5,6
contaminación. Temperatura 25°C 30°C 37°C IFCC*
Procedimiento 2, partida con muestra Hombres hasta 18 U/l 25 U/l 37 U/l 35
[²REF²] 12031 y 12021: Poner el contenido de un frasco [SUB] en un frasco Mujeres hasta 15 U/l 21 U/l 31 U/l 31
de [BUF], mezclar cuidadosamente. * con activación par priridoxalfosfato
[²REF²] 12211: Pipetear 1 ml del frasco [SUB] en un frasco de [BUF], mezclar
cuidadosamente. Control de calidad
Pueden ser empleados todos los sueros control con valores de GOT
[REF²] 12011: Pipetear 2 ml del frasco [SUB] en un frasco de [BUF], mezclar
determinados por este método.
cuidadosamente.
Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal
El reactivo de trabajo es estable 4 semanas de 2...8°C y 5 días de 15...25°C. HumaTrol o nuestro suero de origen humano SERODOS como control de
calidad.
Muestras
Suero, plasma con heparina o EDTA. Automatizacion
¡Evitar la hemólisis ! Proposiciones para la aplicación de los reactivos sobre analizadores están
Disminución de la actividad a los 3 días a +4°C ~ 8%, disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la
a 20...25°C ~ 10%. aplicación en su propia responsabilidad.

Ensayo Notas
Longitud de onda: Hg 365 nm, 340 nm ó Hg 334 nm [BUF] y [SUB] contienen azida de sodio (0,095%). No ingerirlo. Evitar el
Paso de luz: 1 cm contacto con la piel y membranas mucosas.
Temperatura: 25°C, 30°C o 37°C
Literatura
Medición: Frente al aire (disminución de la absorbancia)
1. Clin. Chim. Acta 70, 19-42 (1976)
Llevar los reactivos y las cubetas a la temperatura deseada. La 2. Wallnöfer H. et al.; Synopsis der Leberkrankheiten, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974
temperatura debe permanecer constante ( 0,5°C) durante la prueba. 3. Thefeld, W. et al.; Dtsch. med. Wschr. 99, 343 (1974)
4. Schumann, G. et al., Clin. Chem. Lab. Med. 40, 725-733 (2002)
Procedimiento 1 *
5. Schumann, G., Klauke, R., Clin. Chim. Acta 327, 69-79 (2003)
Pipetear en cubetas 25°C, 30°C 37°C 6. Fischbach, F., Zawta, B., Klin. Lab. 38, 555-561 (1992)
Muestra 200 µl 100 µl
[BUF] 1000 µl 1000 µl EN-GOTLI INF 1221101 E 02-2011-18 |
Mezclar, incubar por 5 minutos a la temperatura deseada
[SUB] 250 µl 250 µl
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 minuto y al mismo tiempo
activar el cronómetro. Leer de nuevo la absorbancia exactamente
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después de 1, 2 y 3 minutos. Max-Planck-Ring 21 · 65205 Wiesbaden · Germany
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GPT (ALAT) IFCC mod. Procedimiento 2 *
Pipetear en las cubetas 25°C, 30°C 37°C
Prueba liquiUV Muestra 200 μl 100 μl
Alanina aminotransferasa (EC [Link]) Reactivo de trabajo 1000 μl 1000 μl
Presentación del estuche Mezclar, leer la absorbancia después de 1 minuto y al mismo tiempo
[REF] 12212 16 x 5 ml Estuche M-test completo activar el cronómetro. Leer nuevamente la absorbancia exactamente
12012 10 x 10 ml Estuche completo después de 1, 2 y 3 minutos.
12022 8 x 50 ml Estuche completo * Método semi micro; para método macro duplicar los volúmenes.
12032 4 x 250 ml Estuche completo
Cálculos
[²IVD²]
Para cambios de absorbancia por minuto (ΔA/min.) entre 0,06-0,08 (Hg
Método1 365 nm) o de 0,12-0,16 (Hg 334 nm, 340 nm) emplear la medición de los 2
Método cinético para la determinación de la actividad de la ALAT (GPT) de primeros minutos en el cálculo (1 minuto de incubación, 2 minutos de
acuerdo a las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC medición).
(Federación Internacional de Química Clínica). Sin activación por U/l = ΔA/min x partida con muestra partida con sustrato
piridoxalfosfato.
Longitud de 25°C, 30°C 37°C 25°C, 30°C 37°C
Principio de la reacción onda
GPT Hg 334 nm 971 1780 1173 2184
2-oxoglutarato + L-alanina L-glutamato + piruvato 340 nm 952 1745 1151 2143
LDH Hg 365 nm 1765 3235 2132 3971
Piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+ Factor de conversión de unidades tradicionales U/l en unidades SI kat/l
Contenidos 1 U/l = 16,67 x 10-3 μkat/l
1 μkat/l = 60 U/l
[²REF²] 12212 12012 12022 12032
[BUF] 16 x 4 ml 10 x 8 ml 8 x 40 ml 4 x 200 ml Características de la ejecución
[SUB] 1 x 16 ml 2 x 10 ml 8 x 10 ml 4 x 50 ml Linearidad

[BUF] Buffer / Reactivo enzimático Si la diferencia de absorbancia por minuto (ΔA/min.) o la actividad excede
Buffer TRIS (pH 7,4) 125 mmol/l Longitud de onda [nm] ΔA/min 25°C, 30°C [U/l] 37°C [U/l]
L-alanina 625 mmol/l Hg 365 0,080 170 320
LDH ≥ 1,5 kU/l
Azida de Sodio 0,095 % Hg 334/340 0,160 190 350

[SUB] Sustrato diluir 0,1 ml de la muestra con 0,9 ml de solución salina fisiológica (NaCl
2-oxoglutarato 75 mmol/l 0,9%) y repetir el análisis usando esta dilución. Multiplicar el resultado por
NADH 0,9 mmol/l 10.
Azida de Sodio 0,095 % En sueros con muy alta actividad, la absorbancia inicial puede ser muy
bajo dado que la mayor parte del NADH ya puede haberse consumado
Preparación del reactivo y estabilidad antes de la primera lectura. En este caso, diluir la muestra como descrito
Procedimiento 1; partida con sustrato antes.
Los reactivos están listos para el uso. Las características de ejecución de la prueba pueden ser encontradas en el
Los reactivos son estables, aún después de abiertos, hasta su fecha de informe de verificación, accesible vía
caducidad cuando se almacenan de 2...8°C protegidos de la luz. [Link]/data/gb/vr/[Link] o
Evitar la contaminación del reactivo! [Link]/data/gb/vr/[Link]

Procedimiento 2; partida con muestra Valores de referencia5,6

[²REF²] 12032 y 12022: Poner el contenido de un frasco [SUB] en un frasco Temperatura 25°C 30°C 37°C IFCC*
[BUF], mezclar cuidadosamente. Hombres hasta 22 U/l 30 U/l 42 U/l 45 U/l
[²REF²] 12212: Pipetear 1 ml del frasco [SUB] en un frasco [BUF] respectiva, Mujeres hasta 17 U/l 23 U/l 32 U/l 34 U/l
mezclar cuidadosamente. * con activación por piridoxalfosfato
[REF²] 12012: Pipetear 2 ml del frasco [SUB] en un frasco [BUF] respectiva,
Control de calidad
mezclar cuidadosamente.
Todos los sueros controles con valores de GPT determinados por éste
El reactivo de trabajo es estable 4 semanas de 2...8°C; 5 días de 15...25°C. método pueden ser empleados.
Muestras Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal
Suero, plasma con heparina o con EDTA. HumaTrol o nuestro suero de origen humano SERODOS como control de
calidad.
Evitar la hemólisis!
Disminución de la actividad con 3 días a +4°C: ~ 10% Automatización
a 20...25°C: ~ 17% Proposiciones para la aplicación de los reactivos sobre analizadores están
disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la
Ensayo aplicación en su propia responsabilidad.
Longitud de onda: Hg 365 nm, 340 nm, o Hg 334 nm
Paso de luz: 1 cm Nota
Temperatura: 25°C, 30°C o 37°C [BUF] y [SUB] contienen azida de sodio (0,095%). No ingerirlo. Evitar el
Medición: Frente a aire. (disminución de la absorbancia) contacto con la piel y membranas mucosas.
Llevar los reactivos y cubetas a la temperatura deseada. La temperatura Literatura
debe permanecer constante (± 0,5°C) durante la prueba. 1. Clin. Chim. Acta 105, 147-172 (1980)
Procedimiento 1 * 2. Wallnöfer H. [Link].; Synopsis der Leberkrankheiten, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974
3. Thefeld, W. et al.; Dtsch. med. Wschr. 99, 343 (1974)
Pipetear en cubetas 25°C, 30°C 37°C 4. Schumann, G. et al., Clin. Chem. Lab. Med. 40, 725-733 (2002)
Muestra 200 μl 100 μl 5. Schumann, G., Klauke, R., Clin. Chim. Acta 327, 69-79 (2003)
[BUF] 1000 μl 1000 μl 6. Fischbach, F., Zawta, B., Klin. Lab. 38, 555-561 (1992)

Mezclar, incubar por 5 minutos a la temperatura deseada

[SUB] 250 μl 250 μl EN-GPTLI INF 1221201 E 10-2011-19 |
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 minuto y al mismo tiempo
activar el cronómetro. Leer nuevamente la absorbancia exactamente
después de 1, 2 y 3 minutos.

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 ++++ Nuevo ¼ ++++ ¡Lea cuidadosamente el texto marcado! ++++

liquicolor Procedimiento 2, partida con muestra*

Pipetear en las cubetas 25°C, 30°C, 37°C
Buffer DEA, DGKC Muestra 20 µl
Monoester ortofosfórico fosfohidrolasa Reactivo de trabajo 1000 µl
(alcalina optimizada) (EC [Link]) Mezclar, leer la absorbancia después de 1 minuto y al mismo tiempo
activar el cronómetro. Leer la absorbancia exactamente después 1, 2 y
Presentación del estuche
3 minutos.
[REF] 12217 16 x 5 ml Estuche M-Test completo
* Metodo semi micro; para métodos macro multiplicar por 2.
12017 10 x 10 ml Estuche completo
12027 8 x 50 ml Estuche completo Cálculos
12037 4 x 250 ml Estuche completo A partir de las lecturas calcular la media del cambio de absorbancia por
minuto (A/min).
[²IVD²]
Calcular la actividad de la fosfatasa alcalina en la muestra usando el
Método3 siguiente factor:
"Método estandarizado optimizado" de acuerdo a las recomendaciones U/l = A/min x 3433 (procedimiento 1, partida con substrato)
de la Asociación Quimica Clínica Alemana (Deutsche Gesellschaft für = A/min x 2757 (procedimiento 2, partida con muestra)
Klinische Chemie).
Factor de conversión para unidades tradicionales (U/l) en SI unidades
Principio de la reacción (Kat/l):
F. alcalina 1 U/l = 16,67 x 10-3 µkat/l
p-nitrofenilfosfato + H2O fosfato + p-nitrofenol 1 µkat/l = 60 U/l

Contenidos Características de la ejecución

[²REF²] 12217 12017 12027 12037 Linearidad
[BUF] 16 x 4 ml 10 x 8 ml 8 x 40 ml 4 x 200 ml Sí el cambio de absorbancia por minuto (A/min) excede 0,250, diluir
[SUB] 1 x 16 ml 2 x 10 ml 8 x 10 ml 4 x 50 ml 0,1 ml de la muestra con 0,5 ml solución salina fisiológica (0,9%) y repetir
el ensayo usando esta dilución. Multiplicar el resultado por 6.
[BUF] Buffer
Buffer diethanolamina (pH 10,35 ± 0,2) 1,25 mol/l Los datos típicos de ejecución de la prueba pueden ser encontrados en el
Cloruro de magnesio 0,625 mmol/l informe de verificación, accesible vía

[SUB] Substrato [Link]/data/gb/vr/[Link] ó

p-nitrofenilfosfato 50 mmol/l [Link]/data/gb/vr/[Link]

Preparación y estabilidad de los reactivos Valores de referencia

Procedimiento 1, partida con substrato Temperatura 25°C U/I 30°C U/I 37°C U/I
Los reactivos están listos para su uso. Mujeres1 40-190 49-232 64-306
Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad cuando se Hombres1 50-190 61-232 80-306
almacenan de 2...8°C. Debe evitarse la contaminación de los reactivos. Niños hasta 15 años2 up to 400 up to 488 up to 644
Procedimiento 2, partida con muestra Niños hasta 17 años2 up to 300 up to 366 up to 483
[²REF²] 12027 y 12037: Poner el contenido de un frasco [SUB] en un frasco
[BUF], mezclar cuidadosamente. Control de calidad
Todos los sueros controles con valores de fosfatasa alcalina determinados
[²REF²] 12217: Pipetear 1 ml del frasco [SUB] en un frasco [BUF] respectiva,
por este método pueder ser empleados.
mezclar cuidadosamente.
Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal
[REF²] 12017: Pipetear 2 ml del frasco [SUB] en un frasco [BUF] respectiva,
HumaTrol ó nuestro suero de origen humano SERODOS como control de
mezclar cuidadosamente.
calidad.
El reactivo de trabajo es estable por 4 semanas de 2...8°C y por 5 días a
15...25°C. El reactivo de trabajo se debe mantener protegido de la luz. Automatizacion
Proposiciones para la aplicación de los reactivos sobre analizadores están
Muestras disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la
Suero ó plasma heparinizado aplicación en su propia responsabilidad.
Evitar la hemolisis!
Notas
Disminución de la actividad dentro de 7 días a 4°C: 0%, a 20...25°C: 10% Durante la reacción se produce p-nitrofenol. Esta sustancia es venenosa
cuando se inhala o cuando se absorbe a través de la piel. Si la mezcla de
Ensayo
reacción entra en contacto con la piel o membranas mucosas, lavarse
Longitud de onda: Hg 405 nm (400-420 nm)
abundantemente con agua y consultar con un médico.
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 25°C, 30°C ó 37°C Literatura
1. Schlebusch, H. et al., Dtsch. med. Wschr. 99, 765 (1974)
Medición: Leer frente al aire (incremento de absorbancia)
2. Rick, W., Klinische Chemie und Mikroskopie, 6th Edition, Springer
Llevar los reactivos y cubetas a la temperatura deseada. La temperatura Verlag, Berlin, 294 (1990)
debe permanecer constante ( 0,5°C) durante el análisis.
3. Z. Klin. Chem. Klin. Biochem. 8, 658 (1970), 10, 182 (1972)
Procedimiento 1, partida con substrato*
Pipetear en las cubetas 25°C, 30°C, 37°C EN-AP-LI INF 1221701 E 05-2014-17M |
Muestra 20 µl
[BUF] 1000 µl
Mezclar, incubar por 1 minuto a la temperatura deseada
[SUB] 250 µl
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 min y al mismo tiempo
activar el cronómetro. Leer la absorbancia exactamente después de 1,
2 y 3 minutos.

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!!"#$!"#$"%&!&'
%62'*3?6*$;$*
Pipette into cuvettes 25°C, 30°C or 37°C
Colorimetric Test Sample 100 µl
L-!-Glutamyl Transferase (EC [Link]) Working reagent 1000 µl
Mix, read the absorbance after 1 minute and at the same time start
%&'(&)*$+,-*. the stop-watch. Read the absorbance again exactly after 1, 2 and 3
9
!"#$% 12213 16 x 5 ml Complete M-Test Kit minutes.
12013 10 x 10 ml Complete Test Kit * Semi-micro method; for macro methods multiply volumes by 2.
12023 8 x 50 ml Complete Test Kit
12033 4 x 250 ml Complete Test Kit 9&8'?8&0,25
!&'(% Calculate the !-GT activity in the sample using the following factors:
/*0123$1,2 U/l = %A/min x 405 nm
Kinetic colorimetric method for the determination of !-GT activity Reagent Start 1421
according to Persijn & van der Slik. Standardised against Sample Start 1158
recommended IFCC method.
Conversion factor from traditional units (U/l) in SI-units (kat/l):
4*&'0,25$%6,5',78*
!-GT
1 U/l = 16,67 x 10-3 µkat/l
L-!-glutamyl-3-carboxy- """"# L-!-glutamyl-glycylglycine + 1 µkat/l = 60 U/l
4-nitroanilide + glycylglycine 5-amino-2-nitro-benzoate
%*6@26D&5'*$91&6&'0*6,.0,'.
9250*50. Linearity
If the absorbance change per minute (%A/min.) exceeds 0.200 at
!)"#$)% :;;:< :;=:< :;=;< :;=<<
Hg 405 nm dilute 0.1 ml of the sample with 0.5 ml physiological saline
!*+$% 16 x 4 ml 10 x 8 ml 8 x 40 ml 4 x 200 ml (0.9%) and repeat the assay using this dilution. Multiply the result by 6.
!,+*% 1 x 16 ml 2 x 10 ml 8 x 10 ml 4 x 50 ml Typical performance data can be found in the Verification Report,
!*+$% >?@@*6 accessible via:
TRIS buffer (pH 8.25) 100 mmol/l [Link]/data/gb/vr/[Link]
Glycylglycine 150 mmol/l [Link]/data/gb/vr/[Link]
!,+*% +?A.06&0*
4*@*6*5'*$F&8?*.$3,4,6,7
L-!-glutamyl-3-carboxy-4-nitroanilide 20 mmol/l Temperature 25°C 30°C 37°C IFCC
6
IFCC
7

4*&)*50$%6*7&6&0,25$&53$+0&A,8,0B Men 6-28 U/l 8-46 U/l 11-61 U/l < 55 < 66
%62'*3?6*$:$C,01$6*&)*50$.0&60 Women 4-18 U/l 7-29 U/l 9-39 U/l < 38 < 39
The reagents are ready for use.
The reagents are stable, even after opening, up to the stated expiry G?&8,0B$9250628
date when stored at 2...8°C. Contamination of the reagents must be All control sera with !-GT values determined by this method can be
avoided! employed.
We recommend to use our animal serum based HI/E#4JK or our
%62'*3?6*$;$C,01$.&D78*$.0&60 human serum based +L4JMJ+ quality control sera.
!)"#$)%$:;=<< and :;=;<: Pour the entire contents of one bottle !,+*%
into one bottle !*+$%, mix thoroughly. E?02D&0,25
!)"#$)%$:;;:<: Pipette 1 ml from bottle !,+*% into one bottle !*+$%, mix Proposals to apply the reagents on analysers are available on request.
thoroughly. Each laboratory has to validate the application in its own responsibility.
!)"#$)%$:;=:<: Pipette 2 ml from bottle !,+*% into one bottle !*+$%, mix
thoroughly. N20*
The working reagent is stable for 6 weeks at 2...8°C and 5 days at 1. !*+$% and !,+*% contain sodium azide (0.095%) Do not swallow.
15...25°C. Avoid contact with skin and mucous membranes.
2. During the reaction 5-amino-2-nitrobenzoate is produced. This is
+7*',D*5 poisonous when inhaled, swallowed or when absorbed through the
Serum, EDTA plasma. skin. If the reaction mixture comes into contact with skin or
Avoid hemolysis! mucous membranes, wash with plenty of water.
No loss of activity within 7 days at +4°C and 20...25°C.
4*@*6*5'*.
E..&B 1. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. :O, 421 (1976)
Wavelength: Hg 405 nm (400 - 420 nm) 2. Z. Klin. Chem. Klin. Biochem. :;, 228 (1974)
Optical path: 1 cm 3. Persijn, J. P., van der Slik, W., J. Clin. Chem. Clin. Biochem. :O,
Temperature: 25°C, 30°C or 37°C 421 (1976)
Measurement: against air (increasing absorbance) 4. Bulletin SGKC, Suppl. Vol. 27/1 (1986)
Warm the reagent and the cuvettes to the desired temperature. 5. Schumann, G. !"#$%&' Clin. [Link]. Med. O=, 734-738 (2002)
Temperature must be kept constant ($ 0.5°C) for the duration of the 6. Schumann, G. !"#$%&' Clin. Chem. Acta <;P, 69-79 (2003)
test. 7. Abicht, K. !"#$%&' Clin. Chem. Lab. Med. <Q, S1-S448 (2001)
8. Lee, D.H. !"#$%&, Clin. Chem. OQ, 1358-1366 (2003)
%62'*3?6*$:$* 9. ISO 15223 Medical devices-Symbols to be used with medical
device labels, labelling and information to be supplied
Pipette into cuvettes 25°C, 30°C or 37°C
Sample 100 µl
!*+$% 1000 µl
Mix, incubate for 1 min. at 25°C, 30°C or 37°C
!,+*% EN-GT-LQ
!
250 µl
INF 1221301 GB
Mix, read the absorbance after 1 minute and at the same time start 01-2004-13
the stop-watch. Read the absorbance again exactly after 1, 2 and 3
minutes.

Human Gesellschaft für Biochemica und Diagnostica mbH

Max-Planck-Ring 21 - D-65205 Wiesbaden - Germany
Telefon: +49 6122 9988 0 - Telefax: +49 6122 9988 100 - eMail: human@[Link]
 +1,1'A363,,7A3/1'53,-201
!"#"$%!"&'()*'!"#$"%&!&' Pipetear en las cubetas Blanco Muestra
Prueba fotométrica para bilirrubina directa !(*"% 1000 µl 1000 µl
!(+"% --- 1 gota*
(D) y bilirrubina total (T)
Mezclar cuidadosamente, añadir muestra dentro de 2 minutos.
Método modificado Jendrassik/Gróf
Muestra 100 µl 100 µl
+,-.-/01234/'5-6'-.0728- Mezclar, incubar a temperatura ambiente -=1201?-/0-'J'?3/K Leer
!"#$% 10740 2 x 100 ml Estuche completo la absorbancia de la muestra frente al blanco (#A546).
!&'(% * 1 gota $ 40 µl

+,3/2393:'5-'61',-12234/ ;L6276:.
La bilirrubina reacciona con el ácido sulfanílico diazotado (DSA) Calcular la concentración de bilirrubina total y directa usando el factor
formando un color rojo. La absorbancia de este color a 546 nm es 13,0.
directamente proporcional a la concentración de bilirrubina en la C= #A 546 x 13,0 = mg/dl
muestra. Los glucoronidos de la bilirrubina solubles en agua [mg/dl] x 17,1 = [µmol/l]
reaccionan directamente con DSA mientras la bilirrubina “indirecta”
conjugada con albúmina reacciona sólo en la presencia de un ;1,120-,M.0321.'5-'61'9,7-A1
acelerador. Linearidad: El ensayo es lineal hasta 25 mg/dl. Para concentraciones
Bilirrubina total = Bilirrubina directa + Bilirrubina indirecta de bilirrubina que exceden de 25 mg/dl diluir la muestra 1+4 con
solución salina fisiológica (0,9%) y repetir la prueba. Multiplicar el
Acido sulfanilico +nitrito de sodio !!" DSA resultado por 5.
Bilirrubina + DSA directa !!" azobilirrubina DIRECTA Los datos típicos de ejecución de la prueba pueden ser encontra-dos
Bilirrubina + DSA +acelerador !!" azobilirrubina TOTAL en el informe de verificación, accesible vía
[Link]/data/gb/vr/[Link] o
;:/0-/35: [Link]/data/gb/vr/[Link]
!)*"% <'='<>>'?6'$-1203@:'5-'A363,,7A3/1'0:016
B0191'A61/21C N16:,-.'5-',-O-,-/231
Acido sulfanílico 14 mmol/l Bilirrubina total [mg/dl] [µmoI/l]
Acido clorhídrico 300 mmol/l
Recién nacido, hasta: 5 85,5
Cafeína (acelerador) 200 mmol/l
Benzoato de sodio 420 mmol/l 5 días, hasta: 12 205
!)+"% <'='D'?6'$-1203@:'*E/30,30: 1 mes, hasta: 1,5 25,6
B0191'A61/21C Adultos, hasta: 1,1 18,8
Para la determinación de bilirrubina total Bilirrubina directa
Nitrito de sodio 390 mmol/l
Adultos, hasta: 0,25 4,3
(Xn, R 22)
!(*"% <'='<>>'?6'$-1203@:'5-'A363,,7A3/1'53,-201
;:/0,:6'5-'2163515
B0191'1F76C
Acido sulfanílico 14 mmol/l Pueden ser empleados todos los sueros control con valores de
Acido clorhídrico 300 mmol/l bilirrubina determinados por este método.
!(+"% <'='D'?6'$-1203@:'(E/30,30: Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero para control de
calidad de origen animal P%HQ*$R# y el suero control de origen
B0191'1F76C
humano SI$R(RS.
Para la determinación de bilirrubina directa
Nitrito de sodio 25 mmol/l
&:01.
+,-91,1234/'G'-.01A363515'5-'6:.',-1203@:. 1. Es importante asegurarse que el reactivo de bilirrubina y el
reactivo de nitrito sean muy bien mezclados antes de adicionar la
Ambos reactivos y las soluciones de nitrito están listos para su uso.
muestra.
Ambos reactivos y las soluciones de nitrito son, aún después de
2. Los niveles de bilirrubina se reducen si la muestra se expone a la
haberse abierto, hasta la fecha de caducidad y almacenados de
luz. La hemólisis también puede causar niveles bajos de
15...25°C. Debe evitarse la contaminación.
bilirrubina por un efecto inhibitorio de la hemoglobina con la
reacción diazo.
H7-.0,1.
Suero ó plasma con heparina. #30-,107,1
Evitar la hemólisis! Las muestras deben estar protegidas de la luz.
1. Jendrassik, L., Gróf, P., Biochem. Z. T<, 297'(1938)
Estabilidad: Cuando se almacena la muestra protegida de la luz de
2. Van der Bergh, A. A., Muller, P., Biochem. Z. UU, 90 (1916)
2...8°C la bilirrubina es estable por 3 días.

I/.1G:
Longitud de onda: 546 nm
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 20...25°C
Medición: Frente a un blanco de muestra.
+,:2-53?3-/0:
+1,1'A363,,7A3/1'0:016
Pipetear en cubetas Blanco Muestra
!)*"% 1000 µl 1000 µl
!)+"% --- 1 gota*
Mezclar cuidadosamente, incubar de 5 minutos.
Muestra 100 µl 100 µl SU-BILDT

Mezclar, incubar a temperatura ambiente de 10 a 30 min.

Leer la absorbancia de la muestra, frente al blanco (#A546).
INF 1074001 E
11-2004-14 !
* 1 gota $ 40 µl

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