GUÍA DE LABORATORIO Nº 1:
MEMBRANA PLASMÁTICA Y TRANSPORTE CELULAR
INTRODUCCIÓN:
Para alimentarse, la célula necesita aporte de materia desde el medio extracelular, y a su
vez vierte diversas sustancias al medio. El H 2O y muchas otras sustancias atraviesan con
facilidad la membrana plasmática. En algunos casos, esto implica trabajo activo de la
membrana para evitar pérdida de iones moléculas fundamentales para la viabilidad de la
célula. Esta función de mantenimiento del medio interno se denomina Homeostasis llevado
a cabo por la membrana plasmática.
El intercambio de sustancias a través de la membrana plasmática es realizado por el
proceso de Difusión.
DIFUSIÓN: El desplazamiento de moléculas de soluto de una región de mayor concentración
a zonas de menor concentración. Este movimiento se hace en forma continua y azarosa
debida a la energía térmica inherente propia de las moléculas.
La posibilidad de que una molécula pase del lado A al B o viceversa es igual pero como hay
más moléculas en A, el número total de moléculas que se mueven del lado A al B será
mayor que el número que realiza el camino opuesto; de manera que la cantidad de
moléculas en el lado A disminuye, mientras que en el lado B aumenta. Este proceso se
denomina Difusión Neta que continuará hasta alcanzar un equilibrio dinámico, pero
estando en equilibrio dinámico no está en difusión neta, y en ambos lados la concentración
es igual.
La Membrana Plasmática separa dos medio de diferente composición y concentración
química. Las moléculas que se encuentran a ambos lados de ella tendrán a difundir
libremente si la membrana no ofreciera una cierta resistencia al paso de las mismas, es
decir que terminarían desapareciendo las diferencias.
GRADIENTE DE CONCENTRACIÓN: Es una secuencia gradual de concentraciones que permite
que el soluto difunda del lugar más concentrado (de la solución Hipertónica) hacia donde
el soluto está menos concentrado (hasta la solución Hipotónica).
La membrana plasmática separa dos medios de diferente composición-concentración
química. Hay compuestos que pasan a través de ella libremente y otras que no pueden
hacerlo, ya sea por el espesor, composición química o por la estructura de la membrana.
Mecanismos De Transporte A Través De La Membrana Plasmática:
El desplazamiento de moléculas de soluto de una solución hipertónica a una hipotónica
se denomina difusión.
DIFUSIÓN PASIVA: se produce directamente a través de la bicapa lipídica, sin resistencia que
es decir que la membrana es muy permeable a esa sustancia; y no requiere de energía
metabólica, y este tipo de difusión se produce gracias a la energía acumulada a favor del
gradiente de concentración.
DIFUSIÓN FACILITADA: si el movimiento es a favor del gradiente de concentración, es decir
por difusión; pero el soluto no puede difundirse por la bicapa lipídica, sino que lo hace a
través de proteínas integrales (formadas oligoméricas) como lo son
- Los transportadores o Carriers.
- Los canales: Transportadores de iones
OSMOSIS: El movimiento de moléculas de agua se hace a través de la membrana desde la
solución Hipotónica hacia la solución Hipertónica.
Cuando dos compartimientos tienen distintas concentraciones de solutos y están separados
por un membrana semipermeable, el H 2O difunde de la solución que tiene menor
concentración de soluto (y por lo tanto de mayor concentración de H 2O –mayor potencial
hídrico–) hacía una región de mayor concentración de soluto (y por lo tanto menor
concentración de H2O –menor potencial hídrico–), este proceso se denomina Osmosis.
La presencia del soluto disminuye el potencial hídrico creando un gradiente de potencial
hídrico a lo largo del cual difunde el H2O.
· La solución que tiene < [ ] de soluto = Hipotónica; > [ ] H2O
· La solución que tiene > [ ] de soluto = Hipertónica; < [ ] H2O.
Difusión Facilitada
Existen proteínas integrales que atraviesan toda la membrana y actúan como:
-Transportadores (permeasas o Carriers) y
-Canales.
En ellas difunden sustancias que no lo hacen a través de la bicapa lipídica.
Transportadores O Carriers:
El soluto se une a la Proteína Transportadora o Canal provocando en esta un cambio
conformacional en su estructura terciaria y cuaternaria que permite que el soluto sea
liberado en el entorno opuesto; y el soluto es disociado de la proteína transportadora, y esta
última retorna a su estado anterior para repetir el ciclo.
Canales:
Los canales están formados por Proteínas Integrales, que comunican el citoplasma con el
medio extracelular. Estos canales son pequeños y selectivos permitiendo el paso de Iónes
Inorgánicos.
Hay varios tipos de canales iónicos según los mecanismos que los regulan, o se
diferencian por:
-Canales Catiónicos: K+, Na+, Ca2+, etc… y
-Canales Aniónicos: Cl-
Según la carga eléctrica del ión puede atravesarlos. Dentro de los canales iónicos más o
menos específicos (para iones mono o divalentes), existen canales que son altamente
específicos para una especia iónica particular. Los iones se mueven de acuerdo con el
gradiente de concentración y eléctrico. El transporte neto de un ión es en el sentido de
alcanzar su equilibrio electroquímico, siempre hacia un estado enérgico menor.
El transporte siempre es pasivo, porque las compuertas del canal por el que se transportan
no están abiertas todo el tiempo, es decir que el flujo iónico es regulado.
Transporte Activo Por Bombas
En este proceso de transporte de sustancias, las moléculas ubicadas en una zona de menor
concentración se transportan hacia una zona de mayor concentración:
Es decir que las moléculas se mueven en contra de su gradiente de concentración,
con gasto de energía, proveniente del ATP.
Un ejemplo de esto es la Bomba de Na+/K+: Esta bomba es una proteína que atraviesa la
bicapa lipídica, la cual tiene capacidad enzimática de hidrolizar ATP, es decir que tiene
capacidad de ATPasa liberando la energía necesaria para el transporte de iones.
El Na+ tiene una concentración diez veces mayor en el exterior de la célula que en el interior.
Este ión ingresa a la célula por una proteína integral a través de difusión facilitada (a favor
de su gradiente) y la bomba saca el Na + en contra de su gradiente, gracias al ATP
hidrolizado para obtener energía.
Por cada ATP Hidrolizado salen 3 Iones Na+, y entran 2 iones K+.
El gradiente que genera y mantiene la bomba es vital para la célula, y la Bomba es
responsable en mantener el equilibrio hídrico en consecuencia el volumen de la célula; y
fundamental en el transporte de difusión facilitada de monosacáridos y de aminoácidos
(interviniendo en varios Simportes y Antiportes).
En el interior de la célula hay moléculas de cargas negativas que por cierto motivo no
pueden salir, entonces son equilibradas por cationes que quedan atrapados dentro de la
célula.
Esta alta concentración de iones y moléculas producirá una gran entrada de H2O a través
de la bicapa lipídica por el efecto de osmosis; sin embargo, la bomba de Na+/K+ está
permanentemente expulsando Na + que el K+ que ingresa
Hay otras Bombas de transporte, como:
-Transporte Activo de:
· Bomba de Ca2+: en el músculo.
· Bomba de I- (Iodo): en la glándula tiroides.
Transporte En Masa
Los materiales que Ingresan a la célula lo hacen por Endocitosis, y existen tres tipos de
Exocitosis:
- Pinocitosis: célula “tomando”.
- Fagocitosis: célula “comiendo” y
- Mediadores Por Receptores: LDL.
Los materiales que Salen de la célula lo hacen por Exocitosis.
OBJETIVOS
a) Entender la importancia de la membrana para a vida celular.
b) Observar procesos relacionados con el transporte de membrana.
ACTIVIDADES PRÁCTICAS:
1. Observación de Membrana Plasmática como barrera selectiva: Coloque unas gotas
de levadura (Saccharomyces cerevisiae) en un porta objeto y agregue una gota de azul
de metileno, ponga encima un cubre objeto, elimine el exceso de colorante. Repita la
experiencia anterior utilizando una suspensión de levaduras previamente hervidas por
cinco minutos, compare los resultados. Esquematice lo observado.
Observaciones:
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2. Observación de Eritrocitos Humanos: Empleando una lanceta estéril obtenga una gota
de sangre, colóquela en un portaobjetos limpio y seco, ponga el cubreobjetos y realice la
observación correspondiente al microscopio. Repita el paso 1 pero ahora agregando a su
muestra de sangre 2 gotas de agua destilada. Repita el paso 1, y adicione a la muestra 2
gotas de las siguientes soluciones: NaCl al 0.9% (observe y dibuje a 400x), NaCl al 10%
(observe y dibuje a 400x).
Observaciones:
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Observaciones:
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Observaciones:
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Cuestionario
1. Mencione las diferencias del proceso de osmosis entre la célula vegetal y animal.
Explique.
2. Describe lo que sucede en una célula cuando se coloca en un medio: a)
hipotónico, b) isotónico, c) hipertónico.
3. Explique en qué consisten los fenómenos de ósmosis y de difusión.
4. ¿Por qué los sueros fisiológicos que se aplican a pacientes intravenosamente
deben ser Isotónicos?
