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UNIVERSIDAD NACIONAL DE BARRANCA ESTUDIOS GENERALES BIOLOGÍA
GUÍA Nº 12
DIVISIÓN CELULAR: MITOSIS EN RAÍZ DE Allium cepa “CEBOLLA”
Objetivos:
● Observar e interpretar las diferentes fases de la mitosis en células vegetales.
● Identificar las fases de la mitosis.
Materiales/reactivos/equipo:
Laboratorio
Microscopio óptico
●
Lunas de reloj – cápsula de porcelana
●
Portaobjeto y cubre objetos
●
Pinzas finas
●
Papel filtro
●
Orceína A y orceína B u Orceína acética clorhídrica
●
Mecheros de alcohol
●
Estudiante:
Bulbo de cebolla (raicillas)
●
Laminas cubre objeto
●
Bisturí
●
PROCEDIMIENTO
Unos cuatro días antes de realizar la práctica, se colocará un bulbo de cebolla tapando la boca de un frasco, que se llena hasta que el agua toca
la base de la cebolla. Se logra así el desarrollo de numerosas raicillas jóvenes, cuando éstas tengan una longitud de 3 A 4 centímetros es el
momento adecuado para hacer la preparación.
Procedimiento para orceína acético clorhídrico
1. Cortar con unas tijeras finas, los 5 últimos milímetros de las raicillas, depositándolas en un vidrio de reloj
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2. Cubrir la muestra con orceína acética clorhídrica. Aproximadamente unos 2 cm de orceína.
3. Dejar que actué el colorante durante 10 minutos.
DOCENTES:
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4. Tomar el vidrio de reloj por los bordes, ayudándonos de una pinza de madera y calentarlo suavemente a la llama del mechero, evitando la ebullición
y esperar hasta que se emitan vapores tenues.
5. Con las pinzas finas tomar con cuidado una raíz y colocarla sobre una porta, cortar los últimos 2 ó 3 milímetros y desechar el resto.
6. Colocar el cubre-objetos y encima una almohadilla hecha con papel de filtro sobre la que se ejerce presión con el dedo pulgar, primero suave, después
más intensa, para aplastar la muestra, técnica conocida como squash
7. Aspirar con el papel de filtro el exceso de colorante.
8. Observar al microscopio primero a pequeño aumento y luego con aumentos mayores, recorriendo diversos campos para descubrir en las células
observadas, las distintas fases de la mitosis.
Procedimiento para orceína A y orceína B
1. Corta con las tijeras unos 2-3 mm del extremo de las raicillas y deposítalo en un vidrio de reloj en el que se han vertido 2 - 3 ml de orceína A.
2. Calienta suavemente el vidrio de reloj a la llama del mechero durante unos 4 minutos, evitando la ebullición, hasta la emisión de vapores tenues.
3. Con las pinzas toma uno de los ápices o extremos de las raicillas y colócala sobre un portaobjetos, añade una gota de orceína B y deja actuar durante
1 minuto.
4. Coloca el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con el mango de una aguja enmangada da unos golpecitos sobre el cubre sin romperlo de
modo que la raíz quede extendida.
5. Sobre la preparación coloca unas tiras de papel de filtro, 5 o 6. Pon el dedo pulgar sobre el papel de filtro en la zona del cubreobjetos y haz una suave
presión, evitando que el cubre resbale. Si la preparación está bien asentada no hay peligro de rotura por mucha presión que se realice.
6. Observa al microscopio.
Observación al microscopio
La preparación presenta el aspecto de una dispersión de células por todo el campo que abarca el microscopio. Se observarán células en distintas fases o estados de
división celular. Con esta técnica de tinción se ven los cromosomas impregnados por la orceína en color morado. El aspecto reticulado, así como el mayor tamaño
de algunos núcleos, corresponde a las células que se encontraban en los procesos iniciales de la división mitótica.
RESULTADOS: FASES DE LA MITOSIS
1. PROFASE
Muestra biológica:
Observación:
Coloración:
Objetivo:
DOCENTES:
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Aumento:
2. METHAFASE
Muestra biológica:
Observación:
Coloración:
Objetivo:
Aumento:
DOCENTES:
4
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3. ANAFASE
Muestra biológica:
Observación:
Coloración:
Objetivo:
Aumento:
4. TELOFASE
Muestra biológica:
Observación:
Coloración:
Objetivo:
Aumento:
DOCENTES:
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CUESTIONARIO
1. ¿Porque se emplean células meristemáticas para la práctica de mitosis?
2. ¿Si las células vegetales no poseen centriolo como realiza la mitosis?
3. Describe las fases de la mitosis que has observado y su significado
4. ¿Explique qué sucede en cada fase diga la característica más importante?
5. ¿Por qué los cromosomas se tiñen de morado?
6. ¿Qué es la citocinesis?
7. ¿En qué tipo de células se lleva a cabo la meiosis?
8. ¿Explique por qué se emplea el colorante orceina A y orceína B para observar las diferentes fases de la mitosis?
9. Elabore una lista de 10 especies vegetales y 10 especies animales indicando en cada una de ellas el número de cromosomas?
Referencias:
DOCENTES:
