GUÍA DE TRABAJOS

PRÁCTICOS

BIOLOGÍA

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

UNER

2024
Cátedra de Biología. FCA-UNER Guía de Trabajos Prácticos 2024

Integrantes

Casco V. H., Sánchez C. I., Sangoy Puntin, N., Re, D.A., Gregorutti, V.C.

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RECOMENDACIONES GENERALES PARA EL DESARROLLO DE LOS

TRABAJOS PRÁCTICOS

Para lograr un máximo aprovechamiento de los prácticos a realizar, será necesario cumplir con ciertas
pautas mínimas que se detallan a continuación:
⮚ Deberá realizar una lectura previa obligatoria del tema teórico vinculado con el práctico a realizar,
prestando especial atención a la técnica, los pasos a seguir y sus fundamentos.
⮚ En cada trabajo práctico se detallará el material a utilizar, cuyas características principales deberán
conocerse. Véase apunte de elementos de laboratorio.
⮚ Usar con precisión el lenguaje oral y escrito.
⮚ Se espera participación activa e inclusiva.
⮚ Deberán tomar nota de los contenidos teóricos abordados en los trabajos prácticos. Las presentaciones
expuestas por las docentes no estarán disponibles en el Campus.
⮚ En caso de encontrar en la guía de TP términos nuevos y/o desconocidos, anotarlos y consultar luego con
las docentes.
⮚ Las actividades de los cuestionarios que no se completen durante el desarrollo del práctico, quedarán
como tarea a realizar por el alumno. Se fomenta que asistan a clases de consulta por cualquier duda.

RECOMENDACIONES GENERALES PARA EL MANEJO EN EL

LABORATORIO

Deberán cumplirse rigurosamente todas las normas de seguridad que se indican:

⮚ En lo referente a la manipulación de productos químicos: no oler, no acercar a los ojos, ni a la boca.
➢ Controlar el manejo de llaves de gas, agua, mecheros, electricidad, etc.
➢ Antes de comenzar a trabajar deberá controlarse el material en lo referente a su funcionamiento y estado
de limpieza.

SALA DE MICROSCOPÍA
➢ No ingresar con mate, alimentos o agua. Sólo útiles para tomar nota.
➢ Todo el material, especialmente los instrumentos delicados, como lupas y microscopios, deben manejarse
con cuidado evitando los golpes o el forzar sus mecanismos.

UTILIZACIÓN DE MATERIAL DE VIDRIO

➢ Manipularlos con precaución.
➢ Rotular con marcador al solvente evitando el uso de corrector.
➢ Entregar al docente el descarte de material por rotura.

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MATERIAL DE LABORATORIO

Una gran variedad de materiales y reactivos del laboratorio, serán empleados en la realización de cada
trabajo práctico. A continuación, repasaremos cuáles son los que se emplearan con mayor frecuencia en
el desarrollo de las actividades de laboratorio de biología, señalando su función.

Tubo de ensayo
Tubo cilíndrico de vidrio con un extremo abierto y el otro
cerrado y redondeado. Se utiliza en los laboratorios para
contener muestras líquidas o sólidas, las cuales se pueden
someter a reacciones químicas u otras pruebas.

Gradilla
Herramienta que puede ser de metal o madera.
Se utiliza para sostener y almacenar gran cantidad de tubos
de ensayo.

Pinzas de madera
También llamadas pinzas para tubos de ensayo.
Se utilizan para sujetarlos mientras se calientan o manipulan
con otros reactivos.

Colorante Azul de Metileno

El azul de metileno o cloruro de metiltionina es un
compuesto de forma líquida de color azul.
Se utiliza para teñir células (ej.: animales y vegetales) para
su mejor observación en microscopio.

Portaobjeto y cubreobjeto
Elementos de vidrio.
Portaobjeto
Cubreobjeto El portaobjeto se utiliza para extender sobre su superficie la
muestra (preparado) que luego será observada en el
microscopio óptico. El cubreobjetos es una lámina delgada
transparente, generalmente de cristal, que se coloca sobre
la preparación microscópica para protegerla y facilitar su
observación.

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Bisturí

También llamado lanceta, es un instrumento en forma de

cuchillo pequeño, de hoja fina, puntiaguda,
extremadamente afiliada.
Se utilizan esencialmente de corte o incisión debido a sus
hojas extremadamente afiladas.

Pinza Bruselas de punta puntiaguda

Elemento de precisión de acero inoxidable.

Se utiliza para sujetar, inspeccionar y realizar montaje de
pequeñas estructuras.

Tijera
Elemento de acero inoxidable
Se utiliza para disección, así como también para cortar y
separar tejidos.

Caja de Petri

Material de vidrio o plástico que consta de una base poco

profunda y una tapa.
Se utiliza para estudiar microorganismos (hongos,
bacterias), contener un medio de crecimiento (medio de
cultivo) para cultivar.

Piseta

Frasco cilíndrico de plástico o vidrio con tapa que contiene

un tubo flexible. No volumétrico.
Se utiliza para contener y administrar algún disolvente que
se encuentre en su interior. En el laboratorio de Biología se
empleará con agua destilada.

Pipeta Pasteur

Dispositivo de plástico de volumen conocido (ej.: 2 o 1 ml).

Se utiliza para trasvasar pequeñas cantidades de líquidos.

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TRABAJO – PRÁCTICO Nº 1
HERRAMIENTAS PARA EL ESTUDIO DE LAS CÉLULAS
UNIDAD TEMÁTICA: LA INVESTIGACIÓN EN BIOLOGÍA CELULAR. HERRAMIENTAS DE BIOLOGÍA CELULAR.

La biología celular es la rama de la biología que busca comprender la forma, función y comportamiento
de la célula. El progreso de esta disciplina científica depende, en parte, del desarrollo de técnicas e
instrumentos experimentales que permiten esclarecer la estructura de la célula y su funcionamiento.
En este primer Teórico-Práctico se estudiarán tres de las múltiples técnicas utilizadas para comprender la
subestructura celular:
1. FRACCIONAMIENTO SUBCELULAR DE CÉLULAS EUCARIOTAS
2. CULTIVO DE CÉLULAS
3. MICROSCOPÍA FOTÓNICA Y ELECTRÓNICA
El tema se puede repasar en el siguiente enlace: https://youtu.be/pBc0dcnP3ig. Asimismo, se hará
especial hincapié en el microscopio como herramienta básica de estudio de la célula. El conocimiento del
uso y manejo del microscopio es de importancia para la formación académica ya que, este instrumental
se empleará en diversas asignaturas de la carrera.

1. FRACCIONAMIENTO SUBC ELULAR DE CÉLULAS EUCARIOTAS

Aunque el microscopio es la herramienta más empleada en el estudio de la biología celular, permitiendo

la observación detallada de la estructura celular, este instrumento no resulta suficiente para definir las
funciones de los componentes subcelulares. Es por ello que para el conocimiento de estos componentes
resulta necesario aislar organelas celulares, en grandes cantidades que permitan su detallado estudio.

RUPTURA CELULAR Y LIBERACIÓN DE SUS ORGANELAS Y OTROS CONTENIDOS

El paso inicial en la purificación de las estructuras subcelulares (organelas u otros componentes) es la
ruptura de la membrana plasmática y de la pared celular, si se trabaja con células vegetales. Para ello, las
células son suspendidas en una solución de pH y concentración salina adecuados en una combinación de
sales similar en composición del interior celular. Posteriormente, se rompe la membrana plasmática de
las células en un agitador a altas revoluciones o exponiendo las células a sonido de alta frecuencia, proceso
conocido como sonicación. La ruptura de las células también puede lograrse utilizando el flujo osmótico
debido a que la membrana plasmática es altamente permeable al agua, y pobremente permeable a las
sales y a otras moléculas pequeñas (solutos). Por lo tanto, cuando las células son ubicadas en una solución
hipotónica, el agua fluye a su interior, hinchando la célula y facilitando su ruptura posterior.
La ruptura celular produce una mezcla de componentes celulares en suspensión conocido como
“homogenato”. Generalmente, la solución celular es dejada a 0 °C para obtener una mejor preservación
de las enzimas y de otros constituyentes. A partir de esta suspensión de organelas, es posible recuperar
aquellas que son de interés para el estudio.

SEPARACIÓN DE ORGANELAS POR CENTRIFUGACIÓN

La mayoría de los procedimientos de fraccionamiento comienzan con centrifugación diferencial a
velocidades crecientes (centrifugación a velocidad diferencial). Las diferentes velocidades de
centrifugación permiten la sedimentación de varios componentes celulares (principalmente las organelas

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subcelulares) separándolos parcialmente debido a sus diferentes tamaños. Los núcleos y partículas virales
pueden ser purificados completamente.
Después de cada centrifugación a la velocidad y tiempo apropiados, el sobrenadante obtenido puede ser
centrifugado a mayor velocidad. Cada fracción, denominada pellet, puede ser re-suspendida y mejor
separada por otra centrifugación, llamada centrifugación por gradiente de densidad en equilibrio. La
centrifugación diferencial no genera fracciones de organelas totalmente puras. La figura 1 muestra los
pasos descriptos anteriormente.

Figura 1. Procedimiento para la separación de organelas por centrifugación. Los diferentes tubos muestran el orden de
separación de las organelas subcelulares de acuerdo a la velocidad de centrifugación aplicada.

La centrifugación por gradiente de densidad en equilibrio (figura 2) separa los componentes celulares de
acuerdo a su densidad (cantidad de masa contenida en un determinado volumen). La fracción impura de
organelas se deposita en la superficie de una solución que contiene un gradiente de una sustancia densa
no iónica, tal como la sacarosa o el glicerol.

Figura 2. Separación de componentes celulares de acuerdo a su densidad. En el tubo de la derecha se muestra la ubicación
de las organelas de acuerdo a su densidad.

2. CULTIVO DE CÉLULAS

Otra herramienta de la biología celular es el cultivo de células. El cultivo de células es una técnica que
permite comprender los procesos que ocurren en la célula y tiene aplicaciones biotecnológicas. La
utilización de la técnica presenta complejidad diferencial de acuerdo con el tipo de célula considerada.
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El cultivo de células de organismos unicelulares procariotas (bacterias) o eucariotas (levaduras) resulta

relativamente sencillo de llevar adelante. El cultivo de células animales se utiliza también en
investigaciones de líneas celulares animales y requiere, a diferencia de las anteriores citadas, mayor
infraestructura y muchos cuidados para evitar las contaminaciones con organismos indeseados. Esto en
parte se debe a que carecen de pared celular, y a que la duración de su ciclo celular es mayor.
El cultivo de células vegetales se utiliza para propagar numerosas especies usadas en el campo de la
Agronomía. El procedimiento se inicia con la obtención de un callo a partir de una célula meristemática.
Un callo se define como una masa de células indiferenciadas, que bajo las condiciones de crecimiento
adecuadas puede formar tejidos y órganos de la especie vegetal. La figura 3 muestra las diferentes etapas
en la obtención de un individuo a partir de un callo. Así, finalmente, los organismos genéticamente
idénticos obtenidos de un organismo se denominan clones. Las primeras especies vegetales sobre las que
se trabajó fueron las ornamentales, pero cultivos de especies de citrus también son propagadas por este
medio. El nivel de infraestructura, cuidados y destreza técnica que se necesita para este tipo de cultivo es
intermedio entre lo requerido para cultivar bacterias y lo requerido para cultivar células animales, ya que
también son susceptibles a las contaminaciones principalmente por el ataque de hongos, causando
finalmente la muerte del cultivo. Además, el procedimiento involucra la utilización de hormonas vegetales
para desdiferenciar células y medios de cultivo específicos hasta generar una planta que será pasada a
tierra para que continúe su desarrollo.

Figura 3. Etapas en la producción de una planta a partir de un callo.

3. MICROSCOPÍA FOTÓNICA Y ELECTRÓNICA

La compleja jerarquía o niveles de organización de la materia viva, se caracteriza por poseer estructuras
de diferentes tamaños o dimensiones. Los límites que separan el estudio de los sistemas biológicos de
diferentes dimensiones están impuestos artificialmente por el poder de resolución de los instrumentos
utilizados para su observación.
Para poder compatibilizar las “dimensiones celulares” con el alcance del ojo humano se desarrollaron
instrumentos (lupas y microscopios) que permitieron explorar aquellos campos de la Biología en los que
el tamaño del objeto de estudio requiere ser magnificado (aumentado) para su observación. La figura 4
muestra diferentes tamaños de sistemas biológicos.

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Figura 4. Tamaño de diferentes niveles de organización de los sistemas biológicos.

En la observación de estructuras biológicas se emplean unidades de medida más pequeñas que las que se
utilizan en la vida diaria. Las conocemos en la siguiente tabla:

Tabla 1. Unidades de medidas empleadas en biología

UNIDADES ABREVIATURA RELACIÓN RELACIÓN con RESPECTO al

METRO

Milímetro mm 0.001 m 10-3 m

Micrómetro μm 0.001 mm 10-6 m

Nanómetro nm 0.001 μm 10-9 m

Angstrom Å 0.0001 μm 10-10 m

El ojo humano sólo puede discriminar dos puntos separados por más de 0,1 mm (100 µm) de distancia. La
mayoría de las células tienen un tamaño menor. Las células eucariotas miden entre 10 y 30 µm de
diámetro, es decir entre 3 y 10 veces menos que el poder de resolución del ojo humano; mientras que las
células procariotas son más pequeñas aún. Para poder observar elementos tan pequeños, es necesario
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disponer de lentes de aumento. Según la complejidad de los sistemas ópticos empleados para observar
estructuras tan pequeñas, estos se pueden clasificar en:
⮚ Microscopio simple: aquel que está constituido por una sola lente.
⮚ Microscopio compuesto: tiene dos lentes o sistemas de lentes. La primera se denomina objetivo
y se sitúa cerca del objeto a observar. La otra lente es el ocular, por donde se observa.
Los avances tecnológicos permitieron desarrollar microscopios cada vez más complejos, que son utilizados
con diferentes fines. A lo largo de la carrera se empleará el microscopio óptico en diferentes asignaturas.

LUPA BINOCULAR
Con la lupa binocular o microscopio estereoscópico sólo se observan superficies, este permite una visión
tridimensional de los objetos y la diferenciación de sus colores, pero no se obtienen aumentos totales
mayores de 1µ. Las partes de una lupa se muestran en la figura 5.

Figura 5. Lupa binocular. Se señalan las partes del instrumental.

Una lupa cuenta con: cabeza binocular, distancia interpupilar variable de 55 - 75 mm, par de oculares 10X,
objetivos de 2X y 4X, enfoque macrométrico bilateral, sustentación en columna sobre la base con fijación
de altura, base con dos platinas: blanco/negro y transparente, sobre la que se coloca la muestra a
observar; pinzas de sujeción del preparado a observar, iluminación incidente por lámpara incorporada,
llave interruptora en la base.

PASOS A SEGUIR PARA OBSERVAR CON LA LUPA BINOCULAR

● Ajustar la lupa moviendo el objetivo de modo que el menor aumento quede frente al observador.
● Colocar el material sobre la platina hasta que quede debajo del objetivo.
● Iluminar, encendiendo la lámpara incorporada a la lupa o una acondicionada para tal uso.
● Aproximar los ojos a los oculares.
● Separar o juntar los oculares acomodándolos al observador.
● Enfocar moviendo el tornillo macrométrico que acerca o aleja el objetivo a la platina (según el
espesor del material será necesario aumentar o disminuir la distancia).

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MICROSCOPIO ÓPTICO
Las piezas del microscopio se agrupan en tres sistemas: el mecánico, el de iluminación y el óptico. En la
figura 6 se presenta el esquema de las partes de un microscopio óptico, cuya descripción y función se
señalan más adelante.

Figura 6. Esquema de un Microscopio Óptico.

DESCRIPCIÓN DE LOS SISTEMAS DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

Se describe a continuación las partes de un microscopio óptico integradas en los sistemas mecánico, de
iluminación y óptico. Estos pueden presentar variaciones de acuerdo al fabricante y variante de
microscopio óptico considerada.
Sistema mecánico
Incluye los elementos que sostienen la parte óptica y de iluminación, así como los elementos que permiten
el desplazamiento para el enfoque del preparado a observar. Consta del pie, el brazo o columna, la platina,
el revólver porta objetivos, el cabezal mono o binocular y los tornillos macro y micrométrico.

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El pie (señalado con la flecha inferior) es una estructura

que le sirve de apoyo, y se continúa con el brazo o
estativo (señalado con la flecha superior), por donde el
microscopio se toma para su transporte.

El cabezal puede ser mono o binocular. Es la parte del

sistema mecánico en la que se encuentran montadas las
lentes oculares.

Los tornillos macro (flecha derecha) y micrométrico

(flecha izquierda) es la parte del sistema que permiten
lograr el enfoque correcto del preparado.

La platina es una placa de metal horizontal, móvil que

lleva un orificio central a través del cual llegan los rayos
lumínicos al objeto que se quiere observar. Para mover el
preparado algunos cuentan solo con un par de pinzas para
sostener el mismo, y otros un par de tornillos que
desplazan el preparado en forma horizontal.

Sistema de iluminación
Comprende las partes del microscopio que reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para
efectuar la observación del preparado. Éste se ubica debajo de la platina y está formado por: fuente de
luz, diafragma iris, condensador y aro portafiltros.

La fuente de luz puede ser una lámpara

incorporada al microscopio o provenir de una
fuente externa que se enfoca hacia la platina, a
través de un espejo plano.

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El condensador es un sistema de lentes que

cumplen la función de concentrar el haz de luz
formando un cono de luz con ángulo suficiente
para llenar la abertura del objetivo. Posee un
diafragma iris que controla el diámetro del
círculo de luz que incide en el condensador

Los filtros que se colocan en los aros portafiltros generalmente utilizados son los azules (claros) que
dejan pasar solo las radiaciones luminosas que convienen para la formación de la imagen.

Sistema óptico

En el extremo superior del cabezal se ubican las

lentes oculares. El ocular es un cilindro metálico
que consta de dos lentes plano-cóncavos,
separados por un diafragma. Pueden tener
aumentos de 5x, 10x o 15x.

En el revólver porta-objetivos se ubican las

lentes objetivas, sostenidas en el revólver porta
objetivos. Las lentes empleadas en microscopía
óptica están construidas de cuarzo o vidrio.

El objetivo es un cilindro metálico que contiene

la lente. En cada objetivo viene indicado el
aumento propio, la apertura numérica, la
distancia del objetivo al ocular en mm, y en
algunos casos el espesor del cubre objetos a
utilizar.

FACTORES QUE INFLUYEN EN LA OBSERVACIÓN

La medida del aumento de la estructura que se observa se conoce como magnificación del sistema. La
magnificación total de un sistema queda determinada por el producto del poder de magnificación
individual de cada una de las lentes en el sistema, es decir, el aumento de la lente objetiva y el aumento
de la lente ocular.
En teoría es posible incrementar la magnificación indefinidamente, pero la calidad de la imagen
magnificada es dependiente del poder de resolución de las lentes del sistema. Existe por lo tanto una
máxima magnificación que puede ser utilizada por un sistema particular. Es necesario, entonces, analizar
los principales factores que influyen en la correcta observación:

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El poder de resolución (PR) se refiere a la posibilidad que tiene un sistema de mostrar separados dos
puntos cercanos (posibilidad de ver detalles finos). Si el ojo humano tiene un poder de resolución de 0,1
mm (100 µm) quiere decir que dos puntos que se encuentran separados entre sí por una distancia menor
a 0,1 mm se ven como uno solo y no como dos puntos.
La menor distancia a la que dos puntos deben estar separados para que sean mostrados como dos puntos
y no como uno solo es el límite de resolución (LR) de un microscopio, es la inversa del poder de resolución.
La relación entre estos dos factores es inversa: a mayor poder resolutivo, menor límite de resolución (PR
= 1/LR). Pero, el límite de resolución también depende la luz, ya que es directamente proporcional a la
longitud de onda de la radiación (λ) con la que se ilumina el preparado.
La relación entre el límite de resolución y la longitud de onda con la que se ilumina un preparado se
muestra en la figura 7: cuando el preparado se ilumina con menores longitudes de onda (en el esquema
se representa con la sal) el objeto se observa con mayores detalles. Pero si el objeto se ilumina con
longitudes de onda de mayor tamaño (en el esquema se representa con las hojas que caen sobre la
moneda), se obtiene menor definición del objeto a observar, y la imagen proyectada tiene menor
definición.

Figura 7. Relación entre la longitud de onda

con la que se ilumina el preparado y el límite de
resolución.

En la determinación del poder de resolución, no sólo juega un rol importante la longitud de onda de los
rayos con los que se ilumina el preparado, sino también la cantidad de rayos luminosos que ingresan al
objetivo. Esto es la apertura numérica (AN). Cuanto mayor sea el número de ellos que penetran al
objetivo, más divergentes son los rayos que puede admitir la lente, y por lo tanto mayor será el poder de
resolución. Esto depende en parte de la propia lente, y en parte del índice de refracción del medio que se
interpone entre el objeto que se observa y la lente objetiva (aire, aceite, agua, etc.). El índice de refracción
del aire es de 1,0 y el de aceite de inmersión es de 1,52. La figura 8 muestra la relación entre los conceptos
presentados. Cuanto mayor es el índice de refracción del medio que se interpone entre el objetivo y el
preparado que se observa, menor es el límite de resolución y por lo tanto mayor será el poder de
resolución del microscopio.
PR = 1/LR
LR= 0,61/AN AN= n x sen α

LR: límite de resolución

λ: longitud de onda de la luz utilizada
(la luz visible tiene una longitud de onda de 380 a 750 nm)
AN: apertura numérica
n: índice de refracción del medio que se encuentra entre el
preparado y el objetivo
α: ángulo de apertura (ángulo que forman los rayos más abiertos
que salen del preparado y entran en el objetivo)

Figura 8. Relación entre el poder de resolución, la longitud de onda y la apertura numérica.

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La apertura numérica es uno de los dos números que se encuentra inscripto en la montura metálica del
objetivo, que es separado por una barra de un primer número correspondiente al aumento propio del
objetivo. Si el número de la apertura numérica es menor a 1, ingresan menos del 100% de los rayos que
han atravesado el objeto. En este caso el objetivo es seco, como el medio interpuesto entre el objetivo y
el preparado es el aire, se emplean objetivos cuyos aumentos pueden ser de 4x, 10x, 40x o 45x. Si el
número es igual o ligeramente superior a 1, significa que penetra la totalidad de los rayos emitidos y se
trata de un objetivo que se debe emplear interponiendo entre el objetivo y el preparando, una sustancia
de índice de refracción mayor que el del aire (generalmente aceite de cedro o aceite sintético) (figura 8)
En este caso se trata de un objetivo húmedo o de inmersión, y la finalidad de esto es poder aumentar el
poder de resolución. Al usar el objetivo seco (10x a 40x) el diafragma sólo se usa parcialmente abierto.
Con el objetivo de inmersión (100x) se debe abrir el diafragma.

CÁLCULO DEL AUMENTO TOTAL

El aumento del sistema es la relación entre el tamaño de la imagen obtenida de un objeto (imagen
observada) y su tamaño real. En tanto que, el área del preparado que incluye el objeto que se observa se
denomina campo observado.
Cuando se realiza una observación, la lente objetiva proyecta una imagen aumentada, real e invertida, la
que es captada por la lente ocular. Finalmente se forma en la retina del observador una imagen
aumentada, virtual e invertida del objeto.
Para informar el aumento total con el que se mira un preparado, se debe multiplicar el aumento del lente
objetivo utilizada por el aumento de la lente ocular. Por ejemplo, si se utiliza el objetivo de 45X con un
ocular de 10X la imagen final que se visualizará estará aumentada 450 veces con respecto al tamaño real
del objeto observado. Si el microscopio es binocular hay que considerar el aumento del prisma, inscripto
en el cabezal.

ALCANCES EN LA OBSERVACIÓN
Esto se refiere a lo que se puede observar con un microscopio. Con un microscopio óptico:
Se pueden observar: No se pueden observar:
La mayoría de las células procariotas Las bacterias más pequeñas
La mayoría de las células eucariotas Estructuras internas de procariotas
La presencia de algunas estructuras eucariotas (núcleo, Estructura de organelas eucariotas
nucléolos, cromosomas, mitocondrias, cloroplastos, La membrana plasmática
cilios, vacuolas, pared celular, gotas de lípidos, gránulos Sistemas membranosos como el aparato de Golgi y
de pigmento, etc.) el retículo endoplasmático
Los ribosomas
Estructura molecular

Conocer las posibilidades de observación de un microscopio óptico permite establecer los alcances del
trabajo de investigación a realizar.

USO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO

Para el enfoque del preparado a observar se procede de la siguiente manera: 1) se enciende la lámpara
de iluminación.; 2) se levanta el condensador del microscopio hasta el tope, teniendo su diafragma iris
completamente abierto; 3) se coloca el preparado en la platina del microscopio; 4) se emplea el objetivo
de menor aumento para ubicar el preparado a observar; 5) por medio del macrométrico se asciende la
platina hasta acercar lo más posible el objetivo a la preparación, “mirando siempre por el costado” para
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evitar que el objetivo toque el preparado. Observando por el ocular se baja la platina hasta encontrar la
imagen del objeto. Con el tornillo micrométrico se corrige el foco hasta que la imagen aparezca nítida; 6)
se desplaza el preparado al centro del campo observado; 7) para hacer visibles más detalles de la
estructura del objeto tendrá que pasarse al objetivo de mayor aumento girando el revólver porta objetivo.
Se tendrá una imagen microscópica en foco y solamente se hará necesaria una corrección con el
movimiento del tornillo micrométrico.
TODOS ESTOS PASOS DEBEN HACERCE CON CUIDADO Y PACIENCIA PARA NO COMPROMETER EL
FUNCIONAMIENTO DEL MICROSCOPIO

A continuación, se señalan algunos problemas con los cuáles se pueden encontrar al momento de la
observación y las posibles causas para luego hacer la corrección correspondiente:

Dificultades y errores al observar Probables causas

Al observar en el microscopio queda todo oscuro o a) el revólver no ha girado totalmente, el objetivo no está
con poca luz. en su tope.
b) el diafragma iris está completamente cerrado.
No se puede enfocar el preparado. a) el preparado está puesto sobre la platina con el cubre-
objetos hacia abajo.
b) se ha utilizado un cubre-objetos demasiado grueso.
La imagen microscópica aparece velada y no se a) la lente del objetivo está mojada o sucia.
puede enfocar bien. b) la lente superior del ocular está empañada por la
humedad o está sucia.
El preparado está enfocado y no se observan a) el diafragma iris del condensador está completamente
detalles. abierto. Al cerrar este diafragma hasta 1/3 de su abertura
se consigue observar estructuras finas.
En la imagen del microscopio aparecen manchas. a) el diafragma iris del condensador está demasiado
cerrado y se enfocan rayas o suciedades existentes sobre
el cubreobjetos y el porta-objetos.
b) las lentes del ocular están sucias.

SI TIENE ALGUNA DIFICULTAD EN EL USO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO INFORME AL JEFE DE TRABAJOS
PRÁCTICOS. NO INTENTE REPARA POR SU CUENTA PORQUE PUEDE DAÑAR EL INSTRUMENTAL.

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
Los mejores microscopios ópticos tienen un poder de resolución de 0,2 µm, esto es aproximadamente
500 veces mayor que el poder de resolución del ojo humano. Con el microscopio óptico se puede distinguir
las células eucariotas y algunas de sus estructuras, y también células procariotas individuales (ver Alcances
en la observación). Sin embargo, no se puede observar la estructura interna de la célula procariota, ni
algunas estructuras subcelulares de las células eucariotas. Cuando se hace uso de la microscopía
electrónica, se emplean electrones para “iluminar” un preparado, alcanzándose menores límites de
resolución. La longitud de onda (λ) de los electrones es más pequeña que de la luz e inversamente
proporcional a la aceleración que se le imprima a esos electrones. En algunos microscopios electrónicos
se logran resoluciones de 0,1 nm, y más usualmente de 4 nm.
Cuando se bombardea la muestra de un preparado biológico con electrones se emiten distintas señales,
tal como se muestra en la figura 9. Según las señales que se empleen en microscopía electrónica para

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iluminar el preparado se pueden diferenciar dos tipos de microscopios: electrónico de transmisión (MET)
y electrónico de barrido (MEB).

Figura 9. Señales empleadas en los dos tipos de microscopios electrónicos estudiados.

MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN

La figura 10 muestra los componentes del microscopio electrónico de transmisión. La microscopía
electrónica de transmisión (MET) es el único instrumento que permite conocer directamente la
ultraestructura biológica. En la observación del espécimen las áreas que permiten la transmisión de
electrones (“regiones transparentes a los electrones”) aparecen brillantes, y las áreas que dispersan
electrones (“regiones opacas a los electrones”) son oscuras.
Por su complejidad, los componentes se estudian organizados en un mayor número de sistemas que en
un microscopio óptico.

Figura 10: Componentes de un microscopio electrónico.

Sistema mecánico
- Mesa de apoyo de la columna
- Sistema de vacío: conformado por bombas mecánicas y difusoras

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- Columna: fuerte estructura metálica que sostiene a las demás piezas. En ella están los sistemas de
iluminación, de manipulación del espécimen, de imagen y de observación.
- Porta espécimen: donde se coloca la muestra que se quiere observar, la cual está ubicada en una grilla
en lugar de un portaobjetos. Representa la platina de un MO.
- Sistema de enfoque macro y micrométrico: desplazan la platina en sentido vertical posibilitando el
enfoque.
- Cámara fotográfica.

Sistema de iluminación
- Fuente de iluminación: filamento de tungsteno.
- Lentes condensadoras: son de dos tipos 1 (tamaño del spot) y 2 (brillo).
- Apertura de condensadora: pequeño agujero que reduce las aberraciones esféricas y ayuda a controlar
la cantidad de iluminación.

Sistema de manipulación del espécimen

- Intercambiador del espécimen: cámara y mecanismo para insertar el porta-espécimen.
- Stage del espécimen: Mecanismo para mover el espécimen dentro de la columna.

Sistema de imagen
- Lentes objetivas: forma, magnifica y enfoca la primera imagen (puede variar de 2000 100.000X). Son
lentes electromagnéticas.
- Apertura de objetivo: controla el contraste y las aberraciones esféricas.
Lentes intermedias: normalmente utilizada para ayudar a magnificar la imagen de la lente objetiva y para
enfocar el patrón de difracción.
- Apertura intermedia: selecciona el área que será difractada.
- Lentes proyectoras 1 y 2: ayuda a magnificar la imagen.

Sistema de observación
- Cámara de observación: posee pantalla de un material fluorescente donde se forma la imagen final.
- Microscopio binocular o lupa: permite magnificar la imagen observada en la pantalla para corregir el
foco.
- Cámara fotográfica: puede o no contener cámaras fotográficas.
- Cámara de video
- Monitor de PC

FUNCIONAMIENTO DEL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN

La emisión de electrones se realiza a partir del cañón electrónico. Un filamento de tungsteno se calienta
a 2300 ºK formándose una nube electrónica. Estos son acelerados a través de una diferencia de potencial.
Los electrones no se desaceleran antes de interaccionar con la muestra ya que la columna del microscopio
funciona en alto vacío.
Los electrones son enfocados por lentes electromagnéticas. En primer lugar, están las lentes
condensadoras (dos) cuya función es enfocar los electrones en una zona del espécimen observado. El
lente objetivo realiza una primera amplificación y luego están las lentes proyectoras que forman la imagen
final.
La observación se realiza sobre una pantalla fluorescente de cesio o fósforo.

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Es muy importante el registro de las imágenes, ya que el espécimen va siendo destruido a medida que es
bombardeado por los electrones. Para ello los ME vienen equipados con sistema de placas fotográficas
y/o cámaras fotográficas. La microscopía electrónica de transmisión suministra un poder de resolución de
aproximadamente 0,2 nm, es decir unas 500.000 mil veces mayor que el ojo humano.

TRATAMIENTO DEL ESPÉCIMEN PARA MET

La muestra (tejido, grupos de células, microorganismos, etc.) que se quiere observar al ME debe sufrir un
tratamiento previo. Para la observación se debe eliminar el agua de las estructuras celulares, sin
modificarlas sustancialmente. El procedimiento se muestra en la figura 11, y consiste en:
 Fijación: es el “arresto” momentáneo de un momento fisiológico celular, por ejemplo, si se quiere
observar una célula que se está dividiendo, se detiene (o paraliza) la división en un determinado
momento. Se puede hacer físicamente (empleando frío, criofijación) o con fijadores químicos. Estas
son sustancias que se combinan con los constituyentes celulares (especialmente proteínas) para
estabilizarlos y así poder eliminar el agua.
 Lavado: para eliminar el exceso de fijadores.
 Deshidratación: para eliminar el agua.
 Inclusión: se realiza con resinas que ocupan el lugar del agua.
 Polimerización: las resinas toman consistencia firme a fin de realizar el seccionamiento posterior.
 Seccionamiento: se hace en ultramicrótomo a fin de lograr cortes de 60 a 90 nm (en microscopía óptica
de 4 a 15 (nm).
Para ingresarlo al microscopio se realiza el montaje sobre grillas de Cu, Ni, o Au.

Figura 11. Tratamiento de la muestra para observar en el microscopio electrónico de transmisión.

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MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO

El microscopio electrónico de barrido (MEB) permite la observación y el análisis de superficies de las
estructuras biológicas. Consta de: una columna óptica electrónica generadora de un haz de electrones
que incide sobre la superficie de la muestra, un sistema de deflexión doble del haz electrónico, un sistema
de detección de las señales originadas en la superficie de la muestra, un sistema electrónico de
amplificación de señales y un sistema de visualización de imágenes (pantalla de T.V.).
Los electrones que se registran provienen de la superficie del espécimen. Las variaciones en la superficie
del espécimen afectan el patrón con que se dispersan los electrones; los huecos y fisuras aparecen oscuros
y las protuberancias y crestas son claras. La imagen que finalmente se observa sobre una pantalla de
televisión sugiere al observador sensaciones de relieve que corresponden en muy buena aproximación a
la topografía de la muestra biológica observada. Se obtienen así representaciones tridimensionales de las
células y de las estructuras celulares.
La intensidad de la señal de electrones dispersados por la muestra depende de la inclinación local de la
superficie de ésta con respecto al haz. Así un borde agudo o saliente genera una mayor dispersión de
electrones hacia el detector.
La figura 12 muestra la comparación de los microscopios estudiados: el microscopio óptico y los
microscopios electrónicos.

Figura 12. Comparación entre microscopio óptico y electrónico de transmisión y barrido en cuanto a las partes componentes,
el sistema de iluminación y la ubicación del preparado para su posterior observación.

ACTIVIDADES
OBJETIVOS
 Identificar las partes mecánicas, óptica y de iluminación del microscopio compuesto
 Adquirir habilidad en el uso y manejo del microscopio
 Calcular el aumento o magnificación empleado en la observación

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ACTIVIDADES
1.- UNIDADES DE MEDIDA UTILIZADAS EN MICROSCOPÍA
a) Calcular: 0,2 mm ¿A cuántos micrómetros equivalen? ¿A cuántos Angstroms y a cuántos nanómetros?
Para ayudarse en el cálculo utilice la tabla de unidades de medida empleadas en biología.

EN LA SALA DE MICROSCOPÍA
2.- CAMPO OBSERVADO
En un microscopio se coloca un preparado de células de catáfilas de cebolla. La imagen de la figura 1, se
obtuvo utilizando el objetivo de menor aumento (10x). La imagen de la figura 2, se obtuvo girando el
revólver porta-objetivos y enfocando con un objetivo de mayor aumento (40x).

Figura 1 Figura 2
Responder: ¿Qué relación existe entre el aumento del objetivo y el tamaño del campo observado?

3.- FORMACIÓN DE LA IMAGEN A OBSERVAR

a) Tomar un portaobjeto con una letra “e” impresa.
b) Colocar el preparado sobre la platina, sosteniéndolo con las pinzas.
c) Hacer coincidir la zona a observar sobre el haz de luz que se proyecta a través de la platina.
d) Acercar el portaobjetos a la lente objetiva de menor aumento con el tornillo macrométrico.
e) Mirar a través del ocular y utilizando el tornillo micrométrico ajustar la imagen a observar hasta
obtener la mayor nitidez posible.
f) Responder: ¿Cómo es la posición de la imagen “e” del ocular con la posición “e” impresa sobre el
portaobjetos?

4.- AUMENTO
a) Buscar los números de aumento del ocular y de los objetivos del microscopio.
b) Calcular el aumento obtenido cuando se usa el objetivo de menor aumento.
c) Calcular el aumento con el objetivo de mayor aumento.

5.- USO Y MANEJO: MICROSCOPIO ESTEREOSCÓPICO (LUPA) – MICROSCOPIO ÓPTICO

a) Coloque el material vegetal (cedido por la cátedra) en la platina de la lupa y observe el mismo
comenzando por el menor aumento hasta llegar al máximo permitido por el instrumento. Realice
una breve descripción de los detalles que pudo visualizar comparado a lo que observa a ojo
desnudo.
b) Compare y describa la observación con la imagen obtenida a partir de un preparado microscópico
de una porción del material vegetal

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TRABAJO PRÁCTICO Nº 2

LA COLUMNA DE WINOGRADSKY
UNIDAD TEMÁTICA: UNA REVISIÓN DE LA BIOLOGÍA CELULAR. EL ORIGEN Y LA EVOLUCIÓN DE LOS SERES VIVOS.

INTRODUCCIÓN
Para el estudio de las comunidades microbianas y su rol en los ecosistemas puede emplearse un
dispositivo denominado “Columna de Winogradsky”. Estas columnas, que llevan el nombre del
microbiólogo ruso que las utilizó por primera vez. Requiere de energía lumínica y temperatura optima
(25° C) para su funcionamiento, un sustrato sólido enriquecido con diferentes componentes y agua como
medio líquido.
La columna de Winogradsky funciona simulando un micro-ecosistema o microambiente que muestra
cómo los microorganismos ocupan micro-hábitats altamente específicos de acuerdo con sus necesidades
vitales, tales como: requerimientos de carbono, energía y oxígeno. En este dispositivo experimental
también puede verificarse la interdependencia de los microorganismos que en él se desarrollan. La
actividad metabólica de un tipo de organismo modifica el microambiente y posibilita el crecimiento de
otros.
Inicialmente, todos los microorganismos están presentes en muy baja proporción en las columnas, pero
transcurrido un tiempo de incubación en condiciones de luz y temperatura ideales, los distintos tipos de
microorganismos proliferan y ocupan los diferentes estratos (lugares o alturas dentro de la columna) en
los cuales las condiciones ambientales permiten su desarrollo de acuerdo a sus requerimientos.
La actividad metabólica de los microorganismos genera en las columnas un gradiente de oxígeno, el cual
es abundante en la superficie y a medida que descendemos va disminuyendo hasta encontrarse en
condición anaeróbica (sin O₂), en las últimas capas de la columna. Esto ocurre dado que en la parte
superior proliferan microorganismos fotosintetizadores que liberan oxígeno como subproducto.
La columna de Winogradsky se prepara con muestras de suelo recolectadas de ambientes húmedos, es
enriquecida con compuestos orgánicos e inorgánicos y expuesta a una fuente de luz natural. Detalles de
cómo se prepara la columna de Winogradsky pueden verse en la pestaña Trabajos Prácticos del Campus
Biología (https://www.youtube.com/watch?v=AjWuq9MXFcY), en tanto que en el siguiente enlace
https://www.youtube.com/watch?v=DUSYWMxLuy8 podrán encontrar detalles sobre el funcionamiento
de la columna.
Transcurridas 3 o 4 semanas de incubación se observa un incremento en la cantidad de los distintos tipos
de microorganismos que se establecen en los diferentes estratos a lo largo de la columna, de acuerdo con
sus características fisiológicas. Este proceso se conoce como sucesión. De esta forma, el resultado es una
columna estratificada, donde cada estrato con una apariencia particular se relaciona con la
preponderancia de organismos especializados asociados a los procesos químico-biológicos o metabolismo
característico del grupo microbiano considerado (figura 13).
En este trabajo práctico se harán observaciones de organismos, que se desarrollan en las columnas de
Winogradsky dispuestas por la Cátedra. También se evaluarán las características metabólicas
preponderantes de los diferentes organismos en relación al lugar que ocupan en la columna.

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Figura 13. Columna de Winogradsky desarrollada donde se observan diferentes estratos de microorganismos de acuerdo a
sus características fisiológicas.

ACTIVIDADES
Las actividades de preparación de las columnas de Winogradsky estarán a cargo de los docentes
de la Cátedra.

MATERIALES PARA LA PREPARACIÓN DE LA COLUMNA

● Muestra de suelo y arena (color claro)
● Recipiente alto de paredes transparentes (columnas de vidrio)
● Pipetas, portaobjetos, cubreobjetos
● Papel de filtro, papel parafilm
● Sales: CaCO3, CaSO4, CaHPO4
● Balanza analítica, cucharas y recipientes para pesar las muestras

PROCEDIMIENTO DE PREPARACIÓN DE LA COLUMNA DE WINOGRADSKY

⮚ Tomar portaobjetos y sobre un extremo agregar hilo de tal forma que se pueda retirar el portaobjetos
con el otro extremo.
⮚ Colocar los portaobjetos en una posición vertical a diferentes niveles de la columna.
⮚ Colectar muestras de suelos para llenar el recipiente hasta una altura aproximada de 10 cm.
⮚ Mezclar y homogeneizar la muestra de suelo con las sales y el papel finamente cortado.
⮚ Colocar la mezcla en las columnas de vidrio y agregar arena. Compactar el sustrato de suelo y arena a
fin de eliminar las burbujas de aire.

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⮚ Añadir suficiente agua hasta alcanzar 3 o 5 cm del borde superior de la columna cuidado de no
resuspender la muestra compactada.
⮚ Cubrir la boca de la probeta con papel parafilm para reducir la evaporación de agua. Puede ser
necesario reponer agua para mantener el nivel original.
⮚ Incubar a temperatura ambiente cerca de una ventana para que reciba una adecuada cantidad de luz.

ACTIVIDADES
OBJETIVOS
✔ Diferenciar los grupos microbianos presentes en la columna.
✔ Relacionar la diversidad microbiana presente en diferentes estratos de la columna con algunas de las
características fisiológicas básicas de los microorganismos.
✔ Integrar conceptos básicos sobre organización celular entre asignaturas correlativas de la carrera.

ACTIVIDADES
1.- EN EL LABORATORIO
A partir de las columnas de Winogradsky, que los docentes asignarán a las mesadas, se trabajará en grupo
respondiendo preguntas relacionadas a la descripción visual de los dispositivos.
a) Comparar y registrar los cambios físicos observados entre la columna asignada al grupo de trabajo
y una columna no desarrollada.
b) Responder: ¿En qué zona de la columna se esperará encontrar un ambiente anaerobio estricto?
c) Completar el siguiente cuadro que permite identificar la disponibilidad de carbono, energía y
oxígeno a diferentes alturas de la columna. Indicar además el tipo de metabolismo que tendrán los
microorganismos en relación con la concentración de oxígeno.

Columna de Winogradsky Concentración Clasificación del Tipo de metabolismo Descripción de las

de O2 (%) a ambiente en relación de los micro- características de la
diferentes con la concentración organismos en relación columna a diferentes
alturas de O2 a la concentración de alturas (color, olor,
O2 formación de burbujas,
etc.)

0,91

0.7

0,15

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2.- EN LA SALA DE MICROSCOPÍA

Observación microscópica de los microorganismos desarrollados en la columna:
a) En los microscopios dispuestos en las mesadas se podrán observar portaobjetos provenientes de la
columna (uno de la superficie y otro del fondo).
b) Observar los microorganismos sin teñir con los objetivos de 10x y 40x. Observar el tipo y la
abundancia de los diferentes microorganismos, así como su movilidad.
c) Esquematizar los microorganismos observados. Describa lo observado y aclare si alguno tiene
movilidad.
d) Discutir con docentes y compañeros de qué microorganismos se tratan. Relacionarlo con de dónde
proviene la muestra.

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TRABAJO PRÁCTICO Nº 3
TRANSPORTE A TRAVÉS DE MEMBRANA
UNIDAD TEMÁTICA 5: ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DE LA MEMBRANA PLASMÁTICA

INTRODUCCIÓN
A nivel celular, la regulación del intercambio de sustancias con el medio extracelular ocurre a nivel de la
membrana plasmática. Este control es fundamental para proteger la integridad de cada célula, mantener
su medio interno adecuado y las condiciones de pH y concentración de iones óptimas.
La composición química y estructura de la membrana plasmática es explicada por el Modelo de Mosaico
Fluido descrito por Singer y Nicolson en 1972 tal como se muestra en la figura 14.

Figura 14. Modelo de Mosaico Fluido de la membrana plasmática (extraído de Cooper, 2002).

Una de las funciones biológicas de la membrana plasmática sobre la que se centrará el estudio es el
transporte selectivo de sustancias. En el transporte de las sustancias están implicados diferentes
mecanismos que dependen del tamaño, del grado de hidropatía (hidrofobicidad o hidrofilicidad) de la
molécula a transportar, si la misma posee o no carga y el gradiente de concentración a ambos lados de la
membrana. En relación a ello, un resumen de los tipos de transporte se clasifica según se muestra en la
tabla 2. Para comprender los tipos de transportes deberá remitirse a la clase teórica.

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Tabla 2. Tipos de transporte a través de la membrana plasmática.

Agua (ósmosis)
Moléculas pequeñas: no polares y
Transporte pasivo Simple polares neutras (CO2, O2, N2, urea)
(sin gasto de energía) Difusión
Facilitada Moléculas polares cargadas y no
(Uniporte) polares (electrolitos y no electrolitos)

Bombas basadas en la Ej.: Bomba de protones, en

hidrólisis de AT mitocondrias. Bomba de Na+/K+

Transporte activo Cotransporte Ej.: aminoácidos-glucosa en

(con gasto de energía) (Transporta 2 sustancias) membrana de enterocitos. Glucosa-
Simporte
sodio en ingreso a células de epitelio
En contra de gradiente
intestinal.
de concentración
química o Antiporte
Ej.: Sodio-calcio. Sodio-potasio.
electroquímica

Pinocitosis
En masa
Endocitosis

ACTIVIDADES
OBJETIVOS
✔ Interiorizarse con la estructura y composición de la membrana citoplasmática.
✔ Reconocer y diferenciar los distintos tipos de transporte molecular a través de membrana.
✔ Demostrar experimentalmente algunos de los mecanismos de transporte en células vegetales.

ACTIVIDADES EN EL LABORATORIO
1.- TRANSPORTE DE AGUA EN CÉLULAS DE CEBOLLA.
En esta actividad se busca someter células de cebolla a soluciones con distintas concentraciones de un
soluto (sacarosa en este caso); para evaluar el movimiento del agua que ingresa o que sale de la célula,
según la solución de la que se trate.
Cuando la solución tiene nula o baja concentración de soluto respecto a la concentración en la célula
recibe el nombre de solución hipotónica; cuando posee igual concentración que en el interior de la célula,
se llama solución isotónica, y cuando tiene mayor concentración de solutos que en el interior de la célula,
se dice que la solución es hipertónica. En situaciones de solución hipotónica, el agua de la solución va a
tender a ingresar en la célula, por ósmosis provocando el proceso de turgencia y en situaciones de
exposición a una solución hipertónica, el agua en el interior de la célula va a tender a salir de ella, hacia la
solución.
Materiales necesarios:
Allium cepa (cebolla colorada) Portaobjetos y cubreobjetos Vasos de precipitado
Pinzas Sol. sacarosa 0,2M, 0,6M y 1,5M
Bisturí H2O destilada o sacarosa 0M

Procedimiento:
● Separar, empleando bisturí y pinza, el tejido que se encuentra entre las catáfilas de la cebolla.
● Cortar el tejido extraído con ayuda de la pinza (sostén) y el bisturí en fragmentos de 5mm x 5mm
(obtener al menos 4 fragmentos).
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● Colocar cada uno de los cortes obtenidos en vasos de precipitado conteniendo las soluciones de
sacarosa y en agua.
● Dejar reposar durante 30 minutos.
● Extraer los fragmentos de tejido y depositarlos en orden creciente de concentraciones sobre un
portaobjetos.
● Agregar una gota de la solución correspondiente. Colocar el cubreobjetos y presionar suavemente con
una hoja de papel absorbente para mejorar la observación del preparado.

● Proceder a observar los preparados bajo el microscopio

● Completar con la información solicitada (dibujar lo observado; establecer diferencias entre los tejidos
haciendo énfasis en las diferencias con la posición de la pared celular y la membrana plasmática; clasificar
las soluciones).

Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3

Esquematizar lo
observado

Tipo de solución según la

concentración
Posición de la membrana
respecto a la pared
celular
Estado osmótico de la
célula

2.-TRANSPORTE DE GLUCOSA EN LEVADURAS

Las levaduras de panificación utilizan la glucosa como fuente de energía. El empleo de este hidrato de
carbono a partir del medio en el que crecen las levaduras puede ser verificado a través de la Reacción de
Fehling*. El transporte de glucosa es inhibido empleando una solución de azida sódica (NaN3). Esta sal,

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actúa sobre la cadena transportadora de electrones mitocondrial, impidiendo la fosforilación oxidativa y

por lo tanto la producción de ATP, necesario para incorporar glucosa desde el medio circundante.

*Reacción de Fehling: se basa en el carácter reductor de los monosacáridos y la mayoría de los disacáridos. Si el glúcido
que se investiga es reductor, se oxidará dando lugar a la reducción de sulfato cuproso, de color azul y a óxido de cobre de
color rojo anaranjado. La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo, ladrillo y será negativa si queda azul
o un tono azul verdoso.

Materiales Procedimiento
● Tubos de ensayo y centrífuga ● Preparar 4 tubos de ensayo. Numerar los tubos con un
● Baño termostático fibrón e indicar mesada y comisión.
● Centrífuga
● Solución fisiológica
● Solución azida sódica 40% ● A cada tubo agregar las soluciones indicadas en cada paso
● Solución glucosa 1% de acuerdo a lo señalado en la tabla que se presenta a
● Levaduras frescas continuación.
● Licor de Fehling

a) Complete la columna de resultado con la coloración observada luego de la reacción de Fehling.

b) Explique brevemente a qué se atribuye el cambio de coloración en cada tubo.

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TRABAJO PRÁCTICO N°4

CÉLULA EUCARIOTA FUNGI
UNIDAD TEMÁTICA 4: INTRODUCCIÓN A LA BIOLOGÍA CELULAR

INTRODUCCIÓN
Los hongos, de acuerdo a lo estudiado en el teórico práctico 2, están clasificados como pertenecientes al
supergrupo Amorphea (grupo Opisthokonta). Consta de más de 250 mil especies conocidas que incluye
organismos filamentosos y levaduras. Todas las especies presentan tipo celular eucariota, es decir, poseen
núcleo delimitado por membrana nuclear y organelas rodeadas de membranas.
Aunque comparten con las células de las especies vegetales la presencia de pared celular, los hongos se
diferencian en la composición de dicha pared, ya que poseen principalmente quitina y glucanos como
componentes esqueléticos embebidos dentro de una matriz de polisacáridos y glicoproteínas. Otra
característica que los separa de las plantas, es que desde el punto de vista de la categoría nutricional son
quimioheterótrofos, no poseen clorofila y por lo tanto su fuente de energía y de carbono son compuestos
orgánicos. A su vez, se diferencian de los animales, también quimioheterótrofos, por ser osmótrofos, es
decir, la incorporación de nutrientes a partir de sustancias más simples obtenidas por la acción de
exoenzimas que liberan los hongos al medio exterior realizando una digestión extracelular y actúan sobre
compuestos orgánicos más complejos.
Desde el punto de vista de la morfología, los hongos pueden presentar uno de los dos tipos conocidos:
levaduriforme (hongos unicelulares) y filamentosa (hongos multicelulares) (Figura 15).

Figura 15. Morfología fúngica. a) levaduriforme (unicelular. b) filamentosa (multicelular).

LEVADURAS
Son organismos unicelulares que se dividen asexualmente por gemación (formación de protuberancias o
yemas a partir de la célula parental) (figura 16). Se utilizan como agentes fermentadores en la industria
cervecera y panadera.

Figura 16. Proceso de división asexual de levaduras por gemación.

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HONGOS FILAMENTOSOS
Poseen estructuras somáticas básicas denominadas hifas, que son filamentos tubulares que se desarrollan
a partir de esporas o de fragmentos de otras hifas que se ramifican a medida que el hongo crece en forma
apical. El conjunto de hifas forma la estructura denominada micelio, también conocido como cuerpo o
talo (figura 17). Esta estructura no tiene una organización como la presentan los tejidos en organismos
como los vegetales y los animales. Una característica de importancia taxonómica en la identificación de
los hongos es si las hifas del micelio presentan septos. Se denomina septo a la pared transversal llamada
tabique o septo. Si están presentes, el micelio se clasifica como septado. En caso contrario, se denomina
no septado (figura 18).

Figura 17. Organización estructural de los hongos filamentosos: micelio constituido por el conjunto de hifas.

Los hongos producen estructuras denominadas esporas. Las esporas son unidades reproductoras con
numerosas funciones como multiplicación, diseminación y resistencia. Contienen toda la información
genética necesaria para el desarrollo completo de un nuevo organismo. Las esporas son muy variadas en
forma, tamaño, coloración y tienen gran interés para la identificación y clasificación taxonómica de los
distintos hongos. Mayores detalles sobre las estructuras fúngicas se encuentran video disponible en la
pestaña trabajos prácticos del Campus de la Cátedra (https://youtu.be/kPpoFFXoE0A).

Figura 18. Tipos de hifas de acuerdo a la presencia de tabiques transversales: a) no septadas y sin color (hialinas) b) septadas
y de color oscuras.

Intervenciones de los hongos en la naturaleza y la agronomía

Desde el punto de vista ecológico, los hongos establecen relaciones extremadamente diversas con otras
especies, muchas de las cuales son de alto interés agronómico. Algunos son saprófitos ya que viven a
expensas de desechos orgánicos u organismos muertos, interviniendo así en los ciclos de la materia. Otras
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especies son parásitas ya que se nutren de las células del organismo hospedero al que infectan. Estos
últimos son los agentes causales de enfermedades en cultivos vegetales que ocasionan grandes pérdidas
económicas. La rama de la Biología que estudia a los hongos, entre otros organismos, como agentes
causales de enfermedades se llama FITOPATOLOGÍA. Algunos ejemplos de las enfermedades que causan
los hongos son: golpe blanco en trigo que es causada por el hongo denominado Gibberella zeae (figura
19). Otro ejemplo es la roya de la soja, causada por el hongo denominado Phakopsora pachyrhizi y el tizón
del maíz por el hongo llamado Exserohilum turcicum.

Figura 19. Agente causal de Golpe blanco o fusariosis del trigo: a) los cuerpos negros observados sobre la espiguilla de trigo
corresponden al crecimiento del agente causal de la enfermedad Gibberella zeae. b) micelio color salmón sobre la espiga Fusarium
graminearum.

Otro grupo de hongos establecen asociaciones simbióticas con otros organismos. Por ejemplo, los
líquenes son asociaciones entre un hongo y un organismo que realiza fotosíntesis (alga o cianobacterias).
Otro ejemplo es el de las micorrizas, que se establecen entre un hongo y las raíces de las plantas
superiores. Esta asociación es de gran importancia para la nutrición fosfatada de los cultivos. Las hifas del
hongo se desarrollan más allá del sistema radical de la planta permitiendo así llegar a zonas en las que la
raíz alcanza zonas de disponibilidad de agua y P (fósforo) (figura 20).

Figura 20. La fotografía muestra el manto del hongo micorrícico formado sobre las raíces de pino. También se observan hifas
del hongo que se extienden más allá de la raíz.

Algunos hongos micorrícicos establecen este tipo de simbiosis con raíces de plantas de gran porte (pinos,
eucaliptos y otras coníferas) y dicha asociación se conoce como ectomicorriza. En este tipo particular de
asociación, cuando las plantas son jóvenes la asociación entre la raíz y el hongo se puede observar a simple
vista o con mejor detalle empleando una lupa porque el hongo induce a la raíz a bifurcarse tal como se
muestra en la composición fotográfica de la figura 21.

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Figura 21. Micorriza: asociación entre un hongo y las raíces de plantas superiores (Pinus spp.) El círculo verde señala la
bifurcación de la raíz provocada por el hongo micorrízico. Las fotografías siguientes muestran en mayor detalle la bifurcación.
Observaciones a ojo desnudo y en lupa.

Además de las intervenciones agronómicas señaladas, algunas especies de hongos son empleadas en las
cadenas agroalimentarias. Muchos hongos se producen comercialmente por su valor comestible como el
caso de las girgolas o champiñones. Otros, como Penicillium roqueforti, se los utilizan en la industria láctea
porque otorgan a los productos sabor o aspectos particulares. Este es el caso del queso azul.
Otros hongos se emplean en la industria farmacéutica ya que producen sustancias que son antagónicas
para otros microorganismos (antibióticos): Penicillium notatum es el hongo productor del antibiótico
conocido como penicilina.

ACTIVIDADES
OBJETIVOS
✔ Reconocer las estructuras celulares características de los organismos pertenecientes al grupo
Opisthokonta.
✔ Conocer las intervenciones que los hongos tienen en el campo de la Agronomía.

ACTIVIDADES
1.- OBSERVACIÓN DE HONGOS FILAMENTOSOS: RHIZOPUS NIGRICANS, ASPERGILLUS SPP. Y PENICILLIUM SPP.
Materiales:
Pan enmohecido -Naranja con podredumbre - Queso azul Porta y cubreobjetos Cinta adhesiva
Gotero con agua destilada Solución de lugol
Procedimiento:
● Colocar una pequeña gota de solución de lugol sobre portaobjetos limpios.
● Cortar un trozo de cinta adhesiva de aproximadamente dos centímetros.
● Tocar con el lado adhesivo de la cinta la superficie de la fruta o pan enmohecido.
● Pegar la cinta adhesiva sobre el portaobjetos. Evitar dejar burbujas al pegar la cinta.
● Dibujar y señalar las estructuras de los hongos que reconoce. Indicar el aumento total empleado.

2. OBSERVACIÓN DE HONGOS UNICELULARES (SACCHAROMYCES SPP.)

Materiales:
Levadura Tubo de ensayo Porta y cubreobjetos Solución fisiológica y glucosa

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Procedimiento:
● Preparar la solución de levaduras: en un tubo de ensayo colocar 5 ml de solución fisiológica.
● Agregar la glucosa y la levadura. Incubar por 30 minutos a 28 °C.
● Transcurrido el tiempo de incubación, con la ayuda de una pipeta Pasteur colocar una gota de la
solución en un portaobjetos limpio.
● Cubrir con cubreobjetos cuidando de no dejar burbujas. Observar en microscopio.
● Dibujar y señalar las estructuras de los hongos que reconoce. Trate de identificar células en gemación.
Indicar el aumento total empleado para la observación.

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TRABAJO PRÁCTICO Nº 5
CÉLULA EUCARIOTA ANIMAL
UNIDAD TEMÁTICA 4: INTRODUCCIÓN A LA BIOLOGÍA CELULAR

INTRODUCCIÓN
La célula eucariota animal presenta algunas características particulares que la distinguen de la célula
vegetal, entre las que se destacan la ausencia de la pared celular y cloroplastos. Las células animales
carecen de vacuola central, pero presentan en su interior vesículas y lisosomas; no poseen gránulos de
almidón, pero en algunos tipos celulares pueden presentar glucógeno como material de reserva. A su vez,
otras características diferencian a las células animales de las fungI, por ejemplo, las células animales no
poseen pared celular (pared celular de composición diferente a la pared celular vegetal); las células
animales son quimioheterótrofos. La nutrición es por ingestión y digestión, mientras que las fungí, además
de ser quimioheterótrofas son también osmótrofas (no ingieren alimento, sino que secretan exoenzimas
que degradan el alimento fuera y los productos son luego absorbidos por las hifas).
Generalmente se dividen en dos grandes grupos, los animales invertebrados de cuerpos blandos o con
exoesqueleto quitinoso (por ejemplo, los artrópodos, anélidos y moluscos), y vertebrados con
endoesqueleto óseo o cartilaginoso (mamíferos, aves, reptiles, anfibios y peces). Desde el punto de vista
ecológico los integrantes de este grupo ocupan el nivel de consumidores, que pueden ser subdivididos en
herbívoros, carnívoros y omnívoros. Desde el punto de vista económico, de los animales obtenemos entre
otros, carne, leche, huevo, cuero, transporte, etc.
La figura 22 presenta un esquema comparativo en el que se señalas las principales estructuras de una
célula vegetal y una célula animal.

Figura 22: Esquema comparativo de una célula animal y una vegetal.

ACTIVIDADES
OBJETIVOS
✔ Identificar estructuras propias de una célula eucariota animal y relacionarlas con su función.

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✔ Adquirir destreza en la realización de preparados frescos y tinción de material biológico.

ACTIVIDADES
1.- OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE CÉLULAS MUCOSA BUCAL
Procedimiento:
● Desinfectar con alcohol un portaobjetos.
● Pasar suavemente el portaobjetos por la parte interna de la mejilla.
● Extender el material extraído con ayuda de otro portaobjetos.
● Colorear el extendido agregando una gota de Azul de metileno.
● Colocar un cubreobjetos.
● Observar al microscopio con el menor aumento y luego pasar al mayor aumento.
● A continuación, esquematizar e indicar las partes observadas. Y responder:
- ¿Qué forma tienen las células de la mucosa bucal?
- ¿Qué estructuras internas se observan? Indicar la forma y ubicación de las mismas.

Aumento empleado:

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TRABAJO PRÁCTICO Nº 6
CÉLULA EUCARIOTA VEGETAL
UNIDADES TEMÁTICAS: LA PARED CELULAR Y LA MATRIZ EXTRACELULAR. LA VACUOLA CENTRAL DE LAS CÉLULAS
VEGETALES. LOS CLOROPLASTOS, OTROS PLÁSTIDOS.

INTRODUCCIÓN
En este trabajo práctico se abordan estructuras subcelulares características de la célula vegetal: PARED
CELULAR, PLASTOS y VACUOLA. Para poder realizar este práctico y reconocer las estructuras subcelulares
características es necesario que consulta la bibliografía sugerida por la Cátedra.

PARED CELULAR VEGETAL

El material sugerido por la Cátedra para estudiar el tema se encuentra en la pestaña del Campus de
Biología “U5: La Superficie Celular: Membrana y Pared célula”. Se sugiere ver los videos https://youtu.be/-
7ZkWCKYkBs y https://youtu.be/RlDpdUpFSVA.
La estructura conocida como PARED CELULAR, no es exclusiva de la célula vegetal. La mayoría de las
bacterias y los hongos también presentan esta estructura que se ubica por fuera de la membrana
plasmática. La figura 23 muestra la disposición de las distintas capas que conforman la pared celular de
dos células contiguas. La pared celular cumple con tres funciones simultáneas: proporciona una envoltura
semi-rígida que protege mecánicamente a la célula, se expande y deforma a medida que la célula crece y
se diferencia, y provee estructuras para el pasaje de materiales entre células vecinas.

Figura 23. Disposición de las diferentes capas de la pared celular en relación a la membrana plasmática (señaladas con color
violeta).

Inmediatamente después del proceso de división celular (mitosis), los citoplasmas de las células vegetales
se separan por la formación de la laminilla media. Esta estructura está compuesta químicamente por
sustancias pécticas que se asocian con el calcio y de magnesio, formando respectivamente pectatos de
calcio y magnesio. En las células en crecimiento, como las células meristemáticas, se forma la pared
primaria que contiene principalmente moléculas de celulosa organizadas en haces de microfibrillas
dispuestas en una matriz de pectinas, hemicelulosas, proteínas y iones Ca++. La pared primaria puede tener
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zonas laxas dejando regiones más delgadas denominadas plasmodesmo (figura 24). Estas zonas son
atravesadas por que son conexiones citoplasmáticas entre células adyacentes. La región de la pared
celular con muchos plasmodesmos conforma un campo de puntuación primario.

b)

Figura 24. Plasmodesmos: a) Esquema de un plasmodesmo, en el que

se señala la ubicación y partes que lo componen (desmotúbulo y
simplasto); b) Microfotografía electrónica de la pared celular de dos
células. Los plasmodemos (señalados con flechas) se observan como
interrupciones de la pared primaria.
a)

Cuando una célula diferenciada detiene su crecimiento (célula madura), se forma la pared secundaria, la
cual se deposita internamente a la pared primaria (figura 23). A diferencia de ésta última, las fibrillas de
celulosa se disponen en forma paralela, en varias capas, cada una de las cuales presenta una orientación
diferente, lo que proporciona resistencia mecánica a la célula. Frecuentemente contiene otras moléculas,
entre las cuales la lignina es el componente químico responsable de la resistencia y fuerza tensil de las
maderas. La pared celular secundaria también presenta canales de comunicación que se observan como
discontinuidades. La zona de mayor densidad de los mismos se conoce como puntuaciones o
punteaduras.

PLÁSTIDOS O PLASTIDIOS
Los plástidos son orgánulos limitados por doble membrana y en la célula tienen diversas funciones y
diferentes tipos de sustancias. Se distinguen tres tipos de plástidos maduros que se clasifican de acuerdo
al tipo de pigmentos que almacenan: cloroplastos, poseen pigmentos fotosintéticamente activos,
cromoplastos, con pigmentos fotosintéticamente inactivos, y leucoplastos, sin pigmentos (Tabla 3).

Tabla 3. Clasificación de los plástidos de acuerdo al tipo de sustancia que almacena

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Para el estudio del tema consultar el material disponible en la pestaña “U8: Plástidos y Vacuolas” del
Campus.
Los cloroplastos son orgánulos de forma ovoide pero no exclusivos de una célula vegetal, ya que algas
verdes también presentan estas estructuras con formas peculiares como la de cinta o estrella. Su principal
pigmento es la clorofila y la principal función es la fotosíntesis.
Los cromoplastos poseen una estructura semejante a la de los cloroplastos. Sin embargo, los pigmentos
que almacena son fotosintéticamente inactivos como carotenos, xantofilas y licopeno, los que dan color
a flores, frutos y brácteas. Estos pueden tener diferentes formas de acuerdo a la especie vegetal
considerada.
Los leucoplastos son plástidos que almacenan sustancias sin color. Por lo tanto, su función es acumular
sustancias de reserva. De acuerdo a su contenido reciben diferentes denominaciones: a) Proteinoplastos
y oleoplastos: almacenan proteínas y lípidos respectivamente. b) Amiloplastos: reservan almidón, el cual
se acumula en el estroma. Pueden ser simples o compuestos según se formen uno solo o muchos granos
de almidón en cada amiloplasto (figura 25). Asimismo, según como se deposita el almidón a partir del
punto inicial o hilio, pueden ser concéntricos o excéntricos. Estas características son peculiares de cada
especie vegetal.

b
)

a)

Figura 25 a) partes de gránulos de almidón (hilio y capa de almidón) y su disposición. b) gránulos de almidón especies
vegetales de interés agronómico: A) papa, B) maíz, C) y D) lenteja, E) y F) poroto.

VACUOLA
Las vacuolas están limitadas por una membrana simple llamada tonoplasto, a diferencia de los plastos.
Son organelas muy grandes pudiendo ocupar hasta el 90% del volumen celular. Entre sus funciones
biológicas se señala el almacenamiento de agua y productos del metabolismo o sustancias ergásticas,
tales como: proteínas, hidratos de carbono, taninos, pigmentos solubles en agua (antocianinas) y cristales
de oxalato de calcio y magnesio, carbonato de calcio. La vacuola puede ocupar mucho lugar como en el
caso de Setcreacea purpurea y dejar pequeños hilos citoplasmáticos por los que se observa el movimiento
de pequeñas vesículas en el microscopio óptico (en el aula virtual de Biología dispone un video sobre
ciclosis (https://www.youtube.com/watch?v=zUF9l9zOGRo).

ACTIVIDADES
OBJETIVOS
✔ Identificar estructuras celulares vegetales y relacionarlas con su función.
✔ Adquirir habilidad para confeccionar preparados temporarios de material vegetal.
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ACTIVIDADES
1.- ESTRUCTURAS CELULARES VEGETALES
Realizar los siguientes preparados en el laboratorio para luego observarlos en la sala de microscopía, de
acuerdo al procedimiento señalado para cuada uno de los materiales vegetales disponibles

Material vegetal: Procedimiento: Orgánulo o estructura

subcelular a observar:

Licopersicum esculentum ● Realizar con un bisturí un corte en forma de V sobre Pared celular y
“tomate” la superficie. plasmodesmos
● Con una pinza tomar una pequeña porción de piel.
● Colocar el material sobre un portaobjeto. Agregar
una gota de agua.
● Coloca un cubreobjetos y comprimir suavemente.

Licopersicum esculentum ● Raspar con un bisturí la pulpa del tomate o morrón. Cromoplastos
“tomate”, o Malus ● Colocar sobre el portaobjeto y agregar una gota de
domestica “manzana” agua destilada.
● Colocar un cubreobjeto y comprimir suavemente.

Pelos estaminales de ● Retirar un estambre con una pinza. Vacuola, núcleo y

Setcreacea purpurea “flor ● Separar la antera del resto del estambre (filamento y ciclosis
de Santa Lucía” pelos estaminales).
● Colocar un pelo estaminal sobre un portaobjeto.
● Agrega una gota de agua y cubrir con un cubreobjeto.

Hojas de Elodea ● Tomar una hoja de la parte apical Cloroplastos

callitrichoides ● Montar sobre un portaobjetos con agua destilada.
(kalanchoe). y hoja de ● Tomar una hoja de espinaca, realizar un corte en V
espinaca con bisturí.
● Tomar con pinza una porción de epidermis.
● Colocar sobre un portaobjeto. Agregar una gota de
agua.
● Coloca un cubreobjetos y comprimir suavemente.

Material: Solanum ● Colocar una gota de agua sobre un portaobjeto. Leucoplastos

tuberosum “papa”, arroz, ● Montar cortes delgados de cada material (apenas (principalmente
garbanzo, lenteja, raspando con bisturí) sobre el portaobjeto. gránulos de almidón)
jengibre, maíz, banana. ● Cubrir con un cubreobjeto y comprimir suavemente.

a) Observar el material biológico al microscopio, primero con objetivo 4X, luego 10X, y si es necesario con
40X.
b) Graficar y colocar las referencias en el gráfico.
c) Calcular el aumento total de lo observado.
d) Responda las preguntas en relación a lo observado.

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2.- RESULTADOS ESPERADOS: complete

Preparado de la piel de tomate:
Se pueden observar las células rodeadas de pared
celular. Las células no dejan espacios intercelulares entre
sí.

- Indique cómo se denomina las estructuras señaladas

con flechas:

- Aumento total empleado:

Preparado de estambre de flor de “santa lucia”:

Cada pelo se presenta como una hilera de células
de aspecto de cuentas de collar

Señalar con flechas las estructuras que reconoce:

A qué se debe el color violáceo de la célula:

Qué características tiene el fenómeno de ciclosis:

¿A qué se debe la ubicación del núcleo?:

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Sobre la observación de cloroplastos:

Responder:
a. Complete los recuadros con el nombre de las
estructuras que reconoce
b. ¿Qué forma tienen los cloroplastos?

c. ¿Cómo se denominan las zonas adelgazadas de

la pared celular? Señálelas en el preparado.

d. Aumento total de la observación

Sobre la observación de amiloplastos: ¿Qué forma tiene el amiloplasto de la “papa”? ¿Cómo es el

depósito de almidón? ¿Dónde se ubica el hilo? ¿Qué diferencia existe entre un amiloplasto simple y uno
compuesto?

3.- OBSERVACIÓN DE CRISTALES PRECIPITADOS:

Utilizando las siguientes especies vegetales, elabore preparados siguiendo las instrucciones del docente.
Observe al microscopio óptico y complete el siguiente cuadro.
Especie vegetal Microfotografía del cristal y su denominación

Nombre vulgar: Jengibre

Nombre científico (completar): Nombre (completar):

Nombre vulgar: Costilla de Adán Nombre (completar):

Nombre científico (completar):

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Nombre vulgar: Mora Nombre (completar):

Nombre científico (completar):

Nombre vulgar: Kiwi

Nombre (completar):
Nombre científico (completar):

4.- Suponer que se efectúa un experimento en el que a la planta 1 se le suministra CO 2 normal, pero H2O
que contiene átomos de O2 radiactivos. A la planta 2 se le suministra H2O normal, pero CO2 que contiene
átomos radiactivos de O2. Se permite que ambas plantas efectúen fotosíntesis y se mide la radiactividad
del O2 gaseosos y los azúcares producidos. ¿Qué planta esperaría usted que produzca azúcares radiactivos
y cual O2 gaseoso radiactivo? ¿Por qué?

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TRABAJO PRÁCTICO N° 7
CICLO CELULAR
UNIDADES TEMÁTICAS: EL CICLO CELULAR EN LAS CÉLULAS EUCARIOTAS. MITOSIS.

INTRODUCCIÓN
El ciclo celular se puede considerar como una sucesión de etapas por las que transcurre una célula que
está proliferando. Todos los seres vivos, uni o pluricelulares, tienen como una de sus funciones
fundamentales la de reproducirse, preservando sus características esenciales a través de las generaciones.
En el caso de las células procariotas y otros organismos unicelulares el ciclo celular se corresponde con
el ciclo de vida de la célula. La división celular de bacterias denominada amitosis o fisión binaria, genera
dos células a partir de la célula madre. Esto permite aumentar el número de individuos de la población
bacteriana.
En células eucariotas, la secuencia regulada y repetitiva de crecimiento y división celular que atraviesan
la mayoría de las células, constituye el ciclo celular, cuyas etapas son la interfase y la división celular. A
su vez, la interfase se subdivide en tres etapas o fases, denominadas G1 (o Gap 1); S (síntesis de ADN) y
G2 (o Gap 2). fenómenos que tienen lugar durante la reproducción celular corresponden sólo a una de las
etapas del ciclo celular (figura 26).
Este ciclo resulta de la coordinación de una serie de procesos que involucran la integración de diferentes
señales, que conducen a la duplicación de sus moléculas de ADN, su condensación formando los
cromosomas, la segregación (o separación) en dos y la posterior descondensación de los cromosomas y
la formación de los nuevos núcleos, seguido de la citocinesis (escisión del citoplasma). Dentro de este
ciclo, la división celular es la etapa durante la cual una célula da origen a las células “hijas”.

Figura 26. Esquemas que representan el ciclo celular eucariota (izquierda). G, del inglés gap y S de síntesis de ADN. Se han
representado valores de tiempos promedio de células en cultivo. n = número de cromosomas, c = número de cromátidas.

MITOSIS
Las células somáticas eucariotas se dividen por mitosis, previa duplicación del material genético y
segregan así una copia de cada cromosoma duplicado. Además, debe garantizarse que las organelas
esenciales sean duplicadas, para proveer a cada una de las células hijas del material necesario.
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Durante la mitosis ocurren 2 procesos altamente sincronizados: la cariocinesis (división del núcleo) y la
citocinesis (división del citoplasma). En la cariocinesis pueden reconocerse las siguientes fases
principales: profase, metafase, anafase y telofase. Algunos autores reconocen a la prometafase como un
estadio entre profase y metafase. La mitosis finaliza precedentemente a la citocinesis, la cual es diferente
entre especies.

CITOCINESIS
La división del citoplasma en las células
animales (citocinesis) se produce por
estrangulamiento y escisión, mientras que en
a b
la célula vegetal no existe escisión completa
) )
del citoplasma, sino que las células hijas
quedan separadas por la formación de una
placa celulósica (fragmoplasto) en el plano
ecuatorial de la célula, que crece hacia la
periferia formando la pared celular primaria,
figura 27. Por ello, se dice que los organismos
que no tienen escisión completa forman un
Figura 27. Comparación de los eventos de separación de
sincitio o sincicio, quedando comunicadas a las células hijas, al finalizar la mitosis. (a) Células animales.
través de aberturas de la pared celular (b) Células vegetales.
denominadas plasmodesmos. Algunos
autores, como Alberts y col. (2002) la denominan citocinesis especial. Tampoco hay escisión del
citoplasma en algunos hongos, protistas e insectos, aunque con características diferentes.

MEIOSIS
La meiosis se caracteriza por presentar dos divisiones sucesivas del material hereditario (División I y
División II o también denominadas Meiosis I y II), precedidas por un único período S (de síntesis de ADN e
histonas y otras proteínas asociadas). Estas divisiones dan lugar a cuatro células haploides (gametos) a
partir de una célula diploide. Cuando ambos gametos fusionan sus núcleos haploides, tras la fecundación,
se recupera la dotación diploide característica de la especie. Vea más información y actividades sobre
meiosis en el campus.

ACTIVIDAD
OBJETIVOS
✔ Diferenciar las etapas del ciclo celular, sus funciones, estableciendo las diferencias entre organismos
unicelulares y multicelulares
✔ Diferenciar el proceso de mitosis y meiosis, y reconocer su importancia biológica
✔ Observar al microscopio óptico las diferentes etapas de la división celular mitótica a partir de
preparados histológicos de tejido vegetal

ACTIVIDADES
MITOSIS
1.- OBSERVACIÓN DE CÉLULAS MERISTEMÁTICAS EN DIVISIÓN CELULAR
En forma práctica, el proceso de mitosis puede ser estudiado empleando tejidos en crecimiento,
constituidos por células que se hallan en continua división. Esta condición la reúnen los meristemos, tales
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como los que se encuentran en el ápice de las raíces y yemas apicales de las plantas.

Material: Raicillas de Allium cepa “cebolla”

Procedimiento
1. Realizar un cultivo hidropónico de bulbos de Allium cepa (cebolla) en condiciones fisiológicas (agua
destilada), a 25 °C y expuestos a la luz, durante 4 a 5 días y hasta que sus raíces alcancen unos 3-4 cm de
longitud (figura 28).

Figura 28. (a) Esquema del dispositivo para crecimiento de

las raicillas de cebolla. (b) Esquema que representa una
raicilla de cebolla; el recuadro indica la zona de mayor
proliferación celular, la cual será disecada para realizar el
TP.

2. Obtención de un preparado histológico semipermanente de los ápices de Allium cepa (cebolla) en

estudio.
• Cortar con bisturí ápices de raicillas de cebolla, de 2 o 3 cm de longitud.
• Sumergirlos en solución fijadora1 (etanol/ácido acético, 3:1) durante 5 minutos a temperatura
ambiente.
• Ablandar la pared celular sumergiendo las raicillas durante 15 minutos en una solución de maceración
(1:1 de etanol/HCl).
• Transferir las raicillas durante 5 min. a una solución de ácido acético al 45 %..2

1La solución fijadora mata las células, evitando procesos de descomposición por enzimas celulares, logrando así la preservación
de las estructuras biológicas y la observación del tejido sin alteraciones.

2Estas soluciones ayudan a disolver el cemento de pectina de la pared celular vegetal y facilita la separación celular posterior y
observación de cromosomas por aplastamiento

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• Lavar las raicillas con agua destilada (H₂Od).

• Depositar una gota de colorante Orceína a un vidrio de reloj y transferir las raicillas durante 2 minutos.
• Calentar con un mechero durante 10-15 segundos, evitando que entre en ebullición ¡UTILIZAR
GUANTES!
• Seccionar 1 mm del extremo apical de la raicilla y transferirlo a un portaobjetos. Realizar squash o
aplastamiento del tejido, colocando un cubreobjeto y presionando con el dedo pulgar.
• Secar el preparado con una almohadilla de papel, si queda líquido fuera del cubreobjetos.

3. Análisis morfológico cuali y cuantitativo de las etapas de la mitosis:

• Observar al microscopio óptico el preparado semipermanente obtenido, enfocando en 10X y luego
aumentar hasta 40X.
• Dibujar las fases del ciclo celular observado y ordenarlas secuencialmente, detallando los componentes
celulares que pudo distinguir en el núcleo y en el citoplasma. Ponga especial atención a las características
de los cromosomas.

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TEÓRICO PRÁCTICO ÁULICO N° 1

CLASIFICACIÓN DE LOS SERES VIVOS
UNIDAD TEMÁTICA: UNA REVISIÓN DE LA BIOLOGÍA CELULAR. EL ORIGEN Y LA EVOLUCIÓN DE LOS SERES VIVOS.

INTRODUCCIÓN

LA CLASIFICACIÓN DE LOS SERES VIVOS

La Biología es la ciencia que estudia la diversidad de organismos vivos en la Tierra. Desde los primeros
tiempos los naturalistas necesitaron agrupar el mundo de los seres vivos basándose en semejanzas y
disponer de un sistema que les permitiese nombrar y agrupar a las especies conocidas de una manera
lógica, objetiva, económica y no redundante. El área de conocimiento de la Biología encargada de
establecer las reglas de clasificación de los organismos es conocida como Taxonomía.
La primera propuesta de clasificación de los seres vivos fue realizada por Linnaeus. En el año 1735
desarrolló el sistema de nomenclatura binomial para nombrar las especies, y que se utiliza en la
actualidad. La unidad básica de clasificación de los organismos es la Especie, que se refiere a los diferentes
“tipos” de organismos. Cada especie es denominada por dos nombres en latín: el primero que denota el
género al que pertenece y se escribe con la primera letra en mayúscula y el segundo, la especie, que se
escribe en minúscula. Ambos nombres en cursiva. Ejemplo: Apis mellifera, nombre científico de la abeja.
En su publicación “Sistema Natural” (1758)
(Figura 1), Linnaeus propone la organización
de los organismos conocidos en tres Reinos:
Reino Vegetabile (plantas), Reino Animale
(animales) y Reino Lapideum (minerales). Este
sistema de clasificación incluye otras
categorías taxonómicas como clase, orden y
familia, cada una incluida sucesivamente
dentro de categorías de mayor rango.

Figura 1. Fotografía de la portada del libro Sistema

Natural, publicada por Linnaeus.

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El trabajo de clasificación u ordenamiento

de los seres vivos estuvo basado en las
semejanzas morfológicas que presentan los
organismos. Estos se organizaban de forma
jerárquica en cinco categorías taxonómicas
o taxa. De mayor a menor jerarquía: reino,
filum (o divisiones), clase, orden y familia.
(Figura 2).

Figura 2. Esquema de organización en categorías

taxonómicas: una especie pertenece a categorías taxonómicas
mayores.

El sistema de clasificación propuesto por Linneus consideraba que las especies eran entidades fijas, que
no cambiaban ni se extinguían. Sin embargo, los estudios posteriores del naturalista Charles Darwin (1809-
1882) se basaron en que las especies no son entidades estáticas, sino que, por el contrario, aunque tienen
un origen común, están en continua evolución. Se buscó entonces una clasificación que refleje la filogenia
de todos los seres vivos. Esto es, que se tenga en cuenta el origen de las mismas y la evolución de un grupo
taxonómico. Así, los sistemas de clasificación propuestos, se apoyaron en el desarrollo de técnicas de
biología molecular, para ubicar a los organismos en las distintas categorías (siglo XX).
En 1990, Carl Woese propone un sistema de clasificación de los organismos vivos conocido como “Sistema
de Clasificación Universal”. Este sistema se basó en estudios de comparación de secuencias de genes
comunes a todos los organismos, como aquellos que codifican para ARN ribosómico (biología molecular).
En cambio, el sistema de Linneus, se basaba en características morfológicas observables. Woese incluyó
un taxón biológico de más alto rango denominado dominio, que es más abarcativo a las categorías
taxonómicas referidas anteriormente y muestra tres linajes evolutivos (Figura 3).
La raíz del árbol universal representa un punto en la historia evolutiva referido a un antepasado común:
Antecesor Universal. Los organismos procariotas (sin núcleo definido y organización subcelular simple)
conforman dos linajes: las bacterias verdaderas (comprendidas en el dominio Bacteria) y las arqueas
(comprendidas en el dominio Archaea). El tercer linaje está conformado por organismos eucariotas
(células con núcleo limitado por doble unidad de membrana y organelas especializadas) comprendidos en
el dominio Eukarya. Los tres dominios (dos procariotas: Bacteria y Archaea y el eucariota: Eukarya) se
subdividían en reinos, los que a su vez se podían organizar en categorías taxonómicas menores. Entonces,
de acuerdo a esta propuesta la organización incluyó tres dominios y seis reinos.

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Figura 3. Esquema del Sistema de Clasificación Universal propuesto por Carl Woese. Se representan los tres
Dominios a partir de un ancestro común.

Desde Woese (1990), la expansión del conocimiento y el aumento del número de especies descriptas ha
requerido una ampliación del número de niveles jerárquicos (rangos) dentro del sistema, por lo que, el
árbol de la vida se ha reestructurado profundamente durante este último tiempo. Los métodos
moleculares (análisis de secuencias genómicas), ampliaron drásticamente la diversidad de organismos
que podía incluirse en el árbol (Hug et al., 2016), reconstituyéndose el denominado “Nuevo Árbol de la
Vida”, en el cual, ya no se trabaja con el nivel Reino. En la Figura 4 se observa que se mantienen los tres
dominios “Bacteria, Archaea y Eukarya”, y se incluyen cinco supergrupos eucariotas: Opisthokonta,
Excavata, Archaeplastida, Chromalveolata, Amoebozoa.

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Figura 4. Nuevo Árbol de la Vida. Se señalan con elipsoides los tres dominios. En el rectángulo se señalan los
cinco supergrupos incluidos en el Dominio Eukarya.

A su vez, Burki et al. (2020) incorpora nuevamente profundos cambios en la rama eucariota, incluyendo
dos supergrupos más al sistema antes mencionado. Esta reorganización del árbol de la vida se basa en el
descubrimiento de numerosos organismos protistas, principalmente heterótrofos de vida libre, a partir
de estudios filogenéticos puramente moleculares. El otro gran cambio está relacionado con las algas y las
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plantas. En el trabajo de Woese, las plantas pertenecen al Reino Plantae y las algas al Reino Protista. Sin
embargo, la historia evolutiva muestra que algas rojas, algas verdes y plantas terrestres, constituyen un
grupo denominado Archaeplastida o Primoplantae (en color verde en Figura 5). La presencia de plastos
rodeados por dos membranas sugiere un origen directo a partir de “procariotas” por endosimbiosis y este
sería el origen del linaje. La clasificación incluye siete "supergrupos”: Amorphea, Excavata,
Archaeplastida, CRuMs, Cryptista, Haptista, TSAR.

Figura 5. Detalle de la rama Eukarya mostrando los siete grupos.

CARACTERÍSTICAS DE LOS DOMINIOS Y SUPERGRUPOS MÁS RELEVANTES EN LA AGRONOMÍA

DOMINIO BACTERIA
Los organismos pertenecientes a este dominio son procariotas unicelulares (bacterias verdaderas o
eubacterias) cuyas dimensiones son del orden de un micrómetro (µm). No poseen núcleo definido y la
mayoría de ellos están rodeados por pared celular constituida por el péptidoglucano llamado mureína.
Los lípidos presentes en la membrana citoplasmática están predominantemente compuestos por dos
ácidos grasos unidos mediante enlaces éster a un glicerol. La figura 6 muestra algunos ejemplos de
bacterias cuyas imágenes fueron obtenidas mediante microscopio electrónico de barrido.

Figura 6. Ejemplos de organismos pertenecientes al Dominio Bacteria se señala además la morfología de cada
una de las especies que se presentan: A) Brucella abortus (coco). B) Listeria monocytogenes (bacilo). C)
Campylobacter jejuni (espirilo).

Se caracterizan por su gran diversidad metabólica. Pueden crecer en ambientes con diferente
concentración de oxígeno: en situaciones de anaerobiosis estricta (sin O₂) a aerobiosis (con O₂). En cuanto
a la obtención de carbono como fuente de materia y energía pueden ser autótrofas, ej. las cianobacterias
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realizan la fotosíntesis y emplean el CO2 (carbono inorgánico) para formar sus propios constituyentes
celulares o bien, heterótrofas, ej. las bacterias Gram positivas requieren de una fuente orgánica de
carbono como lactosa, almidón, etc.
En este dominio se incluyen organismos de interés agronómico: mycoplasmas, cianobacterias,
proteobacterias, bacterias verdes sulfurosas, Bradyrhizobium japonicum (bacteria que se asocia
simbióticamente con la soja y fija nitrógeno molecular), Streptococcus agalacteae y Streptococcus
disgalacteae (bacterias que provocan infección e inflamación de las ubres en vacas lecheras),
Streptococcus thermophilus y Lactobacillus bulgaricus utilizadas en la elaboración industrial de yogur.

DOMINIO ARCHAEA
Las arqueas son microorganismos procariotas unicelulares (arqueobacterias). A nivel molecular, en la
composición química de la pared celular no se encuentra peptidoglucanos. Algunas de ellas presentan un
componente denominado pseudomureína. En cuanto a los lípidos de membrana, la característica
distintiva en Archaea es que, la unión entre el glicerol y las cadenas hidrocarbonadas es de tipo éter.
Desde el punto de vista ecológico, estos organismos en su mayoría son anaeróbicos y heterótrofos. Se
encuentran en hábitats con condiciones extremas, por ejemplo, temperaturas muy bajas o muy elevadas,
ambientes con altas concentraciones de azufre, etc. Según el hábitat preferido, podemos dividirlas en tres
grupos.
● Halófitas: Viven en ambientes extremadamente salinos. Ejemplo: Halococcus y Halobacterium.
● Termoacidófilas: Requieren temperaturas de entre 60 - 80º C para desarrollarse, y algunas
especies también un pH bajo, de 1 a 3. Sulfolobus acidocaldarius oxida el azufre y vive en las
fuentes termales; Thermoplasma se encuentra en escombreras de carbón encendidas.
● Metanógenas: Viven en ambientes anaeróbicos y producen metano. Se pueden encontrar en
sedimentos o en los intestinos de animales. Un ejemplo lo constituye el grupo de las
Methanobacterias.
La figura 7 muestra microfotografías electrónicas de algunas especies pertenecientes a este dominio.

Figura 7. Ejemplos de organismos pertenecientes al Dominio Archaea: A) Halobacterium sp. (halófita). B)

Sulfolobus acidocaldarius (termo-acidófila). C) Methanosarcina mazei (metanógena).

DOMINIO EUKARYA
El dominio Eukarya abarca organismos unicelulares y pluricelulares, autótrofos o heterótrofos, pero
TODOS con un núcleo organizado, envuelto por una doble membrana lipídica, donde se encuentra el ADN
genómico asociado a proteínas histónicas y no histónicas.
El dominio se organiza en 7 supergrupos, de los cuales describiremos sólo los de mayor interés
agronómico.

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TSAR
Comprende hasta la mitad de toda la diversidad de especies de eucariotas. Pueden ser organismos
unicelulares o pluricelulares. Autótrofos en su mayor parte, con clorofila a y c. Incluye varios grupos
principales de algas microscópicas (p. ej., diatomeas, dinoflagelados), algas marinas grandes, protozoos
de vida libre ecológicamente importantes (p. ej., ciliados, foraminíferos, radiolarios) y muchos parásitos
protozoarios bien estudiados (p. ej., oomicetos causantes de enfermedades en plantas).

ARCHAEPLASTIDA
En este supergrupo se incluye a Rhodophyta (algas rojas), Chloroplastidia (algas verdes y plantas) y
Glaucophyta (algas unicelulares de agua dulce). Todos estos subgrupos se caracterizan porque presentan
plástidos primarios fotosintéticos originados directamente de cyanobacterias.
En Chloroplastidia, el grupo Plantae comprende unas 260.000 especies conocidas y clasificadas, entre las
cuales se encuentran musgos, epífitas, helechos, herbáceas, arbustos, plantas trepadoras y árboles (Figura
8). El tamaño y la complejidad de los organismos de este grupo es muy variable: desde pequeños musgos
no vasculares hasta gigantescas secuoyas (de más de cien metros de altura). Son organismos
pluricelulares. Las células poseen una pared celular más o menos rígida compuesta principalmente por
celulosa y otros constituyentes que serán estudiados cuando se trate el tema de célula eucariota
vegetal. Las células constituyentes de éstos organismos se organizan en unidades estructurales y
funcionales llamadas tejidos. Son autótrofos porque realizan el proceso de fotosíntesis gracias a la
presencia de la clorofila ubicada en los cloroplastos y absorben agua y demás nutrientes a través de las
raíces. La reproducción es sexual (semillas) con alternancia de generaciones, pero también se pueden
reproducir en forma asexual o vegetativa.

Figura 8. Ejemplos de organismos pertenecientes al Grupo Plantae: A) Bryum algovicum (musgo). B) Tillandsia
aëranthos (epífita). C) Blechnum brasiliense (helecho). D) Solidago chilensis (herbácea). E) Baccharis articulata
(arbusto). F) Clytostoma callistegioides (trepadora). G) Handroanthus impetiginosus (árbol).

Entre las especies de interés agronómico se pueden citar el arroz, el trigo, el maíz, el algodón, la soja, el
pino y el tabaco, etc. La biomasa generada por la producción que aportan las plantas no sólo constituye
la base de todas las cadenas tróficas, sino que también modifica los climas y suelos transformando así los
ecosistemas.

AMORPHEA

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Incluye los subgrupos Amoebozoa (mayoría de las amebas), Opisthokonta (Fungi, conocidos como hongos
verdaderos) y Metazoa, donde se encuentran los denominados animales. Los organismos del grupo Fungi
poseen pared celular, en cambio los protistas flagelados (Amoebozoa) y los animales (Metazoa) no
presentan esta estructura.
El grupo Fungi incluye a los hongos, mohos y levaduras. Son organismos pluricelulares con excepción de
las levaduras que son unicelulares (Figura 9).

Figura 9. Ejemplos de organismos pertenecientes al Grupo Fungi: A) Saccharomyces cerevisiae (levadura

unicelular). B) Penicillium digitatum (hongo pluricelular).

Poseen pared celular formada por los polisacáridos quitina y glucano. En cuanto a su nutrición son
quimioheterótrofos y secretan enzimas que degradan compuestos orgánicos y luego absorben productos
más simples de dicha degradación.
Los hongos pluricelulares constan de una masa de filamentos (llamados hifas). El conjunto de hifas
resultante del crecimiento del hongo se llama micelio. La mayoría de los hongos se reproducen mediante
esporas sexuales y/o asexuales, pero también pueden hacerlo por seccionamiento de hifas.
Los hongos tienen una activa participación en numerosos ecosistemas, algunos de los cuales son de
interés agronómico. Algunos de ellos son responsables de la putrefacción y descomposición de la materia
orgánica y reciclado de nutrientes. Muchos forman asociaciones simbióticas con algas (formando
líquenes), raíces de plantas (micorrizas) o animales (hormigas). Hay especies de hongos que son parásitos
y causan enfermedades a especies vegetales. Otros, son de gran utilidad en las cadenas agroalimentarias
como las levaduras que son empleadas en la fabricación del pan, del vino y de la cerveza. También hay
hongos comestibles (champiñón) y hongos utilizados en medicina como el Penicillium, del cual se extrae
la penicilina y otros antibióticos.
Otro subgrupo dentro de Opisthokonta es el subgrupo Metazoa, que incluye al grupo Animalia; éste
abarca a esponjas, equinodermos, anélidos, moluscos, artrópodos, peces, anfibios, reptiles, aves y
mamíferos (Figura 10). Los animales habitan ambientes muy diversos, desde profundidades marinas,
pasando por todos los ambientes terrestres, e incluso algunos adquirieron la capacidad de volar
conquistando el ambiente aéreo.
Estos organismos son multicelulares y en general diploides. Poseen células eucariotas sin pared celular
que se organizan en tejidos. Son quimioheterótrofos y obtienen materia y energía a partir de sustancias
carbonadas orgánicas. La reproducción es predominantemente sexual. Se desarrollan de una célula huevo
o cigoto que es el producto de la fusión de una pequeña célula masculina (espermatozoide) y una gran
célula femenina (óvulo). Algunos grupos animales presentan también reproducción asexual como es el
caso de la fragmentación o escisión en Anélidos y Equinodermos, y la partenogénesis en pulgones.

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Figura 10. Ejemplos de organismos del subgrupo Opisthokonta: A) Aplysina archeri (esponja). B) Protoreaster
nodosus (equinodermo). C) Nereis sp. (anélido). D) Octopus kaurna (molusco). E) Doxocopa laurentia (artrópodo). F)
Amphiprion ocellaris (pez). G) Hylorina sylvatica (anfibio). H) Tupinambis merianae (reptil). I) Ramphastos toco (ave).
J) Puma concolor (mamífero).

La mayoría de los animales han desarrollado un sistema nervioso muy evolucionado y órganos sensoriales
complejos que, junto con los movimientos especializados, les permiten controlar el medio y responder
con rapidez y flexibilidad a estímulos cambiantes. También se caracterizan por desarrollar un esqueleto
interno o externo que les sirve de soporte y movilidad.
La diversificación de los animales ha sido tan importante que ocupan un gran número de nichos
ecológicos.

CRuMS
Son protozoos de vida libre con morfología variada (flagelados nadadores, células ameboides filosas y
pequeñas células deslizantes, respectivamente) y anteriormente eran taxones huérfanos, pero se unieron
sólidamente en análisis filogenómicos recientes.

EXCAVATAS
Involucra a Euglenidos y otros flagelados. Son organismos unicelulares. Tanto autótrofos como
heterótrofos, protozoos de vida libre, simbiontes intestinales y parásitos. No poseen mitocondrias
clásicas, pueden poseer mitocondrias con crestas generalmente discoidales, menos a menudo tubulares
o planas.

OBJETIVOS
✔ Diferenciar a los diferentes organismos vivos. Distinguir sus características morfológicas,
fisiológicas y clasificarlos.
✔ Conocer y caracterizar organismos de interés agronómico pertenecientes a diferentes
supergrupos.

ACTIVIDADES TEÓRICO –PRÁCTICAS: virtuales en Campus todas las comisiones (a y b)

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TEÓRICO PRÁCTICO ÁULICO Nº 2

COMPUESTOS ORGÁNICOS E INORGÁNICOS EN SISTEMAS

BIOLÓGICOS
UNIDAD TEMÁTICA 2: LA QUÍMICA DE LAS CÉLULAS

INTRODUCCIÓN
Los seres vivos, como los inanimados, son sistemas materiales compuestos por moléculas (y estas a su vez
por átomos). Gran parte de la biología moderna se apoya en la Biología Molecular: esto es, la química y la
física de las moléculas que constituyen los seres vivos.
A pesar de lo diversos que son los seres vivos, estos poseen alrededor del 98% de la masa formada por
sólo seis elementos fundamentales: carbono (C), hidrógeno (H), oxígeno (O), nitrógeno (N), y en menor
proporción, pero no menos importantes, fósforo (P) y azufre (S). Hay unos 14 elementos más, que se
presentan en la mayor parte de los seres vivos, aunque en cantidades reducidas.
En cuanto a la organización molecular, las células están constituidas por dos grandes grupos. El primer
grupo de compuestos o moléculas son denominados inorgánicos, que incluye el agua y las sales minerales.
El agua es la sustancia más abundante, alcanzando hasta un 70% de la masa celular. Esto es de gran
importancia porque la mayoría de las reacciones químicas celulares ocurren en medio acuoso. Los iones
inorgánicos de las células: sodio (Na+), potasio (K+), magnesio (Mg2+); calcio (Ca2+); fosfato (HPO42-); cloruro
(Cl-); bicarbonato (HCO3-) constituyen cerca del 1% o menos de la masa celular, sin embargo, estos iones
poseen un rol fundamental en el metabolismo celular.

El segundo grupo de compuestos corresponde a los denominados compuestos orgánicos, cuya

característica principal es que el eje o esqueleto principal de éstas moléculas está formado por cadenas
de átomos de carbono, enlazados entre sí por un tipo de enlace clave en la vida, “el enlace covalente”.
Los compuestos orgánicos constituyen un grupo heterogéneo de compuestos que cumplen diversas
funciones biológicas en las células.

La mayoría de los compuestos orgánicos pertenecen a una de las siguientes cuatro clases de moléculas:
carbohidratos, proteínas, lípidos y ácidos nucleicos.

Tabla 1: Composición química aproximada de una célula bacteriana

Porcentaje del total del peso Número de tipos de cada
de la célula molécula
Agua 70 1
Iones 1 20
Azúcares y precursores 1 250
Aminoácidos y precursores 0.4 100
Nucleótidos y precursores 0.4 100
Ácidos grasos y precursores 1 50
Otras moléculas pequeñas 0.2 ~300
Macromoléculas (proteínas, ácidos 26 ~3000
nucleicos y polisacáridos)
#
Alberts y col., 2002
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Profundizar este tema con el material de estudio disponible en el Campus Virtual

ACTIVIDADES
OBJETIVOS
✔ Analizar y comprender a composición química de los seres vivos
✔ Relacionar la composición química de los seres vivos con las funciones biológicas

ACTIVIDADES
Con ayuda del material bibliográfico responder el siguiente cuestionario
1.- Investigue cual es la composición elemental aproximada de un tejido vegetal. Clasifique dichos
elementos de acuerdo a su abundancia.

2.- Conociendo las funciones que cumplen diferentes elementos en los sistemas biológicos:

a) ¿Qué ocurriría en una planta con deficiencia de calcio?

b) Describa el principal efecto de la deficiencia de calcio en rumiantes.

3.- Observar la tabla que se presenta a continuación sobre el contenido de agua en diferentes órganos del
ser humano. Explique qué sentido biológico le encuentra a dicha distribución.

Tejido Composición
Porcentual

Cerebro 86 %

Sangre 79%

Músculos 75%

Hígado 70%

Cartílagos 55%

Huesos 22%

Dientes 10%

4.- De todos los elementos que hay en la naturaleza: ¿Por qué el C es el elemento central de los
compuestos orgánicos?

5.- Indique las semejanzas y diferencias entre las siguientes moléculas: a) celulosa y almidón; b) celulosa
y quitina; c) almidón y glucógeno.

6.- Esquematice la estructura de un triglicérido, un ácido graso y un fosfolípido. Indique las partes que
reconoce en la estructura de cada uno de ellos. Mencionar las funciones biológicas de cada uno.

7.- La siguiente imagen presenta los 20 aminoácidos que forman parte de las proteínas (en la naturaleza
existen otros aminoácidos que no son constituyentes de las proteínas). Sobre los mismos indique: a)

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¿Cuáles son los elementos presentes en los aminoácidos? b) Identifique sobre los mismos los grupos
amino, ácido, cadena lateral y carbono α. c) ¿Qué aminoácidos presentan en su constitución azufre?

8.- El siguiente gráfico representa la estructura secundaria de una proteína. Indique: a) ¿Qué tipo de
estructura secundaria es la que se representa? b) Conociendo el tipo de enlace que estabiliza la estructura
secundaria de las proteínas, señale los mismos sobre el gráfico.

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9.- ¿Cuándo se desnaturaliza una proteína?

10.- a) Indique cómo están conformados los nucleótidos y represente gráficamente la disposición de sus
constituyentes. b) Mencione las principales funciones de los nucleótidos en los sistemas biológicos.

11.- La siguiente figura muestra el esquema del ADN. Sobre el mismo identifique: a) Las partes que
presentan un número. b) El sentido de las cadenas.

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TEÓRICO PRÁCTICO ÁULICO N° 3

CELULA PROCARIOTA
UNIDAD TEMÁTICA 4: INTRODUCCIÓN A LA BIOLOGÍA CELULAR

INTRODUCCIÓN
Como sabemos, la célula, es la unidad estructural y funcional básica de todos los seres vivos. Sin embargo,
a pesar de compartir una serie de características esenciales en cuanto a estructura y función, no todas
presentan el mismo nivel de complejidad, pudiéndose distinguir dos modelos de organización estructural:
las células procariotas y las células eucariotas.

En la siguiente figura se comparan ambos tipos celulares, procariota a la izquierda y eucariota a la derecha.
Se pueden observar las diferencias fundamentales, en cuanto a tamaño y organización estructural típica

Figura 1. Diferencias entre células procariotas y eucariotas.

La célula procariota típica tiene algunas estructuras que comparte con la célula eucariota y otras que le
son propias, figura 2.

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Figura 2. Estructuras de una célula procariota.

Cada célula procariota constituye un organismo (o microorganismo ya que son de dimensiones

microscópicas) correspondiente a los dominios Bacteria o Archaea. Estos microorganismos pueden
presentar tamaños entre 0,1 y 5 µm de diámetro y según la especie tienen diferentes formas que se
observan con el microscopio óptico.
Estas formas son características de cada especie bacteriana pero no suficiente para su identificación. Estas
son: coco (esferas pequeñas), cocobacilo, bacilo (cilindros rectos), espirilo (bacilo curvado), espiroqueta
(bacilo con forma de sacacorcho) y filamentosa. La figura 3 muestra las formas más representativas que
pueden tener las bacterias.

Figura 3. Diferentes formas de las células procariotas.

Muchas células microbianas se mantienen unidas luego de dividirse y según los planos de división, suelen
quedar agrupadas de una manera que es característica para la especie. Los agrupamientos son

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característicos de cada forma bacteriana. En la figura 4 se muestran algunas formas de agrupaciones

bacterianas de acuerdo con el plano de división original.

Figura 4. Planos de división de una célula con forma de coco y agrupamientos bacterianos que se pueden derivar.

A continuación, se describirán algunas estructuras características de la célula bacteriana, para más

información se sugiere revisar el libro Biología de los Microorganismos de Brock.
Las endosporas son estructuras de resistencia característica de algunos géneros de bacterias como
Bacillus y Clostridium. Su principal función es permitir a la célula resistir condiciones ambientales
desfavorables extremas, especialmente altas temperaturas. No se conocen arqueas que formen
estructuras similares. Estas estructuras se observan fácilmente al microscopio óptico como cuerpos con
índices de refracción diferentes al resto de la célula, ya que al ser impermeables a colorantes se observan
como regiones no teñidas, figura 5.

Esporangio o célula
Esporas
vegetativa

Figura 5. Endosporas bacterianas. En las microfotografías a y b se observa que la endospora se forma en el

extremo de un bacilo, y en la microfotografía c se observa que se forma en el centro del bacilo.

Otras de las estructuras características de las células procariotas que se puede observar al microscopio
óptico es la pared celular. Su función biológica es la de conferir rigidez, protección física al citoplasma y
dar forma a la célula. Esta estructura está presente en la mayoría de las bacterias. Los miembros de
Archaea presentan pared celular constituida por pseudopeptidoglucano (o pseudomureína), proteínas o
glucoproteínas. La pared celular de los miembros de Bacteria en cambio está constituida por el
peptidoglucano denominado mureína. La mureína (figura 6) está formada por una cadena lineal de dos
aminoazúcares alternados: N-acetilglucosamina (representada con color anaranajado) y ácido N-
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acetilmurámico (representado con color verde). A cada residuo de ácido murámico se halla ligado un
tetrapéptido compuesto de D y L-aminoácidos alternados.
Según la estructura y composición de la pared celular las bacterias se clasifican en bacterias Gram
positivas (+) y Gram negativas (–), como se muestra en la figura 7. La clasificación de las bacterias según
la pared celular [Gram (+) o Gram (–)] es de valor taxonómico, estas se clasifican así según se tiñan o no
con el colorante cristal violeta.

Figura 6. N-acetil-glucosamina (NAG) y

ácido N-acetil-murámico (NAM) unidos como
aparecen en el péptido glucano. La unión que
establecen se denomina de tipo ß-1,4. Las
cadenas paralelas se unen a través de
tretapétidos.

Figura 7. Comparación entre las estructuras y los componentes de las paredes celulares de bacterias Gram-
negativas (A) y Gram-positivas (B)

Otras estructuras de importancia para la célula bacteriana como glicocalix, flagelo, entre otras, serán
tratadas en detalle en el video disponible en el campus https://youtu.be/GBDKue8mnN0

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ACTIVIDADES

OBJETIVOS
✔ Reconocer las estructuras propias de la célula procariota y relacionarlas con su función biológica.

ACTIVIDADES
ACTIVIDADES TEÓRICO –PRÁCTICAS: virtuales en Campus todas las comisiones (a y b)

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