TRABAJO PRÁCTICO
COCOS GRAM (+)
OBJETIVOS: Que el estudiante:
1. Conozca los pasos a seguir en una marcha bacteriológica donde se aíslan
cocos gram positivos.
2. Realice e interprete las pruebas bioquímicas utilizadas comprendiendo la Fig1:http://www.agroparlamento.com/agr
importancia de las mismas para la caracterización e identificación de estos oparlamento/notas.asp?n=1744
microorganismos.
3. Desarrolle habilidades y destrezas en el laboratorio de microbiología.
CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD: Normas de Bioseguridad N°
2
*Hisopados de piel, de
mucus cervico vaginal,
óticos MUESTRA
* Leche.
* Orina.
* Contenidos de abscesos
RUTA MICROBIOLÓGICA RUTA INMUNOLÓGICA
NO SE REALIZA
Aislamiento y Visualización
tipificación
RUTA
MICROBIOLÓGICA
FAMILIA:Staphylococcaceae
GÉNERO: Staphylococcus
MORFOLOGÍA
Cocos grampositivos dispuestos en racimo. (Figura 2) Fig 2:http://vetbook.org/wiki/cat/index.php/
Staphylococcus_spp.
MUESTRAS QUE SE REMITEN AL LABORATORIO
Hisopados de piel, de mucus cervico vaginal, óticos. Leche. Orina. Contenidos de
abscesos.
93
MEDIOS DE CULTIVO UTILIZADOS
Crecen bien en medios comunes como Agar Nutritivo, MuellerHinton, Agar Sangre. Hay
medios selectivos para estafilococos como Agar Manitol Salado o Chapman y Agar 110; no
crecen en medios para Enterobacterias como Agar Mac Conkey.
IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA
a)Agrupamiento celular (agrupación microscópica previa coloración de Gram)
b)Catalasa
c)O/F
d)VP
e)Crecimiento de C1Na
f)Crecimiento en Bilis 40%
COLORACIÓN DE GRAM: (ver técnica práctico coloraciones). Se hace un
extendido fino, usando una suspensión de cultivo joven, porque muchas bacterias Gram (+)
pierden la capacidad de fijar el violeta de genciana cuando envejecen. (Fig 3)
Fig 3: Cocos gram positivos
PRUEBA IDENTIFICATORIA: CATALASA POSITIVA
CATALASA: Se debe trabajar con cultivos jóvenes de 18 a 24 hs, ya que cultivos
viejos pueden dar resultados incorrectos. Tampoco se deben emplear medios de cultivos
con sangre porque la catalasa de los glóbulos rojos da resultados falsos positivos.Por lo
tanto, no se debe tomar agar al arrastrar la colonia. Si no puede tomar fácilmente la colonia
o ésta no creció bien, repita la prueba a partir de colonias en agar chocolate, éste no
interfiere con el test. O de agar nutritivo. Por otro lado, algunas asas de metal pueden
producir resultados falsos positivos, por eso se prefiere el uso de asas de platino, de plástico
o de vidrio.
Puede efectuarse directamente en un cultivo en pico de flauta (agar nutritivo) agregando l
ml de agua oxigenada al 30%; o bien en un portaobjetos colocando una gota de suspensión
bacteriana y una gota de agua oxigenada. Si hay desprendimiento de burbujas es porque la
bacteria al producir la enzima catalasa, hace que se desdoble el peróxido de hidrógeno
desprendiendo oxígeno que se visualiza como pequeñas burbujas. (Fig 4)
Esta enzima se encuentra en la mayoría de las bacterias aeróbicas y anaeróbicas facultativas
que contienen citocromos.
2 H202 ------catalasa----------2 H20 + O2
94
Fig 4: A. Resultado negativo. No hay producción de burbujas. B. Resultado positivo. Hay producción de burbujas .
http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/moodle/file.php/743/Bacteriologia/Pruebas_de_laboratorio/Catalasa1.jpg
PRUEBAS QUE LO DIFERENCIAN DE Micrococos (FLIA Micrococcaceae):
Prueba Micrococcus Staphylococcus
O/F (glucosa) Oxida Oxida y fermenta
VP (VogesProskauer) Negativa Positiva/ negativa
Crecimiento en ClNa 15 % No desarrolla Desarrolla
Crecimiento en Bilis 40% No desarrolla Desarrolla
PRUEBA DE ÓXIDO-FERMENTACIÓN (O/F): Al medio base de Hugh y
Leifson esterilizado, se le agrega la solución de hidrato de carbono a concentración final de
1 % (esterilizada por filtración). Se siembra en picadura el microorganismo a estudiar de
un cultivo de 24 hs, en dos tubos con 5 ml de medio OF y se cubre uno de ellos con vas-par
(vaselina y parafina, 1: 1, estéril) para favorecer la fermentación. El ácido resultante de la
metabolización del hidrato de carbono da por resultado un cambio de pH y el indicador
azul de bromotimol vira del verde al amarillo. En un tubo se mide la capacidad de
oxidación (“O”: oxidación, tubo sin vas-par) y en el otro la fermentación (“F”:
fermentación, tubo con vas-par).
Interpretación:
Oxida y fermenta: Tubo “F”: vira del verde al amarillo. Tubo “O”,con O2: vira del verde
al amarillo. Microorganismos anaerobios facultativos. (Fig 5, punto 3)
Fermenta: Tubo “F”: vira del verde al amarillo. Tubo “O”, con O2: permanece verde-azul
(del medio original). Microorganismos anaerobios.
Oxida: Tubo “F”: permanece verde-azul. Tubo “O”, con O2: vira del verde al amarillo.
Microorganismos aerobios(Fig 5, punto 2)
El hidrato de carbono comúnmente utilizado es la glucosa, aunque, con un procedimiento
similar se pueden determinar la fermentación de otros azúcares: lactosa, sacarosa, etc.
Fig 5: Prueba de Oxido-Fermentación.
Resultados.
1.- Medios luego de la siembra y agregado
de capa de vas-par.
2.- Utiliza hidratos de carbono por medio de
la respiración. Bacteria aerobia
3.- Utiliza hidratos de carbono por medio de
la fermentación. Bacteria anaerobia
facultativa.
4.- No utiliza hidratos de carbono. Color
azul en tubo sin vas-par puede deberse a la
http://c degradación de las proteínas, lo cual
ommons.wikimedia.org/wiki/File:Hugh_et_Leifson.jpg
aumenta el pH y el indicador vira a azul. 95
PRUEBA VOGES PROSKAUER(VP): Esta prueba se emplea para determinar
la capacidad de algunos microorganismos de producir acetilmetilcarbinol (acetoína), que es
un producto final neutro, a partir de la fermentación de la glucosa.
Sembrar en 5ml de caldo MR-VP (medio de Clark y Lubs) a partir del cultivo en estudio e
incubar a 37°C por 48-72 hs. Para la prueba de VOGES PROSKAUER, transcurrida la
incubación se añade 0,6 ml de alfanaftol al 5% en alcohol etílico absoluto y 0,2 ml de
hidróxido de potasio al 40% (Es esencial agregar
A los reactivos
B en ese orden). El desarrollo
de un color rosa o rojo en 15-30 minutos después de una completa agitación del tubo es
una prueba positiva, indicando la presencia de acetoína como producto final del
metabolismo fermentativo. (Fig. 6)
A B
Fig
6. Resultados de Voges Proskauer. A.-Negativo. B.-
Positivo. http://www.studyblue.com/notes/note/n/micro-lab-
2/deck/4385877
CALDO CINa al 15%: El fundamento de este medio estaría dado por la
tolerancia a altas concentraciones de CINa del Genero Staphylococcus.
IDENTIFICACIÓN DE ESPECIES DE Staphylococcus
MANITOL SALADO: Es un medio selectivo por su alto contenido de sal (7,5 %
de ClNa) y diferencial debido a la presencia de manitol. Es especial para Staphylococcus
patógenos. Por el indicador de pH rojo fenol que contiene este medio, las colonias que
fermentan el manitol viran al amarillo. Se siembra una pequeña estría y se incuba a 37ºC
durante 24 hs. Esto se puede realizar en aerobiosis o en anaerobiosis. (Fig. 7)
Fig 7.Agar manitol salado. http://pathmicro.med.sc.edu/
spanish/chapter13.htm
96
AGAR 110: Presenta el mismo fundamento que el medio anterior, solo que además
presenta gelatina, lo que nos permite evaluar la actividad proteolítica que presentan algunas
cepas de Staphylococcus.
DNAsa: Esta prueba pone de manifiesto la enzima desoxirribonucleoproteinasa. Se
emplea un medio que presenta desoxirribonucleoproteínas como sustratos. Se siembra en
una placa el microorganismo en estría gruesa, se incuba a 37°C durante 24 hs., luego de lo
cual se revela agregando el reactivo de Frazier (ácido clorhídrico l N). Éste precipita las
desoxirribonucleoproteínas que no fueron hidrolizadas, por lo tanto si la cepa es positiva
aparece un halo transparente alrededor de la colonia. Negativo todo el medio opaco. (Fig.
8)
Fig 8. Resultados de DNAsa. http://edicion-micro.usal.es/web/identificacion/ayuda/DNASE_PO.GIF
http://edicion-micro.usal.es/web/identificacion/ayuda/DNASE_NE.GIF
TERMONUCLEASA: La mayoría de las nucleasas se inactivan a 60°C, algunas
cepas de Staphylococcus producen nucleasas termoestables a esta temperatura y suelen
estar relacionadas con la producción de coagulasas y enterotoxinas por parte de S. aureus.
Se cultiva el microorganismo en agar nutritivo a las 24 hs. Se lo coloca en estufa a 60°C
durante 2hs; luego se le agrega al medio 10 ml de una solución de TDA (compuesta por
DNA, CINa y CbCa, azul de toluidina, agar, pH= 9), se incuba a 37°C durante 2 hs. Las
cepas positivas dan colonias que presentan un halo rosado, lo que indica la hidrólisis de
DNA. (Fig. 9)
Fig 9. Colonias con halo rosado (+).
http://publicaciones.ops.org.ar/publicaciones/cursos_virtuales/ETAs
M2/modulo2/pptM2/M2_S5%20completo.htm#slide0322.htm
97
COAGULASA: La coagulasa es una enzima con actividad similar a la
protrombina, capaz de convertir el fibrinógeno del plasma en fibrina. La coagulasa puede
estar de dos formas: unida a la pared celular bacteriana, y libre la cual se halla presente en
filtrados de cultivos.
Se utiliza para esta prueba, plasma humano o de conejo, también existe un producto
comercial liofilizado. No se debe emplear sangre citratada pues los microorganismos que
utilizan el citrato pueden dar falsos positivos.
Prueba en portaobjeto (coagulasa fija): Colocar una gota de agua destilada o solución
fisiológica estéril sobre un portaobjeto. Emulsionar suavemente sobre la gota una ansada
del microorganismo. Colocar una gota de plasma junto a la suspensión bacteriana, mezclar.
Inclinar el portaobjeto hacia uno u otro lado, observando la formación inmediata de un
precipitado granular o de grumos blancos. Se considera un resultado negativo si en 2 o 3
minutos no se observa aglutinación. (es una prueba presuntiva)
Prueba en tubos (detecta coagulasa libre y ligada): Colocar asépticamente 0,5 mL de una
dilución de plasma (1:4) en un tubo de hemólisis. Añadir 0,5 mL de un cultivo puro de 18-
24 hs en caldo del organismo a investigar. Mezclar por rotación suave del tubo, evitando
remover o agitar el contenido. Incubar a 37°C. Se observa el tubo cada 30 minutos,
produciéndose el coágulo entre 1-4 hs. La reacción se considera positiva ante cualquier
grado de coagulación visible dentro del tubo. Algunas cepas pueden ser positivas a las 18--
24 hs de incubación y otras cepas de S. aureusson fuertemente productoras de fibrinolisinas
que pueden disolver el coágulo, es por eso que se debe observar a intervalos regulares. (Fig.
10)
Fig
10. Resultados de la prueba de Coagulasa. A. Positiva. B. Negativa
RESISTENCIA A LA NOVOBIOCINA: se emplea para diferenciar entre S.
epidermidis de S. saprophyticus. Se prepara una suspensión del microorganismo, se la
extiende sobre un agar nutritivo o enriquecido, según la técnica de Kirby Bauer, luego se
coloca el disco de novobiocina, se incuba y se lee a las 24 hs. El S. saprophyticus es
resistente mientras que S. epidermidises sensible. (Fig. 11)
Fig 11. A. Staphylococcusaureus. Sensible a Novobiocina. http://mayrarolon.wordpress.com/bio408-
compartiendo-experiencias-de-laboratorio/ B. S. epidermidisSensible. S. saprophyticus Resistente.
http://www.esanatos.com/ghid-medical/microbilologie/Izolarea-bacteriilor-in-vivo-d92561.php 98
METODO INMUNOLOGICO PARA DETERMINAR ENTEROTOXINA.
ELISA. La intoxicación alimentaria por estafilococo (estafiloenterotoxicosis;
estafiloenterotoxemia) es el nombre de la enfermedad causada por las enterotoxinas que
producen algunas cepas de Staphylococcus aureus.Se puede hacer en colonias o muestras
de alimentos.
Diferencias entre las especies de Staphylococcus
Características S. S. S. S. S. S.
aureus intermedius hycus epidermidis saprophyticus haemolyticus
Coagulasa + + V - - (+)
Pigmento + - - - d d
colonia + + + - -
Termonucleasa + (d) - - d d
Manitol + - - + + d
VP S S S S R S
Novobiocina + D - - - (+)
Hemolisina + V V - - V
DNAsa + + + V-w - DS
-w
d: 11 a 80 % de cepas positivas. ( ) reacción demorada. V: variable. V : por lo común
negativo o reacción débil. DS: Variaciones en subespecies.
FAMILIAS: Streptococcaceae y Enterococcaceae
GÉNEROS:Streptococcus yEnterococcus
CULTIVO: Crecen bien en la mayoría de los medios enriquecidos (agar sangre) y
generalmente facultativos en relación con sus necesidades de oxígeno. Se recomienda que
en el primer aislamiento se siembre en microaerofilia.
De acuerdo al tipo de hemólisis que producen en el medio Agar Sangre (con sangre de
carnero al 5%) podemos clasificarlos en estreptococos -hemolíticos, estreptococos -
hemolíticos y estreptococos -hemoliticos (o no hemolíticos).(Fig. 12)
F
Fig 13. GRAM. Estreptococos
Fig. 12.Alfa (Hemólisisincompleta.Color verdoso. Beta
(Hemólisis completa. Transparente. Gamma ( No produce
hemólisis. http://www.iqb.es/diccio/h/images/hemolisis.jpg
99
PRUEBA IDENTIFICATORIA: catalasa negativa
IDENTIFICACIÓN DE ESPECIES DE Streptococcus
SENSIBILIDAD A LA BACITRACINA: Se cultiva la cepa en estudio en una
placa de agar sangre sembrada por estría apretada, luego se coloca el disco de bacitracina y
se incuba a 37ºC durante 24 hs. Los estreptococos del grupo A son sensibles con halo de
inhibición de 15-20 mm. (Fig. 14)
Fig 14. S. pyogenes. Sensible a Bacitracina.
http://www.studydroid.com/imageCards/0q/fg/car
d-27771804-front.jpg
HIDRÓLISIS DEL PYR: Es una prueba que puede reemplazar la de bacitracina
para identificar rápidamente estreptococos del grupo A, los cuales son los únicos beta
hemolíticos (cuando se usa sangre ovina) que dan positivo al PYR. También se utiliza para
enterococos. Tomar una colonia de cocos grampositivos catalasa negativos, suspender en
50 µL de solución fisiológica estéril hasta una concentración de 108 / 109 UFC/ml. Agregar
un disco de PYR (pirrolodonil-beta-naftilamida) e incubar 30 min a 35-37ºC. Retirar de la
estufa y agregar una gota de reactivo revelador (cinamaldehído). Dejar 5 minutos e
interpretar. Positivo: disco de color rosado o rojo. Negativo: incoloro o amarillo. (Fig 15)
Podemos hacer una marcha rápida partiendo de:
Hidrólisis del PYR
(+) (-)
Agar Bilis Esculina CAMP e Hidrólisis del Hipurato
(+) (-) (+) (-)
Enterococcus Grupo A Grupo B otros estreptococos
Fig.
15.http://test.classconnection.s3.amazonaws.com/328/flashcards/71328/
jpg/picture14.jpg
100
HIDRÓLISIS DEL HIPURATO: Los estreptococos del grupo B contienen una
enzima hipuricasa que hidroliza el ácido hipúrico. Otros estreptococcos beta-hemolíticos
carecen de esta enzima.
Se puede realizar mediante dos métodos, detección de benzoato o de la glicina (Fig
16)(ambos productos de la hidrólisis del hipurato).
Detección de benzoato: Incubar un tubo con caldo hipurato, el cual contiene caldo infusión
corazón 25 g/ L de hipurato de sodio 10 g/L. Incubar a 37°C 24h. Centrifugar y transferir
0,8 mL del sobrenadante claro a un tubo limpio. Añadir 0,2 rnL del reactivo cloruro férrico
y mezclar bien. Este re activo se prepara con ClFe3.6H20, 12g y HCl al 2% en agua, 100
rnL. Si se produce un precipitado por más de 10 minutos es positivo.
F
ig 16. Hidrólisis del Hipurato. Detección por el método de la glicina. http://edicion-
micro.usal.es/web/identificacion/ayuda/HIPPUR02.GIF. http://edicion-
micro.usal.es/web/identificacion/ayuda/HIPPUR01.GIF
BILIS ESCULINA: Medio utilizado para la identificación presuntiva de
estreptococos del grupo D. Éstos tienen la capacidad de hidrolizar la esculina a esculetina y
glucosa en presencia de bilis al 1-4%. Sembrar el microorganismo en un tubo con agar bilis
esculina en pico de flauta, incubar a 35-37°C hasta 3 días. La prueba es positiva si hay
crecimiento y ocurre oscurecimiento del medio desde verde oliva a negro (la esculetina con
una sal de hierro que es el citrato férrico reacciona dando color oscuro). También se puede
emplear en placa. (Fig. 17)
+
Fig 17.Bilis Esculina B
A
Fig 18. Prueba de CAMP.A) Varios
Streptococcus CAMP (+)
B) http://people.upei.ca/jlewis/assets/images/camptest_copy.jpg
PRUEBA DE CAMP: (Christie, Atkins y Munch-Petersen). Para identificación
de estreptococos hemolíticos grupo B, los cuales poseen un factor extracelular (factor
CAMP) intensificador de la actividad hemolítica de la beta-lisina estafilocócica sobre los
eritrocitos. Se debe usar sangre ovina (lavada y resuspendida en solución fisiológica da
mejores resultados). La prueba se lleva acabo en una placa de petri común con agar sangre
101
ovina al 5%. Se traza una estría de estreptococos (por identificar) en forma perpendicular a
otra estría de una cepa de S. aureusconocida como productora de beta-lisina. Ambas líneas
no deben tocarse. Se incuba a 37°C durante 18-24hs. La zona de intensificación de lisis
asume la forma de una cabeza de flecha en la intersección de ambas estrías. Control
positivo: S. agalacteae. Control negativo estreptococo grupo A o grupo D. (Fig 18).
TOLERANCIA AL CINa: Se utiliza caldo infusión cerebro corazón con el
agregado de ClNa al 6,5%. Se toma una o más colonias y con ellas se siembra: un tubo con
caldo normal (control) y un tubo con caldo hipersalado. Se incuba a 37°C durante 24-48hs.
Si se produce turbidez en ambos caldos la prueba es positiva. Si sólo se produce turbidez
en el tubo control es negativa. Los enterococos son tolerantes a la sal.
También existe un medio comercial para enterococos con un indicador de pH que vira
cuando hay desarrollo.
DIFERENCIA ENTRE LOS GRUPOS DE LANCEFIELD DE
IMPORTANCIA VETERINARIA
MÉTODO SEROLÓGICO DE LANCEFIELD
Los grupos de Lancefield se basan en diferencias serológicas en los polisacáridos C
de la pared celular. Estos carbohidratos antigénicos se extraen de los estreptococos antes de
reaccionar con sueros absorbidos de especificidad conocida. Las pruebas de precipitación
se realizan en tubos capilares, en donde los sueros se añaden sobre el antígeno o viceversa.
La reacción positiva consiste en la aparición de un precipitado en la interfase entre la
solución del antígeno y el plasma.
Grupo Especies Hemólisis Pruebas básicas
A S. pyogenes Beta Bacitracina sensible
PYR (+)
B S agalacteae Beta Hidrólisis del
hipurato(+)
CAMP (+)
Esculina (+) PYR (-)
C S. equi Beta Bacitracina R
S. equisimilis Beta Hidrólisis del Hipurato
S. zooepidermicus Beta (-)
s. dysgalacteae Alfa PYR (+)
(*)
Enterococos
S.fecalis Alfa Bilis esculina (+)
S.faecilum Beta ClNa (+)
S.durans
No enterococos B.Esculina (+)
S. bovis Alfa ClNa (-)
S. uberis Alfa/Beta Hipurato (+)
estrecha Esculina (+) PYR(-)
102
*Diferencias entre grupo C beta-hemolíticos
Especie F. glucosa F. Sorbitol F. Trehalosa
S. equi + - -
S equisimilis + - +
s. zooepidermicus + + -
Streptococcus relacionados con infecciones en pequeños animales
Especie
Prueba S. pyogenes S. canis
Hemólisis beta beta
Trehalosa + -
Lactosa + -
PYR + -
Bacitracina + -
CAMP - +
Streptococcus relacionados con infecciones en cerdos
Especie
Prueba S. porcinus S. suis
Hemólisis beta -
VP + -
CAMP + -
103
MARCHA BACTERIOLÓGICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS
MUESTRA Siembra en medios líquidos
(CTS-caldo tioglicolato)
Siembra en medios sólidos
AGAR SANGRE - AGAR NUTRITIVO - MAC CONKEY
Observación ( no crecimiento) 37ºC 24hs
hemólisis
Coloración de GRAM
Cocos gram positivos ANTIBIOGRAMA
CATALASA
(+) (-)
Micrococcus y Staphyloccocus Streptococcus y Enterococcus
oxida O/F oxida/fermenta PYR
- VP + Bacitracina
- ClNa 15% + Hidrólisis del Hipurato
Bilis Esculina
Caldo ClNa
CAMP
Crecimiento a 45ºC
Coagulasa
AMS
DNAsa
Novobiovina
Serología de Grupo
104