Carrera de Tecnología Médica Curso de Biología Celular y Molecular 2024
TRABAJO PRÁCTICO Nº2
MEMBRANAS BIOLÓGICAS: ESTRUCTURA Y FUNCIÓN
MÉTODOS DE ESTUDIO
INTRODUCCIÓN
La membrana plasmática, también denominada membrana celular, es un tipo de membrana.
La membrana plasmática a través de proteínas integrales de transmembrana es un conector
activo y no una barrera que separa la célula de su medio ambiente. Muy por el contrario, la
membrana plasmática establece interacciones intracelulares con componentes
citoplasmáticos, e interacciones extracelulares con la matriz extracelular o el medio
ambiente más inmediato de la célula. El papel activo de los componentes de la membrana
plasmática se puede comprender respondiendo preguntas que permitan explicar por ejemplo
¿cómo es posible que la célula mantenga una composición cualitativa y cuantitativa diferente
en el medio intra y extracelular? En este mismo contexto, la información conformacional
de los componentes de las membranas determina la asimetría funcional de esta estructura,
como por ejemplo, en el caso de proteínas co-transportadoras de iones. Estas presentan un
sitio específico hacia el medio extracelular diferente al que presentan hacia el medio
intracelular. Este lenguaje que opera para el transporte de iones y otros metabolitos, está
presente en todas las funciones de la membrana plasmática.
LOGROS DE APRENDIZAJE
1. Describe la organización de la membrana plasmática y sus propiedades.
2. Explica qué factores modifican la fluidez de la membrana y cómo actúan.
3. Explica la clasificación de proteínas de membrana.
4. Describe características del transporte de iones y moléculas, a través de la membrana
plasmática.
ACTIVIDADES PRÁCTICAS
1. Estructura y organización de la membrana plasmática.
Esquema que representa el modelo del mosaico fluido propuesto por Singer y Nicolson, en
1972.
1.
2.
3.
4.
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a) Identifica con su nombre cada una de las moléculas y estructuras señaladas con números:
b) ¿Qué propiedades o características de las membranas biológicas se infieren de este
modelo?
Explica cada una de ellas.
c) ¿Qué factores contribuyen a la fluidez de las membranas?
d) ¿Qué evidencias experimentales apoyan el modelo del mosaico fluido?
2. Distribución de lípidos de membrana (entre dominios y monocapas)
Células polarizadas fueron tratadas para la obtención de 2 fracciones que contienen los
fosfolípidos y esfingolípidos correspondientes a los dominios apical y basolateral (Figura
1). Los lípidos de cada una de las fracciones fueron identificados y cuantificados. A su vez,
se pudo determinar cómo se distribuían dichos lípidos entre las caras intra y extracelular
de la membrana plasmática. La Figura 2 muestra los resultados obtenidos.
Dominio apical Dominio basolateral
Dominio apical
Distribución (%)
Extracelular
Intracelular
Dominio basolateral
Figura 1: Células polarizadas
Figura 2: Distribución de lípidos y esfingolípidos entre dominios y capas
a) Describa los resultados y compare los dominios de membrana.
b) Explique el origen de la asimetría de lípidos a través del plano transversal.
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3. Tipos de proteínas de membranas
Desde membranas tratadas con una solución iónica de cloruro de sodio se extraen proteínas
que se llaman periféricas. Mientras que cuando se emplean soluciones de detergentes
(Figura 3) se extraen proteínas que se llaman integrales.
Triton X-100
β-octylglucoside
Sodium dodecyl
sulfate Figura 3: Extracción de proteínas integrales con detergentes
(SDS) (adaptado de Alberts et al. 6th Ed. Pag. 584)
a) ¿Explica por qué los detergentes pueden extraer las proteínas integrales?
b) En la Figura 4 se presentan distintos tipos de proteínas de membrana clasificas en
integrales o periféricas de acuerdo a los antecedentes entregados en el enunciado:
1: 2: 3: 4:
5: | 6: 7: 8:
4. Equilibrio osmótico y variación del volumen celular.
Prepare una cámara húmeda, ubicando dos trozos de cintas paralelas al eje longitudinal del
portaobjetos. A continuación, entre las cintas paralelas coloque un trozo de hoja de Elodea
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sp. y una gota de NaCl al 0,85%. Sobre esto último, y a apoyado sobre las cintas, coloque un
cubreobjetos.
Observe este preparado al microscopio y dibuje. Mientras observa, agregue con una pipeta
Pasteur, por uno de los costados abiertos de la cámara, NaCl al 3% y por el otro costado
absorba el agua con un trozo de papel absorbente, con el fin de cambiar el medio a las células
de la hoja.
a) Realiza un esquema y describe lo observado, antes y después de agregar NaCl al 3%.
NaCl 0,85% NaCl 3%
b) Interpreta tus observaciones:
BIBLIOGRAFÍA
1. "Elementos de Biología Celular y Genética" 1ª y 2ª Edición. Editado por el Departamento
de Biología Celular y Genética, Facultad de Medicina, Universidad de Chile, (1993).
2. Alberts, B.; Bray, D. Lewis, J. Raff, M.; Keiths, R.; Watson, J.D.: “Molecular Biology of
the Cell” Third Edition New York, Scientific American Books, W.H. Freeman and
Company, (1994). [La cuarta edición (2002) es una versión más actualizada de este libro.
Además, la Biblioteca de la Facultad de Medicina cuenta con 14 ejemplares de la edición
2008 de este libro, donada por los autores.]
3. Lodish, H. ; Baltimore, D. ; Berk, R. ; Zipursky, S.L. ; Matsudaria, P. ; and Darnell, P. :
"Molecular Cell Biology" , Fourth Edition, New York (2000).
4. Segawa K, Kurata S, Yanagihashi Y, Brummelkamp TR, Matsuda F, Nagata S. “Caspase-
mediated cleavage of phospholipid flippase for apoptotic phosphatidylserine exposure”,
Science. Jun 6;344: 1164-8 (2014).
5. Segawa K, Nagata S. “An Apoptotic 'Eat Me' Signal: Phosphatidylserine Exposure”. Trends
Cell Biol. Nov;25: 639-50 (2015).
6. Apuntes de clases teóricas
