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Estructura y Genética Bacteriana

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20-03-2024

Citología Bacteriana
Generalidades,
Estructura, Genética y Fisiología

"Este material (ppt) es sólo


para discusión en clase,
debe ser complementado
con los textos guía"

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“Arbol filogenético molecular de la vida” o “árbol universal de la vida”

Microbes versus humans

Microbes Humans Factor

Number on earth 5x1031 6x109 ∼1022


Mass, metric tons 5x1016 3x108 ∼108
Generation time 30 min 30 years ∼5x105
Time on earth (years) 3.5 x109 4x106 ∼103

Clinical Infectious Diseases (2008) 46:155–64

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MICROORGANISMOS

ALGUNAS DE SUS FUNCIONES:


❖ Reciclamiento de la materia en la naturaleza
❖ Elementos básicos en las cadenas tróficas
❖ Ciclos biogeoquímicos (fijación del nitrógeno, formación de metano,
reducción de sulfatos)
❖ Regulación del clima
❖ Composición atmosférica (incluyendo los gases invernadero)
❖ Producen ácidos grasos, vitamina D y K, favorecen la recuperación
y absorción de calcio, hierro, magnesio (microbiota normal humana)

[Link] [Link] [Link]

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Morfología y agrupación bacterianas, afinidad tintorial

PRIMER OBJETIVO:
▪ Conocer las estructuras bacte-
rianas indispensables y no
indispensables Estructuras indispensables:
➢membrana citoplasmática
▪ Relacionar estructura - función
➢material genético
➢ribosomas
➢pared celular

Estructuras no indispensables:
➢ flagelo
➢ fimbria o pili
➢ cápsula
➢ esporas

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La célula bacteriana, organismo procarionte, carece de


sistemas membranosos internos, sin embargo, posee
todas las capacidades para realizar sus funciones
celulares de manera autónoma.

Nucleoide (ADN) Fimbria, Pili (Pilus)


Citoplasma

Flagelo
Ribosomas

ADN Inclusiones
extracromosomal citoplasmáticas
Cápsula Pared
celular
Membrana
citoplasmática

MEMBRANA CITOPLASMÁTICA
Modelo del Mosaico fluido: Singer y Nicholson

a altas temperaturas, aumenta la proporción de ácidos


grasos saturados, en cambio a bajas aumentan los
insaturados
Fluidez

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Membrana citoplasmática. Algunas de sus funciones:


1. Constituir una barrera osmótica
2. Control del transporte de sustancias
3. Localización del sistema transportador de electrones
4. Biosíntesis de lípidos y proteínas
5. Biosíntesis de los constituyentes de la pared celular
6. Anclaje del ADN
7. Transporte activo
8. Localización de receptores específicos

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Ácidos nucleicos bacterianos


y material genético

Acido desoxirribonucleico (ADN) Acido ribonucleico (ARN)


Cromosoma bacteriano ARNm, ARNt, ARNr
ADN extracromosomal

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R3 R4

R2 FTR

R1

Plásmido: ADN extracromosomal circulares (cerrado) que se duplican


en forma autónoma del cromosoma bacteriano. Generalmente
contienen genes que codifican para su autotransferencia (factor de
transferencia de resistencia, FTR)

Propiedades que pueden estar codificadas en genes plasmidiales:


a) Metabólicas (utilización y degradación de substratos orgánicos)
b) Resistencia a metales pesados
c) Factores de virulencia
d) Resistencia a antibióticos, generalmente a más de un antibacteriano.

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Mecanismos de variación genética en bacterias :


Mutación , Transformación, Transducción y Conjugación

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Algunas características de la mutación

Tipos: de punto, delección, inserción,

Espontánea: Está ocurriendo naturalmente en una determinada


población bacteriana.

Heredable: Ocurrida la mutación, las células hijas presentarán la característica


de la célula mutada.

Frecuencia fija: Para una determinada característica, siempre aparecerá


en la población bacteriana una proporción similar de células
con esa propiedad mutada.

La frecuencia de mutación puede incrementarse por acción de


agentes mutagénicos físicos o químicos.
Físicos: radiaciones ultravioleta U.V. o radiaciones ionizantes,
éstas provocan daño en el ADN bacteriano.
Químicos: por compuestos que tienen afinidad por el ADN.

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Mecanismos de variación genética en bacterias :


Transformación, Transducción y Conjugación

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TRANSFORMACION

Transferencia de genes en que una bacteria


capta fragmentos de ADN provenientes de la lisis
de otras células bacterianas. El ADN exógeno
es incorporado a la célula e integrado al genoma.

Etapas comunes en todas las bacterias:


• Desarrollo de la competencia (estado
fisiológico en el cual la pared de la célula
bacteriana se hace permeable al ingreso de
ADN soluble). Puede ser también logrado in
vitro.

• Unión de los fragmentos de ADN a la


célula competente

• Captación y procesamiento del ADN

• Integración del ADN al cromosoma y


expresión de sus genes.

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TRANSDUCCION
Transferencia de genes de una bacteria a otra
a través de un virus del tipo bacteriófago.
Introducción de ADN exógeno por un virus.

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CONJUGACION
Traspaso de ADN extracromosomal desde una célula
dadora a otra receptora por contacto físico entre ellas.
Este proceso se inicia cuando el pili sexual de la célula
dadora se une con la célula receptora.
El contacto célula-célula se alcanza presumiblemente por
la contracción o desensamblaje del pili sexual.

ADN
plasmidial

ADN Célula
cromosomal Célula
receptora
dadora

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TRANSPOSONES

Secuencias o trozos de ADN de pequeño tamaño que tienen la particularidad de


moverse o "saltar" desde un plásmido al cromosoma bacteriano o del cromosoma
al plásmido.
Contienen información suficiente para codificar las enzimas que promueven su
"salto" entre ambas identidades genéticas y, además, otra información como por
ejemplo resistencia a antibióticos.

Localización de un transposon
Transposón

Cromosoma Plásmido

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RIBOSOMAS

80 S 70 S

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Tinciones

Tinción simple

Tinciones diferenciales
* Tinción de Gram
* Tinción de Ziehl-Neelsen
(para BAAR (ácidos micólicos))

Tinciones especiales
* flagelo
* espora

Tinciones negativas

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[Link]
[Link]

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Hans Christian Joachim GRAM (1853 - 1938)

Gram positivo

Gram negativo

[Link]

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PEPTIDOGLICAN

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Lipopolisacárido (LPS)

Antígeno “O”
Unidades de azucares complejas

Core

Lipido “A”

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Algunas propiedades: Lipopolisacárido (LPS)


- presente en bacterias Gram negativas
- liberado por lisis *
= endotoxina *
- no transformable en toxoide

Ag “O”
- Antígeno O
Polisacárido
- LPS liso: Ag O de cadena larga
- LPS rugoso: Ag O ausente o de cadena corta
Core
- Core
Oligosacárido (más otros componentes no carbohidrato) Lípido “A”

- Lípido A
Carbohidrato más múltiples ácidos grasos
Fiebre, diarrea, shock séptico

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BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

Endotoxina, posee diversas


propiedades biológicas

Porinas: proteínas de  35 kDa,


que forman trímeros con canales
interiores. Atraviesan la ME y
permiten el transporte de
substancias de peso molecular
bajo, hidrofílicas

enzimas hidrolíticas, enzimas


inactivadoras de antibióticos
y proteínas de transporte

Lipoproteína de Braun: lipoproteína muy


abundante en la membrana externa. Responsable de
la unión covalente entre la ME y el peptidoglicán

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FLAGELO
Flagelos bacterianos: estructuras proteicas (Flagelina) que
otorgan movilidad a la célula bacteriana. Se unen a la célula
mediante un cuerpo basal.

Dependiendo de la especie (o cepa) bacteriana difieren en


número y localización.

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Disposición de flagelos bacterianos

Monótricas

Lofotricas

Anfítricas

Peritricas

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FIMBRIA, PILUS (pili)

Fimbrias: estructuras proteicas delgadas,


corta y recta, que participan en la adherencia
de la célula bacteriana a superficies inanimadas
o tejidos de un hospedador

Pili: estructuras proteicas delgadas que


permiten el paso de ADN extracromosomal
(plásmido) desde una célula bacteriana
dadora a una receptora en la conjugación.

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CAPSULA

Polímero de (generalmente) azúcares que forma


una estructura compacta con límites definidos
que rodea al cuerpo bacteriano.
Otorga a la célula la capacidad de evitar la
fagocitosis por los macrófagos

Glicocalix: polímero de azúcares que forma una estructura laxa de límites


poco definidos que rodea la célula bacteriana y participa en la adherencia de
la célula bacteriana

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Materiales de reserva:
tales como polisacáridos, lípidos, polifosfatos y azufre. Éstos se

encuentran en la célula en forma osmóticamente inerte

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Espora o endoespora bacteriana: es una estructura de resistencia que se forma


en el interior de la célula bacteriana cuando las condiciones ambientales son
desfavorables. La formación de endoespora se puede observar en los géneros
bacterianos Clostridium y Bacillus.

Características:
• más resistente que la célula vegetativa
• se encuentra deshidratada
• no posee actividad metabólica.
• resistente a elevadas temperaturas
• resistente a radiaciones ultravioleta
• resistente a agentes químicos

Core ( ADN, enzimas)

Corteza
Exosporio

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Propiedades biológicas de las esporas

➢ Hipometabolismo: Poseen la más baja tasa respiratoria de todos


los seres vivos. Por ello son capaces de sobrevivir en ausencia de
nutrientes durante largos períodos de tiempo.

➢ Resistencia al calor: estructuras de envoltura


proteínas SASP (small acid-soluble proteins)

➢ Resistencia a los rayos UV: absorción de luz UV por las cubiertas


dipicolinato de calcio
proteínas SASP

➢ Resistencia a agentes químicos: impermeabilidad de las cubiertas

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Factores que influencian el


crecimiento bacteriano

Temperatura

Disponibilidad de Oxigeno

pH

Presión osmótica

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Fuente de carbono

Bacterias autótrofas

Bacterias heterótrofas (compuestos orgánicos)

Otros Aportes Ej : N
P
S

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Clasificación según
requerimientos físicos
TEMPERATURA
Psicrófilas < 25ºC (5ºC) Ej.: Pseudommonas sp.
Mesófilas 37ºC Ej.: Escherichia coli
Termófilas > 40ºC (110ºC) Ej.: Termus sp.

Termodúricas: alta temperatura por corto tiempo

pH
Acidófilas Ej.: Lactobacillus sp.
Neutrófilas Ej.: E. coli
Basófilas Ej.: Proteus sp.

Oxigeno:
Aeróbicas
Anaeróbicas
Facultativas
Microaerofílicas

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Generation Time:
Time required for a cell population to double
DNA

DNA Replication

Cell Elongation
12

9 3 Septum Formation
6

Cell Separation

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44

22

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