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TÉCNICAS DE ESTUDIO EN
MUESTRAS DE ORINA
 ESTUDIO DE LA
ORINA
La orina es un líquido biológico producido en los riñones y
excretado a través de los uréteres, la vejiga urinaria y la
uretra.

Es de color amarillo-ámbar, y se puede considerar una

solución acuosa de urea, creatinina, cloruro sódico, potasio,
alcaloides, ácido úrico y otros ácidos como el fosfórico o el
oxálico, urobilina y otros pigmentos, etc.

En una persona adulta con un régimen alimentario habitual,

el volumen de orina producido en 24 h está entre 700 y
1.500 ml, la densidad, entre 1,005 y 1,030 y el pH entre 5,0
y 6,5.
 ESTUDIO DE LA ORINA

La secreción urinaria cumple con las funciones de eliminar

los productos finales del metabolismo nitrogenado y
mantener el equilibrio hidroelectrolítico.

Por esto, el análisis de la orina es un procedimiento

imprescindible para el estudio y seguimiento de los trastornos
renales, metabólicos y del tracto urinario.

El análisis de orina o urianálisis, es el examen básico de la

orina y comprende un estudio fisicoquímico de la muestra
mediante química seca y el estudio microscópico del
sedimento urinario, si procede
Así, un análisis urinario puede abarcar los siguientes
procesos:

➢ Examen físico. Trata de determinar las

características físicas de la orina, como son el aspecto,
el color, la densidad, el pH, la osmolalidad y la diuresis
en orinas de 24 h.

➢ Examen bioquímico. Consiste en realizar las

determinaciones químicas de los analitos cuya
presencia puede ser anormal o estar alterada.

Estos analitos son, entre otros: glucosa, proteínas,

cuerpos cetónicos, bilirrubina, hemoglobina, porfirinas,
fármacos y drogas, test de embarazo, etc.
Examen del sedimento urinario.

Es el análisis microscópico del sedimento urinario: células, agentes patógenos (bacterias, hongos, parásitos), cilindros y
cristales.

Para un buen estudio del sedimento es imprescindible conocer los resultados del examen fisicoquímico.

➢ Análisis de cálculos urinarios.

La precipitación de cristales puede

dar lugar a la formación de cálculos urinarios.

➢ Cultivo microbiológico de la orina.

Permite confirmar la presencia de una infección
urinaria y consiste en la cuantificación, aislamiento
e identificación
del agente infeccioso y la realización del antibiograma.
El análisis de orina
Abarcar los siguientes procesos:
Aspecto, el color, la densidad, el pH, la

Examen físico. Determina las características físicas de la orina osmolalidad y la diuresis en orinas de 24h.


Examen bioquímico. Glucosa, proteínas, cuerpos cetónicos …


Examen del sedimento urinario. Células, agentes patógenos (bacterias, hongos, parásitos).


Análisis de cálculos urinarios. La precipitación de cristales puede dar lugar a la formación de cálculos urinarios.


Cultivo microbiológico de la orina. Permite confirmar la presencia de una infección urinaria y consiste en la
cuantificación, aislamiento e identificación del agente infeccioso y la realización del antibiograma.
Para el examen fisicoquímico y microscópico rutinario de la orina

•
Estos análisis tienen un carácter cualitativo o semicuantitativo, pues para saber con exactitud la
concentración de una sustancia excretada es preciso conocer el volumen de orina emitido en un
determinado número de horas, debiendo recogerse en estos casos orina de 24 horas (análisis
cuantitativo).
•
Es importante tener en cuenta las condiciones preanalíticas y los aspectos fundamentales de cada
una de las etapas del análisis (obtención, recepción, transporte, conservación y análisis) para llevar
a cabo un procedimiento correcto.
 Se estudian: el volumen de orina
recogida, su aspecto, el color, el
EXAMEN MACROSCÓPICO Y FÍSICO DE LA
ORINA olor, la densidad y la
osmolaridad/osmolalidad.
Poliuria
Volumen de orina

Oliguria y anuria La orina recién emitida es clara y trasparente, y la observación de

un aspecto turbio puede deberse a:
Aspecto
- La presencia de sales en suspensión.

La presencia de pus en la orina o piuria. En este caso, la turbidez no

desaparece con la sedimentación ni con la acidificación ni tampoco
calentando a 60ºC. Las orinas con piuria tienen pH básico debido a la
acción de las ureasas bacterianas que rompen la urea generando
amoniaco.

La presencia de proteínas. Al agitar aparece espuma.

 
Densidad > 1,025. Se da en estados de
deshidratación, diabetes mellitus,
insuficiencia cardiaca congestiva e
Densidad insuficiencia adrenal.
La densidad urinaria informa sobre la capacidad concentradora del 
Densidad < 1,010. En pacientes tratados
riñón. Para medirla se utiliza la expresión masa volumétrica relativa, con diuréticos o en estados de hipotermia y
que se define como la relación, en condiciones normales, entre la masa enfermedad renal. En estas orinas se
de 1 ml de orina (en gramos) y la masa de 1 ml de agua (en gramos) y, rompen los hematíes y los leucocitos por
por tanto, no tiene unidades (1,003 y 1,030). fenómenos osmóticos.

Olor
La orina normal es inodora o tiene un olor ligeramente amoniacal. Alteraciones en el olor pueden ser indicadoras de
posibles patologías. Así, podemos encontrar:

Olor pútrido. Indica infección.

Olor amoniacal. Puede ser debido a una infección o a una orina almacenada durante mucho tiempo.

Olor afrutado. Indicativo de la presencia de acetona.
EXAMEN BIOQUÍMICO DE LA
ORINA

De forma general las tiras reactivas

utilizadas disponen de diferentes
zonas reactivas que tomarán
coloraciones diferentes y cuya
intensidad dependerá de la
concentración del componente a
medir.
 El pH urinario es una medida de la capacidad de los riñones
para regular la excreción de los ácidos resultantes de los
procesos metabólicos y que no pueden ser excretados por
Determinación del pH la vía respiratoria.
De esta forma, la orina se acidifica con la excreción de ácido
clorhídrico, fosfórico y sulfúrico y, en menor medida,
cuerpos cetónicos y ácidos orgánicos como los ácidos
láctico, pirúvico y cítrico.
Todos estos ácidos son eliminados en forma de sales de
sodio, potasio, calcio y amonio.
También se eliminan hidrogeniones al ser intercambiados
por el sodio retenido durante el filtrado de la orina.
El pH normal oscila entre 4,6 y 8,0, y lo más habitual es
encontrar pH entre 5,5 y 6,5. Después de las comidas
disminuye la acidez de la orina (se torna más alcalina) como
consecuencia de la excreción de HCl por la mucosa gástrica
y es más ácida en estados de ayuno.
Una orina se considera alcalina cuando su pH es superior a 7 y puede tener como causas:

Dietas vegetarianas, consumo elevado de cítricos y leche.

En la alcalosis metabólica o respiratoria (mecanismo de compensación).

Algunos medicamentos como el bicarbonato sódico o el citrato potásico.

En la acidosis tubular renal y en el síndrome de Fanconi los túbulos renales no excretan hidrogeniones
aunque exista acidosis.

Las infecciones del tracto urinario debidas a bacterias productoras de ureasa que forman amoniaco
(Proteus).
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Determinación de proteínas

En condiciones normales, la concentración de proteínas excretadas oscila entre 130 y 150 mg/día.

Su determinación se fundamenta en el hecho de que algunos indicadores de pH cambian de color ante la presencia de
proteínas.
En el área de reacción se encuentra un indicador como el azul de tetrabromofenol más un tampón que mantiene el pH
igual a 3.
En ausencia de proteínas ambos indicadores aparecen de color amarillo, al aumentar la concentración de proteína el color
progresa por varias tonalidades de verde, hasta llegar a azul oscuro.

La reacción es particularmente sensible a la albúmina, y es positiva a partir de concentraciones superiores a de 6

mg/dl.
El valor de referencia es negativo (< 10 mg/dl), con una sensibilidad y especificidad mayor del 99% para detectar la
albuminuria.
 Determinación de glucosa

La orina normal carece casi por completo de glucosa, puesto que esta es reabsorbida en el túbulo proximal. Ocurre
glucosuria cuando se excede el umbral renal, es decir la capacidad del túbulo proximal para reabsorber la glucosa,
que está alrededor de 180 mg/dl.

La detección de la glucosa se basa en una reacción específica de la glucosa oxidasa/peroxidasa que hace
cambiar de color a un indicador. La reacción es específica para glucosa y no depende del pH ni de la densidad de
la orina, ni se ve afectado significativamente por la presencia de cuerpos cetónicos.
El valor de referencia es negativo (< 30 mg/dl) y un cambio de color indica un intervalo de concentraciones que
puede superar hasta los 2.000 mg/dl.
 Determinación de cuerpos cetónicos

Los cuerpos cetónicos son excretados en la orina (cetonuria) cuando se encuentran en niveles elevados en la
sangre (cetosis) como consecuencia de la metabolización incompleta de ácidos grasos. Este proceso se
acompaña de acidosis.

El predominio de la lipolisis sobre la lipogénesis produce un aumento de los niveles de ácidos grasos libres en
el suero y, por su descomposición en el hígado, se forma más acetil-coenzima A.
Este exceso se convierte en ácido acetoacético, que a su vez se transforma parcialmente en ácido β-
hidroxibutírico y acetona.
Las proporciones de los cuerpos cetónicos en orina son de 20% de ácido acetoacético, 2% de acetona y 78%
de ácido β-hidroxibutírico.

Principio de la prueba
El test se basa en el reactivo de Rothera. El ácido acetoacético y la acetona reaccionan con nitroprusiato sódico y
glicina en un medio alcalino para formar un complejo color violeta.

Principio de la prueba de cetonas en la tira reactiva

de orina (Roche Diagnostics)
La reacción es específica para el ácido acetoacético y
la acetona. No es interferida por el ácido
betahidroxibutírico ni por la presencia de glucosa,
proteínas y ácido ascórbico en la muestra. El valor
de referencia es negativo (< 5 mg/dl).
 Se basa en la actividad pseudoperoxidasa de la hemoglobina o la mioglobina, que
catalizan la oxidación del indicador para producir un color azul verdoso sobre el
Determinación de sangre
papel amarillo de la tira.

En las zonas de reacción, de acuerdo al patrón de coloración es

posible distinguir eritrocitos intactos de hemolizados:
•
Los eritrocitos intactos se hemolizan sobre el papel reactivo y
la hemoglobina liberada inicia la reacción de color, formando
puntos verdes visibles.
•
Por el contrario, la hemoglobina disuelta en la orina (eritrocitos
lisados) y la mioglobina dan lugar a un color verde uniforme.
•
El valor de referencia es negativo (0 a 3 eritrocitos por ml).
Determinación de bilirrubina


Principio de la prueba
La prueba se basa en la unión de la bilirrubina con una
sal de diazonio estable en medio ácido del papel
reactivo. Las reacciones que se presentan en la tira son
muy sensibles (detectan cantidades de 0,05 mg/dl de
bilirrubina) y la más leve coloración rosada indica un

Alteraciones en que aumenta la producción de
resultado positivo.
bilirrubina por destrucción de eritrocitos: hemolisis,
El valor de referencia es negativo (< 0,2 mg/dl). anemia hemolítica, malaria.

Enfermedades hepatocelulares que impiden la
eliminación del urobilinógeno por el hígado: hepatitis
infecciosa, hepatitis tóxica, cirrosis.
 Los nitritos normalmente no se encuentran en la orina, se producen cuando
las bacterias reducen los nitratos urinarios a nitritos (la mayoría de los
organismos gramnegativos y algunos grampositivos son capaces de realizar
Determinación de nitritos
esta conversión). Por tanto, la presencia de nitritos en la orina indica
crecimiento bacteriano (bacteriuria).

Principio de la prueba
El nitrito es detectado y analizado por la formación de un
color rojo rosado al tratamiento de una muestra
conteniendo NO2− con el reactivo de Griess.

Cuando se agrega el ácido sulfanílico, los nitritos forman

una sal de diazonio.

Cuando se agrega la α-naftilamina, se desarrolla un color

rosado.
La prueba es muy específica pero poco sensible, por lo que un resultado positivo es útil, pero un resultado negativo no
descarta una infección del tracto urinario. La detección de nitrito es específica de la presencia de bacteriuria y en todos
los casos debe ser confirmada por un cultivo.
Determinación de leucocitos
Los leucocitos excretados en la orina son casi exclusivamente polimorfonucleares neutrófilos y la tira reactiva detecta su
presencia mediante la actividad de la esterasa que poseen.


Principio de la prueba
La tira tiene una zona que contiene un éster de
indoxilo que es disociado por la esterasa leucocitaria.
El indoxilo libre reacciona con una sal de diazonio
para formar un colorante violeta.

La leucocituria puede deberse a causas infecciosas y/o

inflamatorias como cálculos y tumores.
 EXAMEN DEL SEDIMENTO URINARIO

El estudio del sedimento urinario se realiza después de conocer los datos de la tira reactiva y la muestra debe
examinarse antes de transcurridas 3-4 horas desde su recogida. Si esto no es posible, se deberá guardar refrigerada
porque algunas estructuras como células y cilindros se lisan fácilmente.

1. Se homogeneiza bien la muestra y se vierten 10-12 ml en un

tubo de centrífuga (fondo cónico).
2. Se centrifuga durante 5-10 minutos y se decanta el
sobrenadante de forma que quede solo 1 ml.
3. Se resuspende el sedimento residual.
4. Se monta un fresco (una gota entre porta y cubreobjetos,
evitando la formación de burbujas).
5. Se observa con objetivo 10x sobre todo en el perímetro del
cubre buscando cilindros y luego a 40x.
6. Por último, se reporta el resultado de los elementos
encontrados.
Examen practico
Practicas
Practicas
Practicas