INDICE

Dedicatoria 2
Índice 3-4
Introducción 5
Capítulo I: Historia de los virus. 6
1.1. Historia 7-9
1.2. Teoría del origen de los virus 9-10
Capitulo II: Características generales de los virus 11
2.1. Concepto de virus 12
2.2. Estructura viral 13
2.2.1 Tipo de cápside 13-14
2.2.2 Genoma viral 14
2.2.3 Envolturas 14-15
2.2.4 Composición química 15-17
Capitulo III: Clasificación de los virus 18
3.1. Clasificación de los virus 19-20
Capitulo IV: Ciclo viral 21
4.1 Ciclo viral 22
4.1.1Adsorción 22
4.1.2. Penetración 22-23
4.1.3. Denudación y eclipse 23-24
4.1.4. Replicación del ácido nucleico 24-25
4.1.5. Maduración y liberación 25
Capítulo V: Mecanismo de transmisión 26
5.1 Mecanismo de transmisión 27
Capítulo VI: Acción de las enzimas de restricción que influyen en la infección
viral28
6.1. Enzimas de restricción viral 29
6.2. Tipos 30
6.3. Métodos de acción 30
6.4. Usos 30
6.5. Beneficios 30-31
6.6. ¿Cómo actúan las enzimas de restricción tras una infección viral? 31
6.6.1 Transducción 31-33
 Los Virus

6.6.2 Retrovirus 33
Capitulo VII: Patogenia viral 34
7.1. Citopatogenia 35
7.1.1. Efecto citopático 35
7.1.2. Cuerpos de inclusión 36
7.1.3. Transformación celular 36
Capitulo VIII: virus y cáncer 37
8.1. Virus y cáncer 38
Capitulo IX: Diagnostico de laboratorio 39
9.1. Diagnóstico de laboratorio 40
9.1.1. Obtención de muestra 40
9.1.2. Técnicas de laboratorio para el diagnóstico viral 40-41
9.1.3. Detección de proteínas víricas 41
9.1.4. Métodos de análisis serológico 41-42
Capitulo X: Enfermedades virales emergentes y reemergentes 43
Capitulo XI: Acción de los antivirales 45
Bibliografía 48
ANEXOS 49-52
 Los Virus

INTRODUCCIÓN

Las dos características fundamentales que presentan los virus son:

su composición simple y su forma de multiplicación especial, siendo
ambas propiedades determinantes de su parasitismo intracelular
obligado.

La partícula viral madura, denominada virión consiste básicamente

de un bloque de material genético rodeado de proteínas que lo
protegen del medio ambiente y le sirven como vehículo para permitir
su transmisión de una célula a otra. Esta estructura puede presentar
mayor o menor grado de complejidad.
 Los Virus

CAPÍTULO I: HISTORIA DE LOS VIRUS

1.2. HISTORIA
Los virus, parásitos intracelulares estrictos, capaces de Invadir al
hombre, animales, plantas e incluso bacterias y hongos. Sus efectos en
el ser humano se conocen desde la antigüedad, particularmente porque
son agentes transmisibles que han ocasionado grandes epidemias y
pandemias. Así, el primer aspecto que realza la importancia de los virus
en medicina humana es su patogenicidad, es decir, su capacidad de
producir enfermedades.

En la historia hay registros de secuelas de poliomielitis en ilustraciones

egipcias que datan de 3000 a.C. Antes de que se definiera el concepto
de virus, ya se había transmitido la idea de la valorización desde Asia al
Occidente, en que individuos en contacto con las pústulas de las vacas
quedaban inmunes a la enfermedad de la viruela, "azote" que causaba
gran mortandad y dejaba secuelas en la piel de los sobrevivientes
(Jenner, 1798).

Posteriormente, en 1885, Pasteur pasó el virus de la rabia por conejos y

desarrolló la vacuna contra esa enfermedad.

La extensión de la fiebre amarilla en el siglo xv111 desde África a

América, fue un desafío a la investigación que culminó en 1927 con el
primer aislamiento de virus humano, el virus de la fiebre amarilla; en
1935 se obtuvo una vacuna contra él. En 1937 se creó la primera vacuna
inactivada contra la influenza y en la década de los sesenta y setenta se
obtuvieron las vacunas contra la poliomielitis, el sarampión, la rubéola y
la parotiditis usando virus vivos atenuados. En los ochenta se producen
las primeras vacunas por ingeniería genética (hepatitis B). No obstante
los notables progresos científicos, los virus siguen desafiando al mundo,
que cada día descubre virus antiguos y nuevos, como el de la pandemia
de influenza A H1 N1, en 2009. Si bien se sospechaba que había
muchos microbios patógenos causantes de enfermedades, sólo los
grandes avances de la ciencia y la biotecnología en el siglo XX han
permitido alcanzar el nivel actual de conocimientos y desarrollar una
capacidad de diagnóstico específico, junto a la adopción de medidas de
 Los Virus

control para minimizar el impacto de los virus en la humanidad. La

relativa simpleza de los virus dentro del mundo biológico los ha
convertido en una herramienta emblemática para el desarrollo de la
biología molecular.

1.3. TEORÍA DEL ORIGEN DE LOS VIRUS

Antes de la invención del microscopio electrónico en 1931, los virus no
se podían ver o cultivar en el laboratorio. Más importante aún, los virus
sólo se definían como agentes tan pequeños que podían pasar a través
de los filtros que atrapaban a la mayoría de las bacterias conocidas. Los
científicos tuvieron que desarrollar otros medios para observar y cultivar
a estos agentes en el laboratorio. Las observaciones y métodos iniciales
desarrollados para estudiar los virus implicaban sistemas con plantas y
bacterias.

En realidad, el primer virus descubierto fue uno de las plantas, conocido

como virus del mosaico del tabaco (TMV), una enfermedad que destruye
los cultivos de tabaco. En 1892, el botánico ruso Dimitri Iwanoski
demostró que extractos de plantas de tabaco enfermas podían transmitir
la enfermedad a plantas de tabaco sanas, luego de pasajes a través de
filtros de cerámica que atrapaban a la mayoría de las bacterias.
Iwanowski no comprendió el significado completo de este resultado. En
1898, Martinus Beijerinick amplió los experimentos de Iwanowski y fue el
primero en desarrollar la idea de virus, al cual llamó contagium vivum
fluidum (literalmente “fluido vivo contagioso”).

Los bacteriófagos se aislaron primero de fuentes naturales (como las

aguas residuales de origen humano) y los científicos los estudiaron a
principios del siglo XX. Crecen gracias a la inserción de su DNA en la
bacteria huésped, con lo cual dirigen la maquinaria biocinética del
huésped para hacer copias de su DNA y de su cubierta proteica y luego
destruyen a la bacteria. La destrucción de la bacteria libera nuevos
bacteriófagos, los cuales siguen infectando nuevos huéspedes. El
ensayo de placas con bacteriófagos es el método que se utiliza para
cuantificar el número de bacteriófagos infecciosos en una muestra dada
que contiene fagos. En síntesis, se deja que los bacteriófagos se
 Los Virus

adsorban a la bacteria huésped en un tubo de ensayo. La mezcla se

vierte entonces sobre una placa de agar y se permite que la bacteria
crezca. En este momento los bacteriófagos lisan las bacterias que

están presentes sobre la superficie de la placa de agar sólido. Los

huecos (llamados placas) en la capa de bacterias son los sitios en que
los bacteriófagos destruyeron a las bacterias.

Los principales avances en virología ocurrieron después de 1952,

cuando Renato Dulbecco modificó el ensayo con bacteriófagos para
trabajar con cultivos de células animales.

Al igual que en los ensayos con bacteriófagos, en la monocapas celular

se visualizan espacios vacíos donde las células fueron destruidas por la
infección viral. Se usó más cantidad de virus para infectar a las células
en los discos del lado izquierdo que en los del lado derecho de la placa.
Dulbecco ganó el Premio Nobel en 1975 por el desarrollo de los
ensayos de placas con células de animales.
 Los Virus

CAPITULO II: CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LOS VIRUS

2.1. Concepto de virus
Los virus son microorganismos parásitos intracelulares obligatorios que
usan la Maquinaria metabólica de la célula para reproducirse. A
diferencia del resto de los microorganismos, se multiplican mediante una
secuencia de armado que requiere de la síntesis previa e independiente
de cada uno de los componentes. Conforme a lo anterior, un virus es un
agente capaz de transferir un ácido nucleico entre diversas células
utilizando en su etapa extracelular una cubierta proteica destinada a
proteger y ayudar a la transmisión del ácido nucleico. Las partículas
virales completas que son capaces de infectar una célula se denominan
vibriones. Esta definición funcional permite diferenciarlas de aquellas
detectables por métodos físicos, pero que no son necesariamente
infectivas. Históricamente, los virus se definieron por su tamaño, pues
eran capaces de atravesar los filtros que retenían a las bacterias y no
eran visibles al microscopio óptico. Si bien las bacterias se miden en
micrómetros (10-6 m), para dimensionar los virus se usan nanómetros
(nm), unidad 1.000 veces menor (1o-9 m), pues el tamaño de los virus
fluctúa entre los 20 y 300 nm. En la definición de virus se incluyen
organismos que poseen un ácido nucleico de ADN o ARN, rodeado por
una cubierta proteica, la que adicionalmente puede estar envuelta por
una bicapa lipídica, que también contiene proteínas de origen viral. Con
el devenir de la virología, se ha asimilado a esta disciplina a una serie de
agentes que cumplen parcialmente estas características, como los
viroides, que sólo tienen una molécula de ARN y los priones, compuestos
por una molécula de proteína, y otros que no son autosuficientes para
replicarse en la célula huésped, llamados virus satélite. Los virus pueden
infectar todo tipo de células, ya sea de organismos procariontes
(bacterias) o eucariontes vertebrados (animales) e invertebrados
(insectos) y de plantas. Los virus que infectan bacterias reciben el nombre
de bacteriófagos o simplemente, fagos. En general, los virus infectan un
número limitado de especies biológicas y dentro de ellas, sólo algunos
tipos celulares -rango de huésped-, debido a que entre el virus y la célula
hospedera debe existir un reconocimiento específico. Las moléculas o
 Los Virus

conjunto de moléculas de la célula a las cuales el virus es capaz de unirse

se denominan receptores virales. En realidad, la célula no dispone de
moléculas diseñadas para la entrada de virus, sino que el virus tiene
proteínas "ligando" que pueden reconocer en forma específica ciertos
componentes externos de la membrana citoplasmática que cumplen
diversas funciones, a las que se agrega la de “receptor" para ciertos virus.
Los virus poseen una capacidad de variación genética que les permite
seleccionar las variantes más eficientes durante su replicación en el
hospedero. La variabilidad genética está en estrecha relación con la
capacidad del virus de sobrevivir en el ambiente y de infectar en forma
eficiente. A esto debe agregarse la capacidad para evadir la respuesta
inmune tanto innata como adquirida cuando infectan a un individuo,
fenómeno que no se observa al infectar cultivos celulares u órganos
aislados. Debido a la gran variedad de virus ADN y ARN, es fundamental
conocer su estructura general y las características del material genético,
porque estas propiedades son las que determinan la estrategia de
replicación al interior de la célula, su capacidad de diseminarse y su poder
patógeno.

2.2. Estructura viral

Las partículas virales infectivas, o viriones, contienen un genoma ubicado
al interior de una cubierta proteica denominada cápside, cuya función es
proteger al genoma en el medio extracelular e intracelular, permitir la
adsorción del virus y la penetración a la célula hospedera. Debido a que
los genomas de los virus son muy pequeños, la cápside se organiza de
manera tal que requiere de la repetición alrededor del ácido nucleico de
pocas moléculas de proteínas distintas o iguales, organizadas en los
denominados capsómeros. Esta estructura regular de subunidades
repetitivas interactúan formando unidades que tienden a adoptar formas
esféricas o alargadas, que son descritas como de Simetría icosaédrica o
helicoidal .Los virus más pequeños usan sólo unas pocas proteínas para
formar la cápside, mientras que los más complejos requieren de más de
35 proteínas distintas. Esto es válido para la mayoría los virus, aunque
algunos de mayor tamaño pueden formar estructuras más complejas, que
 Los Virus

escapan a la regla general Muchos virus tienen además una bicapa

lipídica, denominada envoltura o manto, que rodea a la cápside, que en
este caso se denomina nucleocápside porque está en contacto más
directo con el ácido nucleico que con la envoltura lipoproteica. Los lípidos
que constituyen este "manto" forman parte de las membranas lipídicas de
la célula, que son modificadas, pues contienen proteínas codificadas por
el genoma viral en forma de proteínas de transmembrana, o en la cara
interior de la membrana, como proteínas de matriz.

Las proteínas que emergen de la membrana hacia el exterior cumplen

funciones relacionadas con la capacidad infectiva del virus y
generalmente corresponden a antígenos de neutralización. La envoltura
le confiere características especiales al virus y define la forma en que
penetra en la célula. La envoltura hace lábiles a los virus, porque una
membrana lipídica es más inestable que una cubierta proteica. En
general, con el uso de detergentes suaves se logra separar la
nucleocápside viral, aunque se inhibe Irreversiblemente la infectividad
viral. Las proteínas de origen viral que se encuentran Insertas en la
envoltura generalmente corresponden a glicoproteínas. Varias familias de
virus tienen entre la envoltura y la nucleocápside una proteína de matriz
(M) cuya función es fortalecer y mantener la integridad del virus. Aunque
los virus utilizan la maquinaria metabólica de la célula, algunos portan en
ese espacio diversas enzimas relacionadas con la transcripción o
replicación del genoma que facilitan la infectividad viral; tal vez el ejemplo
más relevante es el virus herpes, que tiene un verdadero depósito de
enzimas, llamado tegumento.

2.2.1 Tipo de cápside

Cápside cilíndricos o helicoidales: En los virus cilíndricos o
helicoidales, los capsómeros, que son de un solo tipo, se ajustan en una
estructura helicoidal en torno a un eje central donde se encuentra una
hélice simple de ácido nucleico. Esta estructura se traduce en un vibrión
con forma de varilla o filamentoso con una gran diversidad, desde los
muy cortos y rígidos hasta los muy largos y flexibles.
 Los Virus

El material genético, generalmente ARN mono catenario y con menos

frecuencia ADN mono catenario, está rodeado por la hélice de proteínas
a la que se une por la interacción entre la carga negativa del ácido
nucleico y la positiva de la proteína. En general, la longitud de la
cápside helicoidal está relacionada con la longitud del ácido nucleico
contenido en ella, y el diámetro depende del tamaño y disposición de los
capsómeros.

Un ejemplo bien estudiado lo constituye el virus del mosaico del tabaco.

Cápsideicosaedros: En los virus icosaedros, los capsómeros se ajustan

formando un icosaedro regular (es decir, 20 caras triangulares y 12
vértices), y dejando un hueco central donde se sitúa el ácido nucleico
fuertemente apelotonado. Algunos forman poliedros con más caras que
el icosaedro, y algunos presentan fibras proteicas que sobresalen de la
cápside. El icosaedro es la estructura cuasi esférica más eficiente y
robusta que se puede construir a partir del ensamblado de varias piezas.
Esta estructura se traduce en una apariencia esférica de los virus
cuando se observan al microscopio.

Los capsómeros pueden ser pentagonales o hexagonales, y se

construyen con varios protómeros. Éstos se asocian a través de una
unión no covalente para encerrar el ácido nucleico, aunque por lo
general menos íntimamente que las cápsides helicoidales.

El número de protómeros necesario para constituir la cápside se denota

por el número T, el cual indica que se precisan 60×T proteínas para
formar la cápside. En el caso del Virus de la hepatitis B, T=4 y se
requieren 240 proteínas para formar la cápside. Otros ejemplos de este
tipo de virus lo constituyen los adenovirus, que incluyen virus que
producen enfermedades respiratorias, faringitis, gastroenteritis, etc.

Cápside complejos: Los virus complejos, con pequeñas variantes,

responden a la siguiente estructura general:

Una cabeza de estructura icosaédrica que alberga el ácido nucleico.

Una cola de estructura helicoidal que constituye un cilindro hueco.

 Los Virus

Un collar de capsómeros entre la cabeza y la cola.

Una placa basal, al final de la cola, con unos puntos de anclaje que
sirven para fijar el virus a la membrana celular. De la placa salen
también unas fibras proteicas que ayudan a la fijación del virus sobre
la célula hospedadora.

Como ejemplo de este tipo de virus puedo citar a la mayor parte de los
virus bacteriófagos (que infectan bacterias). Envoltura lipoproteica
Muchos virus, exteriormente a la cápsida, presentan una envoltura de
características similares a una membrana plasmática: doble capa
fosfolipídica y proteínas, muchas de ellas glicoproteínas que proyectan
salientes hacia el exterior llamados espículas.

La cápsida de estos virus suele ser icosaédrica, aunque también los

hay con cápsida helicoidal. Se interpreta que la envoltura lipoproteica
es un resto de la membrana de la célula infectada donde se ha formado
el virus, ya sea de la membrana citoplasmática que rodea la célula, o
de las membranas internas como la membrana nuclear o el retículo
endoplasmático. Esta membrana es integrada en el virus por las
proteínas codificadas por el genoma viral, sin embargo los lípidos y
carbohidratos en sí mismo no son codificados, sino que se obtienen de
la célula huésped.

La envoltura viral puede dar al vibrión algunas ventajas, como por

ejemplo, la protección contra ciertas enzimas y productos químicos.
Puede incluir glicoproteínas que funcionan como moléculas receptoras,
permitiendo que las células huéspedes la reconozcan y se unan a
estos viriones, dando lugar a la posible adsorción del vibrión por parte
de la célula.

La mayoría de los virus con envoltura dependen de esta para su

infectividad. Un ejemplo de este tipo de virus lo constituye el de la
gripe.

Algunos autores (como yo) denominan virus complejos a virus con

cubierta lipoproteica que presentan además varias moléculas de ácido
 Los Virus

nucleico en su interior y algunas enzimas, como es el caso del virus de

la gripe. Otros como los polveras son virus grandes y complejos que
tienen una inusual morfología. El genoma viral se asocia con las
proteínas dentro de una estructura central de disco denominado
nucleótido. El nucleótido está rodeado por una membrana y dos
cuerpos laterales de función desconocida. El virus tiene una envoltura
exterior con una gruesa capa de proteínas sobre su superficie.

La cápside es una cubierta proteica externa que encierra y protege al

genoma viral de la acción de nucleasas y otros factores adversos del
medio exterior. Además, en los virus desnudos carentes de envoltura,
la cápside es la encargada de establecer a través de alguna de sus
proteínas la unión con la célula que será parasitada por el virus.
Asimismo, las proteínas de la cápside contienen los determinantes
antigénicos contra los que el sistema inmune del huésped elaborará la
respuesta de anticuerpos en defensa del organismo.

Hay dos tipos básicos de estructura que pueden presentar las cápsides
virales: simetríaicosaédrica, observándose el virión al microscopio de
forma aproximadamente esférica, o simetría helicoidal, resultando
nucleocápsides filamentosas tubulares pero que pueden estar
encerradas dentro de una envoltura que confiere a la partícula forma
esférica o de bastón.
 Los Virus

Simetría icosaédrica: El icosaedro es un poliedro de 20 caras triangulares

equiláteras con 12 vértices. Presenta simetría rotacional 5.3.2, por lo que
tiene 6 ejes de simetría quíntuple que pasan a través de pares de vértices
opuestos; 10 ejes de simetría triple que pasan a través del centro de las
caras, y 15 ejes de simetría binaria, a través de los puntos medios de las
aristas.

2.2.2 Genoma viral

El genoma viral es muy pequeño, lo que limita el número de
proteínas que puede codificar. Para resolver este problema,
la cápsideestá formada de uno o muy pocos tipos de proteínas,
que a menudo se arreglan de manera simétrica. Existen desde
ese punto de vista, dos tipos de virus:

Virus helicoidales, en donde las proteínas de la cápside se

arreglan en forma de cilindros, como en el virus del mosaico del
tabaco:

Figura: representación del virus del tabaco

 Los Virus

El virus del mosaico del tabaco (TMV) es uno de los mejor

estudiados; esta partícula viral tiene aproximadamente 300 Å
de longitud y 180 Å de diámetro. La cubierta consiste de
aproximadamente 2,130 copias idénticas de una proteína de
158 residuos de aminoácidos. El genoma viral del TMV
consiste de aproximadamente 6,400 ribonucleótidos. Este virus
fue el primero que se caracterizó.
Virus esféricos, en los cuales las proteínas de la cubierta se
arreglan formando poliedros, como en los adenovirus:

Figura: representación de un adenovirus

Los virus esféricos poseen cápsides icosahédricas que
requieren un mínimo de 60 subunidades de la misma proteína.
Este arreglo simétrico favorece la presencia de caras
triangulares como puede observarse en la figura.

Otra manera de clasificar a los virus es de acuerdo al tipo de

material genético que poseen, de ahí que en esta categoría
únicamente existen dos tipos: los virus de ADN como los
bacteriófagos que parasitan específicamente a bacterias;
los adenovirus (que causan catarros y la enfermedad de ojos
rosados); los papilomavirus que causan verrugas. La otra
categoría esta formada por los virus de ARN o retrovirus como
el de la influenza, la hepatitis, el mosaico del tabaco y el sida.
 Los Virus

Figura: representación del VIH.

Una vez que el material genético de los virus ha ingresado al

interior celular, pueden seguir dos caminos, entrar al ciclo lítico
o bien al lisogénico:
 Los Virus

No todos los virus ocasionan inmediatamente la muerte de la

célula infectada, algunos, como los que invaden las células
animales, convierten a estas últimas en fábricas perpetuas de
virus, de tal manera que la membrana celular no se rompe a la
salida de los virus sino que únicamente tiene poros.

2.2.3 Envolturas

La envoltura de un virus es una membrana constituida por una doble capa

lipídica asociada a glicoproteínas que pueden proyectarse en forma de
espículas desde la superficie de la partícula viral hacia el exterior.

Los virus adquieren su estructura mediante un proceso de brotación a

través de alguna membrana celular. El número de glicoproteínas que
presentan los virus animales es muy variable.

Las glicoproteínas virales que forman las espículas son proteínas

integrales de membrana que atraviesan la bicapa de lípidos presentando
tres dominios topológicamente diferenciables: 1) un gran dominio
hidrofílico hacia el exterior de la membrana; 2) un pequeño dominio
hidrofóbico formado por 20-27 aminoácidos que atraviesa la capa lipídica
y ancla la glicoproteína a la membrana; 3) un pequeño dominio hidrofílico
hacia el interior de la partícula viral. Este último dominio interactúa con las
proteínas de la nucleocápside, ya sea directamente o a través de una
proteína viral no glicosilada denominada M (de matriz), que se encuentra
en algunos virus animales por debajo de la bicapa.

Las glicoproteínas virales cumplen diversas funciones biológicas durante

el ciclo de vida de un virus, siendo esenciales para la infectividad, ya que
actúan: 1) en la adsorción a la célula huésped; 2) en el proceso de fusión
que permite la entrada de la nucleocápside viral al citoplasma; 3) en la
brotación, que permite la salida del virus envuelto a partir de la célula
 Los Virus

infectada. Además las glicoproteínas son el blanco de reacción para el

sistema inmune tanto en la respuesta humoral como celular.

2.2.4 Composición química

Los virus se clasifican en base a su morfología, composición química y

modo de replicación. Los virus que infectan a humanos frecuentemente se
agrupan en 21 familias, reflejando sólo una pequeña parte del espectro de
la multitud de diferentes virus cuyo rango de huéspedes van desde los
vertebrados a los protozoos y desde las plantas y hongos a las bacterias.

NOMENCLATURA

El nombre de los virus obedece a distintas consideraciones. Algunas

veces se debe a la enfermedad que ellos producen, por ejemplo el
virus polio se llama así porque produce la poliomielitis. También puede
deberse al nombre de los descubridores como el virus del Epstein-Barr,
o a características estructurales de los mismos como los coronavirus.
Algunos poseen un nombre derivado del lugar donde se los halló por
primera vez, tal es el caso del virus Coxsackie o Norwalk.
 Los Virus

El ICTV (International Committeeontaxonomy of viruses) ha propuesto

un sistema universal de clasificación viral. El sistema utiliza una serie
de taxones como se indica a continuación:
Orden (-virales)
Familia (-viridae)
Subfamilia (-virinae)
Género (-virus)
Especie ( )
Por ejemplo, el virus del Ebola de Kikwit se clasifica de la siguiente
manera
- Orden Mononegavirales
- Familia Filoviridae
- Género Filovirus
- Especie: Ebola virus Zaire
 Los Virus

CAPITULO III: CLASIFICACIÓN DE LOS VIRUS

3.1. Clasificación de los virus

VIRUS ADN

Familia Género Ejemplo Comentario

Herpes simplex Encefalitis, estomatitis

Alphaherpes-
Herpesviridae virus type aguda, llaga labial del
virinae
1 (aka HHV-1) resfríado.
Herpes simplex
virus tipo Herpes genital, encefalitis
2 (aka HHV-2)
Varicella zoster
virus (aka Varicela, Herpes Zóster
HHV-3)
Epstein Barr
Gammaherpes Mononucleosis hepatitis,
virus (aka
-virinae tumores (BL, NPC)
HHV-4)
Sarcoma de
Kaposi,
Probablemente: tumores,
asociado al
inc. Sarcoma de Kaposi
herpesvirus,
(KS) y algunos linfomas
KSHV (aka
de células B
Human
herpesvirus 8)
Cytomegaloviru
Betaherpes- Mononucleosis, hepatitis,
s Humano (aka
virinae pneumonitis, congénitas
HHV-5)
Human Roseola (aka E. subitum),
herpesvirus 6 pneumonitis
Human Algunos casos de
herpesvirus 7 reseola?
Adenoviridae Mastadeno- Adenovirus 49 serotipos (especies);
 Los Virus

virus Humano infecciones respiratorias.

Papilloma- Papillomavirus 70 especies; verrugas y
Papovaviridae
virus Humano tumores
usualmente poco graves;
Polyoma-virus JC, BK viruses
JC causa PML en SIDA

Virus de la Hepatitis (crónica),

Hepadnavirida
Hepadna-virus cirrosis, tumores
e
Hepatitis B hepáticos.
Orthopox- Virus de la vacuna de la
Poxviridae Vaccinia virus
virus viruela
Enfermedad como la
viruela, zoonosis muy rara
Monkeypox
(un brote reciente en el
virus
Congo; 92 cases desde
2/96 - 2/97)
Lesiones dérmicas
Parapox-virus Orf virus
("pocks")
Exantema. infecciosa. (5ª
Parvoviridae Parvo-virus B19 parvovirus emfermedad), crisis
aplástica, pérdida fetal.
Util para terapia génica;
Virus Adeno-
Dependo-virus se integra en el
asociado
cromosoma
 Los Virus

VIRUS ARN
Familia Género Ejemplo Comentario
3 tipos; meningitis
Picornaviridae Entero-virus Polioviruses aséptica, poliomielitis
paralítica
32 tipos; Aseptic
Echoviruses
meningitis, rashes
29 types; meningitis
Coxsachieviruses
aséptica, miopericarditis
Virus de la
Hepatitis aguda
Hepato-virus
(propagación fecal-oral)
Hepatitis A
115 tipos; Resfríado
Rhino-virus Human rhinoviruses
común
Enfermedad
Caliciviridae Calici-virus Norwalk virus
gastrointestinal.
Virus de la
Hepatitis aguda
Hepe-virus
(propagación fecal-oral)
Hepatitis E
Paramyxo- Parainfluenzaviruse 4 tipos; Resfríado común,
Paramyxoviridae
virus s bronquiolitis, neumonía
Paperas: parotitis,
Virus de las
Rubula-virus meningitis aséptica (raro:
Paperas
orquitis, encefalitis)
Sarampión: fiebre,
Morbilli-virus Virus del sarampión exantema (raro:
encefalitis, SSPE)
Resfríado común(adultos),
Pneumo- Virus Sincitial
bronquiolitis, neumonia
virus respiratorio
(niños)
Flu: fiebre, mialgias,
Orthomyxovirida Influenza-
Influenza virus A malestar general, tos,
e virus A
neumonia
Flu: fiebre, mialgias,
Influenza-
Influenza virus B malestar general, tos,
virus B
neumonia
Rabia: incubación larga y
Rhabdoviridae Lyssa-virus Virus de la Rabies después enfermedad del
SNC y muerte.
Virus de
Fiebre hemorrágica,
Filoviridae Filo-virus
muerte
Ebola and Marburg
No muy claro; relacionado
con enfermedades
Bornaviridae Borna-virus Bornadisease virus
tipo:ezquizofrenia en
algunos animales.
 Los Virus

Human T- Leucemia de células T del

Retroviridae Onco-virinae lymphotropic virus adulto. (ATL), paraparesia
type-1 espástica tropical (TSP)
Spuma- Human
No se conoce patología
virinae foamyviruses
Virus type1 y 2 de
SIDA, enfermedad del
Lenti-virinae la inmunodeficiencia
SNC
humana
Exantema;
Togaviridae Rubi-virus Virus de la Rubeóla malformaciones
congénitas.
Virus de la
Transmitida por
Alpha-virus Encefalitis equina
mosquitos, encefalitis
(WEE, EEE, VEE)
Virus de la Fiebre Mosquito-born; fever,
Flaviviridae Flavi-virus
Amarilla hepatitis (yellowfever!)
Transmitida por
Virus del Dengue mosquitos;
hemorrhagicfever
Virus de la
Transmitida por
Encefalitis de San
mosquitos; encephalitis
Luis
Virus de la
Hepatitis (con frecuencia:
Hepaci-virus
crónica), cáncer hepático
Hepatitis C
Rotaviruses
Reoviridae Rota-virus 6 tipos; Diarrea
Humano
Virus de la Fiebre
Transmitido por
Colti-virus de Garrapatas de
garrapatas; fiebre
Colorado
Ortho- Reoviruses
Enfermedad leve
reovirus Humanos
Propagado por roedores;
Síndrome Pulmonar enfermedad pulmonar
Bunyaviridae Hanta-virus
por Hantavirus (puede ser letal, Ej brote
de las "4 esquinas")
Propagado por roedores;
Hantaan virus fiebre hemorrágica con
síndrome renal.
Phlebo-virus
 Los Virus

CAPITULO IV: CICLO VIRAL

4.1 Ciclo viral

CICLO DE MULTIPLICACIÓN VIRAL

El ciclo de multiplicación viral se define como la serie de etapas secuenciales

que transcurren desde el contacto inicial de un virus con una célula huésped
hasta la liberación a partir de la misma célula infectada, de la progenie de
nuevos viriones.

ETAPAS DEL CICLO DE MULTIPLICACIÓN VIRAL

ETAPAS TEMPRANAS

4.1.1 Adsorción

El evento inicial en el ciclo de vida de un virus es la unión del mismo con

la célula huésped a través del proceso de adsorción. Esta unión
específica se establece entre una molécula presente en la membrana
celular (receptor) y una proteína externa del virión. Algunos receptores
virales han sido identificados y son en general carbohidratos, lípidos o
proteínas de la membrana plasmática.

Así, la susceptibilidad o resistencia de una célula a la infección está

determinada por la presencia o ausencia de receptores específicos. La
importancia de la carencia de receptores se demuestra indirectamente
porque es posible infectar exitosamente células no susceptibles a algunos
virus utilizando ácido nucleico desnudo (transfección).

La unión virus-célula ocurre en dos etapas: una primera unión reversible

por atracción electrostática, facilitada por la presencia de cationes: la
adsorción irreversible se produce cuando se establece la unión polivalente
virus-célula, ya que suele haber muchas copias de los receptores en la
célula y múltiple sitios de unión en el virión.
 Los Virus

4.1.2. Penetración

Una vez establecida la adsorción, los virus pueden entrar en la célula a

través de tres mecanismos diferentes: endocitosis mediada por receptor,
fusión con la membrana plasmática y traslocación a través de la
membrana plasmática.

Se acepta en la actualidad que los virus desnudos pueden entrar en la

célula por traslocación o por endocitosis mientras que los virus envueltos
penetran por endocitosis o por fusión.

En la endocitosis mediada por receptor el virus utiliza la misma vía de

entrada que emplean muchas macromoléculas fisiológicamente
importantes como nutrientes hormonas y factores de crecimiento. El
virus absorbido a su receptor va quedando encerrado dentro de
invaginaciones de la membrana plasmática recubiertas de una proteína
llamada clatrina, que forman primero un hueco recubierto y luego una
vesícula. De este modo el virión intacto entra en el endosoma. El pH
ácido del endosoma (5 a 5,5) produce cambios conformacionales en las
proteínas del virión que permiten la fusión de la membrana del
endosoma con la membrana externa del virus y expulsan el genoma viral
al citoplasma celular para su libre expresión. (Ver virus de la gripe)

El mecanismo de fusión directa de la envoltura viral con la membrana

plasmática celular es utilizado por ciertos virus envueltos como herpes
y Paramixovirus. Estos virus poseen en su envoltura glicoproteínas con
capacidad de fusión independiente del pH, es decir, que a un pH neutro
ocurre la fusión a nivel de la membrana celular liberando el genoma al
citoplasma. A diferencia de la entrada por endocitosis, en este caso en
ningún momento se ven viriones intactos dentro de la célula. Esta
capacidad de fusión con membrana plasmática que tienen ciertos virus
ha permitido su utilización como agentes fusogénicos para la obtención
de híbridos celulares. (Ver virus del VIH)
 Los Virus

Por último, algunos virus desnudos como Adenovirus parecen entrar

directamente a través de la membrana plasmática mediante un proceso
de traslocación.

4.1.3. Denudación y eclipse

El desnudamiento ocurre simultáneamente o después de la penetración y

comprende la eliminación de todas o parte de las cubiertas proteicas que
rodean al ácido nucleico viral, de manera de dejar expuesto dentro de la
célula el genoma viral desnudo o asociado a alguna enzima para que
pueda expresarse. En algunos casos sólo se remueve parte de la cápside
viral y en esas condiciones el genoma expresa sus funciones. Para otros
virus complejos, como por ejemplo los Poxvirus, el desnudamiento parece
ocurrir en dos etapas: en la primera hay remoción de ciertas cubiertas
proteicas por enzimas celulares, parte del genoma es tanscripto en esas
condiciones y luego, en una segunda etapa, y a través de una proteína
codificada por el virus, se produce el desnudamiento total del genoma.

En general el desnudamiento es un proceso difícil de estudiar y establecer

con precisión sus características por la rapidez con que ocurre y la
dificultad en separarlo temporalmente de la penetración. Es por ello que
se suele denominar internalización del virión al conjunto de ambos
eventos, penetración y desnudamiento.

4.1.4. Replicación del ácido nucleico

Virus con genoma de ADN: Los virus llevan a cabo la duplicación de su ADN
por medio de mecanismos y herramientas similares a los empleados por la
célula para replicar su material genético. La replicación del ADN viral es
generalmente semiconservativa, es decir cada cadena del ADN parental se
conserva y por apareamiento con las bases complementarias se duplica,
produciéndose como resultado final dos moléculas de ADN, cada una de las
cuales está formada por una cadena de ADN parental y una cadena sintetizada
"de novo".
 Los Virus

Virus con genoma de ARN: A diferencia de lo que sucede con el ADN,

la replicación del ARN es un fenómeno único de los virus ya que la maquinaria
genética de la célula se basa exclusivamente en el uso del ADN como
templado (ADN-ADN o ADN-ARN). Por lo tanto, para la duplicación de su
genoma, así como acontecía para la síntesis de sus ARNm, los virus ARN
deben necesariamente aportar la enzima ARN polimerasa ARN dependiente.

4.1.5. Maduración y liberación

En las etapas tardías del ciclo de multiplicación viral las moléculas de

ácido nucleico y proteínas virales sintetizadas en la célula infectada
deben ensamblarse para formar los nuevos viriones y salir al espacio
extracelular para estar en condiciones de infectar nuevas células. Este
proceso de maduración y ensamble, también denominado morfogénesis,
comprende el armado de la cápside a partir de las unidades
estructurales y luego la formación del virión completo. El mecanismo va
a diferir en base a dos propiedades del virión: la estructura de la cápside
y la presencia o no de envoltura.
 Los Virus

CAPÍTULO V: MECANISMO DE TRANSMISIÓN

5.1. Mecanismo de transmisión

BACTERIAS Y VIRUS

Las bacterias son seres vivos formados por una sola célula (unicelulares) que
viven en casi todos los ambientes de la Tierra conocidos. Sus células, que se
denominan procariotas, son muy diferentes a las nuestras, las eucariotas. Como
seres vivos autónomos que son, tienen su propio metabolismo y fisiología, y se
reproducen si las condiciones ambientales son las adecuadas. Igual que nosotros,
necesitan alimentarse, es decir, obtener energía y materia del ambiente.
La mayoría de las bacterias no son parásitos de otros seres vivos, sino que viven
libremente en el ambiente. Algunas viven sobre otros seres vivos sin hacerles
ningún daño e incluso aportándoles un beneficio, como por ejemplo, las bacterias
que cubren nuestros intestinos (la denominada flora intestinal).
Los virus son muy específicos escogiendo a sus víctimas. De manera que hay
virus vegetales, animales, humanos, etc. Incluso hay virus que infectan a bacterias
(denominados bacteriófagos).

Los antibióticos no hacen efecto sobre los virus, así que, por ejemplo, no tiene
sentido tomar antibióticos ante un resfriado, que está causado habitualmente por
un rhinovirus. En algunos casos, sí se recetan antibióticos para evitar infecciones
paralelas. Otros virus que nos son familiares son los de la gripe, el sarampión o el
SIDA

ENFERMEDADES INFECCIOSAS BACTERIAS Y VIRUS

Las bacterias y los virus son agentes patógenos, algunos de ellos atacan a ser
humano causando enfermedades infecciosas, comúnmente conocidas como
infecciones, algunas bacterias no causan daño al ser humano y conviven con él,
como por ejemplo las bacterias que tenemos en la piel y en el estómago que nos
sirven de protectores contra otras bacterias o virus queso son nocivos. Los bebés
son relativamente inmunes a las enfermedades infecciosas debido a los
anticuerpos que adquirieron de la leche materna y las vacunas que se les
administraron, luego del año y medio sólo contarán con las defensas que les den
las vacunas y sus refuerzos.
 Los Virus

Debido a que existen gran cantidad de bacterias y virus, las vacunas pueden
inmunizar a los niños sólo de las principales enfermedades infecciosas, las más
agresivas y comunes, las demás deben ser tratadas aparte, por lo general en
invierno predominan las enfermedades respiratorias y en el verano las
estomacales.
Aunque parecen lo mismo, no lo son. Los virus son agentes externos a nuestro
organismo, que provocan “enfermedades virales”; si un virus ataca, quiere decir
que las defensas de nuestro Organismo están bajos.

Para remediarlo, bastará con un poco de descanso y cuidados, además de

incrementar las vitaminas y minerales necesarios para que aumenten nuestras
defensas y la “enfermedad viral” cese.

MECANISMOS DE RESISTENCIA:

Las bacterias han desarrollado varios mecanismos para resistir la acción de los
antibióticos.1-3,7 El primero de ellos es por la posición de un sistema de expulsión
activa del antimicrobiano, una especie de bomba expulsora que utilizan las
bacterias para la excreción de productos residuales o tóxicos, con la que puede
eliminar además muchos de estos agentes antibacterianos.

El segundo, se realiza mediante la disminución de la permeabilidad de la pared

bacteriana, con la pérdida o modificación de los canales de entrada (porinas)
 Los Virus

CAPÍTULO VI: ACCIÓN DE LAS ENZIMAS DE RESTRICCIÓN QUE INFLUYEN EN

LA INFECCIÓN VIRAL

6.1. Enzimas de restricción viral

Un enzima de restricción (o endonucleasa de restricción) es aquella

que puede reconocer una secuencia característica de nucleótidos dentro
de una molécula de ADN y cortar el ADN en ese punto en concreto,
llamado sitio odiana de restricción, o en un sitio no muy lejano a este. Los
sitios de restricción cuentan con entre 4 y 6 pares de bases, con las que
son reconocidos.

El mecanismo del corte de ADN se realiza a través de la ruptura de

dos enlaces fosfodiéster en la doble hebra, lo que da lugar a dos
extremos de DNA. Estos pueden ser romos (cuando los enlaces rotos
coinciden) o cohesivos/escalonados. Estos últimos tienen tendencia a
volver a unirse de modo espontáneo, ya que los extremos se pueden unir
a otros extremos coincidentes que pueda haber en la cercanía
(Apareamiento de Watson & Crick).

Los fragmentos de ADN obtenidos de este modo pueden unirse por otras
enzimas llamadasligasas.

Las enzimas de restricción que a pesar de ser distintas y provenir de

distintas especies, tienen la misma secuencia de reconocimiento y dejan
el mismo extremo cohesivo, pero no cortan en el mismo sitio, son
llamadas isoesquizómeros. Por ejemplo, están los
isoesquizómeros Asp718 y KpnI.

6.2. Tipos

Existen, en general, 3 sistemas de enzimas de restricción:

 Tipo 1: Una sola enzima (con 3 subunidades) tiene actividad de restricción

(corta) y modificación (metila). Al reconocer la secuencia específica de DNA
corta al azar en sitios distintos al sitio de reconocimiento, ya sea corriente
arriba o corriente abajo. El corte deja extremos cohesivos. Necesitan de
 Los Virus

ATP para moverse en el DNA, desde el lugar de reconocimiento hasta el

sitio de corte (unas 1000 pares de bases aproximadamente), además de
SAM (S-adenosil-metionina) y Mg++ como cofactores.

 Tipo 2: Solo tienen actividad de restricción. Otras enzimas llevan a cabo la

metilación. El corte es efectuado en el sitio de reconocimiento, o bien, cerca
de él, por lo que el corte es resistente y predecible. Por esta característica
es que son muy utilizadas para clonación de genes, ya que al cortar en
sitios específicos se pueden recuperar secuencias conocidas. Sólo
requieren Mg++ como cofactor, no necesitan de ATP...

 Tipo 3: Se utiliza una enzima oligomérica que realiza todas las actividades
enzimáticas. Tienen función de restricción y modificación. Cortan de 25 a 27
pares de bases lejos del sitio de reconocimiento, dejando extremos
cohesivos. Requieren dos secuencias de reconocimiento en orientación
opuesta en la misma cadena de DNA. Necesitan ATP, Mg ++ y SAM (S-
adenosil-metionina) como cofactores.

Hay otros sistemas de restricción descubiertos actualmente, como el sistema

tipo 4 de E. coli (Eco571) que consta de una sola enzima que corta únicamente
DNA metilado en una secuencia específica, y que además metila.

6.3. Métodos de acción

La electroforesis es cuando moléculas cargadas son forzadas a ir a través
de una matriz debido a un flujo de corriente eléctrica.

 Una molécula de DNA cortada con enzimas de restricción genera

diferentes fragmentos. Estos pueden ser separados en base a su tamaño
utilizando un gel de electroforesis.

 El gel puede estar hecho de agarosa o poliacrilamida:

 La agarosa es un polisacáriso de galactosa y derivados de galactosa que

se entrecruzan por puentes de hidrógeno. Se puede variar el tamaño de
los poros ajustando la concentración de agarosa.
 Los geles de poliacrilamida son generados al mezclarse polímeros de
acrilamida y bisacrilamida en una reacción catalizada por persulfato de
amonio y TEMED. El tamaño de los poros depende de la concentración
de acrilamida y bisacrilamida.
 La matriz de poliacrilamida posee poros mas pequeños que la de
agarosa, permitiendo la separación de fragmentos mas pequeños.
 Los Virus

 Los fragmentos de DNA migrarán a una razón inversamente proporcional

al logaritmo de su tamaño o peso molecular.

 A mayor tamaño menor será la migración del fragmento y a menor

tamaño mayor será la migración del fragmento.

 El movimiento de los fragmentos de DNA va a producir un patrón de

bandas, donde cada banda corresponde a un fragmento de un tamaño
particular.
 El tamaño de cada fragmento puede ser determinado utilizando un
marcador o una escalera de DNA cuyos fragmentos tienen pesos
moleculares conocidos.
 Este marcador sirve de control y migrará paralelo a las bandas de DNA
que deseamos analizar.

 Una mezcla de diferentes moléculas puede ser separada en base a

 Tamaño de la molécula o masa.

 Forma o conformación del DNA (ej. DNA superenrollado migra mas que
DNA lineal).
 Tamaño de los poros del gel.
 Magnitud de la carga neta de la molécula.

6.4. Usos
Existen varios factores que son críticos al trabajar con enzimas de
restricción y que pueden afectar la actividad de las mismas:
1) Pureza del DNA – la reacción de enzimas es muy dependiente de la
pureza, contaminantes como proteínas, fenol, cloroformo, etanol,
EDTA, SDS, altas concentraciones de sal, etc. inhiben la
endonucleasa.
2) Temperatura y pH – las enzimas son muy sensitivas a temperatura y
pH en lo que respecta a su estabilidad y actividad.
3) DNAsas – Las DNAsas degradan el DNA en presencia de Mg++ .
4) Contaminantes con carga (-).
5) DNA contaminado con otro DNA.
6) Grados de metilación – algunas endonucleasas son inhibidas por
metilación.
7) Tipo de molécula de DNA – si el DNA no tiene la secuencia que es
reconocida por la enzima accesible, esta no puede cortar el material
genético (ej. si el DNA está superenrrollado el lugar de restricción no
va a estar accesible para la enzima).
8) Buffer adecuado – este provee el ambiente que necesita la enzima
para trabajar en condiciones óptimas.

 Importante: Una unidad de enzima se define como la cantidad de

enzima que se necesita para cortar 1µg de DNA en 1 hora.

 El buffer siempre debe añadirse como un 10% de la reacción total de

digestión.
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6.5. Beneficios
Gracias a las enzimas de restricción somos capaces de diagnosticar ciertas
enfermedades genéticas, bien sean debidas a una variación en el material
genético (duplicación, deleción, etc) o bien sean debidas a una mutación en
una base puntual. El procedimiento para dicho diagnóstico consistiría en
amplificar por PCR una región concreta del cromosoma donde sepamos
que debería estar o no ese cambio genético y añadir la enzima o enzimas
de restricción para que así se realicen los cortes pertinentes. Tras realizar
dichos cortes, correremos nuestras muestras en un gel de electroforesis y
veremos las diferencias de tamaños que existen. Si la mutación genera una
selección, al correr en la electroforesis observaremos un fragmento menor
al que esperaríamos de un paciente sano, de tal manera que lo podríamos
diagnosticar. Si la mutación, por el contrario, genera una mutación puntual,
podremos aprovecharla para utilizar una enzima en ese punto y que así, si
no existe dicha mutación, ese corte no se producirá y obtendremos un
fragmento mayor en el gel de electroforesis

6.6. ¿Cómo actúan las enzimas de restricción tras una infección viral?

En esta tabla se presentan algunas enzimas de restricción, con su

respectivo origen bacteriano y sitio de reconocimiento.
Sitio de
Enzima Origen Bacteriano Resultado del Corte
Reconocimiento

5'---G AATTC---
5'GAATTC 3'
EcoRI Escherichia coli 3'CTTAAG 3'---CTTAA G---
5'

5'---G GATCC---
5'GGATCC 3'
BamHI Bacillus amyloliquefaciens 3'CCTAGG 3'---CCTAG G---
5'

DpnI* Diplococcus pneumoniae

CH3 CH3
| |
5'GATC 5'---GA TC---3'
3'CTAG 3'---CT AG---5'
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| |
CH3 CH3

5'---A AGCTT---
5'AAGCTT 3'
HindIII Haemophilus influenzae 3'TTCGAA 3'---TTCGA A---
5'

5'TCGA 5'---T CGA---3'

TaqI Thermus aquaticus 3'AGCT 3'---AGC T---5'

5'---GC GGCCGC---
5'GCGGCCGC 3'
NotI Nocardia otitidis 3'CGCCGGCG 3'---CGCCGG CG---
5'

5'GANTC 5'---G ANTC---3'

HinfI Haemophilus influenzae 3'CTNAG 3'---CTNA G---5'

5'GATC 5'--- GATC---3'

Sau3A Staphylococcus aureus 3'CTAG 3'---CTAG ---3'

5'CAGCTG 5'---CAG CTG---3'

PovII* Proteus vulgaris 3'GTCGAC 3'---GTC GAC---5'

5'CCCGGG 5'---CCC GGG---3'

SmaI* Serratia marcescens 3'GGGCCC 3'---GGG CCC---5'

5'GGCC 5'---GG CC---3'

HaeIII* Haemophilus egytius 3'CCGG 3'---CC GG---5'

5'AGCT 5'---AG CT---3'

AluI* Arthrobacter luteus 3'TCGA 3'---TC GA---5'

5'GATATC 5'---GAT ATC---3'

EcoRV* Escherichia coli 3'CTATAG 3'---CTA TAG---5'
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5'GGTACC 5'---GGTAC C---3'

KpnI1 Klebsiella pneumonia 3'CCATGG 3'---C CATGG---5'

5'CTGCAG 5'---CTGCA G---3'

PstI1 Providencia stuartii 3'GACGTC 3'---G ACGTC---5'

5'GAGCTC 5'---GAGCT C---3'

SacI1 Streptomyces achromogenes 3'CTCGAG 3'---C TCGAG---5'

5'GTCGAC 5'---G TCGAC---3'

SalI1 Streptomyces albue 3'CAGCTG 3'---CAGCT G---5'

Streptomyces 5'GCATGC 5'---G CATGC---3'

SphI1 3'CGTACG 3'---CGTAC G---5'
phaeochromogenes

5'TCTAGA 5'---T CTAGA---3'

XbaI1 Xanthomonas badrii 3'AGATCT 3'---AGATC T---5'

* = ADN queda con extremos romos

6.6.1 Transducción

La transducción es un proceso mediante el cual el ADN es

transferido desde una bacteria a otra mediante la acción de unvirus.
También se utiliza para designar al proceso mediante el cual ADN
exógeno es introducido en una célula mediante unvector viral. Esta es
una herramienta que usualmente utilizan los biólogos moleculares
para introducir en forma controlada un gen extraño en el genoma de
una célula receptora.

Cuando los bacteriófagos (virus que infectan bacterias) infectan una

célula bacteriana, su modo normal de reproducción consiste en
capturar y utilizar la maquinaria dereplicación, transcripción,
y traducción de la célula de la bacteria receptora para producir gran
cantidad de virones, o producir partículas virales, incluido el ADN o
ARN viral y la cubierta de proteína.
 Los Virus

6.6.2 Retrovirus

Es aquel cuyos genes se encuentran codificados en ARN en lugar de

ADN.Los virus cuentan con muy poca cantidad de moléculas. En líneas
generales, todos los viruscontienen proteína que los encapsula, unas
pocas enzimas para su replicación y el material genético a replicar. Al
infectar una célula, el virus utiliza la maquinaria celular para crear más
virus y destruir dicha célula hospedadora.

Los retrovirus también necesitan de la maquinaria celular para realizar copias

de sí mismos, pero la infección requiere un paso adicional. El genoma del virus
necesita transcribirse inversamente a ADN utilizando una enzima
llamada transcriptasa inversa.

De este modo, los retrovirus convierten su RNA de cadena simple en una

molécula de ADN de doble hebra que puede ser integrada en el genoma de
células que han infectado. Una vez que la versión de ADN del gen
 Los Virus

retroviral se ha incorporado al genoma celular, la célula copia esos genes en

su proceso de replicación normal, haciendo que la célula haga todo el trabajo
de replicación por ellos.

Existen 3 tipos de retrovirus:

Oncovirus: Es un virus capaz de modificar el ciclo normal de las células,
dando lugar a la aparición de tumores, de ahí su nombre. Es decir, estos virus
son capaces de convertir en una célula tumoral cualquier célula que infecten.
Lentivirus: Son virus que pueden afectar a vacas, gatos, ovejas, caballos y
primates, además del hombre. Estos virus provocan enfermedades con
períodos de incubación muy largos. Suelen presentarse en tres etapas: la
primera, transitoria y aguda; la segunda, en la que el organismo parece tener
controlada la enfermedad; y una tercera en la que se produce una reproducción
del virus con las mismas patologías y alguna nueva.
Spumavirus: Los spumavirus son virus de la familia de los virus Retroviridae
que también son causantes de diversas enfermedades crónicas.
En definitiva se puede decir que son virus que pueden tardar más en hacer
notar sus síntomas debido a que necesitan un proceso adicional para
comenzar la infección. Pero debido a su proceso de transcripción cruzada
también son más difíciles de detectar y de encontrar tratamiento para futuras
reproducciones/variaciones del retrovirus.
 Los Virus

Capitulo VII: Patogenia viral

El término patogenia se refiere a los procesos o mecanismos de
generación del daño o enfermedad, dentro de estos mecanismos se
pueden incluir tanto los biológicos, pasando por lo químicos, hasta los
físicos, este término de “patogenia” a menudo se compara con el termino
de fisiopatología, pero la fisiopatología se refiere a la respuesta del cuerpo
humano hacia los virus, mientras que la patogenia establece el solo
comportamiento viral.

7.1. Citopatogenia
Es una rama de la patología que estudia y diagnostica las enfermedades al
nivel celular. La disciplina fue fundada por Rudolf Virchow en 1858.

7.1.1. Efecto citopático

Se denomina efecto citopático (ECP) a los cambios bioquímicos y

moleculares, morfológicos y de viabilidad celular, visibles a microscopía
óptica, causados durante el ciclo de replicación viral.

A lo largo del ciclo viral intracelular, desde que un virus reconoce a una
célula y penetra en su interior hasta la lisis o muerte celular,
prácticamente todos los componentes y orgánulos celulares sufren
alteraciones drásticas a nivel molecular, muchas de las cuales tienen
manifestación morfológica. La mayor parte de las observaciones del
ECP se han realizado encélulas infectadas en cultivo, en las que se
aprecia: pérdida de adherencia al sustrato, inhibición por contacto,
agregación celular, redondeamiento celular, formación de sincitios,
cuerpos de inclusión citosólicos, transformación celular, lisis, etc.
Aunque todos los virus líticos producen efecto citopático, puede
observarse una gran diversidad de manifestaciones.

7.1.2. Cuerpos de inclusión

 Los Virus

Muchos tipos de virus inducen la aparición de estructuras membranosas

en el citoplasma, en algunos casos en forma de grandes vacuolas
citoplasmáticas (e.g. VIH) y en otros como pequeñas vesículas. En
varios virus se ha comprobado que estas regiones corresponden a
zonas muy ricas en proteínas virales, siendo centros de replicación viral.

Los cuerpos de inclusión son estructuras observables a microscopía

óptica y constituyen centros activos del ciclo vírico intracelular.
Corresponden a complejos replicativos, transcripcionales o de
ensamblaje; situados en el núcleo (e.g.herpesvirus β, virus
del sarampión y adenovirus) o en el citoplasma, asociados
al citoesqueleto (e.g. reovirus).

Tienen valor diagnóstico, ya que poseen

carácter basófilo o acidófilo (eosinófilo) según el virus.

7.1.3. Transformación celular

Es una alteración en el crecimiento normal de las células en cultivo

con evidentes manifestaciones morfológicas. Se asocia a una serie
de cambios moleculares, que causan la desregulación de los
sistemas de control de la proliferación celular y de la apoptosis, que
se manifiestan en la pérdida de la inhibición por contacto, formando
cultivos multicapa e incluso tumores, la desorganización del
citoesqueleto, que acompaña a una cierta desdiferenciación
morfológica, alteraciones en la superficie celular
(cambios antigénicos y cambios en la funcionalidad de la membrana),
alteraciones nucleares y cromosómicas, independencia de anclaje,
disminución de la capa externa de fibronectina, bajos requerimientos
de factores de crecimiento, aumento en la secreción de proteasas,
etc.

La transformación celular está especialmente ligada a virus que

insertan su genoma en el de la célula infectada, pudiendo
causar mutagénesis insercional al interrumpir antioncogenes o activar
pro-oncogenes, o alterando la correcta regulación de la expresión
génica celular. Los virus que integran su genoma pueden ser
 Los Virus

virus RNA (e.g. Retrovirus)

o DNA (e.g.Adenovirus, Poliomavirus, Herpesvirus, Papilomavirus, He
padnavirus, Poxvirus)
CAPITULO VIII: VIRUS Y CÁNCER
8.1. VIRUS Y CÁNCER

VIRUS
Los virus infectan todos los tipos de organismos, desde animales y plantas,
hasta bacterias y arqueas. También infectan a otros virus; en ese caso
reciben el nombre de virófagos.Los virus son demasiado pequeños para
poder ser observados con la ayuda de un microscopio óptico, por lo que se
dice que son submicroscópicos; aunque existen excepciones entre
los Virus nucleocitoplasmáticos de ADN de gran tamaño o girus, tales como
elMegavirus chilensis, el cual se logra ver a través de microscopía óptica

El primer virus conocido, el virus del mosaico del tabaco, fue descubierto
por Martinus Beijerinck en 1899, y actualmente se han descrito más de
5000, si bien algunos autores opinan que podrían existir millones de tipos
diferentes. Los virus se hallan en casi todos los ecosistemas de la Tierra y
son el tipo de entidad biológica más abundante. El estudio de los virus
recibe el nombre de virología,7 una rama de la microbiología.

A diferencia de los priones y viroides, los virus se componen de dos o tres

partes: su material genético, que porta la información hereditaria, que
puede ser ADN o de ARN; una cubierta proteica que protege a estos genes
llamada cápside y en algunos también se puede encontrar una
bicapalipídica que los rodea cuando se encuentran fuera de la célula
denominada envoltura vírica. Los virus varían en su forma, desde
simpleshelicoides o icosaedros hasta estructuras más complejas. El origen
evolutivo de los virus aún es incierto, algunos podrían haber evolucionado a
partir de plásmidos (fragmentos de ADN que se mueven entre las células),
mientras que otros podrían haberse originado desde bacterias. Además,
desde el punto de vista de la evolución de otras especies, los virus son un
medio importante de transferencia horizontal de genes, la cual incrementa
la diversidad genética.
 Los Virus

Los virus se diseminan de muchas maneras diferentes y cada tipo de virus

tiene un método distinto de transmisión. Entre estos métodos se
encuentran los vectores de transmisión, que son otros organismos que los
transmiten entre portadores. Los virus vegetales se propagan
frecuentemente por insectos que se alimentan de su savia, como los áfidos,
mientras que los virus animales se suelen propagar por medio de
insectos hematófagos. Por otro lado, otros virus no precisan de vectores: el
virus de la gripe (ortomixovirus) o el resfriado común (rinovirus
y coronavirus) se propagan por el aire a través de los estornudos y la tos y
los norovirus son transmitidos por vía fecal-oral, o a través de las manos,
alimentos y agua contaminados. Los rotavirus se extienden a menudo por
contacto directo con niños infectados. El VIH es uno de los muchos virus
que se transmiten por contacto sexual o por exposición con sangre
infectada

CÁNCER

Los virus son una causa establecida de cáncer en los humanos y otras
especies. Los cánceres virales son extremadamente raros y solo
ocurren de unas cuantas personas (o animales). Los virus que producen
cáncer pueden provenir de muchas familias, tanto de virus ADN como
de virus ARN, y no únicamente del oncovirus (un término obsoleto para
referirse a losretrovirus). El desarrollo del cáncer puede deberse a gran
cantidad de factores como la debilidad inmunitaria del huésped
ymutaciones en éste.174 175 Los virus más importantes asociados con
cánceres humanos son el papilomavirus humano, el virus de la hepatitis
B, el virus de Epstein-Barr, y el virus T-linfotrópico humano. El más
reciente descubrimiento de un virus que causa cáncer es el poliomavirus
(Merkel cell polyomavirus) que es la causa de un raro cáncer de piel
denominadocarcinoma de células de Merkel.

Los virus de la hepatitis pueden causar una infección crónica que

provoca cáncer de hígado. La infección con virus T-linfotrópico humano
puede causar paraparesia espástica tropical y leucemia de linfocitos T
del adulto. Los papilomavirus humanos son una causa establecida de
cáncer de cérvix, piel, ano y pene. Dentro de los Herpesviridae, el
 Los Virus

human herpesvirus 8 causa sarcoma de Kaposi y linfoma de las

cavidades corporales, y el virus de Epstein-Barr causalinfoma de
Burkitt, enfermedad de Hodgkin, trastorno linfoproliferativo de los
linfocitos B y carcinoma nasofaríngeo. ElMerkel cell poliomavirus está
estrechamente relacionado con el SV40 y con los poliomavirus del ratón
que han sido usados como modelos de animales para los virus del
cáncer desde hace 50 años.

LOS VIRUS ONCOGÉNICOS

Los virus oncogénicos (también conocidos como Oncovirus) son

aquellos virus que poseen la propiedad de poder transformar la célula que
infectan en una célula tumoral. El primer indicio de que
un virus era carcinógeno lo tuvo elbiólogo estadounidense John
Bittner en 1936, quien descubrió que el cáncer de mama del ratón era
debido a un retrovirus, el MMTV (virus del tumor mamario del ratón).
Aunque se ha buscado algún agente vírico responsable del cáncer de
mama humano, no se ha llegado a ningún resultado concluyente.

Hoy en día se acepta que un gran número de retrovirus

y virus de ADN causan diversos tipos de cánceres en un gran número
de animales. La demostración de este mismo hecho en la
especie humana es más difícil, pues la prueba concluyente consiste en la
infección de un individuo sano con el virus, para comprobar el desarrollo
del cáncer, y claro está, esta inducción directa de la enfermedad en el
hombre no sería ética. Sin embargo, la presencia constante de un
determinado virus en las células cancerosas constituye un indicio que
puede confirmarse con otras comprobaciones.

Por ejemplo, la forma más corriente de cáncer de hígado se asocia a la

presencia del virus de la hepatitis B; el EBV (virus de Epstein-Barr) se
asocia a linfoma de Burkitt y al carcinoma nasofaríngeo; el virus HTLV-I se
asocia a una forma deleucemia humana; el HHV8/KSHV es el responsable
del sarcoma de Kaposi así como de la MCD (enfermedad multicéntrica de
Castleman) y de PEL (linfomas de efusión primarios) y el HPV (virus del
 Los Virus

papiloma humano) es el causante de lasverrugas de la piel y es el

responsable de un gran porcentaje del cáncer de cérvix.

CAPITULO IX: DIAGNOSTICO DE LABORATORIO

9.1. Diagnóstico de laboratorio

En este examen es importante que la muestra sanguínea no se

contamine con organismos de la piel o del equipo utilizado para preparar el
examen. Se debe seguir una técnica estricta con antisépticos para obtener y
preparar la muestra.

La sangre se extrae de una vena, usualmente de la parte anterior del

codo o del dorso de la mano. El sitio de punción se limpia con un antiséptico y
luego se coloca una banda elástica alrededor del antebrazo con el fin de aplicar
presión y hacer que la vena se llene de sangre.

Luego, se introduce una aguja en la vena y se recoge la sangre en un

frasco hermético o en una jeringa. Durante el procedimiento, se retira la banda
para restablecer la circulación y, una vez que se ha recogido la sangre, se
retira la aguja y se cubre el sitio de punción para detener cualquier sangrado.

Se examina el cultivo por varios días en búsqueda de la presencia de

microorganismos y, si éstos están presentes, se pueden realizar otros cultivos
para identificarlos. También se puede realizar una tinción de gram para
clasificar el organismo de forma que se pueda iniciar la terapia con antibióticos
antes de que los resultados del cultivo final estén disponibles.

La muestra inicial se debe colocar en el tipo correcto de medio en el

laboratorio. La mayoría de los cultivos son para bacteria. Otros medios están
disponibles para micobacterias e infecciones micóticas.

9.1.1. Obtención de muestra

A continuación se describen los procedimientos por tipo de muestra; así como

para la conservación y transporte de las muestras.
TIPO DE MUESTRA:
SUERO SANGUINEO
Para detección de anticuerpos de IgM e IgG anti-sarampión y anti-rubéola
Procedimientos:
• En el primer contacto con el paciente se extraen 5 ml de sangre venosa sin
anticoagulante.
 Los Virus

• Centrifugar a 2500 rpm x 10 min, (si no hay centrífuga dejar el tubo en reposo
por 2 horas para que se separe el coágulo del suero).
• Trasvasar el suero a un vial estéril y rotular.
9.1.2. Técnicas de laboratorio para el diagnóstico viral

En los laboratorios médicos y biológicos se realizan trabajos muy

variados que comportan un gran número de riesgos de diversa índole
para el trabajador, el personal cercano al mismo y para la comunidad en
su conjunto; entre tales riesgos se destaca en forma predominante el
riesgo biológico infeccioso derivado de la manipulación o exposición a
microorganismos patógenos en el laboratorio. La infección en el personal
de laboratorio depende básicamente de la interacción de varios factores
como son: el agente infeccioso implicado; el reservorio de laboratorio; el
modo de escape, vía de transmisión y puerta de entrada; y la
susceptibilidad del hospedero. Sólo una parte de las infecciones
contraídas en el laboratorio son atribuibles a accidentes reconocidos; en
la mayoría de las infecciones ocurridas en este ambiente se desconoce
la causa directa de la infección, aunque se presume que pueda deberse
a contaminación por aerosoles infecciosos, capaces de ser generados
por muchos procedimientos habituales de laboratorio. La Organización
Mundial de la Salud (OMS) ha elaborado una clasificación de agentes
biológicos sobre la base del riesgo que representan para el individuo que
trabaja con ellos y para la comunidad; así se han establecido 4 grupos
de riesgo en orden creciente de peligrosidad como se muestra a
continuación: Grupo de Riesgo 1 (escaso o nulo riesgo individual y
comunitario) Microorganismo que tiene pocas probabilidades de
provocar enfermedades humanas o animales. Grupo de Riesgo 2 (riesgo
individual moderado, riesgo comunitario bajo) Agente patógeno que
puede provocar enfermedades humanas o animales, pero que tiene
pocas probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal de
laboratorio, la comunidad, el ganado o el medio ambiente. La exposición
en el laboratorio puede provocar una infección grave, pero se dispone de
medidas eficaces de tratamiento y /o de prevención, y el riesgo de
propagación es limitado. 2 Grupo de Riesgo 3 (riesgo individual elevado,
 Los Virus

riesgo comunitario bajo) Agente patógeno que suele provocar

enfermedades humanas o animales graves, pero que de ordinario no se
propaga de un individuo infectado a otro. En el laboratorio pueden
transmitirse por aerosoles. En general no se dispone de medidas
eficaces de tratamiento y prevención. Grupo de Riesgo 4 (elevado riesgo
individual y comunitario) Agente patógeno que suele provocar
enfermedades graves en personas o en los animales y que puede
propagarse fácilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente.
No suele disponerse de medidas eficaces de tratamiento y de
prevención. Entre los elementos a considerar para evaluar el potencial
de riesgo de un agente biológico se cuentan: la capacidad patógena del
agente, el modo de transmisión y su rango hospedero, la disponibilidad
de medidas de prevención eficaces, disponibilidad de tratamiento eficaz,
endemismo o exotismo del agente considerado y la experiencia de
trabajo con el agente. En cada país, se deberá clasificar por grupo de
riesgo a todos los microorganismos que se encuentren en el territorio
nacional. El término contención se usa para describir métodos seguros
para el manejo de agentes infecciosos, en el laboratorio donde estos son
manipulados o mantenidos. La Bioseguridad, disciplina que se ocupa de
la prevención del riesgo biológico infeccioso, no es más que un conjunto
de medidas científico-organizativas y técnico- ingenieras encaminadas a
lograr la contención de los agentes infecciosos y proteger al trabajador
de laboratorio y a la comunidad de este tipo de riesgo. En
correspondencia con los grupos de riesgo se han establecido también 4
niveles de Bioseguridad, o sea combinaciones de técnicas y prácticas de
laboratorio, equipos de seguridad e instalaciones de laboratorio,
apropiadas para el riesgo que representen los agentes infecciosos que
se manipulen en estos lugares. En el caso de los Arbovirus se siguen los
mismos criterios que para el resto de los agentes patógenos aunque en
particular, un Subcomité para la Seguridad 3 de Laboratorio en Arbovirus
(SALS), perteneciente al Comité Americano sobre Arbovirus (ACAV), ha
categorizado, acorde con la clasificación de la OMS, a cada uno de los
virus registrados en el Catálogo de Arbovirus y Ciertos Otros Virus de
Vertebrados. Las categorizaciones del SALS, periódicamente
 Los Virus

actualizadas desde 1980, se basan en las evaluaciones de riesgo

realizadas a partir de la información proveída por 585 laboratorios que
trabajan con arbovirus en todo el mundo. Según esta categorización los
virus del dengue han sido asignados al Grupo de Riesgo 2. Antes de
1988 se habían reportado 12 infecciones por dengue adquiridas en el
laboratorio; desde 1988 a 1991 se documentaron 4 casos adicionales.
Mientras que los riesgos primarios en el laboratorio son la inoculación
parenteral accidental, el contacto del virus con la piel dañada o las
membranas mucosas y las mordeduras de roedores de laboratorio o
picaduras por artrópodos infectados, los aerosoles infecciosos pueden
también constituir una fuente potencial de infección. En los últimos 4
casos reportados, no se utilizaron medios de protección individual
adecuados y en 3 de ellos también se ignoró la contención de aerosoles
potenciales en cabinas de seguridad, especialmente cuando se
trabajaba con altas concentraciones de virus. Tales aerosoles o
salpicaduras con fluidos infecciosos pudieran haber producido
contaminación de la piel dañada y no protegida adecuadamente. La
manipulación segura en el laboratorio de los virus del Dengue (en
especial las preparaciones concentradas) requieren de la adherencia
estricta a las recomendaciones del Nivel de Bioseguridad 2 (Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories. CDC-NIH, 4th ed. 1999).
Estas recomendaciones, según el manual de la OMS, comprenden en
esencia el trabajo de un laboratorio básico y observar técnicas
microbiológicas apropiadas (TMA).

9.1.3. Detección de proteínas víricas

Se puede realizar de distintas maneras: Aislamiento viral. Los primeros
huéspedes biológicos empleados fueron los animales de
experimentación. Actualmente su uso se ha limitado notablemente
debido a las dificultades inherentes al trabajo con animales y al
desarrollo de cultivos celulares. En ciertos laboratorios de diagnóstico
virológico y de producción de productos biológicos, se utilizan lauchas en
la propagación del virus rábico para la producción de la vacuna, en el
diagnóstico de arbovirus y en estudios epidemiológicos de enterovirus;
 Los Virus

se pueden emplear una variedad de animales para la preparación

específica de anticuerpos antivirus (policlonales o monoclonales) con
distintos objetivos. Todavía se propaga virus influenza en huevo
embrionado, más para obtención del antígeno viral utilizado en la
producción de vacuna que para diagnóstico. Los cultivos celulares
constituyen, desde 1950, el sistema más empleado para el aislamiento y
propagación de la mayoría de los virus. Los cultivos de células in vitro
consisten en un sistema formado por células provenientes de un órgano
o un tejido, normal o tumoral, mantenidas en medios de cultivo de
composición química definida y en condiciones de temperatura, pH,
atmósfera y humedad controladas. Los cultivos pueden clasificarse en
tres tipos: 1. cultivo primario Diagnóstico Virológico 3 Cátedra d e
Microbiología , Parasitología e Inmunología – Facultad d e Medicina ‐
UNNE 2. cepa celular 3. línea celular dependiendo del origen y tiempo
de sobrevida de las células in vitro. Los cultivos primarios se preparan a
partir de tejidos normales, jóvenes, que tienen un cariotipo normal y una
capacidad de crecimiento in vitro limitada a 2 ó 3 subcultivos (Ej: pulmón
fetal humano, prepucio de recién nacido, amnios humano, etc.) y son
más difíciles de obtener. En el otro extremo, las líneas celulares
provenientes de tejidos tumorales, con cariotipos heteroploides, pueden
subcultivarse en forma contínua y son fáciles de mantener in vitro (Ej:
HEp‐2, Hela, Vero, RK, etc.). Las cepas celulares tienen una constitución
cromosómica normal y permiten 20 a 50 subcultivos (MCR‐5). No existe
un cultivo celular susceptible a todos los virus, de modo que un
laboratorio de diagnóstico viral debe disponer de distintos cultivos
celulares. Por ejemplo, el virus herpes simplex crece bien in vitro en
cultivos primarios, cepas y líneas celulares (MRC‐5, RK, HEp‐2, HeLa,
Vero u otras); en cambio, otro virus de la misma familia, el
citomegalovirus (CMV) sólo crece en cultivos primarios de pulmón fetal
humano o bien en algunas cepas celulares derivadas del mismo órgano
y especie (MRC‐5). Por otro lado, una línea celular como HEp‐2 puede
ser bastante sensible a adenovirus, VRS, parainfluenza, herpes simples,
poliovirus y otros, pero no permitir el crecimiento de CMV, rotavirus,
influenza, etc; además, es posible que los pasajes sucesivos de una
 Los Virus

línea la hagan disminuir su sensibilidad a algunos virus, como sucede

con Hep‐2 en relación a VRS. Algunos virus inducen un efecto
citopático viral (ECP) muy característico en ciertos cultivos celulares,
facilitando su diagnóstico, como HSV, VRS, adenovirus. Considerando el
cuadro clínico del paciente y el tipo de muestra y de cultivo celular
usado, con las características y tiempo de aparición del ECP se puede
presumir una etiología viral con cierta seguridad. Sin embargo, se deben
usar técnicas diagnósticas complementarias para identificar o precisar el
agente viral. Por otra parte, hay virus que requieren cultivos celulares
muy especiales (HIV, EBV, calicivirus, rotavirus, etc.) y otros para los
cuales aún no se dispone de un cultivo celular que permita su
propagación (papilomavirus, hepatitis B y C, etc), para los que se debe
recurrir a otro tipo de técnica diagnóstica.

9.1.4. Métodos de análisis serológico

El objetivo de estas técnicas es detectar la respuesta inmune humoral
del huésped (anticuerpos). Su fundamento es la formación de un
complejo antígeno anticuerpo ‐ virus y suero del paciente ‐ que puede
demostrarse por diversos procedimientos. 1. Reacción de
neutralización. Se basa en la pérdida de la capacidad infectiva de un
virus al unirse al anticuerpo específico, formando un complejo antígeno‐
anticuerpo. Estos complejos no infectivos se pueden detectar inoculando
la mezcla en un huésped vivo, animales de experimentación o en
cultivos celulares, donde no produce efecto pues la capacidad infectiva
del virus ha sido neutralizada por los anticuerpos del paciente. Por el
contrario, en ausencia de anticuerpos específicos no se forma el
complejo, el virus mantiene su capacidad infectiva y es capaz de
producir un efecto biológico característico en el huésped. Esta técnica
también permite definir los “serotipos virales”, pues la reacción de
neutralización refleja el grado de inmunidad del huésped frente al agente
específico ( Ej. 3 serotipos de virus polio, 51 serotipos de adenovirus, 1
serotipo de rubéola, etc). Por esto, generalmente se considera como
técnica de referencia para metódicas que miden anticuerpos. Sin
embargo, es una técnica sofisticada, pues requiere de un laboratorio con
 Los Virus

capacidad de mantener huéspedes vivos y la reacción demora varios

días, el tiempo que tarda el virus en producir un efecto demostrable. 2.
Reacción de inhibición de la hemaglutinación. Se basa en la pérdida de
la capacidad hemaglutinante de un virus al formarse el complejo
antígeno‐anticuerpo. Se utiliza en el diagnóstico de virus con capacidad
de aglutinar glóbulos rojos (influenza, rubéola, sarampión, etc.), que al
unirse a los anticuerpos específicos pierden esta propiedad. Esto se
demuestra haciendo reaccionar la mezcla de antígeno con anticuerpos
(suero del paciente) con glóbulos rojos, los que no se unen y sedimentan
formando un botón o punto; en ausencia de anticuerpos específicos se
expresa la propiedad hemaglutinante del virus, que se visualiza por la
formación de una malla de aglutinación en el tubo o pocillo en que se
realiza la reacción. Esta técnica se hace en microplacas de plástico en
forma manual y demora 3 a 5 horas en dar resultados. Actualmente se
usa principalmente en diagnóstico y caracterización de virus influenza.
Los anticuerpos inhibidores de la hemaglutinación tienen buena
correlación con los neutralizantes en reflejar nivel de inmunidad, y su
medición es más sencilla ( ej. sarampión, rubéola ) 3. Reacción de
fijación del complemento. En esta técnica el complejo virus‐anticuerpo
específico debe competir por captar complemento con otro sistema,
formado por glóbulos rojos de cordero sensibilizados con hemolisina
(anticuerpo anti‐glóbulos rojos de cordero). Si en la primera reacción se
forma el complejo antígeno‐anticuerpo, se consume o “fija”el
complemento que hay en el medio y al agregar los glóbulos rojos
sensibilizados no se produce la hemólisis porque no hay complemento
libre y los eritrocitos sedimentan al fondo del tubo o pocillo formando un
botón. En cambio, si no se forma el primer complejo, el complemento
queda libre, se une a los glóbulos rojos sensibilizados y los lisa. Esta
técnica es relativamente compleja, pues usa muchos reactivos, los que
deben estar debidamente estandarizados. Su sensibilidad y
especificidad no son muy altas y han sido superadas por otras técnicas.
Los anticuerpos fijadores del complemento duran sólo algunos años
después de la infección, de modo que son indicadores de un proceso
reciente.
 Los Virus

CAPITULO X: ENFERMEDADES VIRALES EMERGENTES Y

REEMERGENTES

En los últimos años ha tenido lugar en el mundo la emergencia o reemergencia

de muchos eventos epidemiológicos, dentro de los que se encuentra el
descubrimiento de nuevas enfermedades infecciosas, sus agentes etiológicos y
su fisiopatogenia, así como otras enfermedades que tuvieron determinados
niveles de control y ahora se muestran con incidencias cada vez más altas
convirtiéndose en problemas sanitarios de primera magnitud, tanto en los
países en vías de desarrollo como en los desarrollados.
Las enfermedades emergentes y reemergentes son un reflejo de la incesante
lucha de los microorganismos por sobrevivir, buscando brechas en las barreras
que protegen al ser humano contra la infección.
Estas brechas sanitarias, que se han venido agrandando desde hace algunas
décadas, pueden obedecer a comportamientos de alto riesgo como fallas en
los sistemas de vigilancia epidemiológica, control insuficiente de la población
de mosquitos portadores de enfermedades, paralización de los sistemas de
abastecimientos de agua y saneamiento, acercamiento de la fauna silvestre a
los asentamientos humanos por la deforestación, entre otros.
En los últimos 25 años han aparecido más de 30 nuevos microorganismos
ENFERMEDADES EMERGENTES
En 1992 el Instituto de Medicina de los Estados Unidos definió como
enfermedades emergentes aquellas cuya incidencia se ha incrementado desde
las pasadas 2 décadas o amenaza incrementarse en un futuro.
Dentro de ellas podemos encontrar:
Por virus:
- Infección por VIH/SIDA.
- Fiebre hemorrágica de ébola.
- Hepatitis C, Delta, E, GB.
- Influenza A (H1N1) virus.
- Neumonía por morbillivirus.
 Los Virus

- Síndrome pulmonar por hantavirus.

- Enfermedad diarreica aguda por Rotavirus.
- Fiebres hemorrágicas por arenavirus (fiebre hemorrágica argentina,
venezolana, boliviana).
- Eritema infeccioso.
Por bacterias:
- Ehrlichiosis.
- Enfermedad diarreica aguda por Campilobacter yeyuni y Escherichia coli
0157 H7.
- Legionelosis.
- Gastritis por Helicobacter pylori.
- Síndrome de shock tóxico por estafilococo áureo.
Por protozoos:

ENFERMEDADES REEMERGENTES
Las enfermedades reemergentes se refieren al resurgimiento de enfermedades
Que ya habían sido aparentemente erradicadas o su incidencia disminuida.
Son todas aquellas enfermedades infecciosas conocidas, que después de no
constituir un problema de salud, aparecen a menudo cobrando proporciones
epidémicas.
Son ejemplos bien conocidos los siguientes:
Por virus:
- Dengue.
- Enfermedad rábica.
- Fiebre amarilla.
Por bacterias:
- Cólera.
- Difteria.
- Fascitis necrotizante.
- Leptospirosis.
- Peste.
- Tuberculosis.
Por parásitos:
- Paludismo.
 Los Virus

Los factores causales relacionados con la emergencia de las infecciones

pueden clasificarse en:
CAPITULO XI: ACCIÓN DE LOS ANTIVIRALES

ANTIVIRALES
Los antivirales son aquellos compuestos capaces de inhibir una o varias etapas
del ciclo de multiplicación viral dentro de la célula huésped
CLASIFICACIÓN

1. Son análogos de los ácidos nucleicos.

2. Bloqueo de la adhesión y penetración.
3. Inhibición de la síntesis de ADN.
4. Inhibición de la síntesis proteica.
5. Alteración de la fase de maduración proteica.

CARACTERÍSTICAS DE UN ANTIVIRAL IDEAL

La droga debe ser específicamente activa contra el virus “target” (blanco),
inhibiendo algún paso esencial de su metabolismo y debe poder debilitar a las
cepas resistentes que puedan surgir.
VIRUS
Parásitos intracelulares que necesitan enzimas y macromoléculas de la célula
huésped para su replicación.
Existen dos grupos de virus:
Virus DNA
Virus RNA
Su ciclo vital es:
1. Adhesión
2. Penetración
3. Pérdida del revestimiento
4. Duplicación del genoma viral
5. Armadura
6. Liberación
 Los Virus

Bibliografía

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ANEXOS
Los Virus