INTRODUCCIÓN

El Laboratorio Clínico hace parte del equipo básico de salud, cuya función es de
gran importancia para lograr el pronóstico, diagnóstico, tratamiento y vigilancia de
las enfermedades, sin embargo, una mala praxis en alguna de sus fases deriva en
la obligación de asumir la responsabilidad por las consecuencias que se
produzcan. El conocimiento de las normas de bioseguridad vigentes, las leyes, las
normas técnicas y los manuales de procedimiento es una obligación de la cual no
se pueden excusar los laboratorios, porque este deber exige un comportamiento
activo del profesional de la salud, quien constantemente está compelido al estudio
de estas normas, con independencia de que sus labores se realicen en una
entidad pública o privada.

Las actividades en las que participan las auxiliares del laboratorios clínico, son de
gran importancia y se consideran eslabones fundamentales para el adecuado
manejo de pacientes y de muestra clínicas, sus actividades en las fases pre
analíticas, analíticas y post analíticas afectan directamente y de manera
contundente el adecuado diagnóstico, pronostico y seguimiento de los pacientes,
siendo entonces vital el conocimiento y el desarrollo de las competencias
necesarias a fin de garantizar brindar información oportuna, pertinente y confiable
al equipo interdisciplinar y así velar por que las decisiones medicas sean
coherentes y de acuerdo a la clínica del paciente.

Los errores cometidos en la fase pre analítica, especialmente en la toma de

muestras, representa un porcentaje superior al 50% de los errores en el
laboratorios clínico; es así como el conocimiento en los cuidados y la aplicación
de las recomendaciones por parte del personal de salud en estas fases deben ser
manejadas con todos los estándares de calidad, las competencias y la
fundamentación científica necesaria y adecuada, con el fin de intervenir de manera
óptima en los procesos asistenciales.

Funciones del laboratorio clínico.

Todo laboratorio clínico independiente del grado de complejidad, para cumplir con
el proceso de recepción, toma, transporte, procesamiento, análisis de muestras e
informe de resultados de laboratorio, tendrá las siguientes responsabilidades:
o Prestar el servicio de laboratorio clínico en cuanto a recepción, toma de
muestra, transporte, procesamiento, análisis e informe de resultados de
manera oportuna, eficiente y confiable.
o Participar en los estudios para la implantación de nuevas técnicas y
procedimientos, así mismo como en la organización, operación,
actualización y difusión de pruebas en uso y sus correspondientes valores
de referencia.
 o Orientar sobre los avances tecnológicos y científicos que inciden en el
laboratorio clínico, el mejor aprovechamiento de los mismos, la
interpretación de resultados y educar sobre lo que se realiza en el
laboratorio clínico para la prevención, diagnóstico, tratamiento y
seguimiento de las diferentes patologías.
o Colaborar con el estudio de verificación de información de muestras cuyo
análisis, resultado o interpretación sean dudosos.
o 5 expedir los resultados de los exámenes solicitados en forma eficiente y
oportuna.
o Mantener un programa de garantía de la calidad en el laboratorio clínico.
o Brindar permanente apoyo, servicio ético y profesional a todos los usuarios
del laboratorio.
o Mantener un sistema de registro de las pruebas realizadas y los resultados
obtenidos.

Al desarrollar este curso el objetivo es lograr adquirir las diferentes técnicas en la

toma de muestras de laboratorio, utilización centrifuga entre otros adquiriendo o
afianzando de este modo los conocimientos sobre de los requisitos regulatorios,
guías, protocolos además también adquirir las diferentes competencias para la
práctica segura de este procedimiento.

Con la guía y ayuda del docente se pretende resolver a cabalidad las dudas que
los alumnos puedan presentar, se espera cumplir con las expectativas de
fructificar y enriquecer el conocimiento en el área de la salud, para colocar en
práctica lo aprendido en cualquier situación, prestando una ayuda al paciente.

Objetivo General

Brindar los conocimientos de actualización y complementarios a la formación

como auxiliares de laboratorio clínico, el cual abarca las temáticas y las
competencias necesarias para su óptimo desempeño en la fase pre analítica.
El laboratorio clínico es una herramienta de apoyo primordial en el área clínica,
que permite al médico orientar un diagnostico frente a enfermedad o estadio del
paciente, seguir y valorar la evolución del paciente con respecto a un tratamiento
Servicios del laboratorio clínico

Básicamente el trabajo de laboratorio clínico se clasifica en tres áreas

* Pre analítica: Toma de muestras
* Analítica: Análisis de muestras
* Post analítica: Entrega de resultados

Razones para el uso de los servicios de laboratorio clínico

* Valoración del estado de salud

* Confirmar el diagnóstico de una enfermedad
* Obtener información sobre el pronóstico de la enfermedad
* Establecer un tratamiento
* Evaluar la respuesta terapéutica
* Vigilar la evolución de la enfermedad
* Precisar factores de riesgo

AUXILIAR DE LABORATORIO: personal de apoyo cuya función es realizar

admisión y registro de pacientes, toma de muestra, preparación de materiales,
limpieza y desinfección entre otras funciones necesarias en el laboratorio clínico.

FUNCIONES DEL AUXILIAR

Se realiza una encuesta a cada paciente para
Encuesta y
Auxiliar de obtener datos de ayuda en la validación de los
verificación de
laboratorio resultados. Se verifica que los exámenes
órdenes y facturas
ordenados estén facturados
Preparación de material a utilizar. Identificación
Auxiliar de de tubos, láminas, recolectores con los datos
Toma de muestra
laboratorio del paciente.
Toma de muestra.
Auxiliar de Preparación de las Centrifugar las muestras.
laboratorio muestras separar/ de las muestras para remisión
Remisión y Envío Empaque/embalaje en sus respectivo
Auxiliar de
de muestras al recipientes secundarios y terciario legiblemente
 rotulado bajo la cadena de frio (registrar
laboratorio de temperatura).
laboratorio
referencia Guardar registro de la relación de muestras
envías.

En función de las labores diarias:

 Garantizar la atención a los usuarios sin discriminación por razones de edad, sexo,
raza, religión, credo, política o condición social y en las mejores condiciones de
calidad, oportunidad, accesibilidad y equidad en la atención
 Recepción de pacientes, se verifica concordancia en la solicitud de exámenes con los
datos del paciente. (Nombre, numero de documento de identidad, edad, eps,
autorización de exámenes de 2do y 3er nivel).
 Se le informa al paciente las condiciones de la toma de muestra, y entrega de
resultados según la complejidad del mismo.
 Registro de exámenes solicitados, y respectiva toma de muestra bajo los protocolos
de la fase pre-analítica.
 En la fase analítica se centrifugan y separan las muestras para su posterior
procesamiento.
 Preparación, montaje y coloración (de Gram, Wright, BK entre otras) de las diferentes
muestra microbiológicas (frotis vaginal, orina, heces, esputo y otros fluidos corporales)
 Desactivación y lavado de material utilizado en la jornada
 Limpieza y desinfección de las áreas del laboratorio según cronograma

* El auxiliar de laboratorio clínico realiza una serie de labores de gran importancia

en la consecución de un resultado final de óptima, calidad, exactitud y
confiabilidad, para el paciente
* La responsabilidad del técnico auxiliar de laboratorio empieza por la excelencia
en la atención y orientación al usuario del servicio de laboratorio clínico, en todo
sentido, ya sea científico o humano Por lo tanto cada examen del laboratorio
clínico, debe realizarse al paciente de forma individual, guiándose siempre por
parámetros profesionales y éticos de: Respeto, confidencialidad y Responsabilidad
* Mantener el material y equipo de laboratorio en buenas condiciones
* Minimizar al máximo errores de la práctica diaria
* Erradicar las equivocaciones manteniendo una actitud ética y profesional,
eficiente en la aplicación de cada uno de los procedimientos realizadosRecuerde
que la obtención de resultados exactos en los análisis realizados, puedan apoyar
el diagnóstico y tratamiento médico, encaminado al bienestar del paciente
Recepción de muestras• Suministrar los recipientes adecuados
• Indicar o informar al paciente las condiciones previas a la recolección de la
muestra
• Recibir las muestra
• Confrontar con la orden médica las muestras recibidas
• Asignar el número de ingreso o consecutivo, para la identificación interna de las
muestras procesadas
• Identificar correctamente la muestra con el nombre, apellidos e identificación,
historia clínica del paciente, número de radicación o ingreso de la muestra
• Registrar en la base de datos: nombres, apellidos y número de identificación del
paciente especificando los exámenes solicitados
• Ordenar las muestras recibidas por números ascendentes
• Trasladar las muestras al laboratorio para su análisis

La Etapa Pre analítica en el Laboratorio Clínico

La fase pre analítica es la secuencia de acontecimientos que tienen lugar antes de

que la muestra sea sometida al proceso de análisis. Actualmente se considera la
fase más crítica del proceso ya que en ella es donde se produce un mayor número
de errores
Hay factores en la fase pre analítica, relacionados con el paciente, que pueden
afectar los resultados del laboratorio. Algunos como sexo, raza, edad, embarazo y
ciclo menstrual no se pueden modificar, por lo que el médico debe conocerlos para
poder interpretar adecuadamente los exámenes; sin embargo, existen otros
modificables con la correcta toma de muestras y preparación de los pacientes, que
constituyen los primeros pasos para obtener resultados válidos, aunque
frecuentemente se descuidan porque se conocen muy poco.

También aparecen factores modificables, pero que afectan los resultados: estrés
mental y físico, ejercicios, dietas, ingestión de alcohol, hábito de fumar, cambio de
postura, cirugía e inyección intramuscular, masaje prostático, tiempo de muestreo
e ingestión de medicamentos.

El resultado de un examen será confiable si la solicitud del examen es clara, si el

paciente reúne los requisitos necesarios de preparación, si los material de toma de
muestra son los adecuado, si se utiliza la técnica adecuada de recolección, si se
transporta en forma oportuna y en las condiciones de almacenamiento requeridas,
El personal de laboratorio debe estar consciente de su responsabilidad profesional
y de su compromiso con los pacientes, se esfuerza cada día por hacer un trabajo
de excelencia

Factores que influencian los resultados de laboratorio clínico

Interferencias que pueden producirse por algunos factores de la fase preanalítica
en análisis del laboratorio clínico.

* Alcohol etílico: Disminuye los valores de. Gamma glutamil transpeptidasa (GGT),
alamino amino transferasa (ALAT),aspartato amino transferasa (ASAT), lípidos,
factores de la coagulación, glucosa, uratos y triglicéridos.
* Altitud. Aumenta la concentración de eritrocitos, hemoglobina y eritrocitos en la
sangre

* Anticoagulantes: es importante el uso del anticoagulante adecuado según la

prueba a determinar (EDTA para hematimetría, citrato para coagulación básica,
Heparina litio para determinaciones bioquímicas…). Además se debe conocer la
sal en la que se presenta el anticoagulante (sódica, potásica, etc.) y las
interferencias que puede presentar en ciertos parámetros. Es fundamental
mantener la proporción adecuada entre la cantidad de sangre y el anticoagulante,
ya que si no se mantiene se invalida la muestra.
* Ayuno prolongado. (12 Horas) Disminuye las concentraciones de proteínas,
colesterol, triglicéridos, tiroxina y urea y eleva las concentraciones de creatinina en
el plasma, la concentración uratos aumenta debido a la reducción de la depuración
de los uratos como resultado de una cetonemia. Se incrementa la excreción
urinaria de amoniaco y creatinina, mientras que se reduce la de urea, calcio y
fosfato

* Cafeína. Promueve la glucogénesis, aumentando la concentración de glucosa.,

ácidos grasos y catecolaminas (adrenalina + noradrenalina) en el plasma *
Cambios posturales y estasis venoso: Producen de 10 a 20 % de
hemoconcentración de proteínas, enzimas y sustancias ligadas a proteínas como:
cortisol, tiroxina, calcio, hierro, fósforo y lípidos * Ciclos biológicos: Las hormonas
sexuales varían a lo largo del ciclo menstrual (FSH, LH, estradiol, etc.).
* Cirugía e inyección intramuscular: Aumenta los valores de Creatinina
* Dieta rica en fosfatos y calcio: Aumenta los valores de calcio; y la rica en grasas,
los de lípidos y bilirrubina. Altos niveles de: Glucosa en sangre, proteínas y
cuerpos cetónicos Pueden elevar las concentraciones de creatinina en sangre

* Edad: algunas magnitudes presentan diferentes valores según la edad, por lo

que es importante conocer la edad del paciente para poder interpretar
correctamente un resultado. Ej.- Una fosfatasa alcalina con niveles patológicos
para un adulto es normal para un niño en edad de crecimiento; las
concentraciones de los eritrocitos, hematocrito y la hemoglobina en la sangre, es
más alta en neonatos que en adultos; los niveles normales de PSA son superiores
en ancianos mayores de 65 años,
Durante los primeros días siguientes al nacimiento, el incremento de la presión de
oxigeno arterial provoca la degradación de los eritrocitos, aumento de la
concentración de la hemoglobina, que influye en el aumento de la concentración
de bilirrubina en el plasma. Dado que la función del hígado (glucoronización), no
está totalmente establecida en los neonatos
* Ejercicio: Ejercicio intenso: realizar ejercicio intenso en los días previos a la
toma de muestra puede aumentar los valores de glucosa, creatinina, CPK, HDL,
potasio, factores de la coagulación, eritrosedimetación., prolactina, cortisol
* Embarazo: diversas magnitudes se ven afectadas por un efecto de “dilución”
producido por el aumento del volumen plasmático, aumenta el aclaramiento de
creatinina. Se produce un incremento de los niveles séricos de lípidos, colesterol,
triglicéridos, glicemia, fosfato, cobre, ceruloplasmina, fosfatasas séricas, amilasa,
lipasa, Lactato deshidrogenasa (HDL), fosfatasa alcalina leucocitaria y
eritrosedimentación. Disminuyen valores de. ALAT, ASAT, proteínas totales,
calcio, CPK, recuento de eosinófilos, hemoglobina y hematocritos.
* Estación: algunos parámetros varían según el periodo estacional. Así, los niveles
de vitamina D se incrementan en verano.
* Estrés: Aumenta los valores de glucosa, colesterol, proteínas transportadoras,
factores de la coagulación y células sanguíneas * Fumar: Aumenta los valores de
glucosa, PTG, colesterol, HDL, amilasa y lipasa fosfoquinasa (CPK), glicemia,
ALAT, ASAT y amilasa
* Inmovilización: Aumenta los valores de Calcio y PTG
* Masaje prostático: Aumenta los valores de amilasa y fosfatasa ácid

* Raza Las personas de raza negra de ambos géneros, tienen significativamente

disminuida la concentración de los leucocitos (granulocitos).en la sangre,
comparado con la raza blanca.
En contraste la concentración de hematocrito, hemoglobina, y linfocitos es casi
idéntica en ambos grupos La concentración de monocitos en la raza blanca, la
concentración de lipoproteínas son 2 veces más altas en los negros. En este
contexto es notable, que ni la arteriosclerosis ni la morbilidad es mayor en
personas de raza negra, a pasar de la concentración de lipoproteínas alta
* Ritmo circadiano: De noche aumentan los leucocitos y eosinófilos, pero
disminuyen algunas hormonas como ACTH, hormonas como el cortisol se ven
afectadas por el ritmo circadiano, presentando un pico máximo a las 8 h y un pico
mínimo a las 20 h.* Sexo: algunas magnitudes como CK, mioglobina, creatinina,
ácido úrico etc., presentan diferencias según el sexo del paciente.
* Sueros terapéuticos: se recomienda, en la medida de lo posible, que se extraiga
la muestra del brazo opuesto al que se tiene la infusión. Si la muestra ha de
obtenerse a través de un catéter se recomienda que se deseche previamente la
cantidad de sangre equivalente a dos veces el volumen de éste.
 UNIDAD 1
1. BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO
Principios de Bioseguridad
El laboratorio clínico constituye un ambiente de trabajo de alto riesgo, donde se
pueden peligros de contagio de enfermedades infecciosas, para las personas que
se encuentren en o cerca de ellos. Algunos casos atribuidos al descuido o la
inadecuada técnica en la manipulación de materiales infecciosos. Contenidos en
muestras biológicas, medios de cultivos, material contaminado. El objetivo es
reducir o eliminar el riesgo de exposición, de quienes trabajan en laboratorios, a
otras personas, y la contaminación del medio ambiente externo por agentes
potencialmente peligrosos
Bioseguridad: "las actividades, intervenciones y procedimientos de seguridad
ambiental, ocupacional e individual para garantizar el control del riesgo biológico"
También es el conjunto de normas y procedimientos que tienen por objeto,
disminuir, minimizar o eliminar los factores de riesgo biológicos que puedan llegar
a afectar la salud o la vida de las personas o puedan afectar el medio o ambiente.
Los principios de la Bioseguridad, tienen cuatro pilares que sustentan y dan origen
a las Precauciones Universales, los cuales son: Autocuidado, Universalidad,
Barreras de protección y Medidas de eliminación.
a. AUTOCUIDADO: El principio del autocuidado se refiere a las prácticas
cotidianas y a las decisiones sobre ellas, que realiza un trabajador expuesto
para cuidar de su salud; para ello cumple con las normas de bioseguridad,
realiza uso adecuado de equipos y elementos que se proveen para su
protección; priorizando en su cuidado como cuidador.
b. UNIVERSALIDAD: De este principio nace el concepto de potencialidad, es
decir, que sin importar si se conoce o no la serología de un individuo, el estrato
social, sexo, religión, etc., el trabajador expuesto debe seguir las precauciones
universales ya que potencialmente puede portar y transmitir microorganismos
patógenos.
c. BARRERAS DE PROTECCIÓN: Son los elementos que protegen al
profesional de la transmisión de infecciones. Se clasifican en dos grandes
grupos, la inmunización activa (vacunas) y el uso de barreras físicas o
elementos de protección personal.
 Guantes: Su indicación de uso está dado para el desarrollo de todo proceso
referido a la manipulación de sangre o fluidos corporales y manejo de
pacientes sin excepción.
 Protección Respiratoria: La indicación de uso del tapabocas quirúrgico está
dada cuando se prevea la formación de aerosoles, manejo de pacientes
que tengan hemorragias en boca o nariz al toser o estornudar pueden
formar aerosoles.
  Lentes de seguridad con filtro UV: Brinda protección en la mucosa del ojo,
su indicación de uso está dada para procesos en los cuales se prevea la
formación de aerosoles y en todo proceso referido a la manipulación de
sangre o fluidos corporales.
 Gorro
 Bata
 Careta
d. MEDIDAS DE ELIMINACIÓN: Mediante este principio se establece la manera
de descartar los elementos de riesgo patológico protegiendo a los individuos y
al medioambiente. Podemos dividir los elementos a descartar en:
 Objetos corto-punzantes: En todos los laboratorios, medios hospitalarios y
demás lugares en donde se exponga el trabajador al riesgo biológico por
medio de la manipulación de estos elementos deben ser eliminados en
contenedores rígidos (Guardianes). Las agujas deben ser descartadas, no
se deben doblar, romper o reencapuchar.
 Objetos no corto-punzantes: Su segregación se hará en los contenedores
dispuestos en los servicios de color rojo

Normas Generales De Bioseguridad

Las Normas Universales buscan completar las recomendaciones de rutina para el

control de infecciones, como el lavado de manos y el uso de guantes para evitar la
contaminación de las manos por microbios. La implementación de normas
universales NO elimina la necesidad de tomar las medidas de precaución
específicas para algunas enfermedades.
 Mantener el lugar de trabajo en óptimas condiciones de higiene y aseo  No es
permitido fumar en el sitio de trabajo.
 No consumir alimentos en laboratorios o áreas de procedimiento asistencial.
 No guardar alimentos en las neveras ni en los equipos de refrigeración de
sustancias contaminantes o químicos.
 Manejar todo paciente como potencialmente infectado. Las normas universales
deben aplicarse con todos los pacientes independientemente del diagnóstico,
por lo que se hace innecesario la clasificación específica de sangre y otros
líquidos corporales como “infectada o no infectada”.
 Lavado de las manos antes y después de cada procedimiento e igualmente si
se tiene contacto con material patógeno.
 Utilizar en forma sistemática guantes de látex en procedimientos que conlleven
manipulación de elementos biológicos y cuando maneje instrumental o equipo
contaminado en la atención de pacientes. Hacer lavado previo antes de
quitárselos y al terminar el procedimiento.
 Abstenerse de tocar con las manos enguantadas alguna parte de su cuerpo y
de manipular objetos diferentes a los requeridos durante el procedimiento.
 Usar delantal en aquellos procedimientos en que se esperen salpicaduras,
aerosoles o derrames importantes de sangre u otros líquidos orgánicos.
 No deambular con los elementos de protección personal fuera de su área de
trabajo.
 Mantener sus elementos de protección personal en óptimas condiciones de
aseo, en un lugar seguro y de fácil acceso.
 Evitar la atención directa de pacientes si usted presenta lesiones exudativas o
dermatitis serosas, hasta tanto éstas hayan desaparecido.
 Si presenta alguna herida, por pequeña que sea debe estar cubierta.
 Mantener actualizado su esquema de vacunación contra Hepatitis B
 Aplicar en todo procedimiento asistencial las normas de asepsia necesarias.
 Manejar con estricta precaución los elementos cortopunzantes y desecharlos
en los guardianes ubicados en cada servicio.
 No cambie elementos cortopunzantes de un recipiente a otro.
 Abstenerse de doblar o partir manualmente la hoja de bisturí, cuchillas, agujas
o cualquier otro material cortopunzante.
 Prohibido reutilizar el material contaminado como agujas, jeringas y hojas de
bisturí.
 Tener en cuenta el proceso de desinfección y limpieza a las superficies,
elementos, equipos de trabajo.
 En caso de derrame o contaminación accidental de sangre u otros líquidos
corporales sobre superficies de trabajo realizar proceso de desinfección y
limpieza con barreras de protección adecuada (EPP).
 En caso de ruptura del material de vidrio contaminado con sangre u otro líquido
corporal los vidrios se deben recoger con escoba y recogedor; nunca con las
manos.
 Prohibido el ingreso a las áreas de alto riesgo biológico al personal no
autorizado y a los trabajadores que no utilicen los elementos de protección
personal necesarios y a los niños.
 La ropa contaminada con sangre, líquidos corporales u otro material orgánico
debe ser enviado a la lavandería de los centros hospitalarios en los cuales
laboran los trabajadores expuestos, en bolsa plástica roja.
 La segregación de los residuos biosanitarios se realizará teniendo en cuenta el
código de colores según lo establecido en la ruta biológica en bolsas de color
rojo, rotulándolas con el símbolo de riesgo biológico y con la secuencia.
 En caso de accidente de trabajo con material corto punzante aplique primeros
auxilios de inmediato y reporte a la oficina de Seguridad y Salud

Uso de EPP
 PROCEDIMIENTO A ELEMENTOS DE PROTECCIÓN
SERVICIO
REALIZAR PERSONAL (EPP)
Área de Toma de Careta, Gorro, Guantes
Toma de muestras biológicas
muestra Bata anti fluidos
Careta, Gorro
Laboratorio
Lavado de Instrumental Guantes Industriales
clínico
Bata anti fluidos
2. LAVADO DE MANOS CLÍNICO

Aplica para todos los procedimientos excepto los quirúrgicos. Es importante que el
dispensador de agua no requiera uso de las manos para evitar la contaminación
de superficies. Los pasos son:

3. LIMPIEZA Y DESINFECION EN EL LABORATORIO

Limpieza: es la técnica mediante la cual se obtiene una reducción cuantitativa de
la contaminación macroscópica de un área, equipo o material y que tiene como
objetivos:
 Reducir el número de microorganismos presentes en los objetos.
 Eliminar los restos de materia orgánica e inorgánica de los mismos.
 Favorecer los procesos de desinfección y esterilización.

NORMAS DE LIMPIEZA
• La limpieza debe preceder a los procesos de desinfección.
• Durante ella no se debe levantar polvo al limpiar
• No realizar aspersiones
Dentro de los DESINFECTANTES más utilizados en los Prestadores de Servicios de
Salud para los procesos de limpieza de áreas se encuentra el HIPOCLORITO DE
SODIO.
Con esta sustancia se debe tener en cuenta:
• Manipular con elementos de protección personal.
• Realizar preparación diaria.
• El tiempo de duración de la preparación varía según las condiciones de
almacenamiento.
• Se inactiva por la luz, calor y por materia orgánica.
• Se debe desechar después del uso.
• Es corrosivo.
• Se debe determinar la concentración y dilución adecuada.

Protocolo de Lavado Rutinario, de Lavado Terminal y de lavado de áreas en

caso de derrame de fluidos:
 Lavado Rutinario: se realiza todos los días en el horario que establezca el
prestador
 Frotar paredes y pisos con agua y jabón detergente, realizando el
avance desde la zona más limpia a la más sucia.
 Retirar con agua.
 Aplicar Hipoclorito de Sodio en concentración de 1000 p.p.m
 Lavado Terminal: El prestador establece la periodicidad en que lo realiza,
los días que no realice atención de pacientes.
 Retirar los equipos, mesas y demás elementos que obstaculicen la
limpieza, los cuales deben estar previamente limpios.
 Lavar techos, paredes y pisos, con agua y jabón detergente.
 Aplicar solución de Hipoclorito de sodio en concentración de 2. 000
p.p.m
 Lavado de áreas en caso de Derrame de fluidos:
  Contar con elementos de protección personal
 Delimitar el área donde se produjo el derrame
 Aplicar la solución de Hipoclorito a 10.000 p.p.m impregnado en un
papel secante y dejar actuar por 10 minutos o aplicar sustancia
gelificante para realizar la recolección.
 Retirar el papel secante y o el gel y desecharlo en el recipiente
destinado a Biosanitarios o residuos peligrosos.
 Aplicar nuevamente Hipoclorito de Sodio en la misma concentración.

Soluciones utilizadas en el laboratorio

4. LAVADOY ESTERILIZACION DEL MATERIAL DE LABORATORIO

PROCEDIMIENTO PARA EL LAVADO DEL MATERIAL DE VIDRIO:

1. Seleccionar el material para lavar
 2. Descartar los residuos de muestras y reactivos antes de empezar a lavar y
dejar el material en remojo, y remover las secreciones que se pueden pegar
en las paredes de los tubos con un cepillo suave
3. Dejarlo en remojo 2 horas en solución de hipoclorito de sodio al 10% en
5000 ppm si estos están sucios de material infectante o con residuos de
coagulo es imprescindible enjuagarlos primero y lavarlos de inmediato.
4. Lleve el material a un recipiente con agua jabonosa, con jabón líquido y un
bactericida.
5. Enjuague el material 4 veces con agua corriente.
6. Coloque el material en la gradilla a escurrir o en un cajón metálico el cual se
lleva al horno para secado en una temperatura de 80 ºC por una hora
7. Después de lavado el material lave el fregadero con cepillo y jabón, luego
desinféctelo con solución bactericida.
Nota: la cristalería no debe estar contaminada con detergente, su presencia
provoca hemólisis
PROCEDIMIENTO PARA EL LAVADO DE LÁMINAS.
1. Lavar cuidadosamente y dejar en alcohol etílico comercial por un tiempo.
Séquelas con un pañuelo limpio cuando las láminas están nuevas.
2. Después de su uso se debe descartar en un recipiente con solución
desinfectante preparada así: 200 ml de agua más 3 ml de detergente y 15
ml de desinfectante
3. Cuando estas láminas están sucias de colorantes se deben dejar en reposo
por 30 minutos a 2 horas y luego lavar con agua jabonosa o con detergente
en líquido o en polvo y un cepillo suave para la remoción del mismo.
4. Enjuagar con abundante agua y repetir el paso anterior.
5. Si los portaobjetos y cubreobjetos están sucios de aceite de inmersión,
parafina o vaselina se deben limpiar previamente con un papel absorbente
como servilleta
PROCEDIMIENTO PARA EL LAVADO DE TUBOS
1. Colocarlos separadamente en un recipiente con agua corriente e hipoclorito
de sodio del 2 al 5% para que los restos del suero, la sangre y las
soluciones químicas no se sequen.
2. Enjuagar con abundante agua del chorro, límpielos por dentro con un
cepillo para tubos de ensayo. Déjelos en remojo durante 2-3 horas.
3. Se sacan de la taza uno a uno.
4. Lavar con detergente biodegradable al 2% (Determine).
5. Enjuague cada uno con abundante agua.
6. Se colocan en un cajón metálico y se llevan a secado en el horno a 180 ºC
por 30 minutos los tubos y las pipetas a 37 grados centígrados
Nota: Se debe recordar que la fase de enjuagado es crítica ya que las partículas
de detergente que se queden en los utensilios de vidrio pueden causar resultados
falsos en el laboratorio. Los materiales contaminados con líquidos o secreciones
corporales se deben esterilizar en autoclave para prevenir enfermedades.
SECADO:
Posteriormente al lavado, se seca cada uno de los materiales preferiblemente con
tela que no desprendan hilos y este debe quedar completamente seco, ya que la
humedad interfiere con el proceso de esterilización, los residuos de agua producen
manchas sobre el material esterilizado.

ESTERILIZACIÓN:
Es el proceso por el cual se obtiene un objeto libre de microorganismos. Existen
diferentes tipos de esterilización:

 Esterilización por calor húmedo bajo presión (autoclave): Es el método de

elección, por ser el más fiable, eficaz y de fácil empleo. Se introduce el material
a esterilizar en autoclave en contenedores adecuados y cerrados durante 20
minutos a 121º C, teniendo la precaución de que la atmósfera del a autoclave
esté a saturación y desprovista de aire. El Laboratorio Clínico utiliza el sistema
de autoclaves para sus procesos de esterilización.

 Esterilización por calor seco: El material debe mantenerse en estufa por un

lapso mínimo de una hora a partir del momento en que se ha llegado a los 170º
C.

 Radiaciones ionizantes: Basan sus efectos en la capacidad de destrucción

celular, debido a su poder de penetración.

 Esterilización por vapores químicos: Los agentes gaseosos, tales como el

óxido de etileno, tienen una actividad bactericida y esporicida en el intervalo de
30 a 80º C. Este tipo de esterilización sólo debe aplicarse a aquel material que
no pueda ser esterilizado al vapor. Estos tres últimos sistemas no son
utilizados por el Laboratorio Clínico.

 REUTILIZACION DE MATERIAL

DISPOSITIVO MANEJO SEGUIMIENTO

Lamina de Serán inmersas durante 24 horas El profesional verifica el estado,
vidrio en hipoclorito al 5%, lavada con la integridad y será el
jabón líquido, enjuaga con encargado de velar por el
abundante agua y se seca en horno funcionamiento de la misma
 durante 1 hora.
Serán inmersos durante 24 horas
El profesional verifica el est ado,
en hipoclorito al 5%, lavada con
la integridad y será el
jabón líquido, enjuagar con
Tubo de vidrio encargado de velar por el
abundante agua y se seca en horno
funcionamiento de la misma
durante 1 hora.
Serán inmersas en hipoclorito al El profesional verifica el estado,
Gradillas
5%, lavada con jabón líquido, la integridad y será el
plásticas para
enjuaga con agua y dejar secar a encargado de velar por el
tubo de vidrio
temperatura ambiente. funcionamiento de la misma
beaker, Serán inmersos en hipoclorito al El profesional verifica el estado,
probetas, 5%, lavada con jabón líquido, la integridad y será el
pipetas, enjuaga con agua y dejar secar a encargado de velar por el
erlenmeyer temperatura ambiente. funcionamiento de la misma
Serán inmersas en hipoclorito al El profesional verifica el estado,
Puntas
5%, lavada con jabón líquido, la integridad y será el
amarillas y
enjuaga con agua y dejar en la encargado de velar por el
azules
secadora por 24 horas. funcionamiento de la misma
Serán inmersas en hipoclorito al El profesional verifica el estado,
Pipetas 5%, lavada con jabón líquido, la integridad y será el
Pasteur enjuaga con agua y dejar en la encargado de velar por el
secadora por 24 horas. funcionamiento de la misma
Serán inmersas en hipoclorito al El profesional verifica el estado,
5%, lavada con jabón líquido, la integridad y será el
Viales
enjuaga con agua y dejar en la encargado de velar por el
secadora por 24 horas. funcionamiento de la misma

5. ELIMINACION DE DESECHOS
RESIDUOS PELIGROSOS ELEMENTOS GENERADOS EN TOMA DE
MUESTRAS Y LABORATORIO
RESIDUOS BIOSANITARIO  Algodones
 Gasas
 Toallas desechables
 Gorro
 Tapabocas
 Guantes
 Tubos de ensayo plásticos
 Frascos de orina y coprológicos
RESIDUOS  Agujas
CORTOPUNZANTES  Lancetas
 Laminas
  Laminillas
 Tubos de vidrio rotos
 Hisopos
NOTA: los guardianes se deben cambiar cada que
cumplan el mes de uso y solo permitir el llenado de las
tres cuartas partes para evitar accidentes laborales. Las
lancetas, láminas de Baciloscopias, leishmania,
coprológicos y KOH, no se rehúsan y se descartan
directamente en el recipiente de descarte (recipiente de
hipoclorito).
RESIDUOS  Sangre
ANATOMOPATOLOGICOS  Suero
 Orina
 Materia fecal
 Esputo
NOTA: las muestras se descartan directamente a la bolsa
roja sin desactivarse ya que son incineradas
RESIDUOS QUIMICOS Todos los reactivos derivados del área de química
REACTIVOS sanguínea, inmunología, hematología y coagulación.
NOTA: Los recipientes de los reactivos derivados de
todas las áreas de laboratorio deben descartarse
directamente en la caneca de descarte de residuos
reactivos bolsa roja y posteriormente serán recogidos
por el área de aseo.

RESIDUOS DE COLORANTES Los residuos derivados de las coloraciones deben

recogerse en un recipiente ancho y posteriormente re
envasados a otro recipiente para su posterior descarte.
Nota: Nunca descartar directamente reactivos en el
sifón.

RESIDUOS NO ELEMENTOS GENERADOS LABORATORIO

PELIGROSOS
Papel higiénico
Papeles no aptos para reciclaje
Gradillas de icopor
Bolsas plásticas
Vasos plásticos
Empaques
Cajas de reactivos
Espumas
Servilletas
 RESIDUOS RECICLABLES  Hojas de papel
 Cartón
 Vidrio
 Plástico
 Metales

ROTULO DE GUARDIANES

UNIDAD 2

1. PROCEDIMIENTOS EN EL LABORATORIO CLINICO

El laboratorio clínico ha estructurado tres grandes procesos en su flujo de trabajo:

el pre analítico, el analítico y el pos analítico. Cada proceso utiliza recursos
humanos, equipos, métodos y materiales para transformar órdenes médicas y
muestras de pacientes en informes de resultados para el manejo de los pacientes.
 Fase pre analítica: Es un proceso clave en el flujo de trabajo del laboratorio en
el cual participan diferentes trabajadores del área de la salud; las actividades
más relevantes incluyen la recepción del paciente, verificación la orden, la
toma de la muestra, el transporte del espécimen y la recepción en el
laboratorio.

Fase analítica: Corresponde a la fase del proceso en la cual ocurre el

procesamiento de la muestra y la generación del resultado, así como el análisis
y correlación clínica de los resultados obtenidos.

Fase pos analítica: Esta fase del proceso de toma de muestras, incluye
actividades relacionadas con la generación de informes de resultados, así
como la entrega de los mismos a los pacientes. De la misma manera que la
fase analítica.

Áreas y/o secciones en el laboratorio

 Toma de muestra
 Área de separación de muestra
 Área de lavado de material
 Área de hematología
 Área de parasitología
 Área de uroanálisis
 Área de química

 Identificación del paciente

Las muestras obtenidas y recibidas en el servicio se marcarán mediante, tres
identificadores inequívocos del paciente, que deberán estar directamente
asociados con la persona.
Estos identificadores son:
 Nombre y apellidos.
 Número de recepción interno
 Número de identificación

Evitando así las acciones inseguras por la incorrecta identificación, tales como:
- Muestra mal identificada o sin identificar.
- Toma de muestras para examen equivocado
- Toma de muestras a paciente equivocado
- Análisis de muestra equivocada.
 - Errores en la entrega de resultados.
- Solicitud u orden de laboratorio mal diligenciada.
- Error en la transcripción de resultados

La identificación incorrecta se debe a:

- Falla de identificación al ingreso del paciente.
- Procesos de captura de datos incompletos de mala calidad o equivocados
- Identificación de los pacientes por medio de datos diferentes a los
personales, ejemplo: fecha de nacimiento, enfermedad, edad, entre otros.

Documentos requeridos
- Son los documentos de identificación como son: cedula de ciudadanía,
registro civil, y tarjeta de identidad.
- Solicitud de exámenes/Facturación.

Método De Verificación Inicial

Se comprobará mediante, al menos, dos identificadores inequívocos del paciente,
que deberán estar directamente asociados con la persona.
Estos identificadores son:
 Nombre y apellidos.  Número del documento de identificación.
Identificación Documental Y Verbal.
A todo usuario/paciente que sea atendido, se le realizará una recogida de datos
administrativos (verificándose con un documento Registro civil, tarjeta de
identidad, cédula de ciudadanía, otros), si ya se le hubiesen recogido con
anterioridad, se procederá a la actualización o comprobación de los mismos.
Verificación física/documental.
 Registro civil.
 Tarjeta de identidad.
 Cedula de ciudadanía.
Verificación De La Identificación Del Paciente Antes Del Proceso En La
Atención De Salud.
Se realizará la verificación de la identificación del paciente por parte del equipo de
salud ANTES del proceso en la atención en salud:
- Extracción de una muestra para Laboratorio Clínico.
- Transferencia de un paciente de un área a otra.

CASOS DE FALSA IDENTIFICACIÓN O SUPLANTACIÓN.

En caso de identificar personas con falsas identificación o suplantación de usuario,
el profesional no debe realizar la atención en salud y reportará el incidente ante la
oficina de SIAU y/o comité de seguridad del paciente.
  ACTIVIDADES PARA LA TOMA DE MUESTRA

RESPONSABLE ACTIVIDAD DESCRIPCION

Recepción de Reciba al usuario amablemente
usuarios / Solicitar la orden de exámenes a realizar.
Secretaria
Asignación de Los primeros turnos son asignados a
turnos ancianos, niños y mujeres embarazadas
Se realiza una encuesta a cada paciente para
Encuesta y
Auxiliar de obtener datos de ayuda en la validación de
verificación de
laboratorio los resultados. Se verifica que los exámenes
órdenes y facturas
ordenados estén facturados
Preparación de material a utilizar.
Auxiliar de
Toma de muestra Identificación de tubos, láminas, recolectores
laboratorio
con los datos del paciente. Toma de muestra.
Auxiliar de Preparación de las Centrifugar las muestras.
laboratorio muestras separar/ de las muestras para remisión

 CONDICIONES GERALES PARA LA TOMA DE MUESTRA

- Llegar completamente en ayunas al Laboratorio Clínico

- El ayuno ideal es de 10 a 12 horas. Se recomienda la última comida a las 8:00
p.m.
- No fumar antes ni durante la realización de los exámenes
- No ingerir bebidas alcohólicas hasta tres días antes de la realización de los
exámenes de laboratorio ya que este produce cambios en la composición de
los fluidos del cuerpo.
- Anotar en la encuesta del paciente si está consumiendo algún medicamento
- Si el paciente se ha realizado algún examen de radiología con medio de
contraste evitar la realización de los exámenes hasta después de tres días
- No realizar ninguna actividad física antes de la realización de los exámenes.

 Tiempo de ayuno para la toma de muestra

Verificar si el paciente está en ayunas y preparado adecuadamente
• De acuerdo con nuestra recomendación publicada anteriormente, la sangre
para todos los análisis debe extraerse en la mañana (entre las 7 y las 9 am), en
ayunas, 12 horas después de la última comida. Se permite el consumo de agua
durante el período de ayuno, pero los pacientes deben abstenerse de tomar
alcohol durante 24 horas antes del muestreo de sangre. Por la mañana, antes
del muestreo de sangre, los pacientes no deben tomar bebidas que contengan
cafeína (café, bebidas energéticas y té). Fumar cigarrillos tampoco está
permitido por la mañana antes del muestreo de sangre. Chicle tampoco debe
ser usado. Se debe evitar la medicina de la mañana a menos que sea vital
para el paciente.
• El estado de ayuno del paciente debe verificarse antes de extraer la sangre.
Siempre que sea posible, no se debe extraer sangre si el paciente no está
preparado adecuadamente (las emergencias son excepciones a esta regla). Si
la extracción de sangre se realiza en estado de no ayuno, o si el paciente no se
ha preparado adecuadamente, debe documentarse para permitir una
interpretación correcta de los resultados de la prueba.
• La actividad física intensa (que excede el nivel de actividad diaria normal) debe
evitarse 24 horas antes del muestreo de sangre.
• El tiempo de colecta de sangre para monitoreo de drogas terapéuticas (MDT)
dependerá del medicamento y de la indicación para la prueba (optimización de
la dosis del fármaco, monitoreo de la adherencia al fármaco, efectos adversos,
intoxicación por drogas, etc.). Se deben seguir recomendaciones específicas
 del médico encargado del MDT para el momento exacto del muestreo de
sangre.
• Existen otros factores potenciales, como la actividad física regular y/o reciente,
ingesta de alimentos y medicamentos, medicamentos de venta libre,
complementos alimenticios y preparaciones a base de hierbas, etc. que se
sabe afectan la concentración de ciertos analitos y debería ser verificado si el
paciente ha seguido las instrucciones necesarias antes del muestreo de
sangre. Si se han identificado algunos de los problemas anteriores, y no se
puede posponer la toma de muestra de sangre, el personal del laboratorio
debe, cuando corresponda, documentar todas las condiciones pre-analíticas
pertinentes para permitir una interpretación correcta de los resultados de la
prueba.
• Extracciones adicionales durante el día pueden ser aconsejables para
exámenes con variaciones circadianas. Se deben seguir las recomendaciones
específicas del médico ordenante para el momento exacto del muestreo de
sangre para estas pruebas. La respuesta postprandial a los alimentos y
bebidas depende de varios factores no modificables (edad, sexo, origen
genético, grupo sanguíneo, etc.) y modificables.
• Los factores modificables son la dieta, consumo de medicamentos,
medicamentos sin receta, suplementos alimenticios y preparaciones herbales ,
estilo de vida, actividad física, como buceo, maratón, ejercicio extenuante y
algunas otras actividades , peso corporal, tabaquismo, consumo de alcohol,
etc. Para limitar la variación en la respuesta postprandial como consecuencia
de la heterogeneidad interindividual, el EFGM WG-PRE publicó en 2014 una
recomendación sobre cómo estandarizar la definición de requisitos de ayuno
• . Los requisitos anteriores están totalmente de acuerdo con esta
recomendación. La actividad física es un factor modificable muy importante que
se sabe ejerce efectos tanto agudos como crónicos sobre el metabolismo
humano y la composición sanguínea. Mientras que los efectos crónicos del
deporte pueden considerarse como una adaptación del organismo humano, los
efectos agudos pueden obviarse evitando la actividad física intensa 24 horas
antes de la extracción de sangre.

Obtener los suministros necesarios para la extracción de sangre venosa

Esta sección se centra principalmente en el muestreo de sangre en una clínica
ambulatoria y no tanto en una sala de hospital con pacientes en cama.
• La extracción de sangre venosa debe realizarse en un entorno limpio, tranquilo
y privado. El área de recolección de sangre puede contener imágenes, con
paisajes relajantes en las paredes, para que el espacio sea más cómodo.
• Deben colocarse sillas y/o camas dedicadas para la recolección de sangre
venosa, así como una silla para el flebotomista. Los apoyabrazos de la silla
deben ser ajustables para permitir una posición óptima para la obtención de
sangre. Si no se dispone de una silla dedicada para colecta de sangre venosa,
la silla debe tener apoyabrazos para evitar que los pacientes se caigan si se
sienten débiles.
• Las áreas de desinfección o lavado de manos con jabón y/o desinfectantes
apropiados y toallas de papel deben estar disponibles y accesibles para
garantizar la higiene adecuada de las manos.
• Las instalaciones para recolección de muestras en pacientes deben estar
separadas de las áreas de espera/recepción, para garantizar la privacidad del
paciente. La privacidad del paciente debe garantizarse durante todo el
procedimiento de muestreo de sangre. Reconocemos que las condiciones
pueden diferir en pacientes ambulatorios y pacientes hospitalizados y para
pacientes hospitalizados con diferentes condiciones clínicas. Sin embargo, se
debe tener cuidado para garantizar que el muestreo de sangre siempre se
realice con respeto a la privacidad del paciente.
• Todos los materiales requeridos deben organizarse antes de la extracción de
sangre venosa y según los exámenes solicitados. El lugar de trabajo debe
organizarse de modo que un flebotomista pueda alcanzar todos los suministros
necesarios sin abandonar su lugar.
• El equipo debe mantenerse de forma adecuada y limpia.
• Debe existir un sistema de gestión de stocks para asegurarse de que los
suministros se utilizan antes del vencimiento.
• La aguja, el soporte y el tubo de sangre forman juntos un sistema integral de
colecta de sangre. Solo se deben usar componentes individuales del mismo
fabricante como parte del sistema de extracción de sangre. Mientras que los
fabricantes aseguran la total compatibilidad entre los componentes de su
sistema, los componentes individuales de diferentes fabricantes nunca deben
usarse juntos, ya que sus combinaciones no son validadas para el uso previsto
y pueden comprometer la seguridad del paciente y del trabajador sanitario.
• Si por cualquier motivo, este requisito no puede respetarse plenamente y
componentes individuales de diferentes fabricantes deben utilizarse juntos (p.
ej., los tubos especiales para extracción de sangre no están disponibles en la
empresa principal cuyos tubos están en uso en la institución particular),
venopunción seriales para salvaguardar la compatibilidad de un único
fabricante de componentes del sistema de colecta de sangre no está
justificada. El almacenamiento de tubos en condiciones diferentes a las
recomendadas por el fabricante puede afectar el volumen de extracción, así
como la estabilidad de geles y aditivos. Los factores ambientales como
 temperatura, humedad, altitud y exposición a la luz pueden tener un impacto
significativo en la calidad del equipo de colecta de sangre. Los tubos de
extracción de sangre pre-evacuados, que están más allá de la fecha de
caducidad, tienen un vacío reducido que puede llevar a extraer un volumen de
sangre inferior al óptimo y conducir a una relación inadecuada de
sangre/aditivo. Además, los tubos expirados pueden sufrir algún deterioro
químico del aditivo de tubo. Para garantizar la calidad de la muestra, los tubos
de extracción de sangre deben descartarse después de su fecha de caducidad.

 MUESTRAS DE FROTIS VAGINAL

- Si se tiene la menstruación aplazar el examen por lo menos hasta tres días

después de suspendido el sangrado
- Se sugiere abstinencia sexual por lo menos desde el día anterior y la mañana
del examen
- Bañarse como de costumbre
- No aplicarse duchas, óvulos o cremas vaginales la noche anterior o el día del
examen.

 MATERIALES PARA LA TOMA DE MUESTRA

La obtención de una muestra de sanguínea de alta calidad será el resultado de

un adecuado y controlado proceso pre analítico, lo que implica que el
laboratorio enfrente grandes retos en la obtención de muestras de suero de
alta calidad para su posterior análisis. El material empleado para la toma de
muestra es de suma importancia para garantizar un óptimo resultado y cuidar
el bienestar del flebotomista.
Tubo tapa roja Exámenes Mezclado

Uso: Química, inmunología,

glucosa, perfil lipídico, No es
banco de sangre, derivados.
prueba de embarazo necesario
Aditivo: Ninguno.

Tubo tapa amarilla

Uso: Hormonas, niveles
plasmáticos, marcadores
glucosa, perfil lipídico, No es
tumorales. Inmunología
prueba de embarazo necesario
Aditivo: Gel – Separador.
Activador de coagulo
Tubo tapa lila
 Uso: Hematología, biología hemograma, recuento
molecular, líquidos biológicos, de plaquetas, VSG,
8 a 10
hemoglobina glicosilada, extendido de sangre
veces
aislamiento viral. periférica, grupo
Aditivo: Anticoagulante EDTA sanguíneo
Tubo tapa celeste
Uso: Pruebas de Coagulación.
PT, PTT, Fibrinógeno Tiempos de
3 a 4 veces
Aditivo: Anticoagulante Citrato de coagulación
sodio 3.2%.
Tubos tapa verde
Uso: Pruebas Bioquímicas, Electrolitos Plasmáticos, marcadores
8 a 10
virales.
veces
Aditivo: Heparina de Litio.

RECIPIENTE CARACTERISTICAS USO

AZUL/TRANSPARENTE Plástico inerte, boca ancha, Recolección de orina
tapa rosca, estéril, para uroanálisis y
desechable. urocultivo.
Materia Fecal Caja hermética Coprológico,
coproscopico.

 ORDEN DE LLENADO DE LOS TUBOS:

La obtención de muestras debe mantener un orden de llenado de los tubos para
evitar errores en la fase pre analítica. El orden recomendado es el siguiente:
1º Frasco de hemocultivo, si corresponde.
2º Tubos para pruebas de coagulación (Tapa Azul celeste).
3º Tubos que contienen aditivos especiales para evitar la coagulación de la
muestra:
- Tubo con heparina (Tapa verde).
- Tubo con EDTA (Tapa lila)
- Tubo con Fluoruro de sodio (Tapa gris).
4º Por último los tubos sin aditivos (Tubos de tapa roja para pruebas
químicas y de serología).

 CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRAS

- Para exámenes de química sanguínea e inmunología rechazar la muestra si el

paciente no está en estricto ayuno
- Muestras lipémicas y hemolizadas pueden interferir en los resultados de
algunos exámenes
- Solicitar nueva muestra en casos como: orinas contaminadas con flujo vaginal
ó espermatozoides, muestras insuficientes, muestra para BK que es solo
saliva, en pacientes femeninas con orden de frotis vaginal que han tenido
relaciones sexuales el día anterior o se han aplicado duchas y/o cremas
vaginales
- Rechazar muestra cuando la proporción muestra-anticoagulante no es
adecuada
- Rechazar muestras que no han sido rotuladas o si existen dos muestras con el
mismo rótulo

2. TOMA DE MUESTRAS
Materiales utilizados
– bandejas de colecta de sangre
– guantes
– sistema de colecta de sangre con características de seguridad (agujas y
soportes, o agujas con soportes integrados)
– tubos de colecta de sangre (una gama completa de tubos con diferente
volumen, dentro de la fecha de caducidad)
– torniquete
– antisépticos para limpiar el sitio de punción
– vendas
– algodón
– contenedor de objetos punzantes
– mezclador de muestras
– bolsas de transporte a prueba de fugas

 PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE MUESTRA SANGUINEAS

Las muestras deben tomarse correctamente y bajo las condiciones más favorables
para evitar errores en sus resultados. Esto incluye la absoluta identificación del
paciente, elección del sitio de punción y el volumen a colectar. El paciente debe
estar en una posición cómoda.
a. Selección del sitio a punción:
- Evitar áreas con presencia de hematoma (s), fístulas, quemaduras,
escoriaciones de la piel o cicatrices.
- Evitar tomar muestra del brazo del mismo lado donde se ha realizado una
mastectomía reciente.
b. Palpación
Antes de proceder a puncionar, escoger la vena más apropiada.
Colocar la ligadura de 6 a 7 cm. por arriba del sitio seleccionado.
Tener presente no mantener la ligadura por más de 3 minutos, para evitar la
hemoconcentración.
Las venas más utilizadas para la venopunción, están localizadas en el área
antecubital. Entre éstas tenemos:
a) Vena Cubital: Es la más larga y gruesa de todas y es la preferida por bordear la
musculatura del brazo.
b) Vena Cefálica: Tiene iguales
características de la anterior, pero
es un poco menos gruesa.
c) Vena Basílica: Es más pequeña que
las anteriores. Esta vena está cerca
de la arteria braquial, por lo que su
punción es riesgosa y su área es
más sensible y dolorosa para el
paciente.
Palpar con la punta de los dedos,
tratando de seguir el rastro de las
venas. En ocasiones si no visualiza la
vena, puede forzar la sangre dentro de la vena a través de un suave masaje de
abajo hacia arriba

.
c. Asepsia del sitio de punción
Una vez que se ha decidido por la vena a puncionar, realizar asepsia de la zona
con alcohol al 70% utilizando algodón y con movimientos circulares del interior al
exterior. Tener presente que, una vez realizada la descontaminación, no debe
volver a tocar el área de punción una vez realizada la asepsia de la zona a
puncionar.
d. Procedimiento de punción venosa:
El brazo del paciente debe estar preferiblemente en posición cómoda
horizontalmente.
Con la ligadura en posición, haga que el paciente cierre y abra el puño de 3 a 5
veces para bombear mejor la sangre, y luego se le indica que debe mantener el
puño cerrado.
Si se trata de un niño, es recomendable colocar 2 dedos de la mano, debajo del
codo del paciente, para evitar que doble el brazo durante la extracción.
Extracción con jeringa
Cuando vaya a proceder a realizar la extracción con
jeringa, tener presente el calibre a utilizar y el tamaño de
la jeringa según el volumen a extraer.
 Colocar la punta de la aguja en un ángulo de 15 a 30º sobre la superficie de la
vena escogida y atravesar la piel con un movimiento firme y seguro, hasta el
lumen de la vena.
 Apretar firmemente la jeringa, tirar el émbolo con un movimiento continuo y
suave para extraer la sangre hasta el volumen requerido. Evite presionar
fuertemente la aguja durante la extracción.
 Aflojar la ligadura para que la sangre fluya mejor y remueva la aguja del brazo
con movimiento suave, cubrir con torunda sin apretar el área de la punción
mientras se retira la aguja.
 Presionar el algodón sobre el sitio de punción aplicando una presión adecuada
y no excesiva para evitar la formación de hematoma.
 Llenar los tubos en su orden.
 Desechar la aguja en caja para eliminar material cortopunzante.
 Colocar un parche curita o un algodón con venda adhesiva en el sitio de la
punción.

Extracción con sistema de extracción al vacío

 Colocar la punta de la aguja en un ángulo de 15 a 30º sobre la superficie de la
vena escogida y atravesar la piel con un movimiento firme y seguro, hasta el
lumen de la vena.
 Llenar los tubos en el orden correspondiente.
 Aflojar la ligadura y presione el algodón sobre el sitio de la punción aplicando
una presión adecuada.

Punción venosa para glucosa post-prandial

- Indicar al paciente que debe ir a tomar un desayuno rico en carbohidratos;

miel, azúcar, mermelada, café de leche cargado en azúcar, huevo, arepa, etc;
y asistir nuevamente al laboratorio exactamente a las dos horas posteriores de
haber iniciado el desayuno.
- tomar muestra en tubo tapa amarilla.

Punción venosa para glucosa post carga

- Obtener sangre del paciente en ayunas, medir glicemia basal con ayuda del
glucómetro para determinar si dar o no carga de dextrosa. Con esto se acelera
un poco más el proceso
- El paciente debe ingerir 75g de dextrosa diluidos en 50 ml de agua (adultos) o
1.75g/kg de peso corporal (niños)
- La ingestión debe hacerse lentamente, en sorbos pequeños.
- La determinación de la glucosa post-prandial puede realizarse después de una
o dos horas según indique el médico.

Problemas durante la extracción venosa:

Diversos problemas pueden surgir durante la colección de sangre venosa esto
pudiera conllevar a no obtenerse sangre o su colección sea incompleta.

 PUNCION CAPILAR
Estas circunstancias se aplican a:
- Neonatos.
- Lactantes.
- Niños.
- Adultos con quemaduras severas.
- En pacientes muy obesos.
- En caso de terapias intravenosas.

Recomendaciones Previas

- Utilizar implementos de bioseguridad (bata, gorro, guantes, tapaboca…)

- La punción puede realizarse en el dedo, pero en lactantes también puede ser
en la superficie plantar del talón
- Estas muestras pueden ser destinadas a exámenes sanguíneos cualitativos
(extendidos de sangre periférica), y a veces también con fines cuantitativos
(recuento de plaquetas, leucocitos, etc.)
- La sangre del lóbulo de la oreja contiene más hemoglobina que la venosa o la
del pulpejo del dedo y no es recomendable para recuentos leucocitarios
- La parte a punzar no debe estar cianótica ni edematosa
- La punción capilar tiene la desventaja que la sangre obtenida por este método
suele contener mezclas de otros líquidos extravasculares que pueden causar
interferencias con los resultados

PROCEDIMIENTO
Sitios para punción:
La punción cutánea se puede llevar a cabo en los siguientes sitios
- La superficie más lateral o más medial de la planta del pie.
- La superficie medial plantar del dedo gordo del pie.
- La superficie lateral del dedo medio o anular, preferiblemente.
- El lóbulo de la oreja, evitando la mejilla.

Procedimiento de la punción capilar:

- Una vez escogido el sitio de la punción, dar un ligero masaje al área para
concentrar la sangre.
- Limpiar el sitio con de punción con alcohol al 70%.
- Con una mano sostener el dedo o área a puncionar y con la otra sostener la
lanceta.
- Realizar la punción con la lanceta, realizando un movimiento rápido, firme y
profundo.
- Después de puncionar, descartar la primera gota de sangre, que contiene
líquido tisular, limpiándolo con el algodón.
- Presionar el dedo para hacer salir la sangre, procurando que sea de manera
ininterrumpida.
- Una vez tomada la muestra, sellar los tubos capilares con sellador o los
microtubos con su tapa.
- Los microtubos y capilares con anticoagulantes deben ser invertidos
suavemente por lo menos 10 veces para evitar su coagulación.
- Colocar algodón sobre el sitio puncionado haciendo presión para detener el
sangramiento.
 PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE MUESTRAS VAGINALES

- Una vez retirada la ropa interior, ubicar al paciente en posición ginecológica en

la camilla
- Introducir el especulo y asegurarlo. Si es una niña o una mujer que indica no
haber tenido relaciones sexuales, utilizar solo escobillón.
- Medir pH vaginal y anotar el resultado
- Tomar muestra del exocervix y fondo del saco con el aplicador o escobillón
estéril, retirar y realizar un extendido en la lámina portaobjetos, que
previamente ha sido marcada con el nombre o código de la paciente
- Posteriormente introducir el escobillón dentro de un tubo de ensayo que
contenga 1 ml de solución salina estéril al 0.85%, previamente rotulado
también (muy útil para investigar tricomonas)
- En caso de estudios para hongos tomar muestra con escobillón impregnado de
agua destilada o solución salina estéril, colocar un escobillón en un tubo que
contenga unas gotas de agua destilada o solución salina estéril y otro tubo que
contenga hidróxido de potasio al 10%
- Procesar la muestra antes de dos horas.

 INSTRUCCIONES RECOLECCION DE ORINA

- Adquiera el recipiente en farmacia y asegúrese de no abrirlo; este se abrirá

solo en el momento de utilizarlo.
- No toque el interior del frasco.
- Marque el frasco con dos nombres, dos apellidos y número de identificación.
Antes de recoger la muestra lávese las manos con agua y jabón.
- Lave la región genital con abundante agua.
- Recoja la orina preferiblemente la primera de la mañana así:
- Comience a orinar en el sanitario, descarte el primer chorro, luego recoja la
orina en el frasco, tape bien el recipiente.

 MUESTRAS DE ORINA DE 24 HORAS (depuración de Creatinina,

Proteinuria, etc.)
- Orinar por la mañana al levantarse y anotar exactamente la hora (esta orina no
se recolecta)
- Guardar TODA la orina eliminada durante las 24 horas siguientes, incluyendo
la primera orina de la mañana del día siguiente, en un recipiente de preferencia
opaco y grande. Conservar este frasco en la nevera
- La ingesta de líquidos debe ser normal
- Al día siguiente, exactamente a la misma hora en que la orina fue desechada el
día anterior, se recoge la última muestra
- Es importante tener cuidado al vaciar la orina en el frasco para que no se
pierda nada de ella. En caso de olvidar recolectar parcial o totalmente alguna
muestra, deberá iniciarse nuevamente el estudio.

 PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE MUESTRAS DE SECRECION

URETRAL
- Retraer el prepucio del pene, limpiar con gasa seca y estéril el meato urinario
- Intentar introducir el escobillón o asa bacteriológica estéril, muy
cuidadosamente a través de orificio uretral. Se puede masajear un poco el
pene a fin de favorecer la salida de la secreción
- Retirar y realizar extendido en lámina portaobjetos para coloración de Gram.
- Colocar el escobillón dentro de un tubo con solución salina estéril al 0.85%
- Procesar la muestra antes de dos horas

 MUESTRAS DE MATERIA FECAL (Coprológicos, Coproscópicos,

Sangre Oculta).

- En la mañana bañarse como de costumbre

- Colocar suficiente papel plástico limpio sobre la mano para recibir allí una parte
de su materia fecal
- Con la cucharita que trae el recolector tomar pequeñas cantidades de distintas
regiones de la materia fecal emitida y colocarla en el recipiente y cerrar bien
- La muestra no debe estar contaminada con orina
- Si el paciente se ha realizados estudios radiológicos con Bario, se deben dejar
transcurrir tres días para recoger la muestra
- Entregar la muestra al laboratorio en un tiempo menor de dos horas, contando
desde el momento de su recolección
- No es necesario estar en ayunas para realizarse el examen coprológico

 CULTIVO DE HERIDAS Y LESIONES DE PIEL PARA GERMENES COMUNES

- Informar al bacteriólogo que toma la muestra acerca del consumo de de
medicamentos y antibióticos
- No aplicar cremas o algún tipo de medicamento en la lesión, por lo menos dos días
antes de la toma de la muestra.

 PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE MUESTRAS DE CAVIDAD ORAL

O FARINGE

- El paciente debe abstenerse de cepillarse los dientes

- Visualizar correctamente el área de toma de muestra (utilizar lámpara o
linterna)
- Pasar varias veces y vigorosamente los escobillones por las paredes orales,
encías, carrillos, paladar, lengua, úvula, amígdala y faringe posterior. (Utilizar
Baja lenguas de madera estéril para permitir una buena visualización de la
faringe), especialmente sobre área en donde existan ulceraciones, vesículas,
exudados, placas e inflamación.
- Disponer de la muestra tomada con los escobillones, para examen directo
(examen en fresco, frotis y extendidos en láminas portaobjetos para coloración
de Gram)
- Tomar con un nuevo escobillón muestra para siembra en los diferentes medios
de cultivo y guardarlo en un tubo de vidrio con tapa que contenga solución
estéril.

 PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE MUESTRAS DE CAVIDAD

NASAL.

- Debe recolectarse siempre material de ambas fosas nasales, por separado, o

una sola si el médico lo especifica en la orden médica.
- Tomar con escobillones cantidad suficiente.
-
 PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE MUESTRAS DE MATERIAL
OCULAR
- Utilizar escobillones estériles (si la muestra es escasa, utilizar asa bacteriológica
estéril)
- En caso como úlceras de córnea el oftalmólogo se reservará el derecho a tomar
la muestra, valiéndose de procedimientos como el raspado de la córnea con bisturí
estéril.
- Realizar siembra inmediatamente en los medios de cultivo seleccionado
- En caso de remisión de muestras, valerse de los medios de transporte
adecuados
- Procesar las muestras antes de dos horas.

 PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE MUESTRAS PARA ESTUDIO DE

HONGOS
DE ESCAMAS
- Limpiar el área de toma de muestra con gasa humedecida en agua destilada
estéril o alcohol. No utilizar algodón
- Raspar cuidadosamente con bisturí estéril los bordes de la lesión. Tomar
muestra de diferentes lesiones
- Si existen vesículas, deben pincharse con la punta de un bisturí o lanceta estéril
y su contenido depositarlo en los recipientes adecuados
- procurar tomar muestra suficiente para examen directo y cultivos, según lo
solicitado por el médico
- Procesar las muestras antes de dos horas

DE UÑAS
- Remover el esmalte de uñas tres días antes del estudio
- limpiar el área de toma muestra con gasa humedecida en agua destilada estéril
o alcohol
- Raspar con cuchilla estéril de bisturí la zona de la placa ungueal afectado, de
extremo distal a proximal.
- Si la lesión se encuentra en la región distal de la uña, cortar con tijera o
cortaúñas estéril la porción afectada.
- Colocar el material recolectado en caja petri estéril
- Procesar las muestras antes de dos horas

 PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE MUESTRA DE TEST DE

GRAHAM PARA OXIUROS.
- Preparar un baja lenguas con cinta adhesiva transparente.
- Voltee la cinta por encima de baja lenguas para exponer la superficie adhesiva.
Coloque varias veces el baja lenguas sobre los pliegues perianales realizando
ligera presión.
- Retire la cinta y colóquela sobre una lámina.
- Alise la cinta cuidadosamente con una gasa o algodón

 MUESTRAS PARA INVESTIGAR BACILO DE HANSEN (LEPRA)

Recomendaciones Previas
- Utilizar implementos de bioseguridad (bata, gorro, guantes, tapaboca…)
- Marcar la lámina en uno de sus extremos con nombre y apellidos o con el código
asignado en el laboratorio y fecha de la toma de la muestra
- Dibujar en la lámina 5 círculos que serán donde se ubiquen las muestras tomadas:
- Debe anotarse la procedencia del paciente

Materiales
- Láminas portaobjetos estériles
- Pinza de Kellin recta o curva traumática
- Lancetas estériles
- Alcohol antiséptico
- Algodón
- Materiales de bioseguridad
- Lápiz de cera (de cualquier color excepto rojo) o Lápiz con punta de diamante, para
marcar las láminas
- Mechero
- Fósforos

Procedimiento
- Tomar en total 5 muestras
- Una muestra de cada lóbulo de las orejas, una de cada codo de los brazos o de dos
lesiones si el paciente las presenta y una muestra de moco nasal
- Con una pinza estéril (de Kellin), presione el lóbulo de la oreja hasta producir
congestión venosa (isquemia)
- Masajear un poco y hasta que se observe sin color y desinfectar el área de la punción
- Realizar una punción rápida y precisa con una lanceta estéril
- Recolectar en la lámina la linfa emitida, específicamente en el sitio que está marcado
para dicha muestra.
- Para las muestras del codo u otras lesiones, proceder de igual forma que en la
punción del lóbulo de las orejas
- Para la muestra del moco nasa, se
sugiere que el paciente suene su
nariz en una bolsa plástica estéril y
de allí recolectar la muestra y
ubicarla en el sitio que de
corresponda en la lámina. Cuando
esto no sea posible por sequedad de
las fosas nasales, utilizar un
escobillón e introducirlo
cuidadosamente en la nariz del
paciente y tomar la muestra.
- Dejar secar, fijar con mechero y procesar la muestra.

3. CENTRIFUGACION Y SEPARACION DE MUESTRA

Una prueba de laboratorio se realiza en su mayor parte utilizando una muestra de

sangre del paciente, dicha muestra puede ser utilizada en una de las tres
diferentes preparaciones, sangre completa, plasma o suero, existiendo diversos
criterios que determinan cual muestra es la más adecuada para el análisis.

- Para poder llevar a cabo la etapa de centrifugación debe haber finalizado el

proceso de coagulación de la sangre. Es muy importante asegurarse de que la
muestra de sangre ha coagulado completamente antes de ser centrifugada.
Normalmente, el tiempo de espera para que la sangre coagule completamente
es de cuando menos 30 minutos. Sin embargo, los pacientes que están con
terapia anticoagulante o aquellos con deficiencias en la coagulación tendrán
procesos de coagulación más largos. A continuación, se describen algunas de
las principales características de los tubos que se ocupan más comúnmente en
la toma de muestras.
- Determinar las RPM requeridas para centrifugar el tubo siguiendo las
recomendaciones del fabricante ya que los tubos pueden requerir diferentes
velocidades y tiempos de centrifugación.
- Aumentar las RPM para acelerar la separación puede ocasionar un
calentamiento excesivo en la centrífuga, lo que afectará la estabilidad de la
muestra y el desempeño del tubo.

 TIEMPO DE CENTRIFUGADO PARA LAS MUESTRA

Muestra R.P.M Minutos

Tubo amarillo/ rojo 3500 10 min
Tubo azul 3500 10 min
Muestra de orina 1800 - 2000 5 min

4. EMBALAJE Y TRANSPORTE DE MUESTRAS

Los sistemas de embalaje que aseguren la integridad del contenido son

primordiales para prevenir el riesgo de contaminación biológica accidental para el
transportista, las personas y el medio ambiente. Para el transporte de las muestras
de diagnóstico, el paquete a transportar tiene que cumplir una serie de requisitos
en relación al etiquetado y embalaje:
Recipiente primario: Los de polipropilenos o polietileno son los más apropiados
para la mayoría de aplicaciones. Los recipientes tienen que estar diseñados para
evitar el derramamiento, tienen que transportarse en posición vertical siempre que
se pueda y ser hermético.
Recipiente secundario: Tiene que ser hermético y tiene que tener material
absorbente entre él y el recipiente primario en cantidad suficiente para absorber
todo el líquido en caso de
derramamiento.
Recipiente terciario: Tiene que ser
resistente a roturas y golpes. El uso del
recipiente terciario estará en función de
las exigencias normativas de cada tipo
de transporte (terrestre, aéreo, postal o
marítimo). Tiene que llevar una etiqueta
en la que figure las direcciones del
remitente y del laboratorio destinatario. Si se trata de una caja, serán necesarios
dos etiquetas de orientación, colocadas en lados opuestos del paquete indicando
su correcta posición.
TRANSPORTE:
El transporte de las muestras está regido por una normatividad perseverando y
garantizando la integridad de las muestras con la finalidad de mantener la
estabilidad de sus propiedades biológicas;
Las muestras que requieren conservarse en refrigeración, deben transportarse en
hieleras que contengan geles refrigerantes manteniendo una temperatura ideal
entre 4°-8°C o con un rango permitido hasta 15°C (Por 4 hora s de transporte
como máximo). Las que se trasportan a temperatura ambiente de 15°c a 30°c b)
El transporte de muestras congeladas se logra idealmente colocando la muestra
en un recipiente de unicel que contenga hielo seco (dióxido de carbono sólido) y
que se mantenga herméticamente cerrado o bien en un termo. De no ser posible;
se pueden transportar en una hielera con geles congelados siempre y cuando el
cliente entregue las muestras congeladas, lo cual garantiza el estado de
congelación.
 UNIDAD 3. TECNICAS UTILIZADAS EN EL LABORATORIO

1. AREA DE HEMATOLOGIA

 EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA

- Láminas portaobjetos limpias.

- Portaobjetos de bordes biselados y esquinas romas (Frotadora)
- Capilar o pipeta pasteur
- Sangre con EDTA
- Colorante de WRIGTH

 PROCEDIMIENTO

1. Colocar una gota (10ul) de sangre (de alrededor de 2-3 mm de diámetro) en un

extremo del portaobjetos. El tamaño de la gota es importante: si es demasiado
grande crea un extendido muy largo o muy
grueso y si es demasiado pequeña a menudo
forma un extendido corto o delgado.
2. Sostener el portaobjetos extensor (frotadora)
con firmeza con la mano dominante a un ángulo
de 30-45º y llevar hacia atrás hasta tocar la
gota de sangre, dejando que ésta se esparza
en todo el ancho del portaobjetos.
3. Empuja con rapidez y suavidad hacia delante
hasta el final del portaobjetos para crear el
extendido. Es importante que toda la gota se
incluya en el extendido. En la figura se muestra
un extendido correcto y las formas inaceptables
4. Dejar secar el frotis, Todos los extendidos de
sangre deben secarse tan rápido como sea posible
para evitar los artefactos que produce el secado
lento, que conlleva a resultados falsos positivos.
5. Colorear con Wright.

 COLORACION DE WRIGHT

1. Realizar el extendido de la muestra de forma que quede una película delgada,

bien sea en portaobjeto o cubreobjeto.
2. Dejar secar al aire por 2 horas, aproximadamente.
3. Colocar el frotis seco sobre el puente de coloración o cubeta de tinción con el
extendido de la muestra hacia arriba.
4. Cubrir la lámina con el colorante de Wright gota a gota hasta abarcar toda la
superficie. Dejar actuar durante 4 minutos.
5. El colorante deberá cubrir completamente el portaobjeto, sin que se derrame
por los bordes.
6. Posteriormente adicionar una cantidad igual del amortiguador, soplar un poco
hasta que aparezca el característico brillo metálico. Cronometrar 4 minutos.
7. Lavar con agua de grifo, colocando el chorro suave hasta que la lámina se vea
rosada.
8. Dejar secar

 MONTAJE DE HEMATOCRITO

LISTADO DEL MATERIAL

Plastilina
Tubos capilares de 75 mm de largo
Lector de hematocrito

PROTOCOLO A REALIZAR.
• Adquirir muestra sanguínea capilar del pulpejo del dedo o del talón con el tubo
capilar hasta 1-2 cm del final
• Taponar parte seca del tubo con plastilina
• Colocar en el plato de la centrífuga
• Centrifugar entre 3 y 5 min
• Leer la altura del plasma y de los paquetes de hematíes (en la misma centrífuga
si la posee o en escala aparte)

El índice hematocrito es el volumen que ocupan las diferentes porciones que se

forman al centrifugar un tubo de sangre previamente hecha incoagulable por la
adición de oxalato potásico o citrato sódico. La parte corpuscular por ser más
densa queda en el fondo del tubo, mientras que sobrenada la fracción plasmática.
La cantidad y proporción relativa de cada una de estas partes se denomina valor o
índice hematocrito. La medición del valor hematocrito se fundamenta en la simple
centrifugación de una muestra de sangre incoagulable colocada en un tubo
especial (tubo hematocrito) que lleva una escala de diez divisiones y que, tras la
centrifugación, permite medir la altura del volumen que ocupan los glóbulos en el
fondo del tubo y la del plasma que sobrenada.
  VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR (VSG)- MÉTODO DE
WINTROBEE
Este método mide la tendencia de los eritrocitos a la sedimentación al colocar
sangre anticoagulada en un tubo pequeño. Se lee macroscópicamente la columna
de plasma al cabo de una hora de reposo.
MATERIALES
- Tubos de Wintrobe.
- Soporte para tubos de Wintrobee.
- Cânulas y jeringas
- Sangre total

PROCEDIMIENTO
a. Tomar muestra en tubo tapa lila con anticoagulante EDTA para 2,5 ml de
sangre total
b. Mezclar la muestra mínima 10 veces
c. Con ayuda de una jeringa y una aguja de Wintrobe, aspirar aproximadamente
1,5 ml de sangre.
d. En un tubo de Wintrobe dispensar la sangre de abajo hacia arriba, teniendo
cuidado de no dejar espacios de aire. Verifique que el tubo este
completamente lleno.
e. Llevar el tubo Wintrobe en el soporte de tubos de manera vertical
f. Contabilizar una (1) Hora a temperatura ambiente.
g. Realizar la lectura de arriba hacia abajo.
h. Anotar lo resultados en el cuaderno de registro interno.

 HEMOCLASIFICACION
Es un examen de laboratorio clínico el cual permite la determinación de grupos
sanguíneos sistema ABO y factor Rh del paciente, es decir, permite conocer el tipo
de sangre especifico que tiene la persona a la cual se le realiza el examen. La
hemoclasificación determina el tipo de antígenos en la sangre para su
clasificación; el tipo de sangre de cada persona depende de las proteínas que se
tengan o no en los glóbulos rojos, también depende de su genética, es decir, lo
que se haya heredado de sus padres.

MATERIALES
 Lamina de hemoclasificación
 Palillos
 Anti sueros (anti A, anti B, anti D)
 Sangre total
PROCEDIMIENTO
Prueba directa: se utiliza eritrocitos del paciente y anticuerpos comerciales Anti A,
Anti B Y Anti D.
Prueba indirecta: se utiliza suero del paciente, más células de reactividad
conocidas A, B, O.

Prueba Directa Prueba Indirecta

Anti A: 1 gota de G.R. Del paciente + a: 1 gota del suero del paciente + 1
1 del Anti A. gota de células a
Anti B 1 gota de G.R. Del paciente + b: 1 gota del suero del paciente + 1
1 del Anti B. gota de células b.
Anti D: 1 gota de G.R. Del paciente + o: 1 gota del suero del paciente + 1
1 del Anti D. gota de células o.

2. ÁREA DE UROANÁLISIS

PARCIAL DE ORINA –UROANALISIS

Materiales
- Tubos falcon
- Tiras de orina
- Lamina
- Laminilla
- Pipeta Pasteur
- Muestra de orina
- Centrifuga

 Examen Macroscópico
Es la fase del examen que evalúa las características del espécimen que se
pueden captar por medio de los sentidos, como son el color y el aspecto. Se
realiza comúnmente por la observación directa de la muestra de orina.
 Color se observa en el tubo de alícuota con un fondo blanco y se registra en
forma descriptiva y sin ningún tipo de clasificación.
COLOR CAUSA
BLANCO Pus (Aumento De Leucocitos)
AMARILLO O ANARANJADO Bilirrubina Urobilina
Eritrocitos Hemoglobina
ROSADO O ROJO Mioglobina Porfirinas
Porfobilina
ROJO O CASTAÑO A PURPURA Porfirina Uroporfirina
 Bilirrubina Fenol Melanina
CASTAÑO A NEGRO
Mioglobinas Metahemoglobina
Biliverdina
AZUL A VERDE
Infeccion Por Pseudomona

 Aspecto se observa con un fondo negro opaco y con incidencia angular del
rayo de luz, esto permite iluminar y contrastar los elementos disueltos o
suspendidos que confieran turbidez a la muestra.
Valores normales:
- Color: de paja a amarillo, pálido a oscuro.
- Aspecto: transparente o ligeramente turbio
 Olor Normalmente
ácidos orgánicos volátiles; puede
modificarse como consecuencia de drogas,
alimentos, por la presencia de bacterias,
metabolitos tales como la acetona,
amoníaco o elevaciones de compuestos
característicos de diversos desordenes
metabólicos.

 Examen Químico
Comprende la determinación cuantitativa y semicuantitativa de
diversos parámetros y sustancias excretadas en la orina. Se realiza
mediante reacciones químicas y enzimáticas de química seca, en
la cual se impregna una fase sólida con los reactivos respectivos a
cada determinación.
 Mojar adecuadamente las zonas reactivas
 Secar el exceso de orina de la tira reactiva
 Cuidar el tiempo de reacción de la tira reactiva
 Buena iluminación para la lectura de la tira
 Conservar la integridad de la carta de colores
Valores normales:
Las tiras reactivas cuentan actualmente con 10 parámetros, con los
siguientes valores normales:
En esta la fase del uroanálisis se identifican y cuentan las diversas partículas
insolubles que arrastra la orina en su paso por las vías de formación y excreción
de la misma.
Procedimiento
Un tubo de fondo cónico, graduado para manejar volúmenes uniformes
1. Se llena el tubo con orina homogeneizada
hasta la marca superior del tubo
(estandariza el volumen en la alícuota)
2. Se trabaja con la tira reactiva.
3. Se tapa el tubo y pasa a la centrífuga,
donde se debe cuidar la fuerza centrífuga y
el tiempo. 5 minutos a 3000rpm
4. Se descarta el sobrenadante
5. Se toma con una pipeta el sedimento y se
deposita entre lamina y laminilla
6. Observar al microscopio las estructura y reportar

3. ÁREA DE PARASITOLOGÍA
Materiales
- Lugol parasitológico
- Solución salina
- Lamina
- Laminilla
- Palillos
- Muestra de heces

Recolección De La Muestra

Debe recogerse en un recipiente limpio, con cuidado de no mezclarla con la orina.

Las muestras obtenidas deben enviarse rápidamente al laboratorio especialmente

si son líquidas o semilíquidas ya que las formas trofozoicas de los protozoos
pierden movilidad y mueren poco después de enfriarse.

En bebés, valerse de escobillón de algodón estéril para estimular reflejo de

defecación al introducirlo cuidadosamente a través del orificio anal. Colocar la
boca del recipiente cerca del ano para recolectar la muestra. (El escobillón puede
servir para siembra en medios de cultivo y otros estudios, siempre y cuando recoja
considerable cantidad de muestra a través del ano), procesar la muestra antes de
dos (2) horas. Si esto no es posible, mantener las muestras en refrigeración o
temperatura de 4º Centígrados.
  COPROLÓGICO

Examen físico

 Color: Normalmente las heces son de color pardo de diferente intensidad, este
color se debe a la presencia de urobilina, varias de acuerdo a la ingestión de
alimentos y medicamentos.

 Consistencia: Normalmente las heces son blandas, aunque moldeadas. Se

observan heces extremadamente duras en el estreñimiento y líquidas por
acción de purgantes, o por causas que originen diarrea. Esta consistencia
puede ser: Líquida, blanda o dura.

 Aspecto: Hay diferentes aspectos como son: Diarreico, cremoso, mucoide,

granuloso, pastosa, caprino.

Examen microscópico

En una lámina portaobjetos se colocan dos gotas, en la parte izquierda solución

salina y en la derecha Lugol, luego se toma con un palillo la muestra de materia
fecal, se debe escoger la parte que tenga elementos anormales como sangre,
moco, etc. y de otra parte para que la muestra sea representativa, se colocan los
cubreobjetos. La suspensión no debe quedar muy gruesa pero tampoco muy
delgada

 COPROSCOPICO
Materiales
- Tubo de ensayo de vidrio
- Mechero
- Fosforo
- Reactivo de benedit
- Palillos
- Muestra de heces
- Papel indicador de Ph

Se realiza el examen coprológico e incluye un examen químico

pH: Su rango normal se encuentra entre 6.9 – 7.2 (ligeramente alcalino) para
medirlo se utilizan cintas de pH que contienen dos indicadores, el rojo de metilo y
el azul de bromotimol, que abarca un intervalo entre 4.0 – 9.0 demostrando la
reacción a través de un viraje de color desde anaranjado hasta verde o azul.
 Azucares reductores: Se realiza para determinar la presencia de azucares tales
como glucosa, lactosa, sacarosa, entre otros. Es un método de autocalentamiento
para la determinación semicuantitativa de sustancias reductoras
Procedimiento
Adicionar aproximadamente un gramo de materia fecal en un tubo de ensayo más
2.5 ml de reactivo de benedith llevar a ebullición y leer la reacción. No agitar
durante la reacción y observar hasta el final de la ebullición, agitar suavemente y
realizar la lectura

4. AREA DE MICROBIOLOGIA

 Hidróxido de potasio al 20% (KOH)

El examen directo con KOH constituye la técnica más empleada en micología
médica: El KOH digiere el material proteico, aclara pigmentos y disuelve el
“cemento” que mantiene pegadas a las células queratinizadas y las de otros
tejidos: ello permite observar los elementos fúngicos que estén presentes.
Tipo de muestra: Escamas Piel, Uñas, Pelos, Exudados de lesiones mucosas,
Exudados de, heridas, nódulos y abscesos subcutáneos, entre otros.,
Hemocultivos, Lavados bronquioalveolar, Expectoración, LCR y otros fluídos
biológicos, Secreciones vaginales, Cornea
Procedimiento
a. Es necesario tener una muestra representativa
b. Se toma la lámina con la muestra y se deposita una gota de KOH, que
cubra toda la muestra.
c. Se coloca la laminilla sobre la muestra y
se deja actuar mínimo 10 minutos sobre la
muestra para que se realice el proceso de
clarificación de la muestra. Para las muestras
de uñas se debe dejar actuar el hidróxido de
potasio aproximadamente 40 minutos, este
proceso se puede acelerar calentando la
muestra.

 COLORACIÓN DE GRAM

La tinción de gram para el examen directo de una muestra, permite observar la

presencia, cantidad, morfología y la respuesta tintorial de bacterias u otros
microorganismos presentes en esa muestra. Además, permite observar la
respuesta leucocitaria, describiendo en número, la presencia de estas células.
Tipo de muestra: Secreción Uretral, Secreción Vaginal, Secreciones de Heridas y
abscesos, Secreción Bronquial, Hisopado rectal, hisopado faríngeo, Líquido
Pleural, Líquido peritoneal, Líquido cefalorraquídeo, Líquido sinovial, Orina,
sangre, esputo y heces.

Procesamiento
- Se extiende la muestra recogida en una lámina y se deja secar a Temperatura
ambiente
- Durante uno o dos segundos con la llama de un mechero fijar la muestra,
teniendo en cuenta que el calor no debe ser directo (sólo se pasa por la llama),
puesto que el calor excesivo puede cambiar la morfología celular de las
bacterias a observar.
- Agregar cristal violeta, solo el suficiente para que se cubra el extendido
bacteriano, dejar actuar durante 60 segundos. Enjuagar con agua corriente.
- Agregar el Lugol, solo el suficiente, dejar actuar durante 60 segundos
- Agregar una o dos gotas de alcohol-acetona dejar actuar por 15 segundos
inmediatamente enjuagar con agua corriente.
- Agregar Safranina solo la suficiente, Dejar actuar durante 30 segundos.
Enjuagar con agua corriente en cada paso.
- Dejar secar a temperatura ambiente.

 MONTAJE DE FROTIS VAGINAL

1. Sacar el escobillón o cepillo del medio de transporte, impregnar indicadora de

pH, comparar con la carta de colores y anotar el pH obtenido en la carpeta.
2. Hacer un montaje en fresco entre lámina y laminilla, en un portaobjeto que debe
estar marcado con el número consecutivo de la paciente.

3. Adicionar al cepillo o escobillon2 a 3 gotas de KOH al % y anotar presencia de

olores amínicos. Fijar y teñir por tinción de gram, la lámina de exo y endocervix
tomada anteriormente con el escobillón seco.

Examen físico
Color: Blanco, Amarillo, Verdoso, Rojizo, Transparente
Aspecto: Grumoso, Homogéneo, Flocula
 pH: Valor obtenido
Test de aminas: Positivo, Negativo

 COLORACION DE ZIEHL NEELSEN (ZN)

Esta técnica es útil para la coloración de Baciloscopias en el Diagnostico de la

Tuberculosis y Lepra. El mecanismo del ácido alcohol resistencia, es una
propiedad que tienen las micobacterias de captar en su pared la fucsina fenicada y
retenerla aún con la acción del alcohol ácido, esta característica se debe al alto
contenido de lípidos, péptidos, glicolípidos y particularmente ácidos micólicos
presentes en la pared celular.

Procedimiento
a) Limpiar el mesón con Hipoclorito de Sodio al 1% y colocar el papel KRAFT (50 cm
aproximadamente).
b) Extender homogéneamente suficiente
cantidad de la partícula más purulenta y
realice el extendido en un pequeño ovalo
centrado de 2cm*1cm

c) e. Flamear la lámina tres veces por el mechero.

d) Cubrir la lámina con 2 ml de fucsina de ZN por un tiempo de 5 min. Se flamea por
5 min. Calentando 3 veces (sin dejar hervir).
e) Enjuagar con agua de chorro.
f) Decolar con 2 ml de alcohol acido por 3 min.
g) Enjuagar y agregar 2 ml de azul de metileno por 1 min.
h) Enjuagar con agua de chorro.
i) Dejar secar y se lleva a la bacterióloga para su lectura.

 COLORACION DE GOTA GRUESA / HEMOPARASITO

Fundamento La prueba tiene por objeto, ser el método de identificación de hemoparásitos
en frotis sanguíneos (Gota gruesa), que permite la visualización de las diferentes formas
del Plasmodium spp, Trypanosoma spp, Leishmania spp después de un adecuado
proceso de tinción.
Informacion de seguridad
 Prueba para diagnostico microscópico
 Todos los componentes son estables hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta.
 No utilizar después de la fecha de caducidad.
 Filtre los reactivos o colorantes antes de usar.
  Debe evitarse su contaminación durante su uso.
 Todas las muestras deben considerarse potencialmente peligrosas,
manipular como agente altamente infeccioso.
Materiales e insumos
Muestra: Sangre total tomada en tubo tapa lila (EDTA) Y por punción
digital.

Materiales:
Papel absorbente.
Laminas.
Colorante de Field A Colorante de Field B.
Azul de metileno.
Solución de buffer o amortiguadora
Marcador o lápiz de cera.
Caja de petri/ Lamina concava
Procedimiento
a. Se marcan tres láminas, dos para gota gruesa y uno para extendido de sangre
periférica (el extendido se colorea con Wright técnica estandarizada por el
laboratorio clínico.
b. Se toma la muestra de sangre con una lanceta nueva del dedo índice o
medio del paciente, se limpia con algodón y alcohol y después se seca
con una torunda de algodón seco, se limpia la primera gota de sangre y
luego se coloca la gota sobre la lámina.
c. Se coloca la gota utilizando otra lamina portaobjetos formando
un cuadrado homogéneo y se extiende la sangre realizando el menor
número de movimientos sobre la muestra para no dañar la morfología del
parasito

d. Dejar secar las gotas horizontalmente a temperatura ambiente.

e. Para la coloración de Field: Sumergir la lámina seca por 2 segundos en
azul de metileno.
f. Dejar escurrir.
g. Reparar en un tubo 3 ml de solución Amortiguadora pH 7.2, 1 gota de
solución A, 1 gota de solución B, por cada lámina a colorear. Los
colorantes se filtran cada 8 días
h. Alistar de tal manera que cada extremo de la lámina quede sobre el
aplicador o sobre la lámina cóncava.
 i. Colocar la lámina invertida y adicionar el colorante con una pipeta de
Pasteur de tal manera que ocupe todo el espacio, evitar burbujas deje
actuar por 10 minutos.
j. Dejar escurrir en una toalla de papel y dejar secar.
k. Informar negativo si no se observa ninguna forma parasitaria en 200
campos microscópicos. Si observa Plasmodium, proceder a identificar la
especie parasitaria.
l. Seguimiento al cumplimiento del procedimiento de coloración y recuento
de parásitos. Si los resultados se hallan fueran del rango de tolerancia,
tomar las medidas correctivas.

 COLORACIÓN DE Mycobacterium leprae

La lepra es causada por la bacteria Mycobacterium leprae. No es muy contagiosa y tiene
un largo período de incubación (tiempo antes de que aparezcan los síntomas), lo cual
dificulta saber dónde y cuándo alguien contrajo la enfermedad. Los niños son más
propensos que los adultos a contraerla
Información de seguridad
Use guantes quirúrgicos y ropa de laboratorio.
Siga los procedimientos de laboratorio aceptados para el trabajo con suero o
plasma.
No use las pipetas aspirando con la boca.
Para mejores resultados, siga las instrucciones.
No use después de la fecha de caducidad
Utilice las normas de Bioseguridad
Este test se almacena a temperatura ambiente. No requiere refrigeración.
Materiales e insumos
Alcohol Acido
Fuscina ZN
Azul de metileno
Laminas
Pinzas Kelly
Lancetas
Aplicadores

Procedimiento
a. Revisar sitio de la lesión.
b. Láminas desengrasadas con alcohol al 70 (nuevas).

c. Utilizar Lápiz de punta de diamante.

d. Utilizar puntas tipo kelly, recubiertas en los extremos.

 e. Muestrear: Linfa o Líquido intersticial del lóbulo de oreja izquierdo, lóbulo de
oreja derecho, codo izquierdo, codo derecho y moco nasal

f. Filtrar los colorantes cada 8 días.

g. Fijar láminas con mechero.

h. Cubrir la lámina con 2 mL de fuscina de ZN por 10 minutos.

i. Decolorar con 2 mL de alcohol acido por 5 minutos.
j. Enjuagar y agregar 2 mL de azul de metileno por 5 minutos.
k. Enjuagar con agua de chorro.
l. Dejar secar y se lleva a la bacterióloga para su lectura

Unidad 4.
1. Consentimientos informados
Es una herramienta más que tiene el laboratorio clínico para eximirse de
responsabilidad cuando ha sido utilizado en la forma adecuada. Este nos permite
realizar determinadas pruebas de laboratorio con toda la confianza de no cometer
falta vulnerando el derecho que tiene el paciente a la información.

De esta manera el paciente logra un conocimiento suficiente, que le permite hacer

una evaluación razonable de cuál es el tratamiento que sirve mejor a sus objetivos
y valores, para poder tomar una decisión libremente. Pero hay que tener en cuenta
que esto es un derecho de las personas, pero no es un requerimiento o una
obligación que el paciente sea informado y participe activamente en la toma de
decisiones, si el así lo decide libremente. Después de que el paciente conozca el
procedimiento, está en la autonomía de decidir si se los realiza, quedando como
evidencia su firma, de lo contrario comentara el por qué se niega a su realización.
  Consentimiento informado para extracción de sangre
 Consentimiento informado para flujos vaginales
 Consentimiento informado para la realización de prueba voluntaria para vih

2. Reactivo vigilancia

Los Programas Institucionales de Reactivo vigilancia son aquellos que se

desarrollan internamente, las Secretarías Departamentales, Distritales y
Municipales de Salud, los fabricantes, comercializadores e importadores,
prestadores de servicios de salud y profesionales independientes relacionados con
los reactivos de diagnóstico in vitro
Los reactivos de diagnóstico in vitro, deben de ser almacenados en las
condiciones establecidas por el fabricante con base en estudios de estabilidad.
a. Se llevarán al refrigerador en caso de que la temperatura indicada lo
requiera.
b. Se deben almacenar por lotes y
utilizar los que primero vayan a
vencer, teniendo en cuenta el
orden en el que han sido recibidos.
c. Se semaforizan los reactivos con el
color indicado dependiendo la
fecha de vencimiento y se
almacenan dependiendo la
temperatura indicada para ello.