UNIDAD 7:
Aplicación de técnicas de
identificación de hongos y
parásitos
MICROBIOLOGÍA CLÍNICA
Docente: CRISTINA LÁZARO GARCÍA
CONTENIDOS DE LA UNIDAD
01 02 03
MICOSIS DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES
MOHOS Y LEVADURAS
FÚNGICAS
04 05
IDENTIFICACIÓN DE IDENTIFICACIÓN DE
PARÁSITOS VIRUS
01 MOHOS Y LEVADURAS: EL REINO FUNGI
Aspectos diferenciales Aspectos comunes
UNICELULARES PLURICELULARES QUITINA
MOHOS
Crecen sobre materia
orgánica
descomponiéndola
LEVADURAS
HONGOS
Descomponen en Descomponedores
materia sencilla formadores
mediante la del fruto aéreo seta
fermentación HETERÓTROFOS
MOHOS Y HONGOS: ESTRUCTURA
01
El micelio es una estructura altamente ramificada formada por las hifas.
Las hifas son una red de células envueltas por quitina.
Se clasifican según:
ESTRUCTURA FUNCIÓN
HONGO
PARASITO
01 FILOS DE IMPORTANCIA CLÍNICA
Zygomycota Asexual: Ascomycota
Acantosis nigricans
esporangiosporas
Sexual: Los esporangios son tipo asco
Rhizopus nigricans zygosporas
Micelio de hifas NO Asexual: Sexual:
septadas conidiosporas ascosporas
Basidiomycota Micelio de hifas
septadas con poro
Forman las setas
Asexual: Aspergillus flavus: aflatoxinas
basidiosporas
Candida albicans: condidasis
vaginal u oral
Micelio de hifas
septadas y Microporum: infecciones
profundas dermatológicas (tiña)
01 HONGOS BENEFICIOSOS
CLÍNICA MEDIOAMBIENTAL ALIMENTARIO
01 TRABAJO DE LABORATORIO
La muestra
Estudio
Tejidos sólidos
macroscópico Cultivo Tejido
Estudio microscópico: Glicerol + KOH +
fijador clarificar
Giemsa Argéntica Schiff
Cultivo
Agar Sabouraud: morfológia.
● Agar Cerebro-Corazón: micosis sistémicas endémicas.
● Agar Mycosel: aislar hongos patógenos.
Tejidos líquidos ● Agar Czapeck: Candida albicans.
MICOSIS
1,2,3
responda otra vez
02 MICOSIS
Profundas o sistémicas Oportunistas
Tejidos internos Diseminable Localizadas Inmunodeprimidos
Inmunocompetentes
Inmunodeprimidos
Paracoccidiomicosis Peniciliosis Histoplasmosis Aspergillosis Mucormicosis
Profundas o sistémicas
02 MICOSIS
Paracoccidiomicosis AGENTE CLÍNICA
Adultos
Localizada:
respiración
Paraccodioides
brasiliensis
TRANSMISIÓN
Niños
Localizada:
diseminada
Inhalación de
esporas de la tierra
Profundas o sistémicas
02 MICOSIS
Peniciliosis CLÍNICA
AGENTE
Fiebre
P. marneffei
Inmunodeprimidos
TRANSMISIÓN Hepatomegalia
Contaminación de heridas Abscesos cutáneos
mediante heces
Profundas o sistémicas
02 MICOSIS
AGENTE
Histoplasmosis CLÍNICA
Enfermedad Histoplasma capsulatum
de Darling
TRANSMISIÓN Afecciones Lesiones cutáneas
pulmonares
Enfermedad
Inflamación de Lesiones óseas
de Duncan
Inhalación de esporas ganglios
02 MICOSIS Oportunistas
CLÍNICA
Aspergillosis
TRANSMISIÓN
AGENTE Inhalación o contacto de esporas
Aspergillus Aspergillus flavus
fumigatus
TOXINA:
PACIENTES
AFLATOXINA
INMUNODEPRIMIDOS
02 MICOSIS Oportunistas
Mucormicosis
Rinoorbital.
Pacientes diabéticos
Progresión paranasal →
Gastrointestinal cefalea→parálisis
Pacientes
neutropénicos o
malnutridos
Infartos o
problemas SNC
Cutánea
Pacientes Pulmonar
transplantados Pacientes neutropénicos
Colonización por Neumonía
contacto dérmico
Cuéntame
1. - Enfermedad de Darling
- Micosis sistémica
- Hipersensibilidad cutánea
8. - Rata del bambú
2. - Blastomicosis - Inmunodeprimidos
sudamericana - Abscesos cutáneos
5. - Hongos mucorales
- Granjeros y campesinos - Mucormicosis rinoorbitaria
- Hepatoesplenomegalia 9. - Toxina cancerígena
- Diabetes - Aflatoxina
12. - Oportunista
3. - Penicillium marneffei - Epidemias hospitalarias
6. - Zonas endémicas de África - Inmunodepresión
- Infección diseminada - Esporas inhaladas - Aspergillosis
- Hepatoesplenomegalia 10. - Hongos mucorales
- Inflamación de ganglios - Mucormicosis
13. – Respiración
4. - Aspergillus fumigatus - Trasplante
7. - Infecciones crónicas del - Sistémica
- Neutropenia prolongada pulmón - Esporas
- Infiltrados pulmonares 11. – Heces
- Lesiones mucosas - Hepatomegalia
- Insuficiencia suprarrenal 14. – Malnutrido
- Asia
- Oportunista
- Micosis
03 DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO
HISTOPLASMOSIS
TÉCNICA TINCIÓN DE GRAM
MUESTRA 1 ESPUTO O RASPADO
CUTÁNEO
MEDIO DE CULTIVO AGAR SANGRE O
SABOURAUD
OBSERVACIÓN LEVADURA OVAL
03 DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO
PARACOCCIDIOMICOSIS
TÉCNICA TINCIÓN DE GRAM
MUESTRA ESPUTO, ABCESO O
SECRECIÓN
MEDIO DE CULTIVO AGAR SABOURAUD
COLONIA RUGOSA
OBSERVACIÓN “RUEDA DE TIMÓN”
03 DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO
PENICILIOSIS
TÉCNICA TINCIÓN DE GRAM
MUESTRA ABSCESO O RASPADO
MEDIO DE CULTIVO AGAR SABOURAUD
COLONIA BLANCA ATERCIOPELADA
ROJIZA RUGOSA
OBSERVACIÓN LEVADURA OVAL (SEPTO)
03 DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO
ASPERGILOSIS
TÉCNICA TINCIÓN DE GRAM
MUESTRA ESPUTO, O SECRECIÓN
MEDIO DE CULTIVO AGAR SABOURAUD
COLONIA - A. fumigatus: algodonosa azulada
- [Link]: algodonosa verdosa
OBSERVACIÓN - A. fumigatus: abanico
- [Link]: diente de león
03 DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO
MUCORMICOSIS
TÉCNICA HEMATOXILINA EOSINA
MUESTRA BIOPSIA
MEDIO DE CULTIVO AGAR SABOURAUD
COLONIA TEJIDO DIRECTO
OBSERVACIÓN HIFAS NO SEPTADAS
CÓMO IDENTIFICAS
LOS HONGOS
[Link]
04 IDENTIFICACIÓN DE PARÁSITOS
Un parásito es un organismo que reside en un organismo huésped, ya sea en su superficie o
en su interior, alimentándose de él. Pueden ser unicelulares o pluricelulares, y su presencia
puede dar lugar a diversas patologías en el ser humano.
PROTOZOOS HELMINTOS ARTRÓPODOS
Unicelular Pluricelular Pluricelular
Trofocito-quíste Ciclo huevo-larva Grupo numeroso
Órgano motil Platelmintos o Nematodos Vectores biológicos
(Anopheles)
Gardia lambia Taenia Ixodoidea
solium
04 IDENTIFICACIÓN DE PARÁSITOS
Muestra biológica
Localización del Fase del ciclo del
parásito parásito
SANGRE HECES OTRAS
Parásitos Parásito Intestinal Vello
sanguíneos
Recogida en días alternos Exudado
Adición de vaginal
anticoagulantes Conservación en
formalina Orina
Estudio directo Estudio indirecto
Estudio directo Estudio indirecto
Visualización microscopio Técnicas inmunológicas
Inmuno
ELISA
cromatografía
Aglutinación Inmuno
por Latex fluorescencia
Artrópodos o
Morfología
Helmintos
PCR
Especificidad Protozoos
Estudio indirecto
Técnicas inmunológicas
Aglutinación
por Latex ELISA
Leishmania
Estudio indirecto
Técnicas inmunológicas
Inmuno
cromatografía
Plasmodium
INVESTIGA
1. **Entamoeba histolytica** 8. **Taenia solium**
2. **Trichuris trichiura** 9. **Anopheles mosquito**
3. **Sarcoptes scabiei** 10. **Cryptosporidium parvum**
4. **Plasmodium falciparum** 11. **Fasciola hepatica**
Tipo de parásito
5. **Toxocara canis** 12. **Ixodes ricinus**
Muestra biológica
6. **Pediculus humanus** 13. **Entamoeba coli** Enfermedad
7. **Giardia lamblia** 14. **Demodex folliculorum** Técnica inmunológica
05 IDENTIFICACIÓN DE VIRUS
Los virus
Parásitos obligados,
no pueden realizar
las funciones básicas
por su propia cuenta
Virus satélites Viroides Priones Proteínas
mal plegadas
Material libre
infectivo de plantas
Necesitan otro virus
05 VIRUS DE INTERÉS CLÍNICO
Orthomyxoviridae ● Influenza A: causante de la gripe A cuyo
reservorio son aves, ganado porcino,
felinos, caballos, murciélagos y el hombre.
● Influenza B: causante de la gripe B cuyo
reservorio es el hombre.
La Gripe Diagnosis
● Inmunocromatografía
●PCR
05 VIRUS DE INTERÉS CLÍNICO
Herpesviridae Virus de Epstein-Barr (VEB)
Citomegalovirus (CMV)
Virus de la Varicela Zoster 1º Contagio: asintomático
(VVZ) Se contagia por contacto 2º Contagio: mononucleosis
Infección 1º: Varicela Latente en linfocitos, epitelio y
Reinfección: Herpes Zoster endotelio vascular. Puede haber complicaciones
Latente en ganglios asociadas.
Clínica similar a la
mononucleosis
Contagio 48h antes de los
síntomas hasta la aparición de
costra Afecta a linfocitos B
05 VIRUS DE INTERÉS CLÍNICO
Herpesviridae
Virus herpes simple 2 (VHS 2):
Virus herpes simple 1 (VHS 1):
ETS
Transmisión entre personas por contacto directo
Primaria: seronegativo en VHS. Manifestación
ulcerosa, fiebre y cefalea
No Primaria: seropositivo VHS1
Asintomáticas Picazón Dolor Recurrente: reactivación del herpes seropositivo
05 VIRUS DE INTERÉS CLÍNICO
Papovaviridae
El genoma es ADN bicatenario circular.
La cápside del virus es icosaédrica y está envuelto.
Papiloma Humano Diagnosis
ETS
Verrugas genitales → cáncer de útero o ano Técnicas de
hibridación
PCR
05 VIRUS DE INTERÉS CLÍNICO
Retroviridae: Existen 3 subfamilias: Oncovirinae (HTLV-1 y HTLV-2), Lentivirinae (VIH) y Spumavirinae.
Oncovirinae:
Virus linfotrópicos de células T oncogénicos
Periodo de latencia de 30 años
Lentivirinae:
Virus de la Inmunodeficiencia humana (VIH)→
SIDA
• VIH1.: procede del simio
• VIH2.: procede del primate, pero es menos
prevalente
Spumavirinae
La variante humana es una variante del simio
05 DIAGNÓSTICO VIRAL
.El cultivo de los virus:
.Diploides
3-7 días después Células primarias.
de los síntomas Hasta 50 pases
.Primarios
Reducen su calidad
con los pases
.Neoplásicos
Aguantan infinitos pases
.Los virus necesitan células
para mantener su ciclo “vital”
Cómo hacer un cultivo celular
05 DIAGNÓSTICO VIRAL
.Detección del antígeno viral
ELISA INDIRECTO ELISA DIRECTO TEST DE AGLUTINACIÓN
05 DIAGNÓSTICO VIRAL
.Diagnóstico serológico
Nos informa del estado
de la infección
• Si IgM>IgG enfermedad activa
• Si IgG>IgM recuperación
¿Quién había pasado
el COVID ?
05 DIAGNÓSTICO VIRAL
Procesamiento de las muestras
Trabajar inmediatamente Medio de transporte Antimicrobiano
SFB 10%
Tampón
Proteínas
Rojo Fenol
Hay
PCR -70ºC RECOGIDA DE LAS MUESTRAS
Líquido amniótico: Enfermedades congénitas o
Sangre: libre de inhibidores Rubeola, Zoster, CMV
Líquido
de DNA polimerasas (HB).
CR:
VEB Aspirado nasofaríngeo:
- Suero (6h) Enterovirus Exudado genital
CMV Enfermedades
- Leucocitos CMV ETS
respiratorias como VRS
LOS VIRUS tienen
orden
1. Recogida y envío de muestras al laboratorio, preferiblemente entre los 3 y 7 días del inicio de la
enfermedad.
2. Realización de un cultivo de virus
3. Diagnóstico serológico para conocer el estado de la infección.
4. Una vez se obtienen las muestras, se realiza su procesamiento, almacenándolas en nevera o
congelador según el tiempo de espera.
5. En el procesamiento de muestras sanguíneas, es crucial la separación de leucocitos para
detectar reactivaciones víricas.
6. Detección de antígenos mediante técnicas como la Inmunofluorescencia Directa.
Slidesgo
