Universidad Norbert Wiener

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
Biología Celular y Molecular
Práctica N° 7
ACTIVIDAD ENZIMATICA

Integrantes :
Nayeli Franchesca Chavez García
Sofía Marlene Márquez Morán
Alexandra Leylla Retamozo Paccorimay

Ciclo: Primero

Sección: LCS401

Docente (s): Dennys Ghenry Samillan

Fecha de realización de la práctica: 20/05/23

Fecha de entrega del informe: 25/05/23
1.1 INTRODUCCION

La actividad enzimática se refiere a la capacidad de las enzimas para catalizar reacciones

químicas específicas en los organismos vivos. Las enzimas son proteínas altamente
especializadas que aceleran las reacciones químicas al disminuir la energía de activación
necesaria para que ocurran. Esto permite que las reacciones ocurran a una velocidad
suficientemente rápida para mantener las funciones metabólicas y biológicas.

1.2 LOGROS DE APRENDIZAJE

 Demostramos que la enzima catalasa está presente tanto en tejidos de animales como
en tejidos de plantas.
 Pudimos comprobar cómo la temperatura afecta la actividad de esta enzima.
 Comprobamos el efecto de la amilasa en la descomposición de moléculas.

1.3 MATERIAL Y MÉTODO

Materiales: Gradillas, tubos de ensayo, mechero, pipetas, pinzas baño María, hígado de
pollo, papa, arena fina, agua oxigenada, Lugol y solución de almidón al 1%. Método:
Experimental.

1.4 PROCEDIMIENTO

Iniciamos con la clase introductoria al tema, La actividad enzimática. El docente nos explicó
parte por parte sobre el tema, iniciando con la definición de enzimas y sobre cómo estas
actúan, para luego pasar al tema principal y enseñarnos diferencias, factores que influyen la
actividad enzimática y, por último, introducir a la catalasa como una enzima presente en
tejidos animales y vegetales.

En la clase de práctica, pasamos a lo experimental e iniciamos el proceso de reconocimiento de

la catalasa, para ello utilizamos 3 tubos de ensayo en los cuales colocamos pequeñas muestras
de hígado de pollo, papa y arena fina; en estos tubos agregamos 3ml de agua oxigenada a cada
muestra y observamos un burbujeo debido al desprendimiento del oxígeno.

Luego hicimos la desnaturalización de la catalasa, para ello introducimos pequeños pedazos de

hígado y papa en tubos de ensayo para luego ponerlos al agua hervida y pudimos observar que
en la muestra de hígado que fue expuesta a mayor tiempo de temperatura hubo una
desnaturalización de la catalasa.

Y al final hicimos el experimento de la hidrólisis del almidón sobre por acción de la amilasa,
para esto introducimos saliva en tubos de ensayo y los colocamos en baño maría a la misma
temperatura, pero en diferentes lapsos de tiempo. Después le agregamos el lugol en la
muestra y pudimos observar la diferencia de coloración; y llegamos a la conclusión de que el
 color “azul” se va perdiendo a medida que sea expuesta a mayor tiempo en el calor,
volviéndose de un color más claro, lo que indica su hidrolización en el almidón.

1.5 RESULTADOS

En el Tubo 1, al adicionar 3 ml de almidón y 3 En el Tubo 2, al adicionar 3 ml de saliva y 3 gotas de lugol,

gotas de lugol, se espera lo siguiente: se espera lo siguiente:

Resultado: Resultado:

Al agregar el lugol al tubo que contiene almidón, Al agregar el lugol al tubo que contiene saliva, puede
se producirá un cambio de color. El lugol es un haber un cambio de color dependiendo de la actividad de
reactivo que se utiliza para detectar la presencia la enzima amilasa salival.
de almidón.
Inicialmente, el lugol presentará un color marrón o
Inicialmente, el lugol presentará un color marrón amarillo en presencia de almidón.
o amarillo en presencia de almidón.
Interpretación:
Interpretación:
Si la saliva contiene una cantidad suficiente de la enzima
El cambio de color hacia un tono azul oscuro o amilasa salival y está activa, se espera una hidrólisis
negro indicará la presencia de almidón en el parcial del almidón presente en el lugol.
tubo.
La hidrólisis del almidón por la amilasa salival liberará
El lugol reacciona con el almidón para formar un azúcares reductores.
complejo de color azul oscuro debido a la
Si se produjo una hidrólisis significativa, se puede
formación de enlaces entre el lugol y las
observar un cambio de color hacia un tono azul claro o
moléculas de almidón.
incluso incoloro en el tubo. Esto indica una disminución
Si no se observa un cambio de color, podría en la concentración de almidón debido a la actividad de la
indicar que no hay almidón presente en el tubo o enzima amilasa salival.
que la concentración de almidón es muy baja
Si no se observa un cambio de color significativo, podría
para detectar.
indicar una actividad enzimática baja o ausente en la
saliva.
En el Tubo 3, al seguir los pasos descritos, se espera En el Tubo 4, al seguir los pasos descritos, se espera
lo siguiente: lo siguiente:
Resultado: Resultado:
Al agregar el lugol al tubo después de realizar la Al agregar el lugol al tubo después de realizar la
incubación en baño maría, puede haber un cambio incubación en baño maría durante 30 minutos,
de color dependiendo de la actividad de la enzima puede haber un cambio de color dependiendo de la
amilasa salival y la hidrólisis del almidón. actividad de la enzima amilasa salival y la hidrólisis
del almidón.
Interpretación:
Interpretación:
Durante los 15 minutos de incubación en baño
maría a 37ºC, la enzima amilasa salival presente en Durante los 30 minutos de incubación en baño
la saliva tendrá tiempo para hidrolizar el almidón maría a 37ºC, la enzima amilasa salival presente en
agregado al tubo. la saliva tendrá un tiempo prolongado para
hidrolizar el almidón agregado al tubo.
Si la enzima amilasa salival es activa y suficiente, se
espera una hidrólisis significativa del almidón Si la enzima amilasa salival es activa y suficiente, se
durante la incubación. espera una hidrólisis completa o casi completa del
almidón durante la incubación.
La hidrólisis del almidón liberará azúcares
reductores. La hidrólisis del almidón liberará azúcares
reductores.
Al agregar el lugol después de la incubación, se
puede observar un cambio de color en el tubo. Al agregar el lugol después de la incubación, se
puede observar un cambio de color en el tubo.
Si se produjo una hidrólisis significativa del almidón,
se puede observar un cambio de color hacia un tono Si se produjo una hidrólisis completa o casi completa
azul claro o incluso incoloro. Esto indica una del almidón, se puede observar un cambio de color
disminución en la concentración de almidón debido hacia un tono azul claro o incluso incoloro. Esto
a la actividad de la enzima amilasa salival. indica una disminución en la concentración de
almidón debido a la actividad de la enzima amilasa
Si no se observa un cambio de color significativo,
salival.
podría indicar una actividad enzimática baja o
ausente en la saliva o una hidrólisis limitada del Si no se observa un cambio de color significativo,
almidón. podría indicar una actividad enzimática baja o
ausente en la saliva o una hidrólisis limitada del
almidón.
En el Tubo 5, al seguir los pasos descritos, se espera En el Tubo 6, al seguir los pasos descritos, se espera
lo siguiente: lo siguiente:
Resultado: Resultado:
Al agregar el lugol al tubo después de realizar la Al agregar el lugol al tubo después de realizar la
incubación en baño maría durante 45 minutos, incubación en baño maría durante 45 minutos con
puede haber un cambio de color dependiendo de la saliva calentada, puede haber un cambio de color
actividad de la enzima amilasa salival y la hidrólisis dependiendo de la actividad de la enzima amilasa
del almidón. salival y la hidrólisis del almidón.
Interpretación: Interpretación:
Durante los 45 minutos de incubación en baño
maría a 37ºC, la enzima amilasa salival presente en
la saliva1.6 CUESTIONARIO
tendrá un tiempo prolongado para La saliva calentada puede afectar la actividad de la
hidrolizar el almidón agregado al tubo. enzima amilasa salival. La temperatura elevada
puede desnaturalizar o inactivar la enzima.
Si la enzima amilasa salival es activa y suficiente, se
espera una hidrólisis completa o casi completa del Si la enzima amilasa salival ha sido inactivada por el
almidón durante la incubación. calentamiento, se espera una hidrólisis limitada o
nula del almidón durante la incubación.
La hidrólisis del almidón liberará azúcares
reductores. Al agregar el lugol después de la incubación, se
puede observar un cambio de color en el tubo.
Al agregar el lugol después de la incubación, se
puede observar un cambio de color en el tubo. Si la enzima amilasa salival ha sido inactivada y no se
produjo hidrólisis del almidón, se espera que el lugol
Si se produjo una hidrólisis completa o casi conserve su color inicial, que suele ser marrón o
completa del almidón, se puede observar un amarillo en presencia de almidón.
cambio de color hacia un tono azul claro o incluso
incoloro. Esto indica una disminución en la Si se observa un cambio de color hacia un tono azul
concentración de almidón debido a la actividad de oscuro o negro, esto podría indicar la presencia de
la enzima amilasa salival. almidón no hidrolizado o una posible contaminación
con almidón en la saliva calentada.
Si no se observa un cambio de color significativo,
podría indicar una actividad enzimática baja o
ausente en la saliva o una hidrólisis limitada del
almidón.
1.7 CUESTIONARIO:

1. ¿Por qué ocurre burbujeo en el ensayo de reconocimiento de la catalasa?

El burbujeo en el ensayo de reconocimiento de la catalasa se debe a la acción de esta enzima

sobre el peróxido de hidrógeno (H2O2). La catalasa cataliza la descomposición del peróxido de
hidrógeno en agua (H2O) y oxígeno (O2). El oxígeno liberado en forma de burbujas es lo que
causa el burbujeo observado en el ensayo. Por lo tanto, el burbujeo es un indicativo de la
presencia y actividad de la enzima catalasa.

2. ¿Qué sucede cuando se calentó la saliva? Explique.

Cuando se calienta la saliva, puede ocurrir la desnaturalización de las enzimas presentes en

ella, incluyendo la enzima amilasa salival. La desnaturalización es un proceso en el cual las
proteínas pierden su estructura tridimensional y, como resultado, su actividad enzimática. El
calor puede alterar las interacciones entre las moléculas de la enzima, rompiendo los enlaces
débiles y provocando cambios en su estructura. En el caso de la saliva, el calentamiento puede
inactivar la enzima amilasa salival, lo que afectará su capacidad para hidrolizar el almidón en el
ensayo de actividad enzimática.

3. ¿Qué función cumple el lugol en el ensayo?

El lugol, también conocido como solución de yodo y yoduro de potasio, se utiliza en el ensayo
de actividad enzimática para detectar la presencia de almidón. El lugol reacciona con el
almidón formando un complejo de color azul oscuro o negro. Por lo tanto, en el ensayo, el
lugol actúa como un indicador visual para determinar si ha ocurrido la hidrólisis del almidón
por la enzima amilasa salival. Si el almidón ha sido hidrolizado, el lugol no mostrará un cambio
de color significativo, indicando la ausencia de almidón. En cambio, si el almidón no ha sido
hidrolizado, el lugol mantendrá su color inicial, lo que indica la presencia de almidón sin
hidrolizar.