Universidad de Sonora

División de Ciencias Biológicas y de la Salud.

Departamento de Ciencias Químico-Biológicas.

Licenciatura en Químico Biólogo Clínico.

Laboratorio Micología

Práctica 4: Estudio de microcultivos de hongos

Docente: Dra. Maria de los Angeles Ahumada Chavez

Integrantes:

Escobar Chávez Iván

Escobar Coronado Paulina

Hermosillo, Sonora. 12 de marzo de 2024

Objetivo(s)
- Aprende de la técnica de microcultivo de hongos para estudiar su morfología
microscópica

Introducción
El microcultivo de hongos es una técnica utilizada en microbiología para la observación e
identificación de estructuras microscópicas de hongos filamentosos. Este método permite que
los hongos se desarrollen directamente bajo un portaobjetos, facilitando la visualización de
las estructuras fúngicas sin distorsión, alteración o rompimiento.
Una parte importante del proceso es la tinción, como la tinción con azul de lactofenol, que
ayuda a observar las estructuras fúngicas. El azul de lactofenol tiene propiedades especiales
que lo hacen adecuado para este propósito: el fenol destruye la flora acompañante, el ácido
láctico conserva las estructuras fúngicas, y el azul de algodón se adhiere a las hifas y conidios
de los hongos.
Para realizar un microcultivo, es esencial preparar un medio de cultivo adecuado que
promueva el crecimiento del hongo. Este medio debe contener los nutrientes necesarios para
el desarrollo del hongo y debe ser estéril para evitar la contaminación por otras especies. El
microcultivo ofrece una visión detallada de las estructuras fúngicas, lo que es beneficioso
para la identificación y clasificación de hongos filamentosos. Sin embargo, también tiene
desventajas, como la posibilidad de traumatismo en las estructuras fúngicas durante la
preparación y la necesidad de tiempo para el aislamiento y crecimiento del hongo, lo que
puede no ser ideal para diagnósticos rápidos
Estos aspectos son fundamentales para la realización del microcultivo y con ello la
identificación de hongos, ya que permite seguir el desarrollo de los mismos y hacer el
seguimiento de su crecimiento. Es una técnica sencilla pero práctica que resulta esencial para
el manejo de hongos en el laboratorio y para la identificación de especies basada en estudios
de morfología macro y microscópica.

Metodología (Diagrama(s) de flujo)

- Ivan
- Paulina
Resultados
 Imagenes de estructura microscópica

En la observación microscópica, se visualizaron abundantes clamidoconidios terminales e

intercalables, múltiples artroconidios, las hifas en su mayoría se presentaban segmentadas y
estas rodeadas de microconidios. Se observaban también lo que se asemeja a macroconidios
de pared delgada, lisa e hialinos, estos de forma cilíndrica.
En cuanto a la observacion macrocopica, los bordes donde se inocularon los conidios del
hongo se observaba un crecimiento de color rojizo y amarillo, con superficie blanca vellosa,
ademas el portaobjetos se adherido al agar.

Discusiones

En comparación con la observación microscópica de las prácticas anteriores con diferentes

agares, fue mejor técnica la elaboración de un microcultivo ya que nos permitió observar
completamente el micelio. Pudimos ver más detalladamente los clamidoconidios, además de
observar clamidoconidios intercalares, esto es una gran ventaja ya que nos permitió observar
las estructuras en forma casi intacta, es una técnica idónea para la identificacion y
clasificacion de hongos filamentosos, y es relativamente fácil de realizar. Por las estructuras
observadas sospechamos de que se tratase de Trichophyton tonsurans, sin embargo,
realizamos pruebas adicionales y una condición es que existiese crecimiento en el agar
Micosel, lo cual no sucedió. Por lo tanto, no se trata de esa especie, ya que nuestro hongo no
sería un dermatofito. Al igual, por las características macroscópicas de las colonias y no ser
patógeno, puede tratarse de Fusarium spp. como habíamos mencionado en prácticas
anteriores, pero no se encuentran estructuras representativas que nos lo confirmen.

Lo que consideramos es que el agar Micosel no está funcionando correctamente, debido a que
se contaminó con colonias de bacilos gram negativos, lo cual no debería ya que contiene
cloranfenicol y cicloheximida. Pero todas las características nos indican que se trata de un
hongo dermatofito.

Conclusiones

Se cumplió el objetivo de la práctica y se comprendió que el microcultivo es una técnica

fundamental en el estudio de los hongos, su facilidad de uso, rapidez, costo y la capacidad de
observar el micelio completo vuelven a esta técnica una buena opción para la identificación y
estudio de los hongos filamentosos, pero debe utilizarse en conjunto con otras técnicas y
conocimientos para obtener resultados precisos y completos.

Cuestionarios
1. Realice un dibujo del microcultivo y mencione sus partes
2. Anote las ventajas y desventajas de los microcultivos
Ventajas:
- Fácil de realizar
- Rápida
- Económica
- Permite la observación de las estructuras microscópicas de hongos
filamentosos que se distinguen con facilidad sin distorsión, alteración o
rompimiento de las mismas, esto pasa cuando el hongo se desarrolla
directamente debajo del cubreobjetos.
- Identificacion y clasificacion de hongos filamentosos

Desventajas:
- Debido a la forma tan rápida de tomar la muestra, este sufre algún
traumatismo en las estructuras microscópicas, lo que dificulta el hecho
identificarlo correctamente
- Requiere un previo aislamiento del hongo
- No es idóneo para un diagnóstico rápido

3. ¿Qué especies de hongos no pueden cultivarse con esta técnica?

- Histoplasma capsulatum, Coccidioides immites, Sporothrixs

4. Investigue los aspectos macroscópicos y microscópicos de los siguientes hongos.

Coloque fotos o esquemas de las estructuras microscópicas de:
 Hongo Aspecto macroscópico Aspecto microscópico

Absidia sp.
1. Tamaño: Tiende a tener un
tamaño ilimitado y a llenar 1. Hifas cenocíticas gruesas: En
las cajas de cultivo. muestras clínicas se pueden
2. Color: En un inicio, es de observar hifas cenocíticas
color blanco y después gruesas.
tiende a volverse grisácea. 2. Ramificación en ángulo recto:
3. Forma y aspecto: Es Las hifas presentan
vellosa-algodonosa y seca. ramificación en ángulo recto.
4. Anverso: Gris. 3. Esporangios: Los esporangios
5. Reverso: Gris claro. son relativamente pequeños,
6. Textura: Algodonosa laxa. piriformes, de paredes
delicuescentes, de 100-120 μm
de diámetro.
4. Cabezas conidiales biseriadas
y radiales
5. Estipes de paredes gruesas:
Los estipes son de paredes
gruesas, lisos, hialinos,
amarillentos o de color marrón
pálido, en especial cerca de la
vesícula.

Circinella sp.
1. Tamaño: Tiende a cubrir
Se caracteriza por presentar hifas no
todo el medio de cultivo.
septadas, es decir, sin divisiones
2. Color: Puede tener
transversales, lo que les da un aspecto
diferentes coloraciones
de tubos continuos. Las
como un color oliva, gris,
esporangióforos, estructuras que
marrón oscuro y negro.
sostienen los esporangios o sacos de
3. Forma y aspecto: Su
esporas, son típicamente erectas y
textura puede ser pueden ramificarse en la parte
polvorienta o aterciopelada superior. Los esporangios son globosos
y contienen numerosas esporas que se
liberan al romperse el esporangio.
Phoma sp.
1. Tamaño: Tiende a cubrir 1. Hifas septadas: Poseen hifas
todo el medio de cultivo. septadas.
2. Color: Puede tener 2. Picnidios: Los picnidios son
diferentes coloraciones grandes y redondeados.
como un color oliva, gris, 3. Conidios y clamidosporas:
marrón oscuro y negro. Producen conidios y
3. Forma y aspecto: Su clamidosporas (algunas
textura puede ser especies). Los conidios son
polvorienta o aterciopelada unicelulares de forma ovalada

Trichoderma sp.
1. Tamaño: Tiende a cubrir 1. Micelio septado
todo el medio de cultivo. 2. Conidios generalmente
2. Color: Las conidias suelen ovalados
tener un color verde claro. 3. Conidióforo hialino no
3. Forma y aspecto: La verticilado
colonia suele ser plana, 4. Fiálides singulares o
aterciopelada y seca. En agrupadas: Las fiálides
ocasiones, puede estar presentan forma de pera, únicas
cubierta por un velo o en grupos, hinchadas en la
blanco. región central y delgadas en el
 ápice.
5. Ángulo de inserción recto: El
ángulo de inserción entre las
fiálides y los conidióforos es
recto.
6. Conidios unicelulares

Ulocladium sp.
1. Tamaño: Tiende a cubrir 1. Hifas septadas
todo el medio de cultivo. 2. Conidióforos: Los
2. Color: Negro, con conidióforos son largos y no se
tonalidades café oscuras. ramifican, y culminan en
3. Forma y aspecto: Plana, conidios de gran tamaño.
aterciopelada, seca y en 3. Conidios: Los conidios son
ocasiones la cubre un velo generalmente ovalados
blanco.

Verticillium sp.
1. Tamaño: Tiende a cubrir 1. Hifas septadas: Poseen hifas
todo el medio de cultivo. septadas que son hialinas.
2. Color: Suele ser de color 2. Conidióforos: Los
oscuro, a menudo negro o conidióforos son largos y no se
marrón oscuro. ramifican, y culminan en
3. Forma y aspecto: La conidios de gran tamaño.
colonia suele ser plana, 3. Conidios: Los conidios son
aterciopelada y seca. En generalmente ovalados
ocasiones, puede estar
cubierta por un velo blanco
Bibliografía
- UNAM. (2016). Técnica de microcultivo de hongos. Microbiología. Consultado el 11
de marzo de 2024 en:
https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-nacional-autonoma-de-mexic
o/microbiologia/micro-cultivo-de-hongos/9838789
- UAQ. (2013). Aislamiento y análisis microscópico de hongos. Laboratorio de
biodiversidad de los microorganismos. Consultado el 11 de marzo de 2024 en:
https://es.slideshare.net/rebecaoloarte/microcultivo-y-cuestionario-de-hongos
- UNAM. (2016). Microcultivo. Descripcion de las características. Studocu. Consultado
el 11 de marzo de 2024 en:
https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-nacional-autonoma-de-mexic
o/quimica-i/parte-1-microcultivo-descripcion-de-las-caracteristicas/32862657