PRÁCTICA DE LABORATORIO #3
“EXTRACCIÓN DEL ADN”
I.-Introducción
El ácido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado como ADN es un tipo de ácido
nucleico, una macromolécula que forma parte de todas las células. Contiene la información
genética usada en el desarrollo y el funcionamiento de los organismos vivos conocidos y
de algunos virus, siendo el responsable de su transmisión hereditaria.
Desde el punto de vista químico, el ADN es un polímero de nucleótidos, es decir, un
polinucleótido. Un polímero es un compuesto formado por muchas unidades simples
conectadas entre sí, como si fuera un largo tren formado por vagones. En el ADN, cada
vagón es un nucleótido, y cada nucleótido, a su vez, está formado por un azúcar (la
desoxirribosa), una base nitrogenada (que puede ser (A)adenina, (T) timina, (C) citosina y
(G) guanina) y un grupo fosfato que actúa como enganche de cada vagón con el siguiente.
Lo que distingue a un vagón (nucleótido) de otro es, entonces, la base nitrogenada, y por
ello la secuencia del ADN se especifica nombrando sólo la secuencia de sus bases. Los
ácidos nucleídos presentan propiedades físico-química importante en relación con sus
funciones de almacenamiento, transmisión (replicación) y expresión (transcripción y
traducción) de la información genética.
En los organismos vivos, el ADN se presenta como una doble cadena de nucleótidos, en la
que las dos hebras están unidas entre sí por unas conexiones denominadas puentes de
hidrógeno. Las secuencias de ADN que constituyen la unidad fundamental, física y
funcional de la herencia se denominan genes.
Cada gen contiene una parte que se transcribe a ARN y otra que se encarga de definir
cuándo y dónde deben expresarse. La información contenida en los genes (genética) se
emplea para generar ARN y proteínas, que son los componentes básicos de las células, los
"ladrillos" que se utilizan para la construcción de los orgánulos celulares, entre otras
funciones. Dentro de las células, el ADN está organizado en estructuras llamadas
cromosomas que, durante el ciclo celular, se duplican antes de que la célula se div ida. Los
organismos eucariotas (por ejemplo, animales, plantas, y hongos) almacenan la inmensa
mayoría de su ADN dentro del núcleo celular y una mínima parte en los elementos celulares
llamados mitocondrias, y en los plastos, en caso de tenerlos; los organismos procariotas
(bacterias y arqueas) lo almacenan en el citoplasma de la célula, y, por último, los virus
ADN lo hacen en el interior de la cápside de naturaleza proteica.
Existen multitud de proteínas, como por ejemplo las histonas y los factores de transcripción,
que se unen al ADN dotándolo de una estructura tridimensional determinada y regulando
su expresión. Los factores de transcripción reconocen secuencias reguladoras del ADN y
especifican la pauta de transcripción de los genes. El material genético completo de una
dotación cromosómica se denomina genoma y, con pequeñas variaciones, es característico
de cada especie.
II.- Objetivo
Extraer el material genético (ADN) de diferentes tipos de tejidos.
III.- Equipo y Material
• Bata
• Guantes
• Plátano
• Fresa
• Detergente líquido
• Sal de mesa
• Agua destilada
• Alcohol Etílico
• Una pizca de ablandador de carne
• 2 Vasos de Precipitados de 100 ml
• 4 tubos de Ensayo
• Bolsa ZipLock
• Gradilla o vaso de plástico
• Papel Filtro
• Agitador de Vidrio
• Servitoalla
IV.- Procedimiento y Resultados
1. Mida 6 mL del detergente en una pipeta de 10 mL. Vierta en un vaso de precipitados de
100 mL.
2. Mida 44 mL de agua destilada. Vierta en el vaso de precipitados de 100 mL que ya
contiene el detergente. Evite la formación de burbujas.
3. Finalmente, añada 5g de sal de mesa y el ablandador de carne. Mezcle bien.
4. Remueva la cáscara de un pedazo de plátano de una pulgada.
5. Coloque el plátano en una bolsa plástica con cierre de seguridad (ZipLock). Cierre la
bolsa.
6. Muela el plátano (puede ser con la mano) hasta obtener una consistencia bien blanda.
7. Adicione los 50 mL de la solución amortiguadora. Cierre bien. Evite la formación de
burbujas.
¿Por qué?
8. Con cuidado, coloque la bolsa en posición horizontal sobre la servitoalla. Asegúrese que
el macerado de platano esté cubierto con la solución amortiguadora. Espere 5 minutos.
¿Por qué el macerado debe estar cubierto por la solución amortiguadora?
¿Por qué debe esperarse 5 minutos?
9. Coloque el papel filtro sobre el vaso plástico y filtre el macerado de plátano. Luego,
descarte el paño con el macerado. ¿Por qué hay que filtrar?
10. Utilice la regla para marcar dos tubos de ensayo a una distancia de 2.5 cm y de 5 cm
desde abajo hacia arriba.
11. Añada a cada tubo de ensayo un volumen del filtrado hasta que llegue a la marca de
1”.
12. Adicione al tubo de ensayo un volumen de alcohol etílico 70%-90% frío hasta llegar a la
marca de 2”.
13. Sin mezclar, coloque el tubo de ensayo en una gradilla o en un vaso plástico. Espere
por 5 minutos.
Durante este tiempo se forman 3 fases; la primera que es la parte inferior del tubo y
corresponde al caldo molecular, la segunda fase en la fase superior y corresponde al alcohol
etílico y en la tercera fase la unión del caldo molecular y el alcohol donde se formara unas
fibrillas de color blancuzco que son fibrillas de DNA
14. Inserte en el tubo de ensayo una varilla de cristal o removedor de café para remover el
ADN de la capa superior del alcohol. Coloque el ADN en otro tubo de ensayo.
15. Repetir la práctica para ahora utilizando una fresa.
Anota en tu cuaderno y reporte de práctica los siguientes puntos:
• OBSERVACIONES.
• RESULTADOS.
• CONCLUSIONES.
¿Cuál, piensas tú, es la función del detergente en la solución amortiguadora?
¿Cuál es la función de la sal?
¿Cuál es la función del ablandador de carne?
V. Bibliografía
I. Veles, Janine. [Link]/~jvelezg/[Link], Extracción de ADN
II. Ardila, Leydi D. GUIA DE LABORATORIO PROGRAMA DE ENFERMERIA CURSO
INTEGRADO DE
PROCESOS BIOLOGICOS. Universidad Francisco de Paula Santander
