UNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA
Profesora: Trina López
[email protected] http://inmunouc.blogspot.com/
@trinalopezuc
Youtube: Microbiología Biosalud
Los Linfocitos T (αβ) tienen funciones importantes en la
Respuesta Inmune Adaptativa contra antígenos PROTEICOS.
Inmunidad Celular:
Linfocitos T CD4+ Linfocitos TCD8+
Activan Destruyen
Macrófagos (fagocitosis MO). Células infectadas con MO
intracelulares o células anormales.
Inmunidad Humoral:
Linfocitos T CD4+
Interactúan
Linfocitos B (Proliferación
y diferenciación).
Tanto la fase de inducción como la efectora de las respuestas
de Linfocitos T están desencadenadas por el reconocimiento
específico de antígenos proteínicos extraños.
CPA
Presentan Ag
Linfocitos
T vírgenes en Fase de
reconocimiento RI.
LinfocitosT diferenciados (CD4+ o
CD8+) en Fase efectora.
LT γδ: Proteínas y lípidos.
Linfocitos T (LT):
La mayoría (αβ) sólo reconoce péptidos
cortos, mientras LB reconocen Proteínas, péptidos, AN, lípidos,
glúcidos, etc.
Son específicos para secuencias de AA
Ala Val Leu
de los péptidos (TCR). Ala Val Arg
Reconocen y responden a antígenos
CPA
peptídicos extraños sólo cuando están
unidos CMH (CPA).
+
Restricción por el CMH propio. CPA
Individuo A Individuo B
Linfocitos T (LT):
La mayoría sólo reconoce péptidos
excepto LT γδ. NO
Son específicos para secuencias de AA
de los péptidos.
Reconocen y responden a antígenos
CPA
peptídicos extraños sólo cuando están
unidos CPA (CPH).
(CMH)
+
Restricción por el CPH propio. CPA
Individuo A Individuo B
Linfocitos T CD4+
Restricción por el CMH II.
Reconocen péptidos extracelulares
que se internalizan en las vesículas
de las CPA.
Linfocitos T CD8+
Restricción por el CMH I.
Reconocen péptidos derivados de
proteínas citosólicas, habitualmente de
síntesis endógena.
Presentación antigénica para lípidos
CD1 se expresa en CPA y presenta Ag
lípídicos a LT γδ, Linf. NK.
CÉLULAS PRESENTADORAS DE ANTÍGENO
Capturan y muestran los antígenos al LT.
Funciones en la activación de LCD4+:
1. Procesamiento antigénico: Convierten
los Ag Proteicos en Péptidos. Complejo
péptido-CMH.
2. Algunas suministran a los LT estímulos que
van más allá del Complejo péptido-CMH
(Coestimuladores).
Vacunas: Los coadyuvantes estimulan
activación LT.
Provocan inflamación local, estimulan la
llegada CPA hasta Ag.
Activan las CPA para que expresen
coestimuladores y produzcan citocinas.
Capturan y muestran los antígenos al LT.
Funciones en la activación de LCD4+:
1. Procesamiento antigénico:
Convierten los Ag Proteicos en
Péptidos. Complejo péptido-CPH.
2. Algunas suministran a los LT estímulos
que van más allá del Complejo
péptido-CPH (Coestimuladores).
Vacunas: Los coadyuvantes estimulan
activación LT.
Provocan inflamación local, estimulan
la llegada CPA hasta Ag.
Activan las CPA para que expresen
coestimuladores y produzcan
citocinas.
Propiedad: Capacidad de procesar los Ag endocitados y la
expresión de genes del CMH II.
Células dendríticas:
Localizadas: Órganos linfáticos, epitelios de la piel y de los
aparatos digestivos y respiratorio. En la mayor parte de los
órganos parenquimatosos.
Células dendríticas
Más eficaces (captación y presentación de antígeno). mielocíticas
Piel
Ganglios Linfáticos
CD INMADURA CD MADURA
Propiedad: Capacidad de procesar los Ag endocitados y la
expresión de genes del CPH II.
Células dendríticas:
Localizadas: Órganos linfáticos, epitelios de la piel y de los
aparatos digestivos y respiratorio. En la mayor parte de los
órganos parenquimatosos.
Células dendríticas
Más eficaces (captación y presentación de antígeno). mielocíticas
Piel
Ganglios Linfáticos
CD INMADURA CD MADURA
Macrófagos (MФ):
Fagocitan activamente partículas grandes, tienen
función importante en la presentación de Ag
(bacterias y parásitos).
Fase efectora de la inmunidad celular, los linfocitos
efectores diferenciados reconocen antígenos
microbianos sobre los fagocitos y activan a los
MФ.
La mayoría de los MФ expresa bajas [CMH] clase
II y el IFN γ induce [CMH] mayores. Mediante este
mecanismo el IFN γ estimula presentación
antigénica y la activación de los LT.
Linfocitos B:
Utilizan sus receptores antigénicos
para unirse e internalizar Ags
proteicos solubles y para presentar
péptidos procesados a los LTh.
La función presentadora de Ags es
esencial para la síntesis de Acs
dependiente de los LTh.
Células endoteliales (CE): CE y mesenquimatosas
Las CE vasculares de los humanos expresan CMH expresan CMH clase II en
clase II y pueden presentar Ag a LT sanguíneos respuesta a IFN γ.
adheridos a la pared vascular.
No expresan
CE injertos son dianas de los LT. coestimuladores.
Las respuestas de LT CD4+ se inician en los órganos linfáticos
periféricos, a los que se transportan los antígenos proteicos
después de ser recogidos en su puerta de entrada.
Las células dendríticas inmaduras (CDI) que residen en los epitelios y
tejidos capturan antígenos proteicos y los transportan a los ganglios
linfáticos de drenaje.
Pasos
1. Captura el
antígeno.
2. Pierden adhesión.
3. Expresan CCR7.
4. CDI maduran.
5. CDM - CMH II.
6. En GL son CPA.
7. LT virgen une CPA.
8. LT se activa.
9. Inicia RI.
Lascélulas dendríticas son las CPA más eficaces para
desencadenar las respuestas primarias de LT.
Razones
Localización.
Expresan receptores
(Tipo Toll, manosa).
Migran a la zona T GL.
CDM expresan
coestimuladores.
En la fase efectora de las respuestas de L CD4+, los L efectores o de memoria
previamente activados pueden reconocer y responder a Ags que se encuentran
en tejidos no linfáticos.
La fase efectora esta diseñada
para eliminar los Ags de cualquier
tejido.
Los LT migran hacia los lugares
periféricos de inflamación o
infección donde los MФ y otras
CPA presentan los Ags.
En los órganos linfáticos los LB
que reconocen Ags, los
internalizan y procesan y se los
presentan al LTCD4+.
Las vías de procesamiento
antigénico convierten a los Ags
proteicos derivados del citosol o
del espacio extracelular en
péptidos y cargan estos péptidos
en las CMH para presentarlas a
los LT.
Los antígenos proteicos
presentes en el citosol originan
péptidos asociados al CMH
clase I, mientras que los que los
interiorizados en las vesículas
de las CPA generan péptidos
asociados a la clase II.
Vía Citosólica CMH I.
Vía endocítica CMH II.
Vías de Procesamiento de Antígeno
Fig. 6-14
Abbas, Lichtman, and Pillai. Cellular and Molecular Immunology, 7th edition. Copyright © ©2012
Copyright bySaunders,
2011 by Saunders, anofimprint
an imprint of
Elsevier Inc.
Antígenos citosólicos y extracelulares
Fig. 6-15
Demostración experimental de la and
Abbas, Lichtman, presentación
Pillai. Cellular and de antígenos
Molecular Immunology,citosólicos y extracelulares.
7 edition. Copyright
th © 2012 by Saunders, an imprint of
Copyright © 2011 by Saunders, an imprint of Elsevier Inc.
Los péptidos asociados al CMH I se producen por la degradación
proteolítica de proteínas citosólicas, el transporte de los péptidos
generados hacia el RE y la unión a las moléculas de clase I recién
sintetizadas.
Virus en Proteina virica
Citoplasma sintetizada
Vesículas
TAP exocíticas
Péptidos
Proteína
desnaturalizada
β2m
Ag proteico microbio
ingerido transportado
Cadena
hacia Citoplasma α CPH
Fuentes de antígenos proteínicos citosólicos
Los antígenos extraños en el citosol pueden ser los productos de:
Virus u otros microbios intracelulares que infecten a tales células.
En las células tumorales, varios genes mutados o que se
expresan en exceso pueden producir antígenos proteínicos que
son reconocidos por CTL restringidos por la clase I.
Los péptidos que se presentan asociados a moléculas de la
clase I también pueden derivar de microbios y otros antígenos
particulados que se interioricen en fagosomas, pero se escapen
al citosol.
Ejemplo: cepas patógenas de Listeria monocytogenes producen
una proteína, llamada listeriolisina, que hace que las bacterias
puedan escapar de las vesículas hacia el citosol.
Digestión de proteínas en los proteasomas
Proteasomas grandes complejos enzimáticos multiproteínicos con
amplia actividad proteolítica se encuentran en el citoplasma y los
núcleos de la mayoría de las células.
Compuesto cilíndrico de una serie apilada de dos anillos β internos
y dos anillos α externos.
Las proteínas de los anillos α externos son estructurales y
carecen de actividad proteolítica.
En los anillos β internos, tres de las siete subunidades (β1, β2 y
β5) son los lugares catalíticos que realizan la proteólisis.
Función degradar muchas proteínas dañadas o mal plegadas.
Digestión de proteínas en los proteasomas
Los polipéptidos recién traducidos pero defectuosos,
así como las proteínas que se han dañado por estrés
celular, se dirigen al proteasoma para su degradación
por la unión covalente de varias copias de un
pequeño polipéptido llamado ubiquitina.
La capucha del proteasoma reconoce las proteínas
ubiquitinadas, con cadenas de cuatro o más
ubiquitinas, que después se despliegan, se les retira
la ubicuitina y se «enhebran» en los proteasomas,
donde son degradadas en péptidos.
Digestión de proteínas en los proteasomas
Mecanismo por el cual el IFN - γ potencia la presentación del antígeno.
En las células tratadas con la citocina ÍFN-γ, hay una mayor transcripción y síntesis de
tres nuevas subunidades catalíticas del proteasoma, llamadas β1i, β2i y β5i, que
reemplazan a las tres subunidades catalíticas del anillo β del proteasoma.
Esto da lugar a un cambio en la especificidad por el sustrato del proteasoma, de modo
que los péptidos producidos suelen contener aminoácidos hidrófobos en el carboxilo
terminal, como la leucina, la valina, la isoleucina y la metionina, o aminoácidos básicos,
como la lisina o la arginina.
Digestión de proteínas en los proteasomas
Mecanismo del IFN - γ en la presentación del antígeno.
Aumento de la expresión de la clase II del CMH
por el IFN -γ . El IFN- γ , producido por los
linfocitos NK y otros tipos celulares durante las
reacciones inmunitarias innatas a los microbios o
por los linfocitos T durante las reacciones
inmunitarias adaptativas, estimula la expresión de
la clase II del CMH en las CPA y así aumenta la
activación de los linfocitos T CD4+. El IFN- γ y los
interferones del tipo I tienen un efecto similar
sobre la expresión de moléculas de la clase I del
CMH y la activación de los linfocitos T CD8. +.
Transporte de péptidos desde el citosol al Retículo
Endoplásmico.
Los péptidos generados en el proteasoma pasan al RE por la acción de
un transportador especializado, donde hay disponibles moléculas recién
sintetizadas de la clase I del CMH para unirse a los péptidos.
Este transporte está mediado por una proteína dimérica llamada
transportador asociado al procesamiento del antígeno (TAP).
Transporte de péptidos desde el citosol al
Retículo Endoplásmico.
La proteína TAP se localiza en la membrana del RE, donde media
el transporte activo y dependiente del ATP de péptidos
procedentes del citosol hacia la luz del RE.
En el lado luminal de la membrana del RE, la proteína TAP se
asocia a una proteína llamada tapasina, que también tiene afinidad
por moléculas de la clase I del CMH vacías recién sintetizadas.
La tapasina lleva así el transportador TAP al complejo con las
moléculas de la clase I del CMH que esperan la llegada de los
péptidos.
Ensamblaje de los complejos péptido-Clase I del CMH (MHC) en el RE.
Los péptidos trasladados al RE se unen a
moléculas de la clase I del CMH que se asocian al
dímero TAP a través de la tapasina.
Las cadenas α de la clase I y la microglobulina
β2m se sintetizan en el RE.
Chaperonas: plegado adecuado de cadenas α,
chaperona de membrana calnexina y la chaperona
luminal calreticulina.
Dentro del RE, los dímeros de la clase I vacíos y
recién formados permanecen unidos al complejo
TAP.
Los péptidos que entran en el RE a través de TAP
y los péptidos producidos en el RE, como los Cadena α
del MHC
péptidos señal, se recortan hasta el tamaño
adecuado para que se unan al CMH por medio de
aminopeptidasa (ERAP).
Ensamblaje de los complejos péptido-Clase I del CMH (MHC) en el RE.
Una vez que las moléculas de la clase I del CMH
se cargan con el péptido, ya no tienen afinidad por
la tapasina, de manera que el complejo péptido-
clase I se libera y es capaz de salir del RE y de ser
transportado a la superficie celular.
Los péptidos transportados al RE se unen de
forma preferente a moléculas de la ciase I, pero no
de la clase II del CMH, por dos razones:
1. Primera, las moléculas de la clase I recién
sintetizadas están unidas a la cara luminal del
complejo TAP y capturan los péptidos con rapidez
a medida que el TAP los transporta al RE.
2. Segunda, en el RE las hendiduras de unión al Cadena α
péptido de las moléculas de la clase II recién del MHC
sintetizadas están bloqueadas por una proteína
llamada la cadena invariante.
Expresión en la superficie de los complejos péptido-Clase I del
CMH (MHC).
Las moléculas de la clase I del CMH están unidas a
péptidos con estructuras estables y se expresan en la
superficie celular.
Los complejos péptido-clase I del CMH estables que
se producen en el RE se mueven a través del
complejo de Golgi y son transportados a la superficie
celular mediante vesículas exocíticas.
Una vez expresados en la superficie celular, los
complejos péptido-clase I pueden ser reconocidos
por linfocitos T CD8 + específicos frente al antígeno
peptídico.
MHC
Correceptor CD8 + tiene función esencial en la unión
a regiones no polimórficas de la molécula de la clase
I.
La generación de péptidos asociados al CMH de clase II a partir de antígenos
endocitados supone la degradación proteolítica de proteínas internalizadas
en vesículas endocíticas y la unión de los péptidos a las moléculas del CMH
de clase II en estas vesículas.
Generación de proteínas vesiculares.
Los pasos iniciales en la presentación de un antígeno proteínico extracelular son
la unión del antígeno original a una CPA y su interiorización.
Las células dendríticas y los macrófagos expresan varios receptores de
superficie que reconocen estructuras que comparten muchos microbios.
Estas CPA usan los receptores para unirse a microbios e interiorizarlos de forma
eficaz.
Los macrófagos expresan receptores Fc de los anticuerpos y para C3b del
complemento .
Los linfocitos B: La inmunoglobulina de superficie y su elevada afinidad por
los antígenos.
Tras su interiorización, los antígenos proteínicos se localizan en vesículas
intracelulares rodeadas de membrana llamada endosomas.
Generación de proteínas vesiculares.
Proteínas diferentes a las capturadas del medio extracelular pueden entrar
también en la vía de la clase II del CMH.
Con menor frecuencia pueden procesarse y presentarse proteínas citoplásmicas
y de membrana en moléculas de la clase II. En algunos casos, esto puede
deberse
Autofagia: mecanismo de degradación de proteínas celulares y de reciclado de
sus productos como fuentes de nutrientes durante los momentos de estrés.
También participa en la destrucción de microbios intracelulares, que están
encerrados en vesículas y se dirigen a los lisosomas.
Digestión proteolítica de proteínas en las vesículas.
Las proteínas interiorizadas las degradan enzimas de los endosomas
tardíos y de los lisosomas para generar péptidos capaces de unirse a la
hendidura de unión al péptido de las moléculas de la clase II del CMH.
La degradación de los antígenos proteínicos en las vesículas es un
proceso activo mediado por proteasas (catepsina) que tienen un pH ácido
óptimo.
Varias catepsinas contribuyen a la generación de péptidos para la vía de la
clase II.
Las proteínas parcialmente degradas o escindidas se unen a las
hendiduras abiertas de las moléculas de la clase II del CMH y son
recortadas por enzimas hasta obtener su tamaño final.
.
Biosíntesis y transporte de moléculas de la clase II del CMH a los endosomas.
Las moléculas de la clase II del CMH se sintetizan en el RE y se transportan a los
endosomas con una proteína asociada, la cadena invariante, que ocupa la hendidura
de unión al péptido de las moléculas de la clase II del CMH recién sintetizadas.
Las cadenas α y β de las moléculas de la clase II del CMH se sintetizan de forma
coordinada y se asocian entre sí en el RE.
Los dímeros de la clase II nacientes tienen estructuras inestables, y en su plegado y
ensamblaje colaboran chaperonas residentes en el RE, como la calnexina.
La cadena invariante (Ii) promueve el plegado y ensamblaje de las moléculas de la
clase II del CMH, y dirige las moléculas recién formadas de la clase II del CMH a los
endosomas tardíos y lisosomas donde las proteínas interiorizadas se han degradado
mediante proteólisis en péptidos.
.
Biosíntesis y transporte de moléculas de la clase II del CMH a los endosomas.
Las moléculas de la clase II del CMH se transportan en vesículas exocíticas a la
superficie celular.
Durante este paso, las vesículas que sacan las moléculas de la clase II del CMH del
RE se encuentran y fusionan con las vesículas endocíticas que contienen antígenos
interiorizados y procesados.
De este modo, las moléculas de la clase II del CMH se encuentran con péptidos
antigénicos que se han generado por la proteólisis de las proteínas introducidas por
endocitosis y en las vesículas se asocian el péptido y el MHC.
.
Biosíntesis y transporte de moléculas de la clase II del CMH a los endosomas.
Asociación de los péptidos procesados con moléculas de la clase II del
CMH en las vesículas.
Dentro de las vesículas endosómicas, la cadena invariante se disocia de las
moléculas de la clase II del CMH por la acción combinada de enzimas
proteolíticas y la molécula del HLA -DM , y los péptidos antigénicos son entonces
capaces de unirse a la hendidura de unión al péptido disponible de las moléculas
de la clase II.
I¡ bloquea el acceso a la hendidura de unión al péptido.
Las catepsinas, actúan sobre la I¡, la degradan y dejan solo un resto de 24
aminoácidos llamado péptido de la cadena invariante de la clase II (CLIP).
El CLIP debe eliminarse para que la hendidura quede accesible a los péptidos
antigénicos producidos a partir de proteínas extracelulares.
Esta eliminación se consigue mediante la acción de una molécula llamada HLA –
DM.
Expresión de complejos péptido-clase II del CMH en la superficie celular.
Los péptidos unidos estabilizan a las moléculas de la clase II del CMH, y los
complejos péptido-clase II estables se llevan a la superficie de la CPA, donde se
exponen para su reconocimiento por los linfocitos T CD4+.
Fusión de extensiones vesiculotubulares del lisosoma con la membrana
plasmática, lo que da lugar a la colocación de los complejos de la clase II del
CMH cargados en la superficie celular.
Una vez expresado en la superficie de la CPA, los complejos péptido-clase II son
reconocidos por los linfocitos T CD4+ específicos frente al antígeno peptídico, y
el correceptor CD4 desempeña una función esencial al unirse a regiones no
polimórficas de la molécula de la clase II.
DM, permanecen en las vesículas y no se expresan en la membrana plasmática.
Estimulan Linfocitos B
Linfocitos T CD4+
Proliferación y Linfocitos T Citotóxicos
diferenciación
Todas las células nucleadas pueden presentar péptidos asociados al CMH clase
I, derivados de Ags proteicos citosólicos (excepto eritrocitos y trofoblastos).
LT CD8+
específico para
Célula infectada el virus
por virus
CPA huésped
LT CD8+
Reconoce Célula
Activados infectada Apoptosis
Algunas células dendríticas tienen la capacidad de capturar e ingerir células
infectadas por virus o células tumorales, y presentar los antígenos víricos o
tumorales a linfocitos T CD8+ vírgenes
Naturaleza de las respuestas de Linfocitos T. La expresión y las funciones de
las CMH determinan como responde los LT a diferentes tipos de antígenos y
median sus funciones efectoras.
Inmunogenicidad de los antígenos proteicos.
Los epítopos de las proteínas complejas que desencadenan las respuestas de linfocitos
T más fuertes son los péptidos que se generan por proteólisis en CPA y se unen con
mayor avidez a las moléculas del CMH.
La expresión de alelos concretos del CMH de clase II en un individuo determina su
capacidad para responder a antígenos concretos.
Vigilancia de Linfocitos T frente a antígenos extraños.
Los linfocitos NKT expresan marcadores que son característicos de los linfocitos
citolíticos naturales (NK) y de los linfocitos T, y expresan receptores αβ del
linfocito T con una diversidad muy limitada.
Los linfocitos NKT reconocen lípidos y glucolípidos mostrados por la molécula
«no clásica» similar a la clase I del CMH llamada CD1.
Todas las moléculas CD1 se unen a los lípidos y los muestran por un único
mecanismo.
Las moléculas CD1 recién sintetizadas captan lípidos celulares y los llevan a la
superficie celular. Desde aquí, los complejos CD1-lípido son captados por
endocitosis en los endosomas o los lisosomas, donde se capturan los lípidos que
han sido ingeridos del ambiente externo, y los nuevos complejos CD1-lípido
vuelven a la superficie celular. De este modo, las moléculas CD1 adquieren los
antígenos lipídicos interiorizados por endocitosis durante el reciclado y los
presentan sin un procesamiento aparente.
Los linfocitos T γδ son una pequeña población de linfocitos T que expresan
proteínas receptoras para el antígeno y son similares, pero no idénticas, a las de
los linfocitos T CD4+ y CD8 +.
Los linfocitos T γδ reconocen muchos tipos diferentes de antígenos, incluidas
algunas proteínas y lípidos, así como pequeñas moléculas fosforiladas y
alquilaminas.
Estos antígenos no se muestran en moléculas del CMH, y los linfocitos γδ no
están restringidos por el CMH.
No se sabe si es necesario un tipo celular o un sistema de muestra particular
para la presentación de los antígenos a estas células.
