UNIVERSIDAD CATÓLICA DE SANTA MARÍA
FAC. CIENCIAS E INGENIERÍAS BIOLÓGICAS Y QUÍMICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
MICROBIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
“Practica N°2”
Responsable del grupo 08 de Microbiología Practica:
MVZ Katerinne Vercy Cuadros Rodríguez
Estudiantes:
• Valenzuela Palomino, Stefano Jhon
• Huyhua Huamani, Judith
• Mendoza Bobadilla, Andrea Luz
• Garcia Aguilar, David Maximus
• Proaño Chuquihuayta, Valeria Suley
Arequipa – 2024
I. OBJETIVOS:
• Comprender la importancia de la esterilidad del material en el trabajo
en microbiología
• Reconocer y sustentar los argumentos para los procesos de
preparación (limpieza y acondicionamiento) del material a esterilizar
• Desarrollar las técnicas de preparación del material a esterilizar según
la naturaleza de estos
• Aplicar los métodos de esterilización adecuados según las
características del material a trabajar
II. MARCO TEORICO:
La Actividad básica de un laboratorio de microbiología involucra el
aislamiento de los microorganismos presentes en una muestra recibida y
seguidamente su identificación. Esto parte de un trabajo mayor que involucra
varias fases, desde la toma de muestras hasta el reporte final al clínico
tratante con la debida información sobre el microorganismo determinado y la
sensibilidad antibiótica.
Nos concentraremos en la Fase 2 del trabajo de laboratorio
Fase 2: Aislamiento
1. Limpieza
2. Acondicionamiento : Es dar una condición de protección al material
que se va a esterilizar para que una vez esterilizado no se vuelva a
contaminar. (2)
3. Esterilización
4. Preparación de medios de cultivo
5. Técnica de inoculación
6. Incubación de medios de cultivo (18 a 24 hrs)
7. Observación de características microscópicas y macroscópicas
En la actualidad sabemos la importancia de la limpieza y desinfección no sólo
de las manos del cirujano y personal médico, sino de todo el instrumental,
aditamentos y material de laboratorio ya que se necesita mantener
controlados a los microorganismos que pueden ocasionar enfermedades, y
estas normas acompañan a la medicina tanto como a la industria
farmacéutica, a la de alimentos y bebidas, a la química, entre otras,
incluyendo al sector educativo pues los jóvenes desde educación secundaria
comienzan a conocer los mecanismos de acción de diversos químicos, así
como a conocer más a fondo el cuerpo humano y otros organismos vivos y
deben mantener limpios los laboratorios. (1)
Limpieza de Material:
La higiene adecuada del material será en función si esta nuevo o si es de
naturaleza reutilizable y se encuentra con restos de cultivos u otros detritos,
ya que, si fuere el caso estos deben ser inactivados apropiadamente, lo cual
se logra mediante el sometimiento a un método de esterilización
propiamente dicho.
Acondicionamiento
Consiste en dar una condición al material previo a la aplicación de un método
de esterilización, esta condición es básicamente una protección que permite
la manipulación del material ya esterilizado sin temor a que sufra una nueva
contaminación
III. MATERIALES:
1. Autoclave
2. Estufa de esterilización
3. Placas Petri
4. Tubos de ensayo 5ml
5. Tijera de papel
6. Lápiz marcador
7. Mechero
8. Pizeta
9. Papel Graff
10. Pabilo
11. Algodón
12. Gasa
13. Agua destilada
IV. ACTIVIDADES:
LIMPIEZA
A) Se debe realizar el aseo del material sea este Nuevo o almacenado con
aparente limpieza, ya que se puede asumir el haber estado expuesto a
polvo contaminado.
B) El material sucio o contaminado que procede de su uso con sustancias,
o restos de cultivos microbiológicos, es potencialmente peligroso y, por
tanto, debe ser esterilizado en autoclave, para proceder a su
manipulación segura para su aseo.
C) Si el material (generalmente de vidrio) presenta restos difíciles de
suciedad difíciles de remover, se recomienda su remoje por varias
horas en solución detergente - desinfectante, evitando el refriegue ya
que podría significar la formación de ralladuras.
D) El enjuague con agua de caño se realizará una o dos veces.
E) Todo material para esterilizar debe ser enjuagado finalmente con agua
destilada desmineralizada o desionizada las veces que sea necesario,
con el fin de retirar las sales que pudieran estar presentes por enjuague
con agua dura de grifería convencional.
F) Proceder al secado en la estufa a baja temperatura y corto periodo de
tiempo.
FIGURA 1
ENJUAGUE INICIAL DEL MATERIAL DE LABORATORIO; IMAGEN DE ORIGEN PROPIO
FIGURA 2
DESINFECCION DEL MATERIAL DE LABORATORIO; IMAGEN DE ORIGEN PROPIO
FIGURA 3
ENJUAGUE FINAL DEL MATERIAL DE LABORATORIO CON AGUA DESTILADA; IMAGEN DE
ORIGEN PROPIO
ACONDICIONAMIENTO
a) Dependerá de la naturaleza del material a esterilizar: vidrio, líquidos,
metal, tela, etc.
b) Existen variedad de formas de acondicionamiento, en la presente
práctica utilizaremos envoltorio de papel Graff para las placas Petri y
sellado de tubos - matraces con tapones de algodón y gasa.
c) Para placas Petri, tomar en cuenta la porosidad del papel y la posición
de la placa en la envoltura, sujete con pabilo la envoltura.
d) Para matraces o tubos de ensayo pipetas, elaborar un tapón de
algodón cubierto de gasa, del diámetro adecuado según la apertura del
recipiente, colocarlo y seguidamente cubrir con una pequeña porción
de papel Graff y sujetarlo con pabilo.
FIGURA 4
EXTRACCIÓN DEL MATERIAL DE LABORATORIO DE LA ESTUFA DE ESTERILIZACION; IMAGEN DE
ORIGEN PROPIO
FIGURA 5
Empaquetado de instrumental para Autoclave con papel Kraft [Internet]. 2022 [citado 24 marzo
2024]. Disponible en: [Link]
EMPAQUETADO DEL MATERIAL DE LABORATORIO; IMAGEN DE ORIGEN PROPIO
ESTERILIZACION
a) Procederemos al uso del calor a través de temperaturas elevadas, esto
logra la coagulación de las proteínas microbianas y su consiguiente
muerte. Para tal fin utilizaremos lo siguientes equipos:
o Horno o Estufa de esterilización: A través de calor seco se
esterilizan materiales que no se dañan con este proceso: vidrio y
metal.
o Autoclave: por medio del calor húmedo esterilizaremos
materiales más delicados como: líquidos, telas, tapas de goma,
etc.
b) Para la presente práctica esterilizaremos material de vidrio que será
utilizado en prácticas posteriores.
COLOCADO DEL MATERIAL DE LABORATORIO EN LA ESTUFA DE ESTERLIZACION; IMAGEN DE
ORIGEN PROPIO
V. RESULTADOS:
• Damos una mejor esterilización al material que vamos a
manipular y no tenga restos contaminantes
• Evitamos la contaminación. Por bacterias o hongos hacia
nuestros materiales
VI. CUESTIONARIO:
1. ¿Cuál es el motivo por la que se debe acondicionar el material a
esterilizar en el laboratorio?
- tiene el fin de eliminar cualquier carga microbiana como, bacterias,
virus, hongos, parásitos, ya sea patógena o no, de los productos que
por su uso lo requieran así evitamos la contaminación cruzada de
muestras o el crecimiento de microorganismos no deseados.
2. ¿Porque se requiere el material y condiciones estériles para el trabajo
en el laboratorio?
- Además de eliminar suciedad, también se produce la eliminación de
todas las formas de vida microbiana como virus, bacterias, hongos y
protozoos. Esto asegura que los productos, ropa, materiales, etc.
sean seguros así evitamos la contaminación.
3. ¿Cuál es la razón del uso del agua destilada o agua desmineralizada en
el enjuague del material de vidrio?
- La desmineralización del agua es conveniente cuando existen
demasiadas sustancias orgánicas. El agua purificada es el agua
obtenida por destilación o desionización, no contiene sustancias
añadidas. La destilación se usa para separar los componentes de
una mezcla. Elimina cierta cantidad de iones y algunas bacterias.
4. ¿Que se produce la muerte de los microogranismo en la esterilización
por calor?
- La reducción de la carga microbiana se consigue mediante la
inactivación de las células como consecuencia de la coagulación de
proteínas, causada por la transferencia de calor, a través de vapor a
alta presión y temperatura. Las condiciones de esterilización
pueden variar en función de la autoclave.
VII. BIBLIOGRAFIA:
Marco teorico:
1. Cómo limpiar y desinfectar el material de laboratorio [Internet].
[Link]. 2017 [cited 2024 Mar 28]. Available from:
[Link]
laboratorio
2. T2 Limpieza, Acondicionamiento Y Esterilizacion DE Material DE
Laboratorio [Internet]. Studocu. Studocu; 2021 [cited 2024 Mar 28].
Available from:
[Link]
santa-maria/microbiologia-i/t2-limpieza-acondicionamiento-y-
esterilizacion-de-material-de-laboratorio/25340887
Cuestionario:
[Link]
es_de_laboratorio_por_calor_humedo_autoclave_y_calor_seco_horno
[Link]
[Link]
esterilizacion-de-los-materiales-medicos/
[Link]
Taller_4.pdf/c9e87264-a088-385b-f67a-
d02db5e901e0#:~:text=La%20reducci%C3%B3n%20de%20la%20carga,va
riar%20en%20funci%C3%B3n%20del%20autoclave.
[Link]
