BACTERIAS

Las BACTERIAS pueden clasificarse según:

- aspecto macroscópico
- aspecto microscópico  ppal modo de distinguir las bacterias. Tamaño, forma, configuración (cocos, bacilos,
curvos, espirales), capacidad de captar tinción de Gram
- crecimiento
- propiedades metabólicas características: necesidad de entorno aerobio o anaerobio, exigencia de nutrientes
específicos, producción de productos metabólicos caracteristicos (ácidos, alcoholes) y enzimas especificas (ej: 1

catalasa en estafilococo).
- antigenicidad
- genotipo
La suma de las características define los rasgos de una COLONIA (color, tamaño, forma, olor).

Mediante el uso de medios de cultivo puede determinarse:

- Capacidad de resistir a determinados atb
- Fermentar azúcares específicos; ej: lactosa permite distinguir E. Coli de Salmonella
- capacidad de lisar eritrocitos (capacidad hemolítica)
- capacidad de hidrolizar lípidos; ej: lipasa de los clostridios

Tinción de Gram
Las bacterias se fijan con calor ó se dejan secar en el porta, se tiñen con violeta cristal q es un colorante q precipita
con yodo; se lava con agua para eliminar el exceso de colorante; se lava el porta con un decolorante (de base
acetona) y agua, para eliminar el colorante no-ligando; se añade un contra-contraste rojo (safranina) para teñir las
céls decoloradas.
- Bacteria Gram + se tiñe morado (“púrpura es positivo”) xq el colorante queda atrapado en 1 capa gruesa de
peptidoglucanos q rodea a la cél
- Bacteria Gram – no retiene el violeta cristal xq su capa de peptidoglucano es muy delgada, entonces se tiñen con
safranina (contra-contraste) y se ven rojas.
La tinción de Gram NO es fiable para bacterias sin nutrientes xq se degradaron los peptidoglucanos (cultivos antiguos
ó en fase estacionaria), lo mismo respecto a bacterias q fueron tratadas con atb.

La tinción de Gram NO es útil para micobacterias (se usa tinción ácido alcohol resistencia) y micoplasmas (carecen de
peptidoglucanos).

Cómo se realiza la tinción de GRAM

1. Se colocan sobre el portaobj bact q están fijadas x calor
2. Se tiñe con el 1er colorante: violeta de giemsa (ó cristal violeta) x 30 segs
3. Se lava con agua. El colorante ingresa a la bacteria.
4. Se agrega una sc iodada x 1 min (actúa como mordiente) y se enjuaga
5. Se decolora con alcohol / acetona x 30 segs y se lava. El objetivo es decolorar las bacterias con pared delgada para
poder diferenciarlas.
6. Se agrega el 2do colorante q actúa como contraste: fucsina ó safranina, 30 a 60 segs. Se enjuaga y se seca.

Las bacterias con pared gruesa NO pierder en 1er colorante y luego de la coloración se ven violeta / púrpura: Gram +
Las bacterias con pared más fina pierden el 1er colorante dps de la decoloración y el 2do colorante es el q ingres a la
cél bacteriana: Gram – (se ven rojo, rosado).
Micobacterias, treponemas y micoplasmas NO se colorean.

Serotipado  prueba serológica para distinguir: una cepa concreta de bacterias mediante el uso de Acs q detectan
Ags caracteristicos, organismos difíciles (treponema), organismos peligrosos (Francisella q produce tularemia),
organismos q no crecen en laboratorio y se asocian a sdmes específicos (serotipo O157:H7 de E. Coli q produce
colitis hemorrágica), organismos q deben identificarse rápidamente (S. Pyogenes q produce faringitis
estreptocóccica).
2
Análisis de material genético ó prots  método más exacto para clasificar bacterias. Pueden detectarse secuencias
especificas de ADN mediante Hibridación de ADN, amplificación mediante Reacción en Cadena de Polimerasa,
Secuenciación del ADN.

ESTRUCTURA BACTERIANA

Estructuras Citoplasmáticas
El citoplasma de la cél bacteriana contiene: ADN cromosómico, ARNm, Ribosomas, Prots, Metabolitos

Cromosoma bacteriano  molécula circular única bicatenaria contenido en una zona llamada “nucleoide”. Algunas
bacterias pueden tener 2 ó 3 cromosomas circulares ó 1 sólo cromosoma lineal.
- El cromosoma carece de histonas y el ADN no forma nucleosomas
La ausencia de membrana nuclear conlleva el acoplamiento de la transcripción y traducción, o sea los ribosomas se
fijan al ARNm y fabrican prots a medida q se sintetiza el ARNm aún unido al ADN.

Plásmidos  moléculas extracromosómicas circulares más cortas de ADN q pueden tener algunas bacterias
(gralmente Gram - ). Los plásmidos no son esenciales para la supervivencia de la bacteria pero le brinda ventaja
selectiva x conferir resistencia a atb.

Ribosoma bacteriano  tiene dos sub-unidades (30S y 50S) y forma un ribosoma 70S. Esto es importante xq el
ribosoma eucarionte es 80S y esa diferencia es objetivo de fármacos anti-bacterianos.

Membrana Citoplasmática  posee estructura lipídica de doble capa SIN esteroides (NO tiene esteroles, NO tiene
colesterol), salvo los micoplasmas. La membr citoplasmática realiza fcs: transporte de electrones y producción de
energía, contiene prots de transporte para captación de metabolitos y liberación de sustancias, posee bombas de
iones para mantener potencial de membr y posee enzimas.
Cara interna de la membrana: está tapizada de filamentos proteicos1 tipo actina q contribuyen a la forma de la
bacteria y tb a formar el tabique de división celular.

Mesosomas  estructuras q puede formar la membrana; invaginaciones hacia el citosol: son las regiones donde se
replica el ADN

Las bacterias Gram+ y Gram- se diferencian x la estructura de la Pared Celular (componentes, fcs).

BACTERIAS GRAM +
PARED CELULAR DE BACTERIAS GRAM+
Estructura: Componentes: FC:

1
Los filamentos determinan la forma helicoidal de los treponemas.
Peptidoglucano Múltiples capas de cadenas de glucanos -Elemento clave para la forma y estructura
entrecruzados x un puente peptidico celular
-Protección frente al ambiente y ante la
destrucción x parte del Complemento
Ácido Teicoico Polirribitol-fosfato ó glicerol-fosfato único al - Refuerza la pared celular
peptidoglucano - Secuestro de calcio
Ácido Ácido teicoico unido a lipido -Activador de protecciones innatas del
Lipoteicoico huésped
Proteínas Las “Prots de Virulencia” establecen enlaces Evasión inmunitaria, adhesión, etc
covalentes con el peptidoglucano ó ác teicoico 3

Peptidoglucano: elem clave para la estructura, replicación y supervivencia de la cél en las condiciones gralmente
hostiles en las q proliferan las bacterias. Formado por cadenas de N-acetilglucosamina y ácido N-acetilmurámico.
Posee enlaces peptídicos q mantienen la unión con las estructuras bacterianas internas (como una suerte de malla).
El peptidoglucano es sitio de anclaje de prots q permiten adhesión a nivel de las superficies celulares (adhesinas) y
de la MEC.
El proteoglicano sirve como reconocimiento de la rta inmunológica.
El peptidoglucano es blanco terapéutico de atbs. El tto con Lisozima podría degradar el peptidoglucano y sin éste, la
bacteria sucumbe a la diferencia de P osmótica a uno y otro lado de la membrana plasmática sufriendo lisis (la pared
bacteriana pierde fc).
Importante  dentro de la sintesis de la pared celular, está el sistema enzimático llamado Proteina Ligadora de
Penicilina (PLP) q se encarga de facilitar las uniones entre cada una de las cadenas del peptidoglicano. Si este PLP se
destruye, se altera la fc de la pared celular, el tema es q este sist ha sufrido mutaciones generando resistencia a los
atb beta lactámicos.

Ácidos Teicoicos: fundamental para la viabilidad celular, son polímeros aniónicos hidrosolubles de fosfatos de poliol
q están unidos al peptidoglucano mediante enlaces covalentes.
Los ác teicoicos se anclan a la pared y dan el 50% del peso seco a la estructura de la pared bacteriana.
La fc del ác teicoico es más metabólica q estructural brindando tb cierta acción a la adhesión a epitelios. Se vinculan
ppalmente con la adhesión al epitelio nasal.

Ácidos Lipoteicoicos: están unidos a la membr plasmática (NO a la pared celular). Son Ags de superficie frecuentes q
diferencian los serotipos bacterianos, favorecen la fijación a otras bacterias y favorecen la adherencia a Rcs en las
céls de mamíferos. Los ácidos lipoteicoicos son expulsados hacia el medio circundante y al huésped y se unen a RRP
pudiendo desencadenar rtas inmunitarias del huésped semejantes a las de las endotoxinas.
Pueden inducir a nivel de las CPA y macrófagos, la sintesis de citoquinas proinflamatorias, generando mayor rta
inmunitaria, x ende mayor daño celular a céls no-infectadas y esto aumenta la patogenicidad de una bacteria.

BACTERIAS GRAM -
La pared celular de las bacterias Gram- son más complejas estructural y químicamente.
Por fuera de la membrana citoplasmática hay una capa delgada de peptidoglucano y en la capa externa del
peptidoglucano está la “membrana externa” (exclusiva de las Gram-).
Membrana Externa es una bicapa lipídica de configuración asimétrica: su hoja int tiene fosfolípidos y la hoja ext
está formada x LPS2. La Membrana Externa forma una suerte de saco rígido alrededor de la bacteria; mantiene la
estructura bacteriana y es una barrera impermeable a moléculas grandes (ej: lisozima) y moléculas hidrófobas (ej:
algunos antimicrobianos); protege ante condiciones ambientales adversas (ej: ap digestivo del huésped).

Espacio Periplásmico  zona entre la cara externa de la membrana citoplasmática y la superficie int de la Membrana
Externa. Es un compartimento q tiene los sistemas de transporte para el hierro, azúcares, metabolitos, enzimas3
hidrolíticas para la degradación y metabolización de macromoléculas x parte de la cél.
En el Espacio Periplásmico están muchos de los fact de virulencia en las especies Gram- patógenas: colagenasas, 4

hialuronidasas, proteasas, B-lactamasa.

PARED CELULAR DE BACTERIAS GRAM -

Estructura: Componentes: FC:
Versión más delgada respecto a la Forma y estructura celular
Peptidoglucano
bacteria Gram+
Espacio Transporte de prots, enzimas Enzimas implicadas en transporte, degradación y sintesis
Periplásmico
Fosfolipidos, LPS, prots, enzimas Canal de Porina: restringe entrada de moléculas gdes e
hidrófobas, incluidos muchos antimicrobianos.
Proteinas:
1) Canal de porina Los Dispositivos de Secreción contribuyen a la virulencia
2) Dispositivos secretores (tipos I – V) del mo.
Membrana
LPS LPS: endotoxina, potente estimulador de la rta
Externa
1) Lipoproteina inmunitaria. Los LPS se desprenden de la bacteria hacia
2) Secciones del LPS: Lipido A, el huésped y se unen a RRP, activan linf B, inducen
polisacárido de la región central ó liberación de IL1, IL6, TNF y otros factores de macrófagos
core, Ag O y CD. Los LPS pueden generar fiebre y shock.

Fosfolipidos c/ ác grasos saturados

La alteración de la Membrana Externa debilita la bacteria, favorece el paso de moléculas gdes ó hidrófobas y permite
la entrada de lisozima.

La Membrana Externa se conecta a la membrana citoplasmática mediante zonas de adhesión y se une al

peptidoglucano mediante una lipoproteína y la lipoproteína se une al peptidoglucano y tb se ancla a la Membrana
Externa.
La Membrana Externa se mantiene enlaces catiónicos divalentes (Mg2; Ca2) formados e/ lso fosfatos de LPS e
interacciones hidrófobas e/ LPS y prots existentes. Esas interacciones producen una membrana rigida, fuerte pero q
se afecta x atb (polimixina) ó mediante eliminación de los iones Mg y calcio (tetraciclina).

Característica Gram + Gram -

Membrana Externa no si
Peptidoglucano grueso delgado
LPS no si
Endotoxina no si
Ácido Teicoico A menudo presente no
Esporulación Algunas bacterias: Clostridium y Bacilus no

2
La hoja externa de la Membrana Externa es el único lugar dnde está el LPS (salvo las moléculas de LPS presentes en el proceso
de sintesis).
3
Proteasas, fosfatasas, lipasas, nucleasas, enzimas metabolizadoras de carbohidratos.
 Cápsula A veces presente
Lisozima sensible resistente
Actividad antibacteriana de penicilina + susceptible + resistente
Susceptibilidad a desecación y alteración física menos más
Producción de exotoxinas Algunas cepas

Estructuras Externas
Cápsula  puede estar en bacterias gram + ó – y se define como capas laxas de prots ó polisacáridos q rodean a la
5
bacteria (capa de limo ó glicocálix). La cápsula no se ve al M.O. pero puede visualizarse con tinta china.
La Cápsula es innecesaria para el crecimiento de la bacteria pero es súper relevante para su supervivencia en el
huésped ya q permite evadir la rta inmunitaria innata local pudiendo generarse diseminación y aumentar así la
virulencia de la bacteria. Todo mo capsulado puede generar bacteriemia (posterior a su ingreso) ya q al evadir la rta
inmune local, puede diseminar hacia otros sitios (mayor virulencia q las bacterias no-capsuladas).
- la cápsula es poco antigénica y es antifagocítica
- es un factor de virulencia significativo (ej: S. Pneumoniae)
La Cápsula:
- puede actuar como barrera contra moléculas hidrófobas tóxicas (ej: detergentes)
- facilita la adherencia a otras bacterias ó a las superficies de los tejs del huésped

Biopelícula ó Biofilm  es una trama extracelular compuesta de polisacáridos y prots q algunas bacterias producen
cdo hay un nro suficiente de bacterias (quórum) y esto puede proteger a la comunidad bacteriana de los atb y
defensas del huésped (ej: pseudomonas aeruginosa, S. Aureus).
El biofilm puede adherirse a ciertas superficies, principalmente materias estériles.
Cómo se produce el biofilm? La sintesis del biofilm se produce cdo se acumulan gran cantidad de bacterias q censan
el ambiente y comienzan la sintesis de la trama de polisacáridos y prots y luego, estas bacterias, pasan a una etapa
latente (fase q NO es metabólicamente activa, no se generan prots ni productos propios), entran en estado de
quiescencia pudiendo sobrevivir a algunos ambientes (como la disecación) y pudiendo sobrevivir a algunos procesos
de desinfección q no eliminan biofilms. Luego, cuando las bacterias son liberadas de la biopelicula, vuelven a un
estado vegetativo (metabólicamente activo) pudiendo producir prots y toxinas.
Por eso, la producción de biofilms aumenta la virulencia de la bacteria ya q puede contaminar sitios estériles.

Flagelo  propulsores en forma de cuerda formados x sub-unidades proteicas enrolladas helicoidalmente

(flagelina). Se unen a las membranas de las bacterias mediante estructuras llamadas “gancho” y “cuerpo basal” y se
impulsan x el potencial de membrana. Las especies bacterianas pueden tener 1 ó varios flagelos en su superficie q
pueden anclarse en diferentes partes de la cél permitiendo motilidad y quimiotaxis hacia nutrientes, evitar
sustancias tóxicas.
Los flagelos tienen factores antigénicos y determinantes de la cepa bacteriana, constituyendo un ligando para el RRP
y activar las defensas innatas del huésped.

Fimbrias (Pili)  las fimbrias son un tipo de pilis no sexuales; estructuras piliformes localizadas en la parte externa
de la bacteria, formadas x sub-unidades proteicas (pilina). Se diferencian del flagelo xq tienen menor diámetro y
carecen de estructura helicoidal. Gralmente, a lo largo de toda la superficie de la cél existen varios centenares de
fimbrias dispuestas uniformemente.
Las fimbrias:
- favorecen la adhesión a otras bacterias ó al huésped, de hecho sus nombres alternativos son adhesinas, lectinas,
evasinas, agresinas
- las puntas de las fimbrias pueden tener prots (lectinas) q se unen a azúcares específicos (manosa)
- son importante factor de virulencia en la colonización e infección del ap urinario x E. Coli y en infección x Neisseria
Gonorrhoeae.
Los Pili sexuales se unen a otras bacterias y configuran una estructura tubuliforme para la transferencia horizontal
de grandes segmentos de los cromosomas bacterianos (Intercambio genético). Estos pili están codificados por un
plásmido.

Esporas (Esporulación)  las esporas sólo son producidas x Bacterias Gram+ Géneros Bacillus y Clostridium (ej:
tetani, botulinum) q suelen ser bacterias de suelos. Estas bacterias pueden formas esporas en condiciones
ambientales adversas (desaparición de nutrientes): pasan de un estado vegetativo a un estado de latencia ó de 6
espora.
Espora: estructura deshidratada formada x múltiples capas q protege a la bacteria permitiéndole vivir en estado de
latencia.
La espora contiene:
- una copia completa del cromosoma bacteriano
- concentraciones mínimas imprescindibles de ribosomas y prots esenciales
- concentración elevada de calcio unido a ácido dipicolínico
Estructura de la Espora
- una membrana interna
- dos capas de peptidoglucano
- una capa proteica semejante a la queratina externa
La estructura de la espora protege al ADN del genoma bacteriano del calor intenso, irradiación, acción de enzimas y
sustancias químicas. Las esporas bacterianas son muy resistentes a los factores ambientales pudiendo mantener
durante siglos su viabilidad y además, las esporas son muy difíciles de descontaminar mediante desinfectantes
convencionales y las condiciones del autoclave.
Ciclo de Esporulación
Toda esporulación comienza con la invaginación de la membrana celular e incluye al nucleoide, dps se van
generando varias capas y se irá perdiendo agua. Hay 4 pasos fundamentales:
1) replicación del cromosoma e invaginación de la membrana plasmática
2) ADN de la futura espora queda rodeado x la membrana
3) se pierde agua de la espora y aumenta el depósito de dipicolinato de calcio (calcio único a ácido dipicolinico)
4) se van formando capas generando muerte de la bacteria y liberación de la espora (q contiene en su interior el
ADN de la bacteria q la generó).
Germinación: es la transformación de las esporas en el estado vegetativo, estimulada x alteración de continuidad de
la capa externa x factores mecánicos, pH, calor, etc requiriendo agua y un nutriente desencadenante (ej: alanina).
Cuando empieza el proceso, la espora capta agua, se hincha, pierde sus capas y produce una nueva cél vegetativa
idéntica a la cél original. Cuando se inicia la germinación, se deterioró la envoltura y se debilitó la espora, se hace
vulnerable y puede inactivarse de forma semejante a cualquier bacteria.

BACTERIAS CON ESTRUCTURAS ALTERNATIVAS DE LA PARED CELULAR

Micobacterias
- Poseen capa de peptidoglucano entrelazado y unido mediante enlace covalente a un polímero de arabinogalactano
y rodeado de una capa lipídica ceriforme de ácido micólico, factor de agregación de micobacterias, waxD y sulfo-
lipidos.
- Son bacterias ácido alcohol resistentes
- El revestimiento le brinda virulencia a la bacteria y es antifagocitico.

- Los mo pertenecientes a géneros Corynebacterium y Nocardia producen ácidos micólicos

Micoplasmas  carecen de pared celular de peptidoglucano. Incorporan en sus membranas moléculas de esteroides
procedentes del huésped.

ESTRUCTURA Y BIOSINTESIS DE LOS PPALES COMPONENTES DE LA PARED CELULAR BACTERIANA

Los componentes de la pared celular son estructuras grandes formadas x polímeros de sub-unidades (lo cual facilita
la sintesis). La sintesis de peptidoglucanos, LPS, ác teicoico y cápsula se da en el exterior de la bacteria en un espacio
alejado de la maquinaria de sintesis y las fuentes de energía del citoplasma situado en el seno de un ambiente
7
inhóspito. Para disponer de potencia y efectuar las reacciones de conexión q se producen fuera de la cél, los
precursores pre-fabricados deben estar activados x enlaces de alta energía (fosfatos) u otros medios.

Peptidoglucano (mucopéptido, mureina)  el componente ppal del peptidoglucano es la mureina. El peptidoglucano

es una malla rigida formada x cadenas lineales de polisacáridos unidas mediante péptidos. El polisacárido se
compone de disacáridos repetidos: N-acetil-glucosamina y ácido N-acetil-murámico.
En bacterias Gram+: el peptidoglucano forma múltiples capas y suele tener configuración tridimensional originando
una pared celular fuerte.
En bacterias Gram-: los peptidoglucanos tienen el espesor de una molecula y la rigidez de la malla depende del nro
de entrecruzamientos y su longitud.
La lisozima dispersa el peptidoglucano x escisión del glucano.

Ácidos Teicoicos y Lipoteicoicos  son polímeros de ribosa o glicerol modificados químicamente y unidos x grupos
fosfato. A los grupos hidroxilo del glicerol pueden unirse azúcares (colina, D-alanina) q actúan como determinantes
antigénicos (estas moléculas se diferencian utilizando Acs y puede determinarse el serotipo bacteriano).
El ácido Teicoico está unido enzimáticamente al grupo N-terminal del péptido del peptidoglucano y tb se secreta
desde las céls.

LipoPoliSacárido (LPS)  está formado x 3 regiones estructurales y la estructura del LPS se usa en la clasificación de
bacterias.
1) Lípido A: componente básico del LPS, esencial para la viabilidad de la bacteria. Responsable de la actividad
endotóxica del LPS.
La estructura básica del lípido A es idéntica en bacterias afines y tb es semejante en todas las bacterias Gram – de la
flia Entrobacteriaceae.
2) Región central / Core: es un lipo-polisacárido ramificado formado x entre 9 y 12 azúcares. La mayor parte de esta
región central es clave para la viabilidad de la bacteria.
La región central es idéntica en cada especie bacteriana.
3) Ag O: está unido a la región central y se proyecta hacia el exterior de la bacteria.4
El Ag O diferencia los serotipos (cepas) de una especie bacteriana determinada como ser el serotipo O157:H7 (Ag O:
flagelina) q identifica las cepas de E. Coli q producen SUH.

METABOLISMO BACTERIANO
El crecimiento bacteriano requiere una fuente de energía y materia prima para fabricar prots, estructuras y
membranas q conforman la maquinaria estructural y bioquímica de la cel: las bacterias deben obtener ó sintetizar
los aa, carbohidratos y lípidos para fabricar las unidades / bloques q constituyen las céls.
Las necesidades mínimas para el crecimiento son:

4
El género Neisseria carece de Ag O del LPS, entonces Neisseria es más susceptible a la lisis mediada x el
Complemento del huésped.
- una fuente de Carbono y Nitrógeno; o sea los elems esenciales de las prots, lípidos y ácidos nucleicos (CHONSP)
- una fuente de energía
- agua
- diversos iones: K, Na, Mg, Ca, Cl
- el hierro es tan importante q muchas bacterias secretan prots especiales (sideróforos) para concentrarlo a partir de
soluciones diluidas y nuestros cuerpos secuestran el hierro para reducir su disponibilidad como método de
protección

Anaerobias Estrictas Aerobias Estrictas Anaerobias 8

(Metabolismo Fermentativo) (Metabolismo Oxidativo) Facultativas
MO q no pueden crecer en presencia de O2. Ej.: MO q requieren O2 molecular para su La mayoría de las
clostridium perfringens (causante de gangrena metabolismo y crecimiento. Toleran los bacterias son
gaseosa), clostridium tetani. derivados del O2. anaerobias
Las bacterias anaerobias obtienen energía mediante Respiración: azúcares simples son facultativas: pueden
Fermentación: degradación de glúcidos en anaerobiosis descompuestos a CO2 y Agua, generando crecer en presencia
(cambia pH: generan medios ácidos), se genera poco EROs. ó en ausencia de O2.
ATP; se usan azúcares simples (glucosa, lactosa) y se Las bacterias aerobias pueden producir dos Tienen metabolismo
descomponen en acetato, lactato generando así enzimas: tanto fermentativo
medios ácidos. - Superóxido dismutasa como oxidativo. Ej:
La Fermentación sucede SIN O2 y el ácido pirúvico - Catalasa enterobacterias,
producido x glucólisis es convertido en diversos Estas enzimas pueden detoxificar el peróxido Staphylococcus spp
productos metabólicos finales en fc de las especies de hidrógeno y radicales superóxido (no
bacterianas. Hay bacterias q utilizan rutas de cambia pH) q son productos tóxicos del
fermentación complejas con formación de ácidos, metabolismo aerobio y son producidos x los
alcoholes, gases q pueden desprender olor neutrófilos y macrófagos para destruir
desagradable. bacterias
Ej: Mycobacterium Tuberculosis,
Pseudomonas Aeruginosa

Bacterias Microaerófilas  requieren poca cant de O2 para crecer y utilizan mecanismos fermentativos si bien, en
algunos casos, pueden oxidar algunos EROs para sobrevivir (no tienen catalasa pero pueden tener cant variable de
superóxido dismutasa).

GENÉTICA BACTERIANA
Genoma Bacteriano: todo el cjto de genes q tiene una bacteria ya sea en su único cromosoma como en sus elems
genéticos extra-cromosómicos (si existen).
Las bacterias presentan un único cromosoma:
- el cromosoma es ADN doble cadena circular super-enrollado q tiene fc de replicación, recombinación, expresión de
genes.
- el cromosoma se encuentra en la región citosólica llamada “Nucleoide”
- el enrollamiento del cromosoma aumenta con la enzima Supergirasa y disminuye x acción de la Topoisomerasa I
- el cromosoma no tiene intrones
- el cromosoma tiene genes lineales y policistrónicos5
- el cromosoma presenta “Islas de Patogenicidad” (genes q comparten fcs; agrupaciones de genes q tienen
determinada fc común).O sea, los genes responsables de algunos mecanismos de virulencia se organizan en un Islote
de Patogenicidad q está bajo el control de un solo Promotor para coordinar su expresión y garantizar q todas las
prots necesarias para una estructura ó proceso se producen oportunamente.
Ej.: los componentes de los sistemas de secreción de tipo III de E. Coli, Salmonella ó Yersinia se agrupan dentro de un
Islote de Patogenicidad.

5
Los operones con muchos genes estructurales son policistrónicos.
Replicón: el cromosoma bacteriano es una unidad de replicación autónoma, x eso se le puede decir “Replicón”.

Operón: unidad de transcripción; el Operón está compuesto x varios genes:

- un Promotor: secuencia de inicio para la transcripción, al cual se une el Factor Sigma para iniciar la transcripción de
ARNm. Los Factores Sigma se fijan a los Promotores para proporcionar un pto de acoplamiento a la ARN Polimerasa.
- un Operador: al Operador se unen las prots reguladoras del super-enrollamiento
Los Promotores y Operadores son secuencias de ADN al inicio de un gen (Operón) reconocidas x los Factores Sigma,
prots activadoras y represoras q controlan la expresión de un gen u operón. Así, pueden regularse coordinadamente
todos los genes q codifican las enzimas. 9

Plásmido  ADN circular q se replica de forma autónoma respecto del cromosoma bacteriano. El plásmido está en el
citosol y contiene información para la adaptación de la bacteria al medio y poder evolucionar (resistencia a los atb).

Transposones  pueden movilizarse dentro de un cromosoma ó dentro de un plásmido; presentan genes

estructurales (genes q codifican como fact de virulencia ó resistencia a los atb) y codifican la enzima Transposasa
(necesaria para el propio movimiento del transposón). El Transposón, en la genética bacteriana, tiene la fc de mutar,
mediante inserción ó deleción, integrarse así a cromosomas ó plasmidos y así ayudar a la bacteria a evolucionar
prolongando su supervivencia.

Quorum Sensing  Percepción de Quorum. Cada bacteria produce una pequeña molécula especifica y cdo hay un
nro suficiente de bacterias, la concentración de esa molécula será suficiente para coordinar la expresión génica para
apoyar a la colonia (en lugar de a la bacteria x separado). Esto puede producir efectos en el huésped.
Ejs.:
- el estímulo para la producción de biofilm en las especies de Pseudomonas es una concentración crítica de N-acil-
Homoserina Lactona, producida justamente cdo hay Quorum.
- en Staphylococcus Aureus, el aumento de concentración de un péptido cíclico se asocia a la activación de biofilm,
producción de toxinas y conducta + virulenta

MECANISMOS DE TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO ENTRE LAS BACTERIAS

El intercambio de material genético entre las céls bacterianas puede producirse a través de uno de los tres
mecanismos siguientes:

1) Transformación: primer mecanismo descubierto de transferencia genética en bacterias, en 1928 por Griffith; se
trata de la captación activa e incorporación de ADN exógeno ó extraño. La bacteria puede captar fragmentos de ADN
desnudo e incorporarlo a su genoma. La bacteria puede adquirir bloques ó cjtos de genes (Islas de Patogenicidad) q
codifican factores de virulencia y pueden estar presentes en el cromosoma bacteriano ó en plásmidos. Estas islas
tienen un contenido de HdeC diferentes al resto del ADN, lo cual permite “mejorar” la especie bacteriana.
La Transformación implica, entonces, q la bacteria captura ADN libre mediante diferentes pasos:
a) la bacteria genera un cambio en su conformación para volverse una bacteria competente (capacitada para captar
ese ADN libre), o sea la capacidad de captar ADN exógeno de manera natural permite llamar “competente” a la
bacteria. Ej.: Haemophilus Influenzae, Streptococcus pneumoniae, genéros Bacillus y Neisseria. En el caso de la E.
Coli, la Competencia aparece al final de la etapa logarítmica de crecimiento.
b) se une el ADN extracelular a la bacteria competente (captura y procesamiento del ADN exógeno)
c) integración del ADN exógeno al ADN de la bacteria, para dps expresarlo.
Nota: la mayoría de las bacterias carece de capacidad natural (competencia natural) para captar ADN y esa
competencia puede inducirse utilizando métodos químicos ó electroporación.
2) Conjugación: apareamiento ó intercambio cuasi-sexual de info genética entre una bacteria donante y una bacteria
receptora. La Conjugación produce una transferencia unidireccional de ADN desde una cél donante (macho) hta una
cél receptora (hembra) mediante el pilus sexual. Mediante Conjugación, habrá adquisición, pérdida ó intercambio de
plásmidos ó trasposones entre bacterias.
Una bacteria genera un pili sexual de modo de interactuar con otra bacteria e intercambiar ese material genético
hacia la bacteria q lo recibe y para la transferencia, participa la proteína TRA ó TRAL q clivará al ADN para q sea
movilizado al pili e ingresar en la bacteria receptora (sólo se “transmite” la porción de ADN clivado). La bacteria
receptora sintetiza la cadena complementaria de la secuencia para poder establecer un nuevo plásmido completo en 10

su interior.
En las bacterias Gram+, el pasaje de material genético se realiza mediante adhesinas proteicas (no mediante pilis).

3) Transducción: transferencia de info genética de una bacteria a otro x medio de un bacteriófago6.

La transferencia genética mediante Transducción está mediada x virus bacterianos (bacteriófagos, parásitos
intracelulares obligados, o sea virus) q se multiplica en el interior de una bacteria haciendo uso de su maquinaria
biosintética. Todos los bacteriófagos contienen ác nucleicos (ADN ó ARN).
La transducción puede clasificarse en:
- Especializada: si los fagos en cuestión transfieren genes específicos (gralmente los adyacentes a sus lugares de
integración en el genoma)
- Generalizada: si la incorporación de las secuencias es aleatoria debido al almacenamiento accidental del ADN de la
cél huésped en el interior de la cápside del fago.

BACTERIOFAGO  virus q infecta a bacterias (todas las cepas son susceptibles de infección) y cumplen un ciclo de
multiplicación dentro de la cél (evenetualmente conduciendo la lisis de la bacteria). El fago ingresa a la cél bacteriana
gracias a algún Rc (LPS, ác teicoico, ác lipoteicoico, prots ó flagelos) y, al ingresar, liberan el material genético al int
de la cél bacteriana. Van a llevar a cabo un ciclo lítico ó un ciclo lisogénico.
Ciclo Lítico  el fago ingresó a la cél bacteriana y allí se replica, de forma autónoma y utilizando su propia
maquinaria. Posterior a la encapsidación, produce la lisis y así nuevos virus quedan libres para una nueva infección.
Ciclo Lisogénico  el bacteriófago penetra en la cél bacteriana y el ADN se inserta dentro del cromosoma bacteriano
ó dentro de un plásmido gracias a una recombinación sitio-específica mediadas x integrasas codificadas x el Fago.
Ese material genético pasa a ser parte del cromosoma bacteriano.
Cuando el fago se encuentra en este ciclo, como “profago”, se mantiene en estad de latencia hta q se deterioren las
condiciones del medio pero, en algunos casos, el profago otorga beneficios a la cél huésped (mientras permanece
como profago) al incorporar nuevas fcs a su genoma. Por ej., la cepa Vibrio Cholerae es inocua pero x acción de un
fago puede volverse altamente virulenta y causa el Cólera.

Bacteria Fago Gen Fenotipo

Vibrio Cholerae Fago CTX Toxina colérica Cólera
Esterichia Coli Fago Lambda Toxina shiga like SUH - diarrea
Clostridium Botulinum Fago clostridial Toxina botulinica Botulismo
Corynebacterium diphteriae Fago beta Toxina diftérica Difteria
Streptococcus Pyogenes Fago T12 Toxinas eritrogénicas Escarlatina

6
El bacteriófago está formado x
- Cabeza (contiene el material genético)
- cuello
- Cola
- Fibras (le permiten quedar inserto)
REPRODUCCIÓN BACTERIANA
Fisión Binaria  la bacteria se divide generando dos céls hijas y cada cél hija hereda un cromosoma parcialmente
replicado de la cél donde estaba.
- el proceso se da cada 20 min a 37°, en la mayoría de las bacterias
1) la bacteria extiende su pared
2) replicación del cromosoma
3) los cromosomas quedan fijados/anclados a la membrana, uno de cada lado
4) división en dos céls hijas
Los procesos de formación de la membrana bacteriana, sintesis d epeptidoglucano y división celular están 11

relacionados e/ sí. Entonces, la inhibicipi de la sintesis de peptidoglucanos inhibe la división celular.

CURVA DE CRECIMIENTO BACTERIANO

A) Período de Latencia  las bacterias se adaptan al medio en donde están. Cdo se añaden bacterias a un cultivo
nuevo, antes de empezar a dividirse, transcurre un cierto tiempo de adaptación al nuevo ambiente.
B) Período de Crecimiento Exponencial  comienzo dps del Período de Latencia. Las bacterias crecen y se dividen
con un tiempo de duplicación característico de la cepa y determinado por las condiciones imperantes.
C) Fase Estacionaria  cuando los metabolitos del cultivo se agotan o aparece en su seno alguna sustancia tóxica
(los nutrientes comienzan a declinar y se modifica desfavorablemente el pH), en ese momento las bacterias
interrumpen su crecimiento y pasan a la Fase Estacionaria.
D) Fase de Muerte  algunas bacterias dejan de dividirse pero siguen siendo viables y a veces son insensibles a los
atb.

Decontaminación  proceso realizado para asegurar la limpieza de dispositivos, instrumentos, superficies, etc.,
mediante limpieza7 previa a proceso de desinfección y esterilización.

Desinfección  elimina organismos patógenos pero NO esporas.

Esterilización  se eliminan todas las formas de vida de mo, incluyendo esporas bacterianas.

Asepsia  se genera carencia de gérmenes

Antisepsia  eliminación de gérmenes.

Método de Estudio de Bacterias ó Dx Bacteriológico

1) Toma de muestra:
- directa: se extrae directamente de un órgano ó cavidad infectados, los cuales son sitios normalmente estériles
- indirecta: se recolecta de forma espontánea y atraviesan regiones con flora normal (ej.: orina)
- muestras de sitios con flora normal: muestras tomadas en sitios donde suele haber flora bacteriana (ej.: intestino)

2) Microscopia: debe verse la muestra en fresco (sin tinción) y teñida.

- coloración Schaeffer-Futton: permite evidenciar esporas
- Ziehl Nielsen: micobacterias

3) Aislamiento en cultivo del agente biológico

- medios de cultivo sólidos (agar) ó liquidos (caldo de cultivo)
- Medios de cultivo Simples: medios para propósitos grales, como ser medios sólidos para bacterias aerobias y

7
Limpieza: remoción de toda materia ajena a lo que se está limpiando con agua, detergente y acción mecánica.
anaerobias facultativas con nutrientes para bacterias q no son muy exigentes
- Medios de cultivo Enriquecidos: permiten crecimiento de especies bacterianas fastidiosas (requieren nutrientes
específicos para crecer)
- Medios selectivos / diferenciales: tienen suplementos q favorecen el desarrollo de determinadas especies e inhiben
el desarrollo de otras

4) Identificación a través de pruebas bioquímicas / serológicas

12
TIPOS DE MEDIO DE CULTIVO
4 grupos grales de cultivos:
1) medios NO selectivos, enriquecidos
2) medios selectivos
3) medios diferenciales
4) medios especializados

Medios de Cultivo NO selectivos enriquecidos  permiten el crecimiento de la mayoría de los gérmenes q NO

precisan condiciones exigentes:
A) AGAR SANGRE: tiene dos componentes fundamentales
1) un medio basal como ser soja tripticasa, base de Brucella
2) sangre de oveja, caballo, conejo
Se pueden añadir varios suplementos más para ampliar el nro de gérmenes q pueden cultivarse en este medio.

B) AGAR CHOCOLATE: es un agar modificado y su nombre “chocolate” es porque si al medio de base calentado se le
agrega sangre ó hemoglobina, se vuelve marrón. Permite el crecimiento de la mayoría de las bacterias, incluso
algunas q no crecen en Agar Sangre como Haemophilus y algunas cepas de Neisseria patógenas.

C) AGAR MüLLER – HINTON: medio recomendado para estudios de sinsesibilidad bacteriana a atbs.
Su composición incluye extracto de ternera y caseína, sales, cationes divalentes, almidón soluble (necesario para q
los resultados sean reproducibles)

D) CALDO TIOGLICOLATO: medio de cultivo enriquecido empleado para recuperar cantidades pequeñas de bacterias
aerobias y anaerobias.
La mayoría de las formulaciones incluyen caseína, glucosa, extracto de levadura, cisteína, tioglicolato de sodio.
Para mejorar la recuperación de bacterias anaerobias se suplementa con hemina y vit K.

E) AGAR DEXTROSA DE SABOURAUD: medio de cultivo enriquecido q contiene caseína y tejido animal digeridos
suplementado con glucosa en baja concentración; suele utilizarse un pH neutro. Se utiliza para aislar hongos.
El medio de cultivo se vuelve más selectivo de hongos si se reduce el pH y se añaden atbs para inhibir bacterias.

Medios de Cultivo Selectivos y Diferenciales  el medio de cultivo selectivo se utiliza para recuperar gérmenes
específicos q podrían estar presentes en una mezcla de gérmenes (ej.: patógeno entérico en las heces).
Los medios se enriquecen con Inhibidores q suprimen el crecimiento de los gérmenes “no deseados”.
Un medio de cultivo es Diferencial cuando se añaden ingredientes específicos q permiten la identificación del
germen en una mezcla, x ej., si quieren identificarse gérmenes q fermentan lactosa, se añade lactosa y un indicador
de pH.
Ejemplos de medios de cultivo selectivo y diferenciales:

A) AGAR MAC CONKEY: este medio de cultivo…

+) es un medio selectivo para bacterias Gram -
 +) es un medio diferencial para distinguir las bacterias q fermentan lactosa y las q no fermentan lactosa
Agar Mac Conkey es un medio q incluye peptonas digeridas, sales biliares, lactosa, rojo neutro y cristal
violeta.
 Sales biliares y cristal violeta: inhiben las bacterias Gram+ (x eso es selectivo para bacterias Gram-)
 Las bacterias q fermentan lactosa producen ácidos q precipitan las sales biliares y provocan un color rojo
del indicador rojo neutro.

B) AGAR SAL MANITOL: medio de cultivo selectivo para aislamiento de estafilococos.

El medio incluye caseína y tejidos animales digeridos, extracto de ternera, manitol, sales, rojo fenol. 13

Los estafilococos suelen crecer en elevada concentración de sal y S. Aureus puede fermentar manitol
produciendo colonias de color amarillo en este agar.

C) AGAR XILOSA – LISINA – DESOXICOLATO: es un agar selectivo para detección de Salmonella y Shigella en
cultivos entéricos.8
Este medio corresponde a extracción de levaduras con xilosa, lisina, lactosa, sacarosa, desoxicolato de sodio,
citrato amónico férrico y rojo fenol.
- El desoxicolato de sodio inhibe crecimiento de bacterias no patógenas
- Las bacterias q crecen típica// fermentan la lactosa, sacarosa ó xilosa dando colonias amarillas.
- Shigella NO fermenta estos carbohidratos, entonces sus colonias serán rojas.
- Salmonella fermenta la xilosa y tb descarboxila la lisina y genera un producto alcalino (diamino cadaverina)
y este producto neutraliza los productos de fermentación de los ácidos, entonces las colonias serán rojas.
La mayor parte de Salmonella produce ácido sulfhídrico (a partir de tiosulfato de sodio), las colonias se
vuelven negras en presencia de citrato amónico férrico y esto permite diferenciar Salmonella de Shigella.

D) MEDIO DE LOWENSTEIN – JENSEN: medio utilizado para aislar micobacterias.

Contiene glicerol, harina de patata, sales y huevos coagulados para solidificar el medio.
Se añade verde malaquita para inhibir bacterias Gram+.

E) AGAR DE MIDDLEBROOK: es un medio de cultivo de agar, también para aislar micobacterias. La diferencia
de este medio con Loewenstein – Jensen, es que Middlebrook se solidifica con Agar.
Contiene los nutrientes necesarios para el crecimiento de micobacterias (sales, vitaminas, ácido oleico,
albumina, catalasa, glicerol, glucosa) y verde malaquita para inhibir las bacterias Gram+.

F) CHROM – Agar: se trata de agares selectivos diferenciales utilizados para aislar e identificar
- especies distintas de bacterias (S. Aureus, bacterias entéricas)
- levaduras
Ejemplo: para Candida, este medio contiene cloranfenicol para inhibir las bacterias y una mezcla de
sustratos cromogénicos especiales; entonces, Candida Albicans genera colonias verdes.

G) AGAR CON INHIBIDOR DE HONGOS FILAMENTOSOS: este medio de cultivo es un compuesto enriquecido
empleado para aislamiento de hongos patógenos distintos de los dermatofitos.
Se añade cloranfenicol para suprimir el crecimiento de bacterias contaminantes.

MECANISMOS DE PATOGENICIDAD BACTERIANA

Para la bacteria, el cuerpo humano es un cjto de nichos ambientales q le brindan calor, humedad, alimento necesario

8
Ejemplo de abordaje para detección de bacterias importantes en mezcla compleja de bacterias insignificantes.
para el crecimiento.
Las bacterias fueron adquiriendo características genéticas q le permiten entrar en (invadir) el ambiente, permanecer
en un nicho (adherirse ó colonizar), lograr acceso a fuentes de nutrientes (enzimas degradativas), secuestrar iones
metálicos (hierro) y evitar rtas protectoras inmunitarias y no-inmunitarias del huésped (cápsula).
Cuando hay Quorum, las bacterias inician fcs para sustentar la colonia, como ser la formación de biofilm.
Las bacterias poseen sus Factores de Virulencia: muchos mecanismos utilizados para mantener los nichos y
productos derivados del crecimiento y colonización bacterianos producen daños e inconvenientes en el huésped
humano.
Hay bacterias q causan enfermedad mediante destrucción directa de tejido y hay bacterias q pueden diseminarse x 14

sangre y producir patogenia sistémica.

No todas las bacterias y no todas las infecciones bacterianas ocasionan enfermedad pero algunas siempre causan
enfermedad una vez producida la infección.
Algunas bacterias siempre causan enfermedad x la expresión de sus factores de virulencia. En otras ocasiones, la
producción de enfermedad depende de la cepa bacteriana y tamaño del inóculo. Algunas cepas pueden ser benignas
y otras no y el umbral para la producción de enfermedad puede ser distinto para las distintas bacterias, x ej se
necesita un millón de mo de Salmonella (o más) para q se produzca una gastroenteritis en una persona sana.
Cto más tiempo permanezca una bacteria en el cuerpo, mayor sea su nro, su capacidad de diseminarse, mayor sea su
potencial de causar lesión tisular / enfermedad, mayor será la rta inmunitaria e inflamatoria del huésped para
resolver la infección y mayor será la inmunopatogenia y gravedad de la enfermedad.

Flora Normal (microbiota)  el organismo humano está colonizado por mo, muchos de los cuales tienen importante
fc para el huésped: ayudar en la digestión, producir vitaminas (vit K), proteger al huésped de colonización x parte de
mo patógenos y activar las rtas innatas e inmunitarias apropiadas del huésped. Estas bacterias endógenas suelen
residir en aparato GI, boca, piel, ap resp sup.
Cada persona tiene una microbiotacaracteristica q se selecciona y mantiene x factores del huésped.
Las presiones de selección (tto con atb u otros fármacos), dieta, estrés pueden cambiar la composición de la
microbiota y habilitar el crecimiento de bacterias inapropiadas (ej.: Clostridium difficile, colitis pseudomembranosa)
y el inicio de rtas inmunitarias inapropiadas (ej.: enfermedades intestinales inflamatorias).

Islotes de Patogenicidad  grandes regiones genéticas en el cromosoma ó en plásmidos q contienen grupos de

genes q codifican numerosos factores de virulencia q pueden requerir una expresión coordinada. Los genes pueden
activarse por un estimulo único (ej.: T° intestinal, pH del lisosoma). El islote suele estar en el interior de un
transposón y puede transferirse como una unidad a distintos lugares dentro del cromosoma o a otras bacterias.

Bacterias Siempre causan enfermedades xq producen toxinas ó poseen mecanismos q promueven su crecimiento en
virulentas el huésped a expensas de los tejidos ó de la fc orgánica de éste (secreción de enzimas degradativas)
Bacterias Se aprovechan de las enfermedades pre-existentes (ej.: inmunosupresión) para crecer y causar enfermedad
9
Oportunistas grave.
Enfermedad  se produce a partir de la combinación de la lesión ó pérdida de tej ó de la fc orgánica causada x las
bacterias combinado ello con las consecuencias de las rtas innata e inmuniatria del huésped a la infección.
La gravedad de la enfermedad depende de la importancia del órgano afectado y extensión del daño causado x la
infección. Las infecciones del SNC son especialmente graves.

Período de Incubación  la duración del periodo de incubación es el tiempo necesario para q la bacteria y/ó la rta
del huésped produzcan lesiones suficientes para ocasionar malestar ó interferir con fcs fundamentales.

9
Victimas de quemaduras y pctes con fibrosis quística: mayor riesgo de infección x Pseudomonas Aeruginosa.
Pctes son SIDA: mayor susceptibilidad a infección x bacterias intracelulares (micobacterias especialmente).
Acciones patógenas de las bacterias
1) Destrucción Tisular  el crecimiento bacteriano genera productos tóxicos para los tejs (a partir de la
fermentación s eproducen ácidos y gases).
Hay bacterias q liberan enzimas degradativas q disgregan los tejs para obtener alimentos y promover el crecimiento
bacteriano.

2) Toxinas  componentes bacterianos q dañan directamente los tejs ó ponen en marcha actividades biológicas
15
destructivas. Las toxinas suelen unirse a Rcs específicos q inician reacciones tóxicas en un tejido diana especifico.
Las toxinas SuperAntigeno y la Endotoxina (Lipido A del LPS) promueven estimulación excesiva / inapropiada de la
rta inmunitaria innata o adpatativa.
En muchos casos, la toxina es la única responsable de los síntomas caracteristicos de la enfermedad, como ser la
“Toxina Preformada” presente en alimentos genera intoxicación alimentaria por S. Aureus y B. Cereus y del
botulismo causado por C. Botulinum. En el caso de la Toxina Preformada, los síntomas aparecen en una fase
bastante anterior q en otras formas de gastroenteritis.

3) Exotoxinas  las bacterias Gram + y Gram – son capaces de fabricar proteínas Exotoxinas como ser enzimas
citoliticas10 y prots de unión a Rcs q alteran una fc ó destruyen la cél.
En muchos casos, la Exotoxina puede estar codificada por un gen en un plásmido (toxina del tétanos, toxina
termolábil y termoestable de E. Coli) ó un fago lisogénico.

4) Toxinas A – B  estas toxinas son dimeros formados x una subunidad A (action) y una subunidad B (binding).
La porción B se une al Rc especifico de la superficie celular y dps, la subunidad A se transfiere al interior de la cél
promoviendo el daño celular.
Los tejs diana de estas toxinas suelen estar definidos siendo sus objetivos bioquímicos ribosomas, mecanismos de
transporte y señales intracelulares con efectos q comprenden desde una diarrea hta pérdida de fc neuronal y
muerte.

5) SuperAntígenos  grupo especial de toxinas. Activan a los linf T al unirse de manera simultánea al Rc del Linf T y a
la molécula ppal de histocompatibilidad de clase II en una CPA (sin necesidad de participación de un Ag).
Los Super Antigenos activan un gran nro de Linf T para liberar gdes cantidades de IL (tormenta de citosinas): IL1, IL2,
IL6, IFN gama, TNF alfa y varias quimiocinas q generan fiebre, shock, exantema y rtas pseudo inmunitarias
potencialmente mortales.
Esta estimulación de LInf T por parte de un SuperAg podría generar tb la muerte de los linf T activados, perdiéndose
así clones específicos y desapareciendo la rta inmunitaria.
Ej.: toxina del sdme del shock tóxico del S. Aureus; entero-toxinas estafilocóccicas; toxina eritrogénica A ó C de S.
Pyogenes.

Mecanismos de Virulencia Bacteriana

- Cápsula y biofilm
- Adherencia
- Invasión
- Metabolitos del crecimiento (gás, ácido)
- Toxinas
- Enzimas degradativas
- Prots citotóxicas
- Endotoxina

10
Enzimas Citoliticas:
- Enzimas capaces de romper la membrana  alfa-toxina (fosfolipasa C) producida x C. Perfringens, degrada la esfingomielina y
otros fosfolípidos de membrana.
- Hemolisinas  se inserta en eritrocitos y otras membranas celulares y las rompen.
- Estreptolisina O  genera poros, puede inducir la salida de iones y agua de las céls y alterar las fcs celulares ó inducir la lisis de
la cél.
 - SuperAg
- Inducción de inflamación excesiva
- Evasión de la rta inmune y fagocítica
- Resistencia a los Atb
- Proliferación intracelular

Puerta de Entrada de las Bacterias

Via Ejemplos
 Géneros: Salmonella, Shigella, Vibrio, Campylobacter, Listeria, Brucella
 Yersinia enterocolítica 16
Ingestión
 E. Coli enterotoxigénica
 Clostridium Botulinum
 Géneros: Mycobacterium, Nocardia, Legionella, Streptococcus
 Mycoplasma pneumoniae
Inhalación
 Bordetella
 C. pneumoniae
 Clostridium Tetani
Traumatismo
 S. Aureus
 S. Aureus
Venopunción
 Género: Pseudomonas
 Rickettsia
Picadura de Artrópodos
 Y. Pestis
 Neisseria Gonorrhoeae
Transmisión Sexual  Chlamydia Trachomatis
 Treponema Pallidum

Ejemplos de
M.O. Capsulados Patógenos Intracelulares
Staphylococcus aureus
Streptococcus pneumoniae
S. pyogenes (grupo A), S. agalactiae (grupo B) Género Mycobacterium
Neisseria gonorrhoeae Género Brucella
N. meningitidis Género Rickettsia
Haemophilus influenzae Género Chlamydia
Esterichia Coli Salmonella typhi
Klebsiella pneumoniae Shigella dysenteriae
Género Salmonella Yersinia Pestis
<yersinia Pestis
Pseudomonas aeroginosa
Cryptococcus neoformans (levadura)

STAPHYLOCOCCUS SPP
 Cocos con coloración Gram+ q se agrupan en racimos.
 Anaerobio facultativo  oxidan y fermentan HdeC
  Catalasa Positivo  desdoblan y degradan el peróxido de H q los neutrófilos utilizan como mecanismo de
ataque contra mo invasores.
A partir de esto, la bacteria puede evadir la rta inmune.
 Puede o no presentar actividad de Coagulasa
 Son inmóviles y NO forman esporas
 Colonizan piel y mucosas (ppalmente oral y nasal)
 Pueden persistir en algunas superficies y no generar patología, salvo falla de la rta inmune
 Tiene lugar cierta resistencia a agentes anti-microbianos (atb).
17

Staphylococcus Aureus
Cocos agrupados en racimos (tipo “racimo de uvas”), inmóviles, gralmente capsulados (90%). Las colonias de S.
aureus pueden tener un color amarillo / orado x los pigmentos carotenoides q se forman durante su crecimiento, x
eso su nombre aureus.
- Todas las especies del género Staphylococcus tienen la actividad enzimática de Catalasas
- S. aureus tiene actividad de Coagulasa: es la especie más común presente en las personas q tiene actividad de
Coagulasa11
- Su nicho preferencial es la parte anterior de las fosas nasales

PATOGENIA  entrada/infección, adhesión, diseminación, multiplicación, evasión, daño, salida

ENTRADA  S. Aureus coloniza piel (incl. pliegues y periné) y mucosas, siendo su nicho preferencial la parte ant de
las fosas nasales. La colonización puede ser permanente o transitoria y puede contaminar materiales estériles.
Tiene q producirse alguna lesión de las barerras naturales del ser humano para generar enfermedad.

ADHESIÓN  con respecto a la Adherencia, la pared celular del S. aureus presenta:

1) Peptidoglucano: sirve como sitio de anclaje a las prots q permiten la adhesión a nivel de las superficies celulares.
Las adhesinas se unen ppalmente a la MEC.
El proteoglicano tb está involucrado en el reconocimiento de la rta inmune y muchos son blanco de acción de atb xq
si el atb destruye la pared de la bacteria (si destruye el peptidoglucano), la pared pierde su fc y se produce la lisis
bacteriana.
- Proteina Ligadora de Penicilina (PLP): es un sistema enzimático regulador q facilita los enlaces entre c/u de las
cadenas del peptidoglucano. Si este sistema PLP se destruye, se altera la fc de la pared celular pero el PLO ha sufrido
cambios generándose cierta resistencia a los atb betalactámicos.

2) Ácidos Teicoicos: constituido x ribitol fostato. Los ácidos teicoicos están entrelazados junto con las cadenas de los
peptidoglicanos. Colaboran en la adhesión a epitelios, ppalmente con la adhesión al epitelio nasal.
Tienen fc más bien metabólica q estructural.

3) Ácido Lipoteicoico: formados x poliglicerol fosfato, se anclan en la membrana plasmática (NO en la pared). Son
muy importantes a nivel fisiológico ya q inducen la síntesis y liberación de citoquinas proinflamatorias x parte de
CPA y macrófagos, generando daño en céls no-infectadas (aumenta así la patogenicidad de la bacteria).

11
Por eso, la prueba de la Coagulasa es muy útil para el dx  PRUEBA DE LA COAGULASA: se suspende una colonia de S. aureus
en un tubo con plasma y la coagulasa se une a un factor sérico, entonces el fibrinógeno se convierte en fibrina dando lugar a un
coágulo.
Las restantes especies de Estafilo carecen de capacidad de producir Coagulasa (“estafilococos coagulasa negativos”) y son
menos virulentos, causando fundamentalmente infecciones oportunistas.
4) Cápsula: está formada x polisacáridos. Más del 90% de las cepas de S. aureus son capsuladas y hay 11 serotipos
diferentes. En el ser humano, los serotipos 5 y 8 son los más frecuentes en generar enfermedades.
La Cápsula determina la adherencia, la evasión de la rta inmune y diseminación a distancia: puede evadir la rta
innata local xq tiene fc antifagocítica, puede diseminar y aumentar así la virulencia.
Todo mo capsulado, al ingresar al organismo, puede generar bacteriemia xq puede evadir la rta inmune local y
diseminar. Entonces, las bacterias capsuladas son más virulentas.

5) Biofilm: puede adherirse a materiales estériles, como catéteres.

18
6) Adhesinas: el S. aureus presenta gran cant de prots de superficie q le facilitan la adherencia hacia los
componentes de la MEC. Hay más de 20 tipos de prots conocidas dentro de los S. aureus q pueden funcionar como
adhesinas a nivel de las superficies celulares y algunas de ellas son particularmente importantes a nivel de la
patogenia:
- Factor de Agrupamiento B (ClfB)  prot de unión especifica al epitelio nasal; permite q la bacteria se adhiera y
evita su eliminación x fricción
- Prots de Unión a Fibronectina (FnBPA y B)  le permite unirse a vegetaciones estériles ó con contenidos
plaquetarios y fibrina (sucede en las válvulas cardiacas)
- Prot de Unión al Colágeno (cna)  facilita la adherencia a tejs con colágeno tipo 1 (especialmente); esta proteína
juega un importante papel en procesos infecciosos a nivel del hueso (osteomilitis)
- Proteína A  es una proteína q se libera de la pared celular y actúa específicamente en relación a la inmunidad
adaptativa: une la fracción Fc de las Ig, entonces la Ig ya no tiene fc de opsonización de la bacteria; la bacteria no es
reconocida ni procesada.
La Prot A es importante para q tenga lugar la diseminación a distancia.
- Prots de regulación inmune  inhiben el Complejo Mayor de Histocompatibilidad. Son prots q permiten evadir las
CPA, entonces hay menor expresión de Ags bacterianos.

DAÑO
Los mecanismos q posee el S. aureus generadores de daño son:
1) EXOENZIMAS  generan destrucción de los tejs del huésped para generar invasión y obtener nutrientes.
Las enzimas son: catalasa, coagulasa, proteasas, hialuronidasa, ADNasa pero las exoenzimas q clasifican a la especie
aureus son Catalasa y Coagulasa.
A) Catalasa: permite inhibir / evadir la lisis oxidativa de los neutrófilos
B) Coagulasa: le permite a la bacteria destruir el fibrinógeno formado en el proceso de la rta inmune innata
permitiéndole así evadir los micro-trombos para disminuir la tasa de multiplicación bacteriana. Así, la bacteria puede
continuar diseminándose.
c) Proteasas (casi todas de serina): permite destruir prots y obtener monómeros para aumentar la tasa de
multiplicación.
d) Hialuronidasas, lipasas, elastasas: permiten degradar componentes de la MEC (lo cual va a proveer de energía a la
bacteria)

2) PROTS ACTIVAS DE LA MEMBRANA PLASMÁTICA (hemolisinas y leucocidinas)

Leucocidina de Panton – Valentine: es un homólogo de la Hemolisina γ pero está codificada a través de un

bacteriófago lisogénico. Es una enzima relacionada a procesos infecciosos de mayor grado invasor.

Hemolisina α Hemolisina β Hemolisina γ Hemolisina δ

Lisis de Eritrocitos: La Hemolisina β es una Forma complejos del poro Forma complejos del
forma un poro en la Esfingomielinasa: degrada sobre leucocitos. Se poro como la α y γ
membr plasm de los esfingomielina de la memb encuentra, junto con la pero es menos
eritrocitos provocando plasm produciendo degradación Hemolisina α, en el potente; actúa sobre
cambios osmóticos y de la memb plasm y lisis celular. cromosoma bacteriano, eritrocitos y
posterior lisis. entonces están bastante leucocitos
Tb puede producir poros conservadas.
en otros tipos celulares.

3) TOXINAS
Las toxinas son prots de acción a distancia y están codificadas en el cromosoma bacteriano, plasmidos y fagos
lisogénicos. 19

a) Toxina Exfoliativa A  se codifica en un fago y es termoestable

b) Toxina Exfoliativa B  se codifica en un plásmido, es termolábil.
La toxina exfoliativa genera dermatitis exfoliativa estafilocóccica (Sdme de la Piel Escaldada). Actúa sobre el estrato
granuloso de la piel, su molécula diana es la Demsogleina1 encargada de la unión estrecha de las céls del estrato
granuloso. Se liberan los componentes del estrato granuloso, se acumula liquido y se forman ampollas q después
estallan y se desprenden los estratos córneo y granuloso provocando exposición de los estratos más profundos y
generando mayor susceptibilidad a infecciones.

c) Super Antigenos  son prots capaces de generar una rta inmune exacerbada con la particularidad de q NO son
presentados por CMHII (ó sea x CPA). El Super Ag se une al TCR activando muchísimos más linfocitos T produciendo
expansión clonal del linf T activado y generando liberación masiva de citoquinas inflamatorias.
El S. aureus puede producir un nro elevado de Super Ags y uno de ellos es la Toxina 1 del sdme del shock tóxico q
produce shock tóxico (relacionado con el ciclo menstrual y tampones, x ej).
Enterotoxinas: Toxinas Estafilocóccicas q son Super Ags. La tipo A y tipo B están relacionadas con shock tóxico a
nivel entérico generando vómitos y cuadros diarreicos. Son toxinas termoestables vinculadas a intoxicación
alimentaria: es intoxicación y no infección xq la bacteria se degrada a 65° aprox, pero la toxina es termoestable y
puede sobrevivir a altas T°, entonces se ingiere la toxina y a partir de las 2 ó 3 hs de ingerir esos alimentos aparecen
los síntomas.

Regulación  Gen AGR

El gen regulador AGR está codificado dentro del cromosoma bacteriano y su mecanismos de acción es mediante el
“mecanismo de detección de quórum”, es decir detección de las condiciones ambientales del sitio donde la bacteria
se encuentra. Por ej.: si la bacteria se halla en proceso de adhesión al epitelio nasal, el gen AGR facilita la expresión
de adhesinas para q la bacteria se adhiera de forma covalente ó bien si la bacteria precisa nutrientes, el gen AGR
facilita la expresión de exoprots.
- Proteína Star  es una prot de unión al ADN, controla de forma positiva la expresión de genes AGR
- ARN Pequeños  regulan la expresión y traducción de diversos tipos de prots en los estadios de evolución y
crecimiento bacteriano.

Resistencia Antibiótica
La resistencia antibiótica tb se halla dentro de los factores de patogenia del S. aureus xq la bacteria desarrolló
resistencia a muchos atb actuales (aumentando así la virulencia del patógeno).
La resistencia está dada ppalmente contra los atb q inhiben la acción de a pared, como ser los q se dirigen a la PLP ó
los atb inhibidores de ribosomas.
Al S. aureus se lo puede clasificar según la presencia ó no de resistencia antibiótica:
- S. aureus meticilina sensible (SAMS): la meticilina es un β-lactámico de 2da generación. Los S. aureus sensibles a
meticilina son sensibles a une spectro de atb de entre la 1era, 2da y 3era generación.
Estas bacterias no son las de mayor frecuencia y las enfermedades causadas x ellas están relacionadas c/ la
transmisión comunitaria.
-S. aureus meticilina resistente (SAMR): estos S. aureus generaron resistencia a los atb de la 2da generación en
adelante, sobre todo a partir de 1960. El ppal medio de transmisión es el intrahospitalario siendo el mayor
transmisor el personal sanitario (pero en los últimos años tb aumentó el nro de casos comunitarios).
El gen mecA codifica para la proteína PBP2A (el patógeno modificó la proteína ligadora a la penicilina 2A).
El tto de estas bacterias es con vancomicina.

-S. Aureus resistente a la Vancomicina (SARPV): este tipo de S. aureus obtuvo resistencia a partir de transposones. El
fenotipo más conocido es el VanA.
20

S. aureus está muy relacionado a:

- enfermedades de piel y partes blandas
- enfermedades de vía respiratoria inferior: neumonías  la infección puede darse x aspiraciones de S. aureus de via
aérea superior ó x diseminación hematógena (x algún foco con S. areus en piel ó partes blandas y de ahí pueden
diseminar bacterias)
- bacteriemia  al poseer cápsula, es más probable q haga bacteriemia y x ende sepsis.
- endocarditis
- infecciones nosocomiales
- infecciones a través del canal de parto
- oteomielitis  causada x diseminación hematógena de la bacteria ó x lesiones contiguas (una celulitis con
compromiso muscular tiene más probabilidad de desarrollar osteomielitis), tb pueden infectarse prótesis articulares
pudiendo generarse el rechazo de la misma

Factores de riesgo:
- edad
- pctes con hemodiálisis (colonización de catéteres)
- pctes con dbt
- pctes inmunocomprometidos

Infecciones de la Piel
Pioderma Primario:
- Impétigo: afecta epidermis
- Foliculitis: afecta epidermis y dermis superficial
- Forúnculo: afecta tej superficial, anexos y tej profundo

Cuando la infección pasa a TCS y afecta la grasa, músculo:

- erisipela
- celulitis
- fascitis

Diagnóstico
Agar sangre: las colonias aparecen en 47 – 72 hs y son de aspecto granuloso de color dorado.
una vez q se identificó el género Staphilococcus pueden realizarse las pruebas bioquímicas identificatorias:
- Test de la Coagulasa
- Test de la Catalasa
BACTERIAS ANAEROBIAS
Las bacterias anaerobias son las bacterias q para crecer en la superficie de un medio de cultivo necesitan una
atmósfera sin O2 xq el O2 les resulta tóxico.
La superficie mucosa y epitelial del cuerpo humano está colonizada x bacterias anaerobias: cavidad oral, tracto GI,
vagina, tracto Genito-urinario.
Algunas de estas bacterias son “patógenos oportunistas”: se transforman en patógenos cdo encuentran un lugar en
el hospedero q les permite desarrollarse.

Causas predisponentes de infecciones x anaerobios: 21

1) Cualquier causa endógena ó exógena q produzca rotura en la continuidad de los tejs

2) Una colonización primaria q evoluciona a infección e incluye a mo aerobios, anaerobios y/o anaerobios
facultativos
3) La bacteria alcanza el torrente sanguíneo y disemina a tejs y órganos obstruyendo, x ej, capilares finos de
circulación, creando así condiciones anaerobias

Factores de Riesgo:
a) modificación en la solución de continuidad de las mucosas: espontánea, accidental, x cirugía
b) tejs debilitados
c) cualquier injuria a tejs q produzca isquemia, necrosis ó ↓ del potencial de óxido reducción
d) variaciones en los mecanismos inmunológicos de defensa del hospedero
e) características de los fact de virulencia del mo

*** CLOSTRIDIUM ***

Una bacteria es anaerobia estricta12 cdo NO es capaz de crecer en ambientes con concentración de O2 en el aire de
aprox 0.5%, como ser Clostridium y Clostridioides.

Cto más O2 tenga un ambiente, más aumenta el potencial redox (y las reacciones químicas q pueden darse en ese
contexto). Si aumenta el potencial redox en el ambiente, se inhibe el crecimiento de bacterias anaerobias estrictas.
Además, la presencia de O2 produce inhibición enzimática (x el mecanismo de la Fumarato Reductasa q es clave en
procesos de respiración anaeróbica).13

Esporulación  es una ventaja evolutiva q sólo poseen el género Clostridium y Bacillus. El proceso de esporulación
lleva aprox 8 hs y la Germinación (mecanismo inverso) sucede en mins.

MURRAY
El género Clostridium se compone de un cjto grande y heterogéneo de bacilos esporulados anaerobios, Gram+. Las
especies patógenas de importancia médica y relevancia clínica son:
- Clostridium tetani
- Clostridium botulinuum
- Clostridium difficile
- Clostridium perfringens
Los clostridios son UBICUOS en suelo, agua, aguas residuales. Forman parte de la flora microbiana normal del ap
digestivo de animales y ser humano.
La mayoría de los clostridios son saprófitos inocuos PERO algunos son patógenos para el ser humano (tetani,

12
Ojo! Aerotolerante se aplica a concentración de O2 entre 2 a 6%,
13
En la fermentación utilizada x las Gram -, hay alta producción de NADPH y el NADPH es dador de electrones. Si hubiese O2, se
consumirían los electrones, habría menos energía y eso llevaría a la inhibición del crecimiento.
botulinuum, difficile, perfringens) y la importante capacidad patógena de los clostridios se atribuye a:
- capacidad para sobrevivir en condiciones ambientales adversas mediante formación de esporas
- crecimiento rápido en un ambiente enriquecido y privado de O2
- sintesis de numerosos toxinas histolíticas, enterotoxinas y neurotoxinas.

CLOSTRIDIUM TETANI
MURRAY  mo extremadamente sensible al O2 (lo cual dificulta mucho la detección en cultivo). El factor de
virulencia fundamentes es la TETANOSPASMINA14. 22
C. tetani es ubicuo: las esporas se hallan en…
- tierra y los suelos fértiles
- pueden colonizar el tubo digestivo de seres humanos y animales
- materia fecal de animales
- fauces de perros, gatos, animales silvestres.
La exposición a esporas es frecuente pero la enfermedad es infrecuente pues existe vacuna de toxoide tetánico.

Bacilos Gram+ esporulados, anaerobio estricto. Los esporos suelen deformar el soma bacteriano: la espora esférica
a nivel terminal suele ser más ancha q el bacilo en sí y genera apariencia de “palillo de tambor”.15
- La cél vegetativa de C. tetani muere rápidamente al exponerse a O2 pero la formación de esporas le permite
sobrevivir en condiciones adversas
- Móvil (flagelado)
- NO fermenta HdeC: la bacteria tiene actividad proteolítica.
- Beta hemolítico

Factores de Virulencia
1) Tetanolisina  hemolisina lábil al O2. Se desconoce la significación clínica de la tetanolisina pero ésta es inhibida x el O2 y el
colesterol sérico. NO se asocia a patogenia.

2) TETANOSPASMINA  neurotoxina termolábil, es codificada x un plásmido. La tetanospasmina se produce durante la fase

estacionaria de crecimiento, se libera cuando la cél se lisa y es responsable de las manifestaciones clínicas del Tétanos.
La Tetanospasmina es una toxina termolábil (se desnaturaliza a 65°) y es de tipo A-B.
Se sintetiza como un péptido único q se escinde en dos subunidades, mediante una proteasa endógena, cdo la toxina es liberada
x la bacteria. Una de las subunidades se une a Rcs de ácido siálico específicos en la superficie de neuronas motoras. La toxina se
internaliza en vesículas endosómicas y se transporta desde el axón hacia el soma de la neurona motora en la médula espinal (o
sea se transporta de modo retrógrado).
La tetanospasmina inactiva las prots q regulan la liberación de los NT inhibidores glicina y GABA, traduciéndose en una actividad
sináptica excitatoria sin regulación en las neuronas motoras, provocando una parálisis espástica.
La unión de la toxina es irreversible.

3) Ag Único O (somático)  útil para detectarlo mediante IF

4) Ags del Esporo  distintos de los somáticos

5) Ags Flagelares H  no asociados a patogenia; útil para tipificar las diferentes cepas.

PATOGENIA
Los esporos están en la tierra, materia fecal de los animales, fauces de los perros, gatos y animales silvestres,
intestino humano y de animales. Los esporos ingresan al organismo humano a través de heridas, que pueden ser
minimas. Ejemplo: pinchadura con una espina de rosa, hasta heridas más importantes producidas por alambres

14
Neurotoxina termolábil q bloque la liberación de NT GABA y glicina en las sinapsis inhibitorias.
15
Para eliminar una espora, debe usarse Autoclave, al menos 15 mins a 121°C.
oxidados, mordeduras de animales o heridas cortantes que raramente pasan del tejido celular subcutáneo.
El esporo germina hacia la forma vegetativa y ésta libera tetanospasmina. Tiene lugar el transporte de
tetanospasmina por via axonal retrógrada hasta el asta anterior de la médula espinal: inhibición de la liberación
presinaptica de GABA y glicina por parte de las celulas de Renshaw.16
El Tétanos evoluciona hacia falla ventilatoria xq el diafragma tb se afecta.
La toxina tetánica inactiva las prots q regulan la liberación de los NT inhibidores.

Período de incubación del Tétanos: varía desde pocos días hta semanas y la duración del periodo de incubación
depende de la distancia de la herida primaria al SNC. 23

El Tétanos puede ser:

- Localizado17 ó Generalizado18
- Neonatal19
- Post cx

DX
El dx es clínico (igual q las enfermedades generadas x otros Clostridios).
Los resultados de los cultivos son positivos solo en el 30% de los casos ya q la enfermedad puede igual producirse
con poco nro de mo. Además, las bacterias de crecimiento lento mueren rápido cdo se exponen al aire.
En el pte, es difícil detectar la toxina xq la toxina se une rápidamente a las neuronas motoras y es internalizada.
Profilaxis  vacunación con toxoide según calendario nacional y ante heridas en ptes susceptibles.
- Administrar vacuna y suero hiperinmune ante cualquier herida y desconocimiento del estado vacunatorio del pte.
- Vacunación de mujer gestante en 5to y 7mo mes (prevención de tétanos neonatal)
Toda herida es potencialmente tetanigena.

CLOSTRIDIUM PERFRINGENS
MURRAY  bacilo gram+ que rara vez forma esporas (característica diferencial de esta especie respecto de otros
clostridios) ya sea en condición in vivo ó en cultivo in vitro.
C. perfringens se caracteriza x crecimiento rápido en cultivos con sangre y x realizar B-Hemólisis.
- Habita en ap digestivo del ser humano y animales
- amplia distribución en la naturaleza, especialmente en agua y suelo contaminados x heces
- las esporas, si se forman, pueden sobrevivir x periodos prolongados
- C. perfringens, sobre todo el tipo A, origina la mayoría de las infecciones en ser humano (incluidas infecciones de
tejs blandos, intoxicaciones alimentarias, enteritis necrosante, septicemia).

16
La alfa motoneurona da la señal de producir estimulación muscular a nivel de cualquier músculo estriado y una vez q se inicia
la actividad excitatoria, ésta no tendrá freno ya q la sinaptobrevina está comprometida (debido a la toxina) y no se libera ni
GABA ni glicina para poder frenar la estimulación muscular.
17
TETANOS LOCALIZADO: la enfermedad permanece confinada a la musculatura del lugar de la infección primaria.
18
El TETANOS GENERALIZADO es el más frecuente y el signo inicial suele ser la afectación de los músculos maseteros (risa
sardónica). Hay otros signos tempranos como babeo, sudoración, irritabilidad, espasmos de los músculos del dorso
(opistótonos).
En los pctes con enfermedad más grave se afecta el sist nerv autónomo: arritmias cardiacas, alteraciones de la TA, sudoración
profusa, deshidratación.
19
TETANOS NEONATAL: asociado a infección inicial del muñón umbilical q progresa hta generalizarse. Mortalidad infantil
superior al 90% y los sobrevivientes presentan trastornos del desarrollo (enfermedad exclusiva de países en vías de desarrollo).
Diapo Cátedra  Bacilo Gram+, esporulado, capsulado, inmóvil. Beta-Hemolítico. Fermenta algunos azúcares y
produce gas.

PATOGENIA
Esporos en la tierra, fauces de animales o el intestino humano  ingreso al organismo por heridas profundas o
perforacion intestinal  liberacion de toxinas, mayoritariamente citolitícas  destruccion tisular masiva.

24
FACTORES DE VIRULENCIA
Existen varios tipos de toxinas q suelen ser secretadas en la fase exponencial de crecimiento de la bacteria. Hay
cepas de perfringens q sintetizan ppalmente una toxina y tb hay cepas q pueden producir varias toxinas.

- Enterotoxina de Clostridium Perfringens  actúa como SuperAntígeno xq estimula la actividad de los Linfocitos T!
Si bien es sensible a enzimas q pueden degradarla.
Murray: A nivel del ribete en cepillo en intestino delgado (fundamentalmente en ileon y yeyuno; en duodeno NO), la
enterotoxina se inserta en la membrana celular, modificando su estructura, alterando la funcionalidad de la
membrana: la cél pierde iones y metabolitos pudiendo generarse daño celular ó lisis.

1) Toxina Alfa  es una lectinasa (fosfolipasa C) q lisa eritrocitos, plaquetas, leucocitos, céls endoteliales. Esta toxina
provoca:
- hemólisis intravascular masiva
- incremento de la permeabilidad vascular
- hemorragia: se potencia x la destrucción de plaquetas
- destrucción tisular (esta toxina sería la esencial en los cuadros de gangrena)
- toxicidad hepática
- disfc miocárdica (hipotensión)
La toxina Alfa es utilizada para hacer el dx de una cepa toxigénica de C. perfringens.

2) Toxina Beta  responsable de la estasis intestinal, destrucción de la mucosa c/ formación de lesiones necróticas y
evolución a enteritis necrótica.
Puede dividirse en:
- Beta 1: es letal para las céls pero es lábil y se degrada ante tripsina
- Beta 2: es citotóxica, necrótica; forma poros

3) Toxina Epsilon  es una pro-toxina q se activa x proteasas intestinales (tripsina).

- Se une a las membranas celulares y altera su permeabilidad generando ingreso de agua: edema celular (diapo
cátedra)
- Aumenta la permeabilidad vascular de la pared del tubo digestivo (Murray)

4) Toxina Iota  posee 2 partes: una parte permite la unión y la otra parte posee actividad enzimática.
Las céls internalizan la toxina y la fracción funcional se libera pudiendo alterar el citoesqueleto causando destrucción
celular y tisular gral.
Murray: la Toxina Iota aumenta permeabilidad vascular y posee actividad necrosante.

Enfermedades Clínicas

a) Infecciones diversas en tejs blandos x C. perfringens: celulitis, fascitis / miositis supurativa, mionecrosis ó
gangrena gaseosa con formación de gas. La gangrena gaseosa suele presentarse dps de traumatismos
abiertos o cerrados asociándose más a heridas contaminadas (Murray agrega intervención quirúrgica como
 causa).
El examen macroscópico del músculo muestra tej necrótico y el gas se produce x la actividad metabólica de
la bacetria q se divide rápidamente (x eso el nombre “gangrena gaseosa”).

b) Intoxicación alimentaria x Clostridios: intoxicación bastante frecuente, a veces se pasa x alto. Periodo de
incubación de 8 a 12 ó 24 hs, espasmos abdominales, diarrea acuosa20. NO hay fiebre ni vómitos. La
evolución clínica suele ser de 24 hs ó de corta duración.
La enfermedad se produce x consumo de alimentos cárnicos (ternera, pollo) contaminados x C. perfringens
tipo A productor de enterotoxina. Es importante refrigerar rápidamente los alimentos cocinados (de lo 25

contrario, germinan las esporas sobrevivientes a la cocción). Recalentar los alimentos a más de 74° destruye
la enterotoxina termolábil.

c) Enteritis Necrosante: casos descriptos en Papua Nueva Guinea, causa x Toxina Beta de C. perfringens tipo C.
Proceso necrosante agudo infrecuente q afecta al yeyuno. Cursa con dolor abdominal agudo, vomitos,
diarrea sanguinolenta, ulceración del intestino delgado, perforación de la pared intestinal q origina
peritonitis, shock.
Se asocia a consumo de carne de cerdo mal cocida, contaminada + batata (la batata posee un inhibidor
termo-resistente de la tripsina).

DX
- Cultivo en Agar Sangre y en caldo de hemocultivo: al cabo de unas 48 hs pueden identificarse colonias con halo de
doble hemólisis (Beta-Hemoliticos).
- Al M.O.: bacilos Gram+ gruesos; difícilmente se reconozcan esporas.
- Reacción de CAMP Reversa21  se realiza en Agar Sangre ovina. Se siembra en la placa una estría central con la
bacteria incógnita; en los laterales se siembra una estría (ó más) de Streptococcus Agalactiae productor de
hemolisinas. Si se observa la aparición de cabezas de flecha, se supone q se trata de C. Perfringens: las cabezas de
flecha reflejan hemólisis potenciadas x enzimas del S. agalactiae y de la bacteria anaerobia (C. perfringens es el único
q presenta este fenómeno en la prueba CAMP reversa).

CLOSTRIDIUM DIFFICILE
Diapo Cátedra: hace varios años se reclasificó taxonómicamente a la especie difficile del genero Clostridium, re-
nombrándola “clostridioides” debido a las secuenciaciones genómicas del ARN ribosomal 16S.
Clostridioides difficile y la especie mangenotii se separan del género Clostridium sensu stricto.

MURRAY: bacilo GRAM+ anaerobio q forma libremente esporas in vivo y en cultivo, es móvil y anaerobio estricto. Las
céls vegetativas mueren rápidamente al exponerse a O2.
C. difficile produce variedad de ácidos grasos volátiles q le dan un olor característico (“a corral”) al cultivo.

PATOGENIA
Las esporas se encuentran en el medio ambiente (C. difficile se halla ampliamente distribuido en el medio ambiente
y hasta el 5% de los adultos sanos lo contienen en el colon, o sea, forma parte de la microflora intestinal normal en
algunos pocos adultos sanos) y se transmiten de persona a persona, ingresando x vía oral. Esto aumenta en
pacientes hospitalizados ó en ptes con antecedentes de permanencia en geriátricos ó mayores de 65 años.

20
Diapo cátedra: diarrea espumosa y maloliente.
21
La CAMP directa se practica usando Staphylococcus en la estria central.
 - Causa el 25 – 30% de las diarreas adquiridas en medios hospitalarios

Las esporas germinan en intestino delgado, hecho estimulado x presencia de sales biliares, aa y asi, se coloniza el
intestino grueso donde Clostridioides producirá sus toxinas.
Las toxinas producidas x la bacteria s einternalizan mediante endocitosis y en citoplasma de la cél del hospedero
inactivan prots reguladoras del citoesqueleto de actina, provocan la despolimerización de la actina, pérdida del
citoesqueleto y muerte de la cél infectada.
Las prots Rho desregulan la suniones e/ los enterocitos, aumentan la permeabilidad de la mucosa colónica y se
produce la diarea típica x Clostridoidides. 26
Un efecto adicional es el producido x la activación del TNF-Alfa y de interleuquinas: esto genera aflujo de neutrófilos
y promueve la apoptosis celular y se forman estructuras pseudomembranosas q dan nombre a la entidad clínica.
La toxina B es más potente a nivel citotóxico.

Causa el 15 a 25% de los episodios asociados a tto atb: lLa enfermedad x C. difficile tb podría producirse en
individuos q reciben atb xq éste altera la microflora entérica normal, promoviendo el crecimiento excesivo de C.
difficile ó bien volviendo al sj más vulnerable ante la adquisición exógena de la bacteria.
Puede ocasionar Colitis Pseudomembranosa.

FACTORES DE VIRULENCIA
C. difficile produce dos toxinas:

1) Toxina A / Enterotoxina  quimiotáctica para neutrófilos (infiltración de PMN en ileon) con consiguiente
liberación de citosinas.
- Posee efecto citopático: altera la unión intercelular estrecha incrementando la permeabilidad de la pared
intestinal y generando así diarrea, dañando tb las microvellosidades.
2) Toxina B / Citotoxina  provoca despolimerización de la actina y destrucción del citoesqueleto celular

DX
-Detección de toxinas (la bacteria puede producir ambas toxinas):
- Enzimo-Inmuno-Análisis: resultados en 1 hora, permiten detectar toxina A y B
- Cultivos toxigénicos: demoran 3 a 7 dias
- en pctes sanos, se practica la búsqueda sistemática de la bacteria en muestras biológicas

CLOSTRIDIUM BOTULINUUM
Bacilo Gram+, esporulado, móvil, anaerobio estricto, beta-hemolítico.
Exigente a nivel nutricional.
MURRAY: se han descripto 7 toxinas botulínicas antigénicamente diferentes pero en el ser humano, la enfermedad
se asocia a los tipos A, B, E y F.
C. botulinuum suele aislarse a partir del suelo, terrenos neutros ó alcalinos ó suelos húmedos.

FACTORES DE VIRULENCIA
Neurotoxina Botulínica  es la toxina más potente conocida; inhibe la liberación presináptica de acetilcolina en sist
nerv autónomo y genera parálisis flácida.
Las toxinas botulínicas se sintetizan a un pH alcalino y se liberan, durante la lisis bacteriana, como precursor inactivo.
Dps se fragmentan x acción de proteasas bacterianas ó x enzimas digestivas (tripsina) dando 2 cadenas: una pesada y
una liviana, unidas x puentes disulfuro (similar a lo q ocurre en tétanos).
Cdo se ingiere la toxina, en el tracto digestivo se asocia a otras prots no tóxicas para formar complejos de mayor
tamaño, permitiendo su pasaje x el tracto intestinal sin ser degradada x enzimas digestivas.
La toxina se absorbe en duodeno y viaja mediante sangre ó linfa a su lugar de acción: sist nerv periférico.
El blanco de acción de la toxina botulínica es la sinaptobrevina y la sintaxina: la neurotoxina arriba a la membrana
presináptica de las neuronas motoras, donde bloquea la liberación de NT.
- Porción C terminal de la cadena pesada: responsable de la unión a Rc en la cél blanco
- Región N terminal de la cadena pesada: regula la penetración
- Cadena liviana, dentro del citosol celular: termina bloqueando la liberación de Ach. 27

El resultado de impedir la acción de la Ach (para q actúe en la zona de contacto neuro-muscular) es una parálisis
flácida. Las manifestaciones de la flacidez suelen precederse de síntomas GI: náuseas, vómitos, diarrea (ó
constipación). El diafragma tb puede afectarse y suceder la muerte.

Tipos de Botulismo:

1) Botulismo Clásico ó Alimentario: intoxicación x ingesta de alimentos con toxina preformada; se asocia a
consumo de conservas caseras (toxinas tipo A y B), a veces pescados en conserva (toxina tipo E). El alimento
puede no parecer en “mal estado” pero sólo probarlo puede causar la enfermedad.
Una cocción suficiente y adecuada de los alimentos sería una medida suficiente para prevenir el botulismo
alimentario: la toxina botulínica se inactiva a 80° durante 30 min (si bien las esporas precisan mecanismo de
autoclave xq son muy resistentes al calor).
2) Botulismo de Heridas: es menos frecuente; sucede x intoxicación de heridas con Clostridium. Los síntomas de
la enfermedad son idénticos a los síntomas de la enfermedad transmitida x alimentos si bien a nivel digestivo,
los síntomas son menos notorios. El periodo de incubación es de 4 días aprox (o más).
3) Botulismo Infantil: tiene lugar en bebes y lactantes, ppalmente RN xq carecen de un ambiente lo
suficientemente ácido a nivel estomacal como para destruir las esporas. Además, el lactante carece de mo
intestinales competidores y el patógeno puede establecerse más fácilmente. Se trataría de una toxi-infección
x la germinación de las esporas de Clostridium.
En lactantes de hta 6 meses – 1 año, se desarrolla enfermedad progresiva con parálisis flácida e insuficiencia
respiratoria; la mortalidad es baja (2%) y algunos casos se atribuyen a muerte súbita del lactante.
4) Botulismo por Inhalación: asociado a bioterrorismo. La toxina del botulismo se ha concentrado para su
diseminación en forma de partículas transportadas en aire, como arma biológica. La enfermedad x inhalación
se caracteriza x inicio rápido y alta mortalidad.

DX
- El dx es clínico
- Dx de certeza: se realiza en laboratorios de referencia, investigando la presencia de la neurotoxina en suero, heces
ó alimentos sospechados de contaminación.
- Bioensayo de ratón: la demostración de producción de toxina se realiza mediante bioensayo de ratón. Se preparan
dos alícuotas de la cepa: se mezcla una alícuota con antitoxina y se inocula x vía intraperitoneal a cada una de las dos
alícuotas de ratones. Si el tto con la antitoxina confiere protección a los ratones, se confirma presencia de toxina.
- Botulismo infantil: el mo puede ser cultivado en heces; en suero se detecta en el 90% de los casos.
- En heridas, puede cultivarse en suero o cultivando mo de la herida.

*** ANAEROBIOS NO ESPORULADOS ***

Los anaerobios NO esporulados son diferentes géneros bacterianos q tienen en común la anaerobiosis y el hábitat.
En un 95% son parte de la microbiota normal del colon; el restante 5% son enterobacterias.
Causan patología cuando atraviesan barreras epiteliales ó invaden x solución de continuidad.
Presentan sinergismo con las enterobacterias, potencian patogenicidad. Ese sinergismo determina la antibiótico-
terapia inicial en casos de “abdomen agudo quirúrgico” y casi siempre, las infecciones x estas bacterias son mixtas
(más de un mo responsable: polimicrobianas), x eso suele instaurarse un tto de amplio espectro contra bacterias
aerobias y anaerobias.
Pueden participar en:
- perforaciones intestinales
- apendicitis aguda 28

- otros cuadros quirúrgicos abdominales agudos

LOS GÉNEROS MÁS COMUNMENTE AISLADOS EN ESTAS LESIONES SON:

- Bacteroides, Bifidobacterium
- Eubacterium, Fusobacterium
- Prevotella, Porphyromonas, , Peptoestreptococcus, Propionibacterium
- Veillonela.

1er grupo de importancia:

BACTEROIDES22  La más importante es la especie frágilis (bacilo anaerobio Gram-, capsulado).
Es la más predominante en el medio (junto con género Fusobacterium, q suele acompañarse de bacterias género
Prevotella y Porphyromonas).
Bacterioides fragilis:
- coloniza ap GI de animales y humanos como miembro menor del microbioma (en sjs sanos suele estar ausente en
orofaringe ó ap genital)
- se asocia a infecciones peuro-pulmonares, intra-abdominales, genitales, piel y tejs blandos. Se caracteriza x la
formación de abcesos y bacteriemia.

PEPTOESTRPTOCOCCUS  Ppal coco Gram+ anaerobio.

COTIBACTERIUM ACNES Bacilo Gram+ patógeno, presente en piel e implicado habitualmente en acné. Puede tb
generar infecciones más profundas y más graves con eventual riesgo de progresión a infección severa y muerte:
infecciones peri-articulares ó peri-protésicas, endocarditis de válvulas protésicas.

2do grupo de importancia

- Anaerobios no espuralados q forman parte de la microflora de la cavidad oral:
1) Género Prevotella y Porphyromonas.
Destacan Porphyromonas gingivalis, asaccharolyticus y oralis.

2) Bacterias anaerobias q suelen estar en otros sitios anatómicos del cuerpo humano:
a) flora vaginal: Prevotella, Bacteroides fragilis, Fusobacterium
b) cavidad oral e intestinal: Fusobacterium (implicado tb en neumonías, afección necrotizante del parénquima
pulmonar, abcesos pulmonares)

22
Importante! El crecimiento del género Bacterioides es estimulado x bilis. Pueden crecer en Agar de bilis-esculina. La mayoría
de las bacterias aerobias y anaerobias son inhibidas x la bilis y la gentamicina en este medio. El grupo B. fragilis es estimulado x
la bilis, es resistente a gentamicina y puede hidrolizar la esculina, produciendo un precipitado negruzco.
FACTORES DE VIRULENCIA
- Polisacárido capsular
- Pili y fimbrias  para adhesión y fijación
- LPS  ppal componente de la pared celular pero carece de actividad de endotoxina  dado el bajo potencial
endotóxico del LPS, cdo hay bacteriemia x estas bacterias anaerobias, el cuadro séptico es menos grave (menos letal)
a los desarrollados x los bacilos Gran – aerobios.
- Exoenzimas (hialuronidasa, colagenasa, peroxidasa)  destruyec la MEC e intentan desdoblar los intermediarios de
O2
29

Bacterioides fragilis:
- Enterotoxina  metaloproteasa termolábil q altera y destruye las uniones de las céls epiteliales intestinales,
perpetuando el mecanismo inflamatorio diarreogénico.
- Cápsula  ppal factor de virulencia; proinflamatoria; estimula reclutamiento de fact de la inmunidad, liberación de
citoquinas (IL8) y TNF alfa promoviendo q el ambiente se vuelva + tóxico para las céls del tej. El daño puede ser
perpetuado x la liberación de elems intracelulares para q el Bacterioide se nutra y pueda persistir en la infección.

¿Cuándo se producen las infecciones x estas bacterias anaerobias?

- cuando las barreras anatómicas se interrumpen y la flora local penetra hta zonas previamente esteriles
- condiciones necesarias para q estos mo puedan “atravesar las barreras” y penetrar en tej: isquemia del tejido,
traumatismo,, intervención cx, perforación de vísceras huecas, aspiración

DX
- Cultivo bacteriológico utilizando placas ó sobres generadores de anaerobiosis: transforman el O2 en CO2,
compuestos nitrogenados y azufrados q es lo q estas bacterias precisan, además de generar un aumento de la T° q
permite tb su mejor desarrollo.

SEMINARIO Nº 4
E. coli, Proteus, Klebsiella y Enterobacter
Definición de ENTEROBACTERIACEAE
La flia Enterobacteriaceae es el grupo más grande y heterogéneo de Bacilos Gram- con importancia clínica.
Las enterobacterias son mo ubicuos: se hallan en suelo, agua, vegetación, son parte de la flora intestinal de
humanos (colon) y animales. Pueden tb colonizar transitoriamente bucofaringe y piel en sjs sanos, tb tracto genital
femenino.
Producen variedad de enfermedades en el ser humano: incluyendo 30% de todas las bacteriemias, más del 70% de
las infecciones del tracto urinario (ITU) y muchas infecciones intestinales
Esta Familia podría dividirse en “tres grupso”:
- Algunos mo se asocian siempre a enfermedad en el ser humano cuando están presentes en las muestras clínicas:
Salmonella serotipo Typhi, Shigella, Yersinia pestis
- Algunos mo forman parte de la microflora comensal normal y pueden producir infecciones oportunistas: E Coli,
Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis
- Enterobacterias q son mo comensales pero pueden convertirse en patógenas si adquieren genes de virulencia
presentes en plásmidos, bacteriófagos ó islas de patogenicidad: E. Coli
¿Cómo pueden originarse las infecciones x Enterobacterias?
1. A partir de un reservorio animal, x ej: la mayoría de las especies de Salmonella y Yersinia
2. A partir de un portador humano, x ej: especies de Shigella, Salmonella serotipo Typhi
3. A partir de diseminación endógena de los mo, x ej: diseminación de E. Coli desde el intestino hta la cavidad
peritoneal dps de la perforación intestinal

PROPIEDADES GRALES DE ENTEROBACTERIACEAE

Bacilos Gram- que NO forman esporas, capsulados ó no, móviles ó inmóviles.
Catalasa + y Oxidasa - 30
Son anaerobios facultativos: todos estos mo pueden crecer de forma erobia o anaerobia en medios no selectivos
(agar sangre) y selectivos (agar MacConkey).
La flia Enterobacteriaceae tiene requerimientos nutricionales sencillos: fermentan glucosa y reducen nitratos a
nitritos.
Comparten un Ag común: “Ag Común Enterobacteriano”.
Su estructura antigénica gral puede contener: Ag Somático O, Ags flagelares H, Ags Capsulares K.

METODOS PARA SU ESTUDIO

- Tinción de GRAM! se observan bacilos Gram-

- Fermentación de la lactosa
- Pruebas de motilidad
- Detección de ureasa
- Fermentación de azúcares (api)
- Producción de indol
- Prueba del rojo de metilo
- Producción de acetil-metil-carbinol a partir de la glucosa
- Utilización del citrato
- Maldi-tof
- Secuenciación del gen codificador del arn ribosómico 16s (como en todas las bacterias)

MÉTODOS PARA DX
Agar MacConkey  útil para distinguir a las cepas fermentadoras de lactosa de las cepas q NO fermentan lactosa (ó
lo hacen muy lentamente).
- Las cepas q fermentan lactosa se verán como colonias de color rosado – púrpura23: Esterichia, Klebsiella,
Enterobacter, Citrobacter, Serratia
- Las cepas q NO fermentan lactosa (o lo hacen muy lentamente) se verán incoloras (ó tipo amarillito): Proteus,
Salmonella, Shigella, especies de Yersinia

- Inhibe el desarrollo de la flora Gram+

- NO afecta desarrollo de enterobacterias (es lo q
Agar Mc Conkey (con sales biliares y cristal de violeta:
nos interesa en este caso)
hacen a la selectividad del medio) + lactosa (HdeC).
- Si la bacteria fermenta lactosa, se acidifica el medio
y el color vira a rojo, tiñéndose las colonias

Agar MacConkey con sorbitol  útil para detección selectiva en heces de baterías Gram- para sorbitol (colonias
incoloras) como E. Coli O 157

23
Se fermenta lactosa, se modifica el pH (se acidifica) y cambia a color rojo-rosado.
TSI  es el método de los 3 tubitos de ensayo; permite evidenciar fermentación de HdeC y formación de ácido
sulfhidrico
- Si la bacteria fermenta glucosa  se adicifica el medio y el color vira de rojo a amarillo en el fondo del tubo
(Shigella)
- Si la bacteria fermenta glucosa, lactosa ó sacarosa y además produce gas  el color vira a amarillo en el fondo del
tubo y también en la superficie (E. Coli).
- Si la bacteria fermenta lactosa o sacarosa  se acidifica el medio volviendo amarilla la superficie (Salmonella)
- Si la bacteria produce ácido sulhídrico  se observará un color negro (Pseudomona)
31

Espectometría de Masas  se trata de la secuenciación de genes específicos de cada especie (ej: gen del ARNr 16S)
ó detección de perfiles proteicos característicos para identificar la mayoría de las especies de Enterobacteriaceae.

Método INViC  consta de 4 pruebas bioquímicas para identificar diferentes bacterias.

1° prueba: Usando producción de indol a partir de triptófano como componente del medio (E. Coli)
2° prueba: Fermentación de H de C y evaluar viraje de color al acidificar el medio
3° prueba: pone de manifiesto la vía de fermentación de la bacteroa
4° prueba: evidencia la capacidad de crecer con citrato como única fuente de HdeC

FACTORES DE VIRULENCIA QUE SE ASOCIAN A LAS ENTEROBACTERIAS (Libro Murray, pág 260, 261)
- Lípido A (LPS) responsable de la actividad de endotoxina  la endotoxina es un factor de virulencia compartido x
bacterias Gram- aerobias y algunas anaerobias. La actividad de la endotoxina depende del componente Lípido A (del
LPS) liberado durante la lisis celular.
Muchas de las manifestaciones sistémicas de las infecciones de bacterias Gram- inician x la endotoxina, x ej.: la
activación del Complemento, liberación de citoquinas, leucocitosis, trombocitopenia, CID, fiebre, disminución de la
circulación periférica, shock, muerte.

- Cápsula  las enterobacterias capsuladas se protegen de la fagocitosis xq los Ags capsulares hidrofílicos protegen a
la bacteria de la superficie hidrófoba de los fagocitos. Estos Ags:
a) interfieren en la unión de los acs a las bacterias
b) son poco inmunógenos ó activan “muy poco” al Complemento

- Variación de fase antigénica  el microorganismo mismo controla genéticamente la expresión de los Ags. Estos
Ags q pueden expresarse son:
a) Ags O somáticos
b) Ags capsulares K
c) Ags flagelares H
Entonces: c/u de estos ags puede expresarse alternativamente ó no expresarse en absoluto (variación de fase). Esto
protege a la bacteria de la “destrucción celular mediada x acs”.

- Sistemas de secreción de tipo III  se describe a este sistema como una jeringa molecular de aprox 20 prots q
facilita la transferencia de factores de virulencia bacterianas dentro de la cél huésped diana.
Los factores de virulencia pueden variar e/ los diversos bacilos Gram- pero el mecanismo x el cual se introducen
estos factores de virulencia es el mismo.
En ausencia del “Sist de Secreción tipo III”, la bacteria tiene menos virulencia.

- Secuestro de factores de crecimiento  en condiciones “in vivo”, las bacterias se comportan como carroñeras
respecto a los nutrientes.
El HIERRO es un importante factor de crecimiento para las bacterias y, en el humano, el hierro está unido a prots
heme (hemoglobina, mioglobina) y tb está unido a prots quelantes del hierro (transferrina, lactoferrina). Entonces,
las bacterias contrarrestan esta unión produciendo sus propios sideróforos competitivos ó “compuestos quelantes
del hierro” (enterobactina, aerobactina).
Importante! El hierro puede igualmente liberarse desde las céls del huésped x la acción de hemolisinas sintetizadas x
las bacterias.

- Resistencia al efecto bactericida del suero  hay bacterias q pueden fácilmente eliminarse de la sangre PERO los
microorganismos muy virulentos pueden producir infecciones sistémicas y suelen ser resistentes a la acción
bactericida del suero. 32

En esto tiene mucha implicancia la Cápsula xq la Cápsula protege a la bacteria del mecanismo bactericida, tb generan
protección bacterica los factores de virulencia q evitan la unión de los factores del Complemento y su eliminación
posterior mediada x el Complemento.

- Resistencia antimicrobiana  los mo pueden desarrollar resistencia a los ATB. Esta resistencia puede estar
codificada en un plásmido transferible e intercambiarse e/ especies, géneros e incluso flias de bacterias!
En los últimos años, la adquisición de genes de resistencia ha creado algunas Enterobacteriaceae (sobre todo
Klebsiella) resistentes a muchas clases de ATB.

E. COLI
E. Coli es el miembro más frecuente e importante del género Esterichia y se asocia a múltiples enfermedades:
muchas cepas pueden producir enfermedad y algunos serotipos se asocian con mayor virulencia como E Coli O157
(causa más frecuente de colitis hemorrágica y SUH).
En el tubo digestivo existe gran cantidad de E. Coli (E. Coli comensal: microbiota normal del intestino) pero son
patógenos oportunistas cdo tiene lugar perforación intestinal y las bacterias acceden a la cavidad peritoneal. La
mayor parte de E. Coli causantes de enfermedad digestiva y extra-intestinal, lo hacen xq adquirieron fact de
virulencia específicos codificados en plásmidos ó ADN de bacteriófagos. Tb, gracias a la captación de plásmidos
pueden sumar factores de patogenicidad y de resistencia a atb.

Caracteristicas Grales
- Especie preponderante de bacilos Gram- en la flora del colon
- Bacilo con fimbrias y flagelo (es móvil)
- Algunas cepas son capsuladas (ej: cepa k1)

Método de estudio / Dx
a) Tinción de Gram: bacilo Gram-
b) Agar MacConkey: se manifiesta la fermentación de lactosa
c) TSI: vira de color amarillo en fonde y superficie (pico del medio) y se evidencia la presencia de gas
d) IMViC: E. Coli produce indol a partir de triptófano; además, el color vira a color rojo x acidificación dps de la
fermentación de HdeC

Patogenia
La E. Coli comensal forma parte de la microbiota normal del intestino PERO si hay disrupción en los tejs, puede
producir cuadros de abdomen agudo quirúrgico como apendicitis, peritonitis y sepsis.

E. Coli uropatógena: produce cistitis y pielonefritis.

La E. Coli fecal coloniza la piel perineal y puede inocularse en la flora vaginal si la higiene genital es inadecuada. Si se
inocula en la flor avaginal, desplaza a la flora Gram+ q está allí ubicada.
Se adhiere a las céls uroepiteliales mediante fimbrias tipo 1: los Rcs de estas fimbrias tipo 1 tienen como ligando un
resto de D-manosa en la capa secretoria q tapiza el urotelio. La unión q se produce es lábil ya q al renovarse la capa
mucoide, se arrastra con la orina.
Ahora, las Fimbrias P son el ppal factor de virulencia, el determinante de q estas cepas de E. Coli causen cistitis ó
pielonefritis. Las Fimbrias P se unen a restos de galactosa (componente de la membrana celular) y la unión es más
estable/estrecha.
Puede tb haber uniones afimbricas mediante adhesinas F ó Hemaglutinina.
Dps de la adhesión, mediante su flagelo, la bacteria asciende para colonizar la vejiga24 con los mismos mecanismos
de adhesión con los cuales colonizó en uretra. En la vejiga tiene lugar el desarrollo bacteriano: en la orina halla los
nutrientes necesarios y dps de producir sus desechos metabólicos, cambiará el pH urinario tornándolo ácido (por 33

ello duele al orinar, hay poliaquiuria, inflamación).

VIROTIPOS

E. COLI ENTERO-HEMORRÁGICA (ECEH)  el hábitat normal de este virotipo es el intestino de animales bovinos,
entonces la bacteria se transmite con la carne picada, salame, lácteos no pasteurizados, verduras ó frutas crudas
contaminadas con materia fecal de bovinos.
De ubicación colónica. No invade los enterocitos pero altera las microvellosidades.
Produce TOXINA SIMIL SHIGA25.
El tipo O157:H7 se asocia a SUH26  serotipo más frecuente hallado en el ser humano pero como los serotipos
varían según las zonas geográficas, el dx de la enfermedad se basa más en la detección de la toxina Shiga y no tanto
en la sero-tipicación de las cepas sospechosas.
La enfermedad es más frecuente en meses cálidos y niños menores de 5 años.27
La enfermedad puede presentarse: desde una diarrea leve no complicada hta una colitis hemorrágica + dolor
abdominal intenso + diarrea sanguinolenta. La enfermedad GRAVE se asocia a O157:H7.
La incubación es de alrededor de 3, 4 días, a veces aparecen vómitos pero NO aparece fiebre alta. A los días días de
inicio de la enfermedad, aparece la diarrea sanguinolenta con intenso dolor abdominal y los síntomas pueden
desaparecer en el transcurso de 10 días.

SHU  trastorno q se caracteriza x insuficiencia renal aguda, trombocitopenia, anemia hemolítica microangiopática.
Sería una complicación q afecta aprox al 10% de los niñores menores de 10 años.
Si hay resolución, pueden permanecer secuelas como disfc renal, HTA y disfc del SNC.
La toxina responsable del SUH posee una subunidad A y cinco subunidades B: las B se unen a un glucolipido Gb3
presente en la cél huésped existiendo gran cant de Rcs de Gb3 en vellosidades intestinales y céls endoteliales del
riñón.
Cuando se internaliza la subunidad A, la toxina se escinde en 2 moléculas:
- el fragmento A1 se une al ARNr 28S e interrumpe la sintesis de proteínas
La toxina destruye las céls endoteliales del glomérulo y esas lesiones de las céls endoteliales induce activación de las
plaquetas y acumulación de trombina, dando lugar a disminución del filtrado glomerular e insuficiencia renal aguda.
Además, la toxina Shiga estimula la producción de citoquinas inflamatorias (TNF alfa, IL6) lo cual aumenta la
expresión del Gb3 de la subunidad B.

24
La vejiga es un medio estéril.
25
Toxina simil Shiga: es codificada x un bacteriófago. Tiene estructura A-B. Inhibe irreversiblemente la fc ribosómica llevando a
la apoptosis celular.
26
Shigella dysenteriae tipo 1 puede producir esta toxina, generando tb SUH. Ambas toxinas se adquieren mediante
bacteriófagos lisogénicos.
27
Según Murray la ingesta de menos de 100 bacterias puede ya causar enfermedad y se ha descripto transmisión de persona a
persona, pág 264.
E. COLI ENTERO-INVASIVA (ECEI)  ubicación colónica. Las cepas patogénicas presentan relación estrecha con la
spropiedades fenotípicas y patógenas de Shigella.
Las bacterias pueden invadir las céls entéricas mediante fagocitosis y cuando se rompe el fagosoma, se libera al
citoplasma ceular donde se multiplica y puede diseminar lateralmente hacia céls contiguas. Entonces, esta cepa
puede invadir y destruir el epitelio colónico (provocando necrosis) para producir la enfermedad, caracterizada
inicialmente x diarrea acuosa; pero algunos ptes evolucionan a la forma disentérica de la enfermedad caracterizada x
fiebre, espasmos abdominales presencia de sangre y leucocitos en heces.
Los genes plnv son transportados en un plasmidos y son los genes q median la invasión del epitelio del colon. El
proceso de destrucción de las céls epiteliales con infiltración inflamatoria podría generar ulceración colónica. 34

E. COLI ENTERO-TOXIGÉNICA (ECET) es necesario un alto inóculo para producir enfermedad, asiq las infecciones
se adquieren x consumo de aguas ó alimentos contaminados x heces. NO se produce transmisión de persona a
persona. La ppal fuente de estas bacterias son las ensaladas y es la ppal causa mundial de diarreas bacterianas en
menores de 5 años y viajeros.
Se adhiere al epitelio del intestino delgado, produce toxinas que aumentan el AMPc intracelular con la consiguiente
excreción de iones y agua (diarrea acuosa).
ECET sintetiza dos clases de enterotoxinas:
- Toxinas termoestables  se une al Rc de la guanilato ciclasa provocando aumento del GMPc y posterior hiper-
secreción de liquidos + inhibición de la absorción de liquidos.
- Toxinas termolábiles de estructura A-B (similar a la toxina del cólera)  está formada x una subunidad A y 5 sub-
unidades B. las sub-unidades B se unen al mismo Rc q la toxina del cólera (Gangliósidos GM1) y tb a otras glucoprots
de superficie de las céls epiteliales del itnestino delgado. S eproduce la endocitosis y dps, la subunidad A atraviesa la
membrana de la vacuola e interacciona con una prot de membrana q regula la adenilato ciclasa. El resultado es el
aumento de AMPc produciendo: aumento de secreción de cloruro, disminución de la absorción de cloruro y sodio
manifestándose en diarrea acuosa.
La exposición a la toxina genera secreción de prostaglandinas y producción de citosinas inflamatorias generando
mayor pérdida de liquido.

E. COLI ENTERO-PATÓGENA (ECEP) NO invasiva. Se adhiere al enterocito en intestino delgado produciendo
destrucción de microvellosidades x desarreglo del citoesqueto (afectando los filamentos de actina). Disminuye la
superficie de absorción de electrolitos y agua, los cuales persisten en la luz intestinal generándose diarrea acuosa.

E. COLI ENTERO-AGREGATIVA (ECEA)  las bacterias se agregan entre sí, se aglutinan, en forma de parches, sobre el
epitelio del intestino delgado. Aumenta así la secreción de mucus a nivel de la superficie epitelial y se dificulta la
absorción intestinal.
la enfermedad se caracteriza x diarrea secretora acuosa, gralmente con céls inflamatorias; suele cursar con fiebre,
náuseas, vómitos y dolor abdominal. Tras la adhesión al epitelio, se secretan citoquinas q reclutan neutrófilos y se
produce la progresión a diarrea inflamatoria. El proceso puede ser agudo o progresar a una diarrea persistente,
sobre todo en niños y pctes VIH.
Murray: es una bacteria asociada a diarrea crónica y retraso de crecimiento en niños

E. COLI DE ADHERENCIA DIFUSA (ECAD)  se ubica en intestino delgado. Induce la formación de proyecciones de la
membrana celular que engloba a las bacterias generando alteración de la superficie de absorción.
DX
EN INFECCIONES URINARIAS: toma de muestra, envío al laboratorio, sedimento urinario, cultivo y antibiograma.
EN DIARREAS: toma de muestra, envío al laboratorio, coprocultivo.
EN CUADROS ABDOMINALES AGUDOS que evolucionaron a peritonitis y a sepsis: eventual punción abdominal y
hemocultivos.

35
PROTEUS SPP
Estas bacterias forman parte de la flora del colon en humanos (sanos y no sanos).
- Bacilos Gram- muy móviles (forman películas en medios comunes y no colonias, salvo en el medio CLDE)
- NO capsulados
- NO fermentan lactosa

Factores de Virulencia:
- LPS
- flagelos, fimbrias, pilis
- prots de membrana
- hemolisinas
- Productora de Ureasa  factor ppal de patogenia! La ureasa degrada la urea produciendo amoniaco28. El amoniaco
genera q la orina se vuelva más alcalina y esto mismo favorece la proliferación de la bacteria y tb favorece la
precipitación de compuestos con consiguiente formación de cálculos (de estruvita y calcio).
Tb se asocia a la formación de biocapa en sondas.

Patogenia de Infecciones Urinarias en la mujer

Colonización de la piel del periné y del meato urinario  ascenso por la uretra  infección de vejiga 
eventualmente ascenso por los uréteres  infección de la pelvis renal

Infecciones urinarias  90% x E. Coli (causante ppal) y 10% x Proteus (2do causante ppal)
(una 3era causante sería Klebsiella)

Estudios laboratorios y DX
- Tinción de Gram: se ven bacilos Gram-
- Agar Mac Conkey: tendrán lugar dos características:
1) el color del medio no vira a ningún color xq Proteus NO fermenta lactosa
2) NO se forman colonias
- En medio sólido CLDE puede visualizarse formación de colonias (perladas y amarillas)

EN INFECCIONES URINARIAS: toma de muestra, envio al laboratorio, sedimento urinario, cultivo y antibiograma

KLEBSIELLA SPP
Coloniza superficies mucosas y eventualmente piel pero es un patógeno oportunista q NO afecta a sjs sanos.

28
Murray: la ureasa escinde urea en CO2 y amonio. Esto eleva el pH urinario, l cual precipita el Mg en forma de cristales de
estruvita y apatita dando formación de CALCULOS RENALES. El aumento del pH urinario tb es tóxico para el urotelio.
Las bacterias pertenecientes al género Klebsiella poseen una cápsula notoria q provee un aspecto mucoide a las
colonias aisladas y la mayor virulencia de los microorganismos in vivo.
Varias cepas de Klebsiella se han vuelto muy resistentes a atb (beta lactámicos, incluidos carbapenémicos).

Caracteristicas
- Bacilos Gram-
- capsulados: forman colonias mucosas
- inmóviles
- fermentan lactosa 36

Especies de importancia médica

Klebsiella pneumoniae y oxytoca asociada a infecciones intra y extrahospitalarias como neumonía lobar. Las
neumonías x Klebsiella suelen implica la destrucción necrótica de los espacios alveolares, producción de caividades,
esputos hemopticos.
Tb puede producir infección de tejs blandos e infecciones urinarias.
Klebsiella ozaene  causante de rinitis crónica atrófica

Klebsiella granulomatis puede generar úlceras remedando el chancro de la sífilis.

Factores de Virulencia. Patogenia y Patología

- Cápsula y LPS
- Infecciones urinarias (1° E. Coli; 2° Proteus; 3° Klebsiella) favorecidas x sondas vesicales en ptes hospitalizados
- Neumonías sobre todo en huéspedes con infecciones previas
- Eventualmente, sepsis

ENTEROBACTER
ESPECIES DE IMPORTANCIA MÉDICA: cloacae y aerogenes

Características biológicas
Las de la familia y:
- Bacilos Gram-
- no capsulado y móvil
- fermentadoras de lactosa
- causa de infecciones intrahospitalarias y de infección de heridas quirúrgicas
- resistentes a antibióticos.

Dx
Agar Mac Conkey  vira a rojo xq Enterobacter fermenta lactosa.

Otras enterobacterias de importancia médica: Serratia spp, Providencia spp, Citrobacter spp., Morganella spp,
Yersinia spp.
Las infecciones primarias producidas x Entrobacter, Citrobacter, Morganella, Serratia ó Yersinia son infrecuentes en
sjs inmuno-competentes! Con mayor frecuencia, suelen causar infecciones nosocomiales en neonatos y ptes inmuno-
deprimidos.
 SEGUIMOS CON ENTEROBACTERIAS: Salmonella y Shigella

SALMONELLA SPP
Presenta las características biológicas de la familia Enterobacteriaceae.

-Bacilo Gram-
- Móvil: tiene flagelo
- NO capsulada; NO fermenta lactosa 37
- Los Ags Somáticos O y los Ags Flagelares H se combinan dando dos especies: Salmonella bongori y Salmonella
entérica.
La Salmonella entérica es la q causa infecciones en humanos.
Salmonella Entérica: hay más de 1500 serovares pero los asociados a infecciones en humanos son:

Salmonella asociada a Fiebre Tifoidea29 Salmonella NO asociada a fiebre tifoidea

- Salmonella entérica serovar typhi (genera - Salmonella entérica serovar typhimuruim
infección sistémica) - Salmonella entérica serovar enteritidis (genera
- Salmonella entérica serovar paratyphi infección localizada y gralmente autolimitada)
- Serovar Sendai

- Se desarrolla en medios diferenciales (colonias negras en SS Agar) y produce sulfuro de H a partir de aa azufrados

Factores de Virulencia
- LPS (endotoxina)
- AG polisacárido capsular “Vi”
- Adhesinas
- Diversas fimbrias:
a) facilitan la adherencia a microvellosidades del enterocito
b) intervienen en la adherencia a las Placas de Peyer
c) facilitan adherencia e/ bacterias
d) algunas fimbrias tienen una proteína de superficie q contribuye a la resistencia de la bacteria ante la lisis x el
Complemento
- Proteínas que se inoculan a la celula eucariotica por el “sistema de secreción de tipo III” (y otros sistemas de
secreción) y alteran al citoesqueleto celular. Están codificadas por islas de patogenicidad.30

Salmonella entérica, serovar typhi: PATOGENIA

La bacteria se halla en agua / alimentos contaminados c/ materia fecal humana. Ingresa al organismo vía oral
mediante la ingesta. En el caso de niños, puede ser transmisión directa fecal – oral.
Ppales fuentes de infección en el ser humano: aves de corral, huevos, productos lácteos, alimentos preparados sobre
superficies contaminadas (tablas de cocina donde se cortan carnes crudas).
Una vez ingerida, la bacteria penetra en la mucosa del intestino delgado teniendo como destino la Célula M de las
Placas de Peyer. La bacteria pone en juego ahora el Sist de Secreción tipo III (codificado x Isla 1) para “alterar el
citoesqueleto celular” y lograr la internalización; entonces, queda englobada en una vesícula (vacuola endocítica)

29
Placas de Peyer hiperplásicas en intestino delgado.
30
-Sistema de Secreción tipo III: codificado x Isla de Patogenicidad 1. Es inducido extracelularmente en el ambiente intestinal.
Permite la invasión del enterocito y participa en los procesos de enterocolitis.

Sistema de Secreción tipo III codificado x Isla de Patogenicidad 2: es inducido intracelularmente (dentro de la vacuola). Permite
la sobrevida intracel de la bacteria Salmonella typhi q genera infecciones sistémicas.
donde se replica. A Nivel intracelular, se ponía en juego el Sist de Secreción tipo III (codificado en Isla 2) y permitía, a
través de la membrana del fagosoma, inyectar al citoplasma del macrófago proteínas bacterianas para alterar la
vacuola fagocitica para permitir la supervivencia y replicación. Esto permite q la bacteria disemine x el organismo
dentro del macrófago mediante linfa ó sangre (cuadro séptico) y así colonizar órganos del sist retículo-endotelial
(bazo, hígado, méd ósea, ganglios).
La bacteria tb puede dirigirse vía hemática hacia la vesicula biliar y generar continua secreción de bacteria a través
de la bilis, volviendo así hacia el intestino y generando daño local: úlceras intestinales, cuadros de hemorragia.
La bacteria es eliminada x materia fecal.
En el 5% de los casos los pacientes quedan como portadores crónicos asintomáticos, con las bacterias en la vesícula 38

biliar (colecistitis crónica linfo-folicular).

Enfermedades Clinicas
- Gastroenteritis
- Septicemia: con mayor frecuencia producida x especies S. thypi, paratyphi, chileraesuis. El riesgo es más alto en
pediátricos, ancianos e inmuno-deprimidos.
- Fiebre Tifoidea (S. typhy)
- Fiebre Paratifoidea (S. paratyphi): versión más leve de fiebre tifoidea
- Colecistitis crónica linfo-folicular

Salmonella entérica, serovar enteritidis: PATOGENIA

Ingreso x vía oral tras ingesta de carne (especialmente picada) ó huevos de gallina, contaminados. La bacteria pasa al
tubo digestivo y produce un cuadro diarreico agudo x liberación de citoquinas e invasión de enterocitos mediante
Secreción de tipo III (inyección de toxinas).

Salmonella spp.: DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

Ante una infección bacteriana con producción de enterocolitis31 se sugiere realizar coprocultivos cuando:
- existe una sola deposición con moco, pus o sangre
- la infección cursa con un cuadro febril
- el número de deposiciones es muy frecuente
- se da en inmunocomprometidos y en los extremos de la vida

Método de Estudio
- Tinción de Gram: visualización de bacilos Gram- dispuestos en cadena
- Aislamiento de bacteria mediante SS Agar (Agar Salmonella – Shigella): Salmonella produce sulfuro de H y sus
colonias se visualizan en SS Agar.
- Agar Mac Conkey (como Salmonella es enterobacteria, puede cultivarse en medios selectivos)

SHIGELLA spp
Respecto a Shigella, hay 4 especies y se han descripto aprox 50 serogrupos / serotipos basados en el Ag O:
S. dysenteriae
S. flexneri

31
Esto es válido para cualquier gastroesnteritis bacteriana, no sólo por salmonella spp.
S. boydii
S. sonnei
Según Murray, estas cuatro especies constituyen biogrupos dentro de la especie E. Coli dado su genoma similar pero
se conservan los nombres históricos xq su designación como “E. Coli” podría generar confusiones.

Características Biológicas
Tiene las características de la Familia Enterobacteriaceae.
- Bacilo gram negativo, inmóvil
- Fermentan glucosa sin producción de gas 39
- NO fermentan lactosa
- Resiste el pH ácido
- Shigella es patógeno primario: no integran la biota normal
- El humano es el único reservorio en la naturaleza

Se desarrolla especialmente Shigella dysenteriae (Grupo A) xq posee los genes q codifican para la toxina Shiga y
genera los cuadros de disentería.

Factores de Virulencia
- LPS (Endotoxina)
- Toxina Shiga32 (exotoxina)
a) Posee estructura AB
b) Codificada x un plásmido
c) Ingresa x endocitosis
- Sistema de Secreción tipo III: interviene en la secreción de cuatro prots (Ipa A, B33, C y D) en las céls epiteliales y
macrófagos. Estas prots generan ondulación de la membrana de la cél diana permitiendo q la bacteria sea engullida.
Shigella lisa la vacuola fagocitica y se replica en citoplasma de la cél del huésped. Se reorganizan los filamentos de
actina en la cel del huésped y la bacteria es empujada (a través del citoplasma) hta la cél adyacente, o sea q hay
pasaje de la bacteria de una cél a otra cél.
Así, Shigella tiene protección contra el ataque inmunitario xq además pueden sobrevivir a la fagocitosis al inducir la
apoptosis.

Patogenia
Transmisión fecal-oral de persona a persona, principalmente mediante manos contaminadas y tb x agua y/o
alimentos contaminados. Un bajo inóculo es suficiente para producir la enfermedad (dada su resistencia al ph ácido
del estómago), entonces la shigelosis se transmite rápidamente en comunidades con higiene personal inadecuada y
normas sanitarias escasas.
La bacteria invade los enterocitos y las Céls M. Mediante un proceso de translocación, la bacteria induce su propia
captación pasando x las Céls M y así induce la apoptosis de los macrófagos subepiteliales.
Entra en juego el mecanismo de Secreción tipo III (ver arriba) para la propagación bacteriana. Todo esto genera, a

32
TOXINA SHIGA  las cepas de S. dysenteriae producen la exotoxina Shiga. Al igual q la toxina de E. Coli enterohemorrágica, la
toxina Shiga tiene una subunidad A y cinco subunidades B. Las subunidades B se unen a un glucolipido de la cél del huésped
(Gb3) y facilitan la transferencia de la subunidad A al interior celular.
La subunidad A escinde el ARNr 28S de la unidad ribosómica 60S evitando así la unión del aminoacil-ARN de transferencia y
alterando la síntesis de prots.
La ppal manifestación de la actividad de la toxina son los daños al epitelio intestinal; tb puede causar daño a las céls
endoteliales glomerulares generando insuficiencia renal (SUH).
33
Activa caspasa I apoptótica para generar la apoptosis celular y supervivencia de la bacteria
nivel intestinal, aumento de producción de citoquinas y, sumado al efecto de la toxina, se reclutan más PMN en el
sitio de infección, se altera la barrera epitelial, aumenta el proceso inflamatorio y se genera el cuadro típico de
disentería de Shigella (disentería basilar).
La mucosa del colon presentará petequias, inflamación.
La patología es local (NO disemina vía hemática) pero la toxina sí puede pasar a sangre pudiendo llevar al riñón y
causar SUH.

Los signos y síntomas aparecen 1 a 3 días dps tras ingerir las bacterias. Shigella coloniza primero intestino delgado.
La shigelosis se caracteriza x espasmos abdominales, tenesmo, diarrea, fiebre, heces sanguinolentas. 40

Método de Estudio y Dx
- Tinción de Gram: bacilos Gram-
- Cultivo en SS Agar: Salmonella exponía colonias oscuras y SHigella exponía colonias opacas y claras
- Al ser enterobacteria, a Shigella de la puede cultivar en Agar Mac Conkey dando colonias transparentes ó claritas

HELICOBACTER pylori
- Bacilos curvos, gram negativos
- móviles: múltiples flagelos unipolares
- catalasa + oxidasa + ureasa +
- NO fermentadores de glúcidos PERO pueden metabolizar aa mediante fermentación (Murray, pág 290)
- crecen en medios enriquecidos, como Agar Columbia.
Murray: el crecimiento de H. pylori necesita un medio complejo complementado con sangre, suero, carbón, almidón
ó yema de huevo, condiciones microaerófilas (O2 bajo y CO2 aumentado) y un intervalo de T° entre 30 – 37°.34
- Bacterias microaerófilas. Su ambiente natural es el mucus gástrico donde hay bajos niveles de O2
- LPS en la membrana externa (ver abajo)

FACTORES DE VIRULENCIA
- Flagelo y Ureasa  todos los Helicobacter gástricos, obviamente H. pylori, son muy móviles (movilidad en
sacacorcho) y produce gran cantidad de ureasa! Las prots del flagelo la protegen de la acidez. Además, la ureasa
forma amoníaco q tb la protege de la acidez. La ureasa es pro-inflamatoria.
Estas propiedades son importantes para la supervivencia en ácidos gástricos y el rápido movimiento a través de la
capa de moco viscoso hacia un entorno de pH neutro.

- Aglutininas y adhesinas q permiten la adherencia

- LPS  se encuentra en la membrana externa y consta de a) un lípido A, b) un oligosacárido central y c) una cadena
lateral O.
El lípido A de H. pylori tiene baja actividad endotóxica (en comparación con otras bacterias Gram-).
La cadena lateral O se parece, a nivel antigénico, a los ags del grupo sanguíneo de Lewis pudiendo proteger a la
bacteria de la eliminación inmunitaria.

34
De todos modos, resulta difícil aislar Helicobacter en cultivo e identificarlas mediante pruebas bioquímicas, entonces la
mayoría de las enfermedades provocadas x H. pylori se confirman con técnicas distintas al cultivo.
- Proteina VacA (vacuolizante)  es una citotoxina; esta citotoxina es endocitada x las céls epiteliales y causa
lesiones en dichas céls x la formación de vacuolas: induce formación de vacuolas ácidas en el citoplasma de las céls
del epitelio gástrico.

- Gen asociado a la Proteína CagA y Proteína CagA  está codificada en una isla de patogenicidad cromosómica de
aprox 30 genes y estos genes codifican una estructura (Sistema de Secreción tipo VI) q actúa como una jeringa para
inyectar la proteína CagA en las céls epiteliales del huésped: una vez en la cél, interfiere con la estructura del
citoesqueleto normal de las céls epiteliales.
41

- Murray: Los genes cag tb inducen la producción de IL8 q atrae neutrófilos: la liberación de proteasas y moléculas
reactivas de O2 contribuye a la gastritis y úlceras gástricas.
Diapo de Cátedra: menciona la Proteína Nac como atrayente de neutrófilos.

PATOGENIA
El ser humano es el ppal reservorio de H. pylori. Y la transmisión interhumana, probablemente sea x vía fechal – oral.
Según Murray, la bacteria se aisló x primera vez en 1984, en cultivo.
La tasa más alta de portadores se encuentra en países en vías de desarrollo: 70 a 90% de la población colonizada
pero estaría disminuyendo gracias a la higiene y tto activo de individuos colonizados.35
La colonización podría durar toda la vida salvo q el huésped reciba un tto especifico.
Tiene lugar la secreción de enzimas por la bacteria: mucinasa, proteasa, lipasa y tb secreción de ureasa. La ureasa
forma amoníaco que neutraliza el pH ácido del estómago.
H. pylori llega a la mucosa gástrica mediada por el flagelo y se adhiere a la mucosa gástrica mediante proteínas de
membrana externa.
El LPS bacteriano aumenta la adherencia e induce gastritis.
La inyección de factores bacterianos a las células gástricas por el sistema de secreción del tipo IV (similar a los pili)
libera los efectores bacterianos CagA y VacA  gastritis.

H. pilory tiene notable capacidad de colonizar de x vida el estómago de personas no tratadas. Múltiples factores
contribuyen a la colonización gástrica, inflamación, alteración de la producción de ácido gástrico, destrucción tisular
(característica de la enfermedad x H. pylori).

ENFERMEDADES CLÍNICAS
- Gastritis: infiltración de neutrófilos y céls MN en la mucosa gástrica.
La gastritis crónica termina sustituyendo la mucosa gástrica normal x fibrosis con proliferación de un epitelio de
tipo intestinal: este proceso aumenta el riesgo de Carcinoma Gástrico.
Las infecciones x H. pylori tb se asocian a infiltrado linfoide de la mucosa gástrica y en pocos casos podría producirse
una población monoclonal de linf B q evolucionan a Linfoma MALT.
- Úlcera gástrica: suelen localizarse en focos con inflamación intensa, gralmente e/ cuerpo y antro
- Úlcera duodenal

DX

35
La diapo de la cátedra menciona q el 50% de la población estaría colonizada, en algunas regiones.
 1) Fibrogastroscopía y biopsia endoscópica (coloración de Giemsa o coloración argéntica de Whartin-Starry36 en
los cortes histológicos)
3) CLO-TEST (detección de ureasa en el tejido gástrico obtenido por biopsia)
4) Prueba de la ureasa en aire espirado  consumo de solución de urea marcada con un isótopo (Carbono 13 o
14); la urea se hidroliza x la ureasa bacteriana y mediante el alimento se elimina el CO2 marcado.
5) Serología  IgA, IgM, IgG
6) Amplificación genómica mediante PCR

42

VIBRIO CHOLERAE
- bacilo gram negativo curvo
- flagelado
- no esporulado
- crece en medios especiales
- aerobios y anaerobios facultativos
- 2 biotipos (en base al “antígeno somático O”): Clásico y Tor.
Clásico: genera una enfermedad más severa x periodos más cortos de tiempo.
Tor: genera una enfermedad más moderada q afecta x periodos más largos de tiempo.

Los Vibrios toleran un rango de pH entre 6,5 a 9 y son sensibles a los ácidos gástricos. Entonces, para desarrollar un
cuadro patológico se precisa un gran inóculo de mos. Ahora, si la producción de ácido clorhídrico esta disminuida ó
neutraliza, el pte es más vulnerable.

FACTORES DE VIRULENCIA
- Flagelo Polar  permite motilidad

- Pili co-regulado x Toxina (TCP: toxic co-regulated pilus)  la virulencia de V. cholerae se asocia a una secuencia de
genes entre los q está el TCP sobre la llamada “Isla de Patogenicidad de Vibrio” seguida de la infección x el
bacteriófago CTX.
Este bacteriófago CTX codifica los genes para las dos sub-unidades de la toxina del cólera: ctxA y ctxB.
El TCP actúa de Rc sobre la superficie celular del bacteriófago (lisogénico) permitiéndole moverse hacia el int de la
cél bacteriana donde se integra en el genoma de V. cholerae.

El locus cromosómico del bacteriófago contiene tb otros factores de virulencia (gen ACE y gen ZOT):

- Gen ACE (Enterotoxina accesoria del cólera)  es una ATPasa, produce aumento de la secreción de liquido
- Gen ZOT (Toxina de la Zónula Oclusiva)  relaja las uniones estrechas de la mucosa del intestino delgado,
incrementando así la permeabilidad intestinal

- Toxina Colérica  es de tipo AB y es estructuralmente similar a la enterotoxina termolábil de E. Coli entero-

toxigénica. La toxina colérica de tipo AB tiene un anillo de 5 sub-unidades B idénticas y ese anillo se une a los Rcs del
gangliósido GM1 en la superficie de las céls epiteliales intestinales.
La porción activa de la sub-unidad A se internaliza, interacciona con Prots G generando catabolismo del ATP en AMP
originando hiper-secreción de agua y electrolitos.

36
Las bacterias se verán de color negro.
La acusada pérdida de liquido provocaría normalmente la eliminación de los mos del ap digestivo pero V. cholerae
puede adherirse a la capa de céls mucosas mediante
1) el TCP (codificado x complejo génico tcp)
2) proteínas quimiotácticas codificadas x genes cep37

-Mucinasa
-Neuraminidasa

43

PATOGENIA
Vibrio crece naturalmente en estuarios y mares de todo el mundo: todas las especies de Vibrio pueden sobrevivir y
replicarse en aguas contaminadas con una mayor salinidad.
Los vibrios patógenos pueden crecer rápidamente en aguas con crustáceos quitinosos (ostras, mejillones, almejas):
de ahí la asociación e/ consumo de crustáceos e infecciones x Vibrio. También la bacteria se adhiere a la superficie
de los peces.
La bacteria se propaga x agua (contamina fuentes de agua dulce y salada) y comida contaminadas pero tb puede
haber transmisión interhumana fecal – oral.
El cólera suele afectar a comunidades con condiciones sanitarias deficientes.
Es necesaria una alta carga infectante ya que los bacilos son sensibles al ph ácido estomacal.

La bacteria ingresa x via oral y actúa a nivel del intestino delgado donde sintetiza sus factores de patogenicidad.
Libera la toxina AB q lleva al aumento de AMPc a nivel de la mucosa intestinal inhibiendo la entrada de Na a nivel de
la vellosidad intestinal y aumento de la salida de Cl desde las criptas. Aumenta así el cloruro de sodio en la luz
intestinal generando acúmulo de liquido (potenciado ello x las demás toxinas).
Cuando se supera la capacidad de reabsorción de este acumulo de liquido, se produce el cuadro de diarrea profusa
en la enfermedad del cólera. Produce un cuadro caracterizado por diarrea acuosa y profusa de comienzo súbito
tratable mediante reposición hidroelectrolítica por vía oral; el fármaco de elección es azitromicina.

Los individuos pueden ser asintomáticos ó presentar diarrea autolimitada.

Las personas infectadas x V. cholerae pueden eliminar bacterias durante los primeros días de la enfermedad aguda:
son un importante foco de nueva infección.

Las manifestaciones clínicas del cólera inician 2 a 3 dias dps de la ingestión de bacterias, el inicio es brusco con
diarrea acuosa, vómitos y raramente fiebre. Conforme de van perdiendo liquidos, las heces se vuelven incoloras e
inodoras, libres de prots, moteadas de mucosidad (heces en agua de arroz). La pérdida significativa de liquidos lleva
a deshidratación, calambres, acidosis metabólica x pérdida de bicarbonato, hiopopotasemia, shock hipovolémico con
arritmia y falla renal.

DX
-Toma de muestra de materia fecal, Gram, cultivo, serotipificación
- Medio de cultivo TCBS: contiene tiosulfato, citrato, bilis, sacarosa; favorece el crecimiento de V. cholerae frente a
otras bacterias Gram-. forman colonias amarillas brillantes
- Murray: agar sangre, agar MacConkey, caldo de peptona alcalino con pH 8.6, TCBS

Profilaxis
- Hervor de agua de consumo ó 3 gotas de lavandina comercial x litro de agua

37
LAS CEPAS NO ADHERENTES SON INCAPACES DE ESTABLECER INFECCIÓN.
CAMPYLOBACTER JEJUNI
- Bacilos curvos gralmente delgados, gram negativos, habitualmente dispuestos de a pares
- no esporulados
- capsulados y móviles
- microareófilos: crece mejor en ambientes con cantidad baja de O2 y elevada de CO2
- desarrollan en medios enriquecidos. (agar sangre, agar mueller-hinton, agar columbia)
- gran variabilidad genética.

La estructura de la pared celular de Campylobacter tiene: 44

- Una cápsula de lipopolisacáridos, externa q expresa lipo-oligo-sacáridos (NO LPS)

- los polisacáridos de la cápsula contribuyen a la virulencia de la bacteria y son diana de las vacunas

Del Género Campylobacter, hay tres Especies de Importancia Médica (cuadro de Murray):

Especie Huésped más frecuente Enfermedad Humana

Aves de granja, ganado Responsable de la mayoría de las infecciones. Gastroenteritis, sdme de
C. jejuni vacuno, ovejas Guillain Barre38, artritis reactiva.
Infecciones extra-intestinales.
Cerdos, aves de granja, Gastroenteritis.
C. coli
ovejas, pájaros Infecciones extra-intestinales.
Ganado vacuno, ovejas Infecciones vasculares: infecciones sistémicas, bacteriemia, tromboflebitis
C. fetus39
séptica, artritis, abortos sépticos, meningitis

Campylobacter jejuni
- crece mejor a 42° que a 37°
- la probabilidad de enfermar estaría relacionada con la dosis infecciosa ya q los mo son sensibles a los jugos
gástricos; la enfermedad se favorece x condiciones de disminución de ácido clorhídrico
- las infecciones x Campylobacter son zoonoticas: los animales son reservorio y el ser humano adquiere las
infecciones tras la ingesta de alimentos, agua ó leche contaminados.
Tb podría darse la transmisión fecal – oral de la enfermedad.
En USA, las infecciones x Campylobacter constituyen la enfermedad diarreica bacteriana más frecuente.
Mediante traslocación, cruza la barrera epitelial y llega a la lámina propia a través de céls M ó enterocitos pudiendo
causar linfadenitis y generar eventualmente bacteriemia.

FACTORES DE VIRULENCIA DE CAMPYLOBACTER JEJUNI

- flagelo
- proteína «CadF» (función de adherencia e ingreso)
- factores de secreción tipo III y IV
- toxina citolítica Cdt  bloquea la división celular eucariota, con consecuente muerte celular
- LOS con fc de endotoxina

38
Sdme de Guillain Barre: alteración autoinmune del sist nerv periférico caracterizada x un proceso de pérdida de fuerza
simétrica a lo largo de varios días. La recuperación necesita semanas y hta meses. Se cree q la patogenia de esta enfermedad se
basa en reactividad antigénica cruzada e/ los lipo-poli-sacáridos de superficie de algunas cepas de Campylobacter y los
gangliosidos de los nervios periféricos.
39
Tendencia a diseminar desde el ap digestivo hta el torrente sanguíneo o focos distantes. Esto es xq C. fetus es resistente al
efecto bactericida del suero mediado x el Complemento y acs. Además, C. fetus posee la Proteina S q evita la unión de C3b a la
bacteria y el posterior efecto bactericida. La bacteria pierde su virulencia cuando pierde esa capa proteica.
La bacteriemia será más frecuente en ptes inmunodeprimidos.
DX Y ESTUDIO DE LABORATORIO
- Muestra para coprocultivo
- Gram: bacilos curvos Gram-
- Agar sangre enriquecito. Suele ser de crecimiento lento, necesita mínimo 48 hs. Precisa de atmósfera microaerófila
para cultivo.

45

YERSINIA ENTEROCOLITICA
Los patógenos humanos mejor conocidos del género Yersinia son: Y. pestis (genera una enfermedad llamada “peste
bubónica” de alta mortalidad); los otros dos géneros: Y. enterocolitica y Y. pseudotuberculosis, son patógenos
ppalmente entéricos.

Caracteristicas grales (diapo Cátedra) + Factores de Virulencia + Patogenia

- BACILO GRAM NEGATIVO
- NO FERMENTADOR DE LACTOSA
- PRODUCTOR DE UREASA.

- INVASINA
- ENTEROTOXINA
- LA BACTERIA INHIBE LA FAGOCITOSIS  Característica común de Yersinia es su capacidad de resistir la
destrucción x fagocitosis gracias al Sistema de Secreción tipo III.
Al entrar en contacto con céls fagociticas, la bacteria secreta unas prots en el fagocito q desfosforilan varias
prots necesarias para la fagocitosis (producto del gen YopH).
- Induce citotoxicidad mediante la alteración de los filams de actina (producto del gen YopE) e inician
apoptosis de macrófagos (producto del gen YopJ/P)
- El Sist de Secreción tipo III inhibe tb la producción de citoquinas: disminuye la rta inflamatoria a la infección

Las infecciones x Yersinia son zoonóticas: los RESERVORIOS son ANIMALES y el ser humano es huésped accidental.
Los reservorios naturales de Y. enterocolitica son: cerdos, ganado, roedores, conejos.
Puede darse transmisión fecal-oral.
Infección frecuente en niños.
La mayoría de las infecciones se asocia a enterocolitis. Tb puede generar gastroenteritis asociada a ingesta de agua o
alimentos contaminados. Se presenta fiebre, diarrea y dolor abdominal q puede durar 1 a 2 semanas.
La enfermedad afecta al ileon terminal.

MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS, BOVIS Y LEPRAE

El género Mycobacterium está formado x bacilos Gram+ débiles y fuertemente ácido alcohol resistentes ya q tienen
cadenas de ácidos micólicos en su pared celular. Son aerobios estrictos, NO esporulados, NO capsulados.

Según el origen filogenético, se los agrupa en 3 complejos:

1) Complejo Tuberculosis: M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum
2) Complejo Leprae: M. leprae
3) Mycobacterias atípicas: grupo heterogéneo de bacterias, la mayoría ambientales. Existen algunos patógenos
oportunistas q podrían producir enfermedad en humanos.

Según crecimiento y coloración, se pueden clasificar:

- De crecimiento lento  las céls se dividen recién a las 24 hs y aparecen cultivos a las 4 a 8 semanas. M.
tuberculosis, M. bovis, M. africanus. Son no-cromógenas.
- De crecimiento rápido  crecimiento y aparición de colonias en menos de 7 días. Gralmente estas especies NO
producen enfermedades en humanos.

46
MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
Características Biológicas
- Bacilo delgado, ácido-alcohol resitente (técnica de Ziehl Neelsen)
- no se usa la tinción de gram
- NO esporulado, inmóvil, NO capsulado
- Aerobio estricto
- crece lentamente en medios enriquecidos: Lowestein-Jensen)
- Resistentes a la desecación, a ácidos y desinfectantes salvo aquellos con fórmula de aldehído, fenol o derivados
- Reservorio humano.
- Pierden viabilidad x pasteurización
- Ppal agente etiológico de TBC

Su membrana es delgada y tiene una capa fina de peptidoglucano.

Sobre la capa fina de peptidoglucano se sitúa el arabinogalactano (unión covalente). Este arabinogalactano está
esterificado con los ácidos micólicos. Los ácidos micólicos40 son los ppales componentes de la pared bacteriana.
En la parte más externa, hay complejos lipídicos libres: micósidos, sulfolipidos, gluco-peptido-lipidos (tienen
diferentes fcs).
Los lípidos suponen más del 60% de la pared celular y muchos son ácidos grasos de cadena larga: blanco de fármacos
anti-tuberculosos.

FACTORES DE VIRULENCIA
M. Tuberculosis NO produce toxinas ni exoenzimas de ninguna índole asique sus factores de virulencia son los
componentes de su pared celular.

-Factor Cordón (Cera C)  forma q adoptan los bacilos formando cordones serpenteantes q se disponen de modo
paralelo y compacto. Este factor está implicado en el desarrollo de Neurolomas, inhibe la diapédesis leucocitaria y
lesiona las membranas mitocondriales en forma in vitro.
- Los sulfolipidos de la pared bacteriana (localizados en la periferia) aumenta la toxicidad del Factor Cordón y tb
inhibe la fusión lisosoma – fagosoma.

- Cera D, Polisacáridos

- Actividad Catalasa: permite sobrevivir a medios con peróxido de hidrógeno

- Proteínas HSPX: elemento controlador de la latencia de la bacteria. La sobre-expresión de esta proteína inhibe su
crecimiento.

40
Los ácidos micólicos son ácidos grasos de cadena larga q están tb presentes en otros géneros bacterianos diferenciándose en
el nro de carbonos q los componen.
- Proteínas de superficie de la pared bacteriana: inhiben la señalización mediante Rcs Toll disminuyendo así la
sintesis de citoquinas proinflamatorias como IFN gama. La promoción de una menor inflamación local permite el
crecimiento libre de la bacteria.

PATOGENIA
La transmisión es interhumana por aerosolización, estornudo ó tos desde un paciente bacilífero a otro no infectado.
Los bacilos colonizan inicialmente la vía aérea superior, alcanzan al parénquima pulmonar y son fagocitados por
macrófagos pero NO son destruidos / lisados (parásito intracelular facultatvo). 47

4 etapas de la Patogenia:

Establecimiento
Los componentes dela pared bacteriana son reconocidos como PAMPS x los RRP tipo Toll generándose liberación de
IL12 (proinflamatoria) q atrae céls NK q liberan IFN gama: aumenta la producción de ON y TNF alfa y ahora hay 2
caminos:

a) Eliminación de macrófagos infectados  infección abortiva

b) Las bacterias bloquean la actividad del fago-lisosoma y las bacterias sobreviven dentro del macrófago

Eso depende de la virulencia, el inóculo (cuánta cantidad ingresó al organismo) y la inmunidad del pte.

Replicación Intracelular
El ambiente proinflamatorio lleva a la destrucción de los fagocitos liberándose bacilos a nivel local, los cuales son
captados x otros macrófagos evadiéndose la rta inmune intracelular. El bacilo multiplica sin generar inflamación.
Los macrófagos NO destruyen la micobacteria, disminuye la presentación de Ags y la bacteria crece sin producir daño
tisular.
Aprox 15 a 21 días dps, los macrófagos reconocen al Lipoarabinomanano como “no propio” y lo expresan mediante
el CMH para presentarlo a los Linfocitos T.

Etapa de Diseminación
Tiene lugar cuando los macrófagos comienzan a formar céls multinucleadas. Los macrófagos comienzan a fusionarse
a partir de moléculas como ICAM 1 permitiendo a estas nuevas céls gigantes agrupar mayor cant de bacilos. Hay
ruptura celular y hay escape.
Los bacilos escapan mediante circulación linfática, afectando ganglios linfáticos anexos a las vís respiratorias; tb
pueden hacerlo via sistémica produciendo microimpactos en riñón, hueso, hígado, corazón, SNC.
Con la ruptura celular hay una rta inflamatoria con nuevo reconocimiento lento de Ags q se presentan, activación
celular, aumento de citoquinas como TNF alfa (q promueve sintesis de ON y EROS). Esto genera mayor daño de
macrófagos infectados, del tej celular cicundante.
Tb se sintetizan las IL q promueven el perfil Th1 (IL1B, IL6, IL12, IFN gama y tb IL18).

Etapa de daño tisular

Aparece a las 4 a 6 semanas de haberse producido la activación de la rta inmunitaria donde entra en juego la
inmunidad inmune adaptativa. Por acción de citoquinas inflamatorias, comienza a haber lesión tisular apareciendo
una lesión de tipo exudativa: necrosis en los sitios donde los macrófagos contienen a los bacilos.
En sjs inmuno-comprometidos, la lesión exudativa indica q la bacteria supera a la rta inmune. Esto es caracterizado x
la inmunidad adaptativa asociada a Linf T Cd8 con actividad citotóxica, produciendo lisis macrofágica, mayor
expresión de otros macrófagos activados q producirán más citoquinas pro-inflamatorias y mayor daño celular.
Aparece tb la rta de Linf T Cd4 perfil Th1, estimulados x IFN gama. Estos producen mayor degradación de
micobacterias y más citoquinas pro-inflamatorias.
Tb puede haber reacciones de Hps asociadas a perfil Th2 q tb estimulan mayor daño tisular y mayor progresión de la
enfermedad. Con esta reacción, estarían más inhibidas las citoquinas para el perfil Th1 y habrá menos actividad de
céls B.
Th2 se asocia a la producción de Acs q lleva a formación de complejos inmunes pero q NO son útiles para atacar a la
bacteria.
Se presenta así un perfil de inflamación crónica: las céls CD8 junto con céls Th1 producen eliminación efectiva de la
infección pero hay menor expresión de Ags y mayor agrupación de céls gigantes multinucleadas (formadas x
macrófagos, linfocitos y fibroblastos) q tratarán de contener la infección (NO de eliminarla). Esto se denomina
granuloma41 y está formado x: 48

- céls gigantes en su centro

- corona de linfocitos
- fibroblastos (tipo malla contenedora)

Todo el proceso anterior se llama PRIMOINFECCIÓN: contacto q el ser humano tiene x 1era vez con la micobacteria,
generación de daño secundario y formación de granuloma.
El desenlace de la primoinfección depende de la cant de Ags y del equilibrio e/ reacción de Hps y rta inmune celular
(Linf T CD8, T CD4 y Th1).

Algujos sjs q hayan desarrollado primoinfección, pueden desarrollar una Reactivación asociado a deterioro de la rta
inmune de los linfocitos T q generan la malla de contención de los bacilos q infectan a los macrófagos alveolares.
Esto provoca escape de micobacterias y reactivación de la enfermedad con liberación de citoquinas proinflamatorias
q genera mayor deterioro de la arquitectura del órgano infectado.
Pueden reactivarse lesiones pulmonares iniciales. Puede producirse una TBC miliar.
Ptes VIH con linfocitos T CD4 x debajo de 200 / 300, son muy afectados x la reactivación al igual q pte dbt,
alcohólicos y malnutridos.

Manifestaciones Clínicas
La TBC pulmonar es la afectación más frecuente (80%).
La enfermedad TBC aparece como infección subaguda o crónica (síndrome simil neumonía) con fiebre, pérdida de
peso, tos, expectoración; si hay lesión bronco-alveolar puede tener lugar hemoptisis (enfermedad cavitada).

Afectaciones Extrapulmonares: pueden darse mediante diseminación en cualquier órgano siendo habitual en
ganglios linfáticos, pleura, órganos genito-urinarios, tejs osteoarticulares, meninges. Las afectaciones
extrapulmonares son variadas pero la pérdida de peso y la fiebre son signos cardinales.
- A nivel renal
- A nivel suprarrenal: las bacterias se diseminan a nivel de las cortezas suprarrenales, pudiendo destruir su
arquitectura y dar cuadros de insuficiencia suprarrenal aguda o crónica
- Ganglionar: se generan abcesos con material purulento (escrófula)
- osteoarticular: Mal de Pott (afectación de la columna vertebral, se forma una joroba)
- Meninges: fiebre y cefaleas

Epidemiologia
La TBC es una enfermedad re-emergente relacionada más bien a países no desarrollados. En Argentina, se estima
que un 75% de la población está infectada x el Bacilo, sin síntomas.

41
Lesión productiva en ptes inmunocompetentes, el sist inmune “supera” la infección bacteriana mediante la formación de
granulomas.
DX
1) Placa de tórax  pueden observarse cavernas (estructura formada x confluencia de granulomas: opacidad
periférica con lucidez central, tendencia a formarse en vértice pulmonar derecho xq hay más O2).

2) PPD / prueba de Tuberculina /Reacción de Mantoux  inmuno-dermo-reacción. Se utilizan Ags de M. Bovis en un

solvente q se inyecta sobre el antebrazo derecho a nivel transdermico (q NO llegue a ningún vaso). Si hubo contacto
previo, los macrófagos tisulares procesan el ag y se lo presentan al linf T produciéndose una inflamación local con
eritema e induración.
Si el pte ya tuvo contacto con los ags de M. Tuberculosis habrá rta inflamatoria xq hay memoria inmunológica 49

(Linfocitos T). A las 24 – 48 hs se visualiza, se mide y controla. Se habla de contacto previo, no de enfermedad! Lo q
se medirá es el borde indurado (no el eritema).

PPD+ PPD -
Nódulo palpable entre 6 a 10 mm (con el tiempo la Nódulo de menos de 5 mm. Puede ser negativo por:
pápula se achica pero sigue inflamada x las citoquina - nunca estuvo en contacto con mycobacterium
sinflamatorias). Puede ser positivo por: - pte inmunodeprimido no pudo desarrollar memoria (VIH,
- Vacunación embarazo, leucemia, Cushing)
- Portador asintomático - anergia a BCG ó nunca fue vacunado
- Pte enfermo - Contagio muy reciente
- Anergia infra tuberculinica: no reacciona contra la
tuberculina pero si reaccionaría contra la bacteria

Teniendo dx clínico positivo y PPD positiva, se precisa un dx de certeza.

3) Baciloscopia  Se toman muestras ppalmente respiratorias: muestras de esputo42 y si se sospecha de

diseminación pueden tomarse muestras para hemocultivo ó hta muestras directas de donde se sospecha la
infección foco. Muestra de LCR (meningoTBC).
Las tinciones utilizadas para poder ver estas bacterias:
- Ziehl Nielsen
- Técnica de Kinyoun: los BAAR se ven de color rojizo en fondo azul
- Tinción fluorescente con Auramina: mediante luz UV se visualizan las micobacterias en amarillo verdoso
con fondo oscuro. Es muy costosa, se utiliza en países de 1er mundo. Permite ver el factor cordón mediante
microscopio de fluorescencia.

Los medios de cultivo sólidos demoran aprox 8 semanas y los medios liquidos 42 días (pero son más costosos).

4) Medios Sólidos con Huevo

- Lowenstein – Jensen: sirve para todas las micobacterias excepto M. bovis. Es el medio sólido más utilizado.
- Stonebrick: para M. bovis

5) Medios sólidos agarizados

- Middlebrook: es el más utilizado

6) Medios Líquidos
- Dubos
- Middlebrook modificado: el más utilizado (utilizado en el BACTEC)

42
Es recomendable enviarlo en tres muestras distintas de días consecutivos ya q la eliminación de micobacterias x via resp no es
constante.
¿CUÁNDO SE CULTIVA?
• Pacientes con tratamientos previos.
• Niños
• Inmunocomprometidos
• Pacientes con exposición conocida a tuberculosis multiresistente (TBMR)
• Muestras no pulmonares
• Sospecha clínica de tuberculosis pulmonar con esputo negativo
• En muchos hospitales públicos sólo se realizan baciloscopías y/o cultivos con una solicitud autorizada por un
médico infectólogo o neumotisiólogo. 50

Dps del cultivo, debe realizarse un antibiograma para determinar la sensibilidad a los fármacos, más aún en aquellos
ptes q sufrieron reactivación de la enfermedad.
Cdo x clínica se sospecha de infección x micobacteria y las observamos a nivel de la baciloscopia, el tto se inicia igual
y no se espera el cultivo definitivo ya q tarda 4 a 8 semanas.

TUBERCULOSIS: DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO RÁPIDO

Métodos radiométricos: BACTEC 460 -TB Métodos no radiométricos

– Considerado el patrón de referencia para el cultivo rápido, es el gold standard MGIT 960 (se utiliza un
para el cultivo rápido. Se utiliza carbono radiactivo marcado y la máquina mide la fluorocromo y se mide la
radiación (no es necesariamente lo mejor para la salud) fluorescencia) y MB Bact
– Antibiograma de drogas de 1era línea.

OTRAS TÉCNICAS DISPONIBLES:

• Técnicas de amplificación de ácidos nucleicos  Sensible y específico pero NO reemplaza a las técnicas
convencionales

• Sondas de ácidos nucleicos  Identificación en un cultivo positivo de diferentes especies de micobacterias. Se

buscan secuencias genómicas particulares.

• Dosaje de adenosina deaminasa (ADA)  Indicado en líquido pleural.

MYCOBACTERIUM LEPRAE
- Bacilos delgados, móviles, BAAR
- NO generan esporas, NO capsulados
- la bacteria nunca pudo ser cultivada en métodos artificiale sin celulares; la única forma q puede demostrarse in
vitro es la inoculación en un ratón sano ó almohadilla plantar de algún otro roedor a T° ambiental.
Dps de necropsia puede, a veces, encontrarse bacilos intracelulares a partir de histopatología.
- Microorganismo intracelular obligado.
- Triple cubierta de polisacáridos externos y un peptidoglicano basal
- El ser humano es el único reservorio.
- pueden sobrevivir varios días en secreciones secas
- La ppal fuente de infección todavía no ha sido demostrada pero las vías de transmisión más aceptadas serían la
piel, el ap respiratorio y ap digestivo.
MURRAY: la lepra se transmite de persona a persona. No se considera altamente contagiosa, se requiere contacto
prolongado con un sj infectado y no tratado. NO se conoce la vía d einfección más importante y se cree q M. leprae
se disemina mediante inhalación de aerosoles infecciosos o mediante contacto cutáneo con secreciones
respiratorios y exudados de las heridas.
Las bacterias se multiplican muy lentamente, el periodo de incubación es prolongado. Los síntomas se desarrollan
entre los 2 a 7 años y hta 20 años dps de la infección (o sea: incubación es de 2 a 7 años según el seminario de
cátedra y según Murray 20 años).

La lepra ó Enfermedad de Hansen fue ya descripta en el año 600 aC en civilizaciones antiguas (Egipto, China, India). 51
La micobacteria se multiplica de forma lenta dentro de macrófagos, céls de Langerhans y céls de Schwann. Tiene alta
afinidad x los nervios: única micobacteria neurotropa.
Actualmente, la lepra afecta ppalmente nervios periféricos alterando la capacidad de sentir dolor en las fases
iniciales dado su neurotropismo característico.
En algunas partes del mundo es una enfermedad erradica y en otras partes es una enfermedad re-emergente como
la TBC.

Clasificación según aspectos clínicos:

1. Lepra tuberculoide
2. Lepra intermedia ó borderline tuberculoide
3. Lepra intermedia ó borderline borderline
4. Lepra intermedia ó borderline lepromatosa
5. Lepra lepromatosa
Tanto la forma Tuberculoide como la forma Lepromatosa son formas estables (ó es una ó es la otra). El resto forma
parte de una clasificación difícil, muchas veces determinada x la fc de la inmunidad ó x si el pte está recibiendo o no
tto.

LEPRA LEPROMATOSA / ENFERMEDAD DE HANSEN MULTIBACILAR

Desarrollan una importante rta de acs pero tb deficiencia especifica en la rta celular a los ags de M. leprae, entonces
hay gran nro de bacterias en los macrófagos dérmicos y en céls de Schwann de los nervios periféricos  forma más
infecciosa de lepra
- la forma lepromatosa se asocia a lesiones cutáneas desfigurantes, nódulos43 (lesiones mayores a 5 mm de
consistencia dura), máculas, pápulas, placas, dermis engrosada, afectación de la mucosa nasal. Pueden afectarse
dorso, brazos, MMII.
- las lesiones engrosan muchos tejs blandos generándose como una piel curtida; si esto se genera a nivel facial, la
cara muestra más arrugas: fascia leonina.
- Las lesiones se caracterizan xq NO se genera rta Th1; se genera rta Th2 asociada a mayor daño celular
- Histopatología: lesión rica a nivel central en bacilos, granulocitos espumosos, pocos linfocitos. Se ven muchos
depósitos de inmuno-complejos a nivel de las lesiones y ganglios linfáticos anexos.
- Si la balanza se inclina más a la forma lepromatosa, esto se relaciona con el perfil Th2

LEPRA TUBERCULOIDE / ENFERMEDAD DE HANSEN PAUBACILAR

Es la forma más frecuente. Muestra una importante reacción inmunitaria celular contra la bacteria, con inducción de
producción de citoquinas q intervienen en la activación de macrófagos, fagocitosis y eliminación de bacilos
- Caracterizada x máculas cutáneas hipopigmentadas, con centro seco (“casi sano”), con borde eventualmente
eritematoso. Las lesiones son asimétricas
- Mayor daño neurotrópico

43
Los nódulos son de tamaño variable y contienen gran nro de bacterias
-Histopatología: mayor infiltrado leucocitario con granulocitos epiteloides + destrucción del nervio a nivel periférico
(a nivel de la piel)
- Las lesiones se relacionan a inmunidad de tipo Th1
- Se diagnostica x la reactividad en pruebas cutáneas al Ag micobacteriano (lepromina), es decir intro-dermo-
reacción): las cepas ácido alcohol resistente gralmente son negativas.

Cuando se inyecta, pueden producirse 2 reacciones:

1) Reacción de Fernández: reacción precoz, parecida a la tuberculina. Alcanza un halo eritematoso y la mayor
actividad al 3er dia, q es la q se mide. Indica sensibilización a los componentes de M. leprae. 52

2) Reacción de Mitsuda: se manifiesta dps de 3 – 4 semanas de la inyección intradérmica, con suspensión de bacilos
muertos x calor en agua fisiológica. Es positiva si aparece un nódulo indurado.
Los ptes con Lepra Tuberculoide suelen presentar AMBAS reacciones positivas.
Los ptes con Lepra Lepromatosa suelen presentar AMBAS pruebas negativas.

DX
- Toma de muestra: biopsia de tej dañado ó secreciones del pte
- Microscopía: Ziehl Nielsen (color rojo)
- Rta inmunitaria tardia a lepromina: s einyecta la lepromina y se evalúan dos reacciones:
a) Fernández: 3 dias; aparece herida eritematosa  hps
b) Mitzuda: a las 3 – 4 semanas; aparece un nódulo.
Lepra Tuberculoide: ambas pruebas +
Lepra Lepromatosa: ambas pruebas –

NOCARDIA
NOCARDIA forma parte de la flia NOCARDIACEAE q está compuesta x más de 50 especies.
Para microbiología médica, la especie más importante es: Nocardia asteroides complex; tb Nocardia brasiliensiss q
puede enfermar a seres humanos.
- Bacilos aerobios estrictos, con pared celular Gram+ PERO parecen, al verlas, Gram- con inclusiones Gram+ intra-
celulares.
El motivo de esta propiedad de tinción es q las Nocardias poseen una estructura de pared celular con ácidos grasos
de cadena ramificada (ácido tubérculoestearico, ácido meso-DAP, ácidos micólicos). La longitud de los ácidos
micólicos en las nocardias es más corta q en las micobacterias y esto explica porqué ambos generos (Nocardia,
Mycobacteria) son ácido alcohol resistentes
- Nocardia se describe como “ácido alcohol resistente débil”
- Forman filamentos ramificados en tejs y cultivos; los filamentos se parecen a las hifas de los mohos (antiguamente
se pensaba q Nocardia eran hongos)
- Inmóviles, NO presentan esporas
- Aerobias
- Nocardia puede crecer en la mayoría de los medios de laboratorio no selectivos pero su crecimiento es lento:
mínimo 3 a 5 días antes de observarse colonias44.
- Pueden crecer en Agar Sangre y tarda hta 4 semanas

Es una bacteria saprófita del suelo. Puede afectar animales domésticos o de granja pero NO se relaciona con
enfermedades zoonóticas.
El mecanismo de tranmisión es x inhalación, infección de heridas (contaminación: nocardosis cutánea), ingesta de

44
Lo habitual es observar alguna colonia entre el 1er y 2do día.
alimentos contaminados.
Se la considera oportunista y las formas graves afectan ppalmente a ptes inmuno-comprometidos.
Puede generar formas pulmonares cavitarias.

Factores de Virulencia
El factor de virulencia más importante es la capacidad de las cepas patógenas para evitar la destrucción fagocítica.
Cuando los fagocitos contactan con los microbios, se produce una descarga oxidativa liberándose EROs (peróxido de
hidrógeno, superóxido). Las cepas patógenas de Nocardia están protegidas de estos metabolitos xq segregan
catalasa y superóxido dismutasa. 53
Además, Nocardia puede sobrevivir y replicarse en los macrófagos: 1) evitando la fusión del fagosoma y lisosoma
(mediado x el Factor Cordón); 2) evitando la acidificación del fagosoma; 3) evitando la destrucción mediada x la
fosfatasa ácida mediante la utilización metabólica de la enzima como fuente de carbono.

Patogenia
Al ingresar al organismo, los neutrófilos intentan evitar la infección pero lso macrófagos fagocitan la bacteria. Si la
inmunidad innata no puede frenar la infección, se convierten en parásitos intracelulares facultativos. Por eso, se
inicia una reacción inflamatoria localizada q genera abcesos al nivel del lugar de ingreso de Nocardia, rodeados los
abcesos de tej de reparación con tendencia a confluir.
Del foco de inicio, la infección puede extenderse x contigüidad o vía endógena.
Nocardia tiene tropismo x SNC y tejs blandos.

Provoca la enfermedad nocardosis donde la toma del pulmón es del 70 a 80% de los casos.
De las infecciones x Nocardia, 80 a 90% es x Nocardia asteroides y el resto Nocardia brasiliensis.
En la mitad de los casos suele existir lesión pulmonar propia pero siempre debería buscarse alguna lesión secundaria
especialmente en ptes inmunocomprometidos.
A nivel del SNC suelen producirse lesiones generando meningitis crónica ó subaguda; tb a nivel óseo, riñón, hígado,
ojo, pericardio.
A nivel de tej blando puede producir abcesos blandos, a veces indoloros pero pueden fistulizar y generar secreción
de material purulento altamente infeccioso.

Enfermedades Clínicas
- Enfermedad broncopulmonar: no suele distinguirse de la enfermedad provocada x otros mos piógenos pero la
enfermedad x Nocardia es más lenta y la enfermedad primaria ocurre casi siempre en ptes inmuno-comprometidos.
Puede haber cavitación y propagación a pleura
Puede diseminar a snc ó tejs subcutáneos.
- Infecciones Cutáneas (micetoma45, abcesos, celulitis): pueden se primarias ó secundarias (x diseminación desde una
infección pulmonar primaria)
Hta un tercio de los ptes infectados x Nocardia presentan diseminación a cerebro con formación de abcesos
cerebrales; inicialmente la enfermedad puede manifestarse como una meningitis crónica.

DX
- Toma de muestra de esputo
- Visualización en microscopio mediante Ziehl Nielsen ó Kinyoun
- Cultivo en agar sangre y agar dextrosa ó Sabouread (como tiene muchos lípidos en su pared, demora 4 a 8 semanas
en aparecer en cultivos)

45
Micetoma: infección crónica indolora sobre todo en pies con tumefacción subcutánea y afectación de músc y hueso
subyacente, supuración, formación de fistulas.
BRUCELLA
Agente etiológico de la Brucelosis ó Fiebre de Malta.
Se considera una zoonosis: se transmite al hombre a través de animales infectados.
- Cocobacilos Gram- , pequeños (según la curva de crecimiento de la bacteria puede encontrarse como coco ó como
bacilo), pueden ser capsulados o no
- Inmóviles; NO esporas
- Las especies q más se asocian a enfermedad en el ser humano son: B. abortus, B. melitensis, B. suis, B. canis
(dependiendo el ganado animal) 54
- Demora una semana aprox en crecer en cultivo y necesita medios de crecimiento complejos
- Microaerofilo (seminario Cátedra); algunas cepas requieren CO2 para crecer.
Abortus y bovis precisan una atmosfera de supervivencia con O2 menor al 10%.
- NO fermentan HdeC

MURRAY: Brucella NO produce toxina detectable y la endotoxina es menos tóxica q la producida x otros bacilos
Gram-.
La ubicación de Brucella puede ser intracelular o extracelular, especialmente en macrófagos de médula ósea,
formando granulomas sólidos. Puede ocurrir diseminación hemática y compromiso de órganos hematopoyéticos,
linfoides y huesos.

La cadena O del LPS constituye un marcador importante de la virulencia. Su patogenicidad se relaciona con el lipo-
polisacárido q funciona como endotoxina q será liberada en la lisis bacteriana.
- Colonias Lisas: presentan el LPS completo
- Colonias Rugosas: pierden el Ag somático O, entonces son menos virulentas y más sensibles al ataque del
Complemento.

Los reservorios de Brucella son ANIMALES y la transmisión al humano se da por ingestión de alimentos
contaminados: alimentos lácteos o cárneos, inhalación de aerosoles contaminados o accidentes laborales.
Poblacion de riesgo: personas q consumen lácteos no pasteurizados, sjs q trabajan en laboratorios, veterinarios
rurales.
Argentina es un país ganadero por lo que podría haber Brucelosis.

La bacteria es intracelular facultativa, al ingresar al organismo invade a los leucocitos PMN y consumen guanosina y
adenina para sobrevivir.
Las cepas rugosas son menos virulentas y menos resistentes a la acción del Complemento.
Cdo invaden a los PMN, éstos pueden alcanzar los ganglios linfáticos y generarse reservorios x largos periodos.
Desde el ganglio linfático, pueden alcanzar la circulación sistémica, hacer bacteriemia y ser capturadas x el Sistema
ReticuloEndotelial.
Murray: Brucella es un parásito intracelular del Sist ReticuloEndotelial: las bacterias fagocitadas son transportadas al
bazo, hígado, méd ósea, ganglio, riñones.
En el Sist ReticuloEndotelial se producirán ciclos de replicación y rupturas de estas céls, liberando sangre de manera
intermitente y provocando episodios febriles ondulantes y formación de granulomas en los órganos del Sist Reticulo-
Endotelial.

El espectro patológico de la Brucelosis depende del mo infectante:

- B. abortus y canis suelen producir un cuadro leve, con complicaciones supurativas inusuales.
- B. suis provoca lesiones destructivas y su evolución es prolongada
- B. melitensis tb provoca enfermedad grave con incidencia elevada de complicaciones serias ya q el mo puede
multiplicarse hta alcanzar concentraciones altas en las céls fagociticas.
Dps de 1 a 3 semanas de la exposición aparecen los síntomas. Inicialmente son inespecíficos: malestar, escalofríos,
fatiga, debilidad, mialgia, pérdida de peso, artralgia, tos no productiva y casi todos los ptes presentan fiebre
intermitente (fiebre ondulante). Cuando la fiebre comienza a ser intermitente (ondulante), inicia la 2da fase de la
infección: astenia, linfoadenopatías locales, agrandamiento de hígado o bazo x activación del Sist ReticuloEndotelial.
La brucelosis no tratada puede evolucionar a una forma subaguda sin síntomas claros pudiendo aparecer episodios
febriles por uno o dos años.

DX 55
- Toma de muestra para hemocultivo ó de médula ósea, q es donde Brucella se almacena.
El hemocultivo es de elección en la 1era fase de la enfermedad.
- Método de inmunocromatografia (BacT / ALERT) para detección rápida en hemocultivo
La bacteria crece lentamente en cultivo y puede requerir medios complejos para aislarse:
- Agar con triptosa ó tripticasa de soja, aprox 30 dias
- Rosa de Bengala (Método indirecto): aglutinación rápida sobre una placa con el suero del pte. Se enfrenta el suero
a una suspensión de Brucella teñida con Rosa de Bengala (suele utilizarse para dx diferencial)

GÉNEROS BACTERIANOS RESPONSABLES DE ITS

Treponema Pallidum, Chlamydia, Mycoplasma, Ureaplasma, Gardnerella

TREPONEMA PALLIDUM SUBESPECIE PALLIDUM

La especie más importante de Treponema q produce enfermedad en el ser humano es Treponema Pallidum y T.
Pallidum tiene tres subespecies46:
- Subespecie pallidum de Treponema pallidum: agente etiológico de la sífilis venérea, enfermedad q afecta a todos
los países del mundo (se asocia a VIH47 y a la coinfección de otras ITS).
- Subespecie endemicum de Treponema pallidum: produce Bejel, la sífilis endémica (no es venérea)
- Subespecie pertenue de Treponema pallidum: produce frambesía (no es venérea)

Caracteristicas Grales
- Espiroqueta, muy fina y muy pequeña. Presenta similitud estructural con las bacterias Gram- ya q de interior a
exterior presenta: citoplasma, membrana celular, una capa delgada de peptidoglucano, espacio periplásmico. En el
espacio periplásmico discurren “flagelos periplásmicos” q le brindan movilidad a la espiroqueta
- Tiene similitudes estructurales con las bacterias Gram- pero NO es observable con la tinción de Gram xq las
espiroquetas son muy finas
- Observable con métodos de impregnación argéntica (Fontana-Tribondeau) o coloración de Giemsa lenta
- No desarrolla en medios de cultivo bacteriológicos acelulares x motivos nutricionales: la bacteria NO realiza el ciclo
de los ácidos tricarboxilicos y depende de las céls huéspedes para obtener purinas, pirimidinas y aa.
- Sensible a la penicilina.

T. pallidum es un mo lábil, no sobrevive a la desecación ni desinfectantes, entonces la sífilis NO se propaga x

contacto con objetos inanimados (como retretes). La via de propagación más frecuente es el contacto sexual directo.
La enfermedad puede adquirirse tb de forma congénita ó mediante transfusión de sangre contaminada.
T. pallidum se contagia fundamentalmente en las 1eras fases de la enfermedad cdo hay muchos mo presentes en las

46
Las subespecies se distinguen x sus características epidemiológicas, presentación clínica y gama de animales experimentales.
47
Es más posible adquirir o transmitir el VIH cuando hay lesiones genitales.
lesiones cutáneas o mucosas húmedas. Durante las primeras fases del proceso, el sj tiene bacteriemia, la cual puede
persistir hta 8 años en ausencia de tto.

Factores de Virulencia
LIPOPROTEÍNAS DE SUPERFICIE: están asociadas a la infección
• Se unen a la laminina y a la fibronectina
• Degradan la matriz extracelular por ser metaloproteinasas y tb pueden degradar coágulos sanguíneos.
La bacteria puede evadir la fagocitosis ya q tiene muy baja antigenicidad
MURRAY: T. pallidum NO presenta ags específicos de especie en la superficie celular y eso le permite evadir al 56
sistema inmunitario. Las bacterias consiguen resistir a la fagocitosis y pueden adherirse a la fibronectina del huésped
interaccionando directamente con sus tejs.

PROTEÍNAS Tpr (Proteínas Repetidas de Treponema pallidum):

• Similares a las porinas de las bacterias Gram negativas
• Facilitan la incorporación de nutrientes desde los fluídos biológicos al espacio periplásmico
• La TprK facilita la evasión de la respuesta inmune. Muy variable, presenta epitopes de linfocitos B.

Patogenia
T. Pallidum ingresa a través de mucosas x ruptura de uniones intercelulares, asociándose a la fibronectina y laminina
de la MEC.
Gralmente la transmisión se da durante el acto sexual y contacto con lesiones activas con alta carga de espiroquetas
q penetran las membranas mucosas ó ingresan al organismo mediante micro-abrasiones q se presentan en la piel
durante un acto sexual habitual.

La evolución clínica de la sífilis discurre a lo largo de 3 fases.

1) Fase Inicial / primaria

- Una ó más lesiones cutáneas: CHANCROS, en el lugar donde penetra la espiroqueta. La lesión se desarrolla
10 a 90 días tras la infección inicial apareciendo como una pápula q se erosiona y se convierte en una úlcera
indolora con bordes sobre-elevados, eritematosos.
Las cels fagociticas ingieren las espiroquetas aunq muchos mo sobreviven en el chancro.
En muchos ptes se desarrolla linfadenopatia regional indolora, entre 1 a 2 semanas de la aparición del
chancro y esto representa un foco local para la prolfieración de las espiroquetas y diseminación a la sangre.
El chancro se cura espontáneamente, gralmente sin secuela.

2) Segunda Fase
Suele presentarse un sdme pseudogripal y linfadenopatias y unos días dps, exantema cutánea generalizado q
puede ser macular, papular, pustular y puede incluir palmas y plantas. El exantema de la sífilis secundaria, es
muy infeccioso (al igual q el chancro!).
- Condilomas: lesiones sobreelevadas gralmente en zonas de pliegues cutáneos
- Erosiones en boca y otras mucosas

El exantema se resuelve y se pase a una FASE DE LATENCIA ó clínicamente inactiva de la enfermedad. Y

aprox el 30% de los ptes no tratados, evoluciona hacia una Fase terciaria de la enfermedad.

3) Estadio terciario
La inflamación crónica difusa característica de la Sifilis terciaria se desarrolla dps de un periodo asintomático
(desde pocos años a décadas q el sj se mantuvo sin síntomas) y esa inflamación crónica puede generar
mucho daño en casi cualquier órgano o tejido.
 La endarteritis obliterante afecta casi todos los órganos:
- Sífilis cardiovascular: miocarditis, aneurisma aórtico, estenosis coronarias
- Neurosífilis: afectación del SNC q puede progresar a demencia. Puede presentarse meningitis (incluso
desde una fase más temprana), “tabes dorsal” (paresia generalizada progresiva)
- Gomas: lesiones granulomatosas q pueden tener lugar en hueso, piel y otros tejs

DX
57
- Observación directa en fase temprana: se lava con sc fisiológica la lesión y presionando el chancro sifilítico con una
gasa, se obtiene un exudado seroso q se coloca en un porta-objetos, se coloca cubre-objeto y se explora en
microscopio de campo oscuro. Podría visualizarse la espiroqueta con aspecto de sacacorchos con movilidad en
espiral.
La microscopia de fluroescencia usa un colorante fluroescente (isotiocianato de fluoresceína) q se encuentra
conjugado con un ac humano acs de conejo específicos para el T. pallidum

Una vez q ya no hay lesión, deben realizarse PRUEBAS SEROLÓGICAS.

Pruebas Serológicas NO especificas (detectan Acs no-treponémicos)

Se realizan con rapidez y son poco costosas. La positividad de alguna de estas pruebas debe confirmarse con una
Prueba Treponémica.
En la prueba serológica no especifica, se busca el ac contra cardiolipina q es un fosfolípido ubicado en la mayoría de
las céls del hospedador (la cardiolipina NO es de la bacteria)
VDRL y RPR  se enfrenta el suero del pte a una solución conocida con cardiolipina. Con el M.O., se observa la
precipitación de partículas muy finas (Fenómeno de Floculación).
MURRAY: en estas pruebas no-treponémicas, se busca IgM ó IgG desarrollados contra los lípidos q se liberan de las
céls dañadas durante la fase precoz de la enfermedad y q aparecen en la superficie celular de los treponemas. El Ag
utilizado para las pruebas no-treponémicas es la cardiolipina q se obtiene del corazón de las vacas.
Las pruebas utilizadas son VDRL y RPR: ambas miden la floculación del ag cardiolipina con el suero del pte.

La VDRL tiene la desventaja de dar falsos positivos en Lupus, sdme antifosfolipidico, fiebre reumática, embarazo.
La VRDL puede dar falsos negativos en enfermedad avanzada por HIV y prozona: en el transcurso de una infección x
sífilis puede haber una alta concentración de Acs; cdo hay alta concentración de Acs en dilusiones bajas, no se
obtiene aglutinación q manifieste floculación positiva: esto xq hay muchos Acs y poco ag, entonces muchos acs
quedan libres sin unirse al Ag y esto no permite q decante / flocule. Es por ello q la prueba de prozona es motivo de
falso negativo en caso de una VDRL.

Las pruebas no-treponémicas pueden negativizarse en algunos ptes con sífilis tardia.

Pruebas de Dx Treponémicas / Especificas

Emplean T. pallidum como Ag y detectan acs específicos contra él.
Estas pruebas pueden ser positivas ANTES q las pruebas no-treponémicas y pueden seguir siendo positivas (aún
cuando las pruebas no-treponémicas negativicen).
Lo q se busca es evidenciar la generación de acs, de prots ó ags específicos de la bacteria q no están presentes en
otras céls del cuerpo. El T. pallidum tiene ciertas prots ó lipoprots poco antigénicas pero en el curso de la
enfermedad se logran generar acs q muchas veces pueden inhibir a la bacteria peeeero no tienen relevancia en la
curación de la enfermedad. Estos acs generados contra los ags específicos del T. pallidum son detectables mediante
estas pruebas.

FTA-ABS  históricamente es la prueba treponémicas más usada: Prueba de Absorción de AntiCuerpos

treponémicos fluorescentes. Es una prueba de acs fluorescentes indirectos.
Las céls de T. pallidum inmovilizadas en un porta-objetos se usan como Ag. El portaobjetos se cubre con suero del
pte, el cual se ha mezclado con extracto de treponema no-patógeno. Dps se añaden antibióticos anti humanos
marcados con fluoresceína para detectar la presencia de acs específicos en ese suero.
Seminario de Cátedra: FTA-ABS es una técnica indirecta de inmunofluorescencia donde se buscan acs reactivos en el
suero del pte y se observan en el M.O. de fluroescencia en una habitación oscura.

MHATP (Diapo Cátedra) ó TPPA (Murray)  Prueba de Aglutinación de partículas de T. pallidum. Es una prueba de 58
aglutinación de microtitulos. Se mezclan partículas de gelatina sensibilizadas con ags de T. pallidum con dilusiones
del suero del pte. Las partículas se aglutinan cdo existen acs.
Seminario de Cátedra: se usan GR de carnero con T. pallidum pegados en su superficie y se expone al suero del pte.
Si el pte tiene acs específicos contra el Treponema se observa una reacción de hemoaglutinación.

VDRL FTA-ABS
-Inespecifica -Acs treponémicos
- Acs no-treponémicos - Especifica y de confirmación de la
-Único método q se utiliza para LCR cuando se sospecha afectación de sospecha ante VDRL positiva
SNC -Una vez q positivizó x infección, queda
-VDRL disminuye con el tto de la enfermedad. Si sigue positiva debe positiva de x vida
sospecharse falla de tto o re-infección - Verdaderos positivos
- Puede dar falsos positivos

CHLAMYDIACEAE
Hay 3 especies responsables de enfermedad en el ser humano:
- Chlamydia trachomatis
- Chlamydophila psitacci
- Chamydophila pneumoniae

Las bacterias de la flia Chlamydiaceae son parásitos intracelulares obligados: inicialmente se consideraron virus ya q
tb son muy pequeñas PERO estos mo tienen características de las bacterias:
1) poseen membrana externa e interna semejantes a las de las bacterias Gram-
La particularidad es q carecen de capa de peptidoglucano rigida (como tienen la mayoría de las bacterias)
2) contienen ADN y ARN
3) poseen ribosomas procariotas
4) sintetizan sus propias prots, ácidos nucleicos y lípidos
5) son sensibles a muchos antibióticos antibacterianos

La particularidad de Chlamydia es q presentan un ciclo vital peculiar: pasan x formas infecciosas inactivas
metabólicamente (Cuerpos Elementales) y con formas no infecciosas con actividad metabólica (Cuerpos
Reticulados).

Caracteristicas Generales
- parásitos intracelulares obligados xq dependen de la maquinaria metabólica de la cél hospedadora para completar
su ciclo de vida
- metabólicamente deficientes
- Carecen de peptidoglucano
- Su núcleo central es denso, está rodeado x membrana citoplasmática y una membrana externa de doble capa
- Posee LPS pero su actividad como endotoxina es débil
- Hay una proteína única de cada especie: MOMP (Murray) ó OMP (Seminario Cátedra) q es un componente
estructural importante de la membrana externa

Existen como dos formas:

59
Cuerpos Elementales Cuerpos Reticulados
-Unidad infectante q puede sobrevivir fuera de -Es de localización intracelular y es la forma en la q se reproduce
la cél huésped (NO replica pero SI infecta) - Tiene actividad metabólica).
-Llega a Rcs de la cél huésped y estimula su - Los CR son frágiles a nivel osmótico xq no tienen prots con
captación y a nivel intracelular se convierten en enlaces extensos cruzados pero al estar dentro de la cél, están
CR “protegidos”.

Las clamidias replican gracias a un ciclo de crecimiento único producido dentro de las céls huésped susceptibles.
El ciclo inicia cdo los CE infecciosos q son muy pequeños, se unen a microvellosidades de las cels susceptibles y se
produce así la penetración activa en la cél huésped (xq los CE estimulan su captación x la cél infectada). Cuando son
internalizadas, las bacterias permanencen dentro de los fagosomas citoplasmáticos y ahí tiene lugar el ciclo de
replicación.
- Si la membrana externa del CE está intacta, se inhibe la fusión de los lisosomas celulares con los fagosomas q
contienen los CE y así se evita su destrucción intracelular.
- Si la membrana externa se lesiona o se inactivan las bacterias (mediante calor ó recubrimiento x Acs), s eproduce la
fusión del fagolisosoma con la consiguiente destrucción de las bacterias.
A las 6 a 8 hs de ingresar a la cél, los CE se reorganizan en CR más grandes y con actividad metabólica. Los CR se
replican mediante fisión binaria (igual q otras bacterias) y las tinciones histológicas pueden detectar el fagosoma con
los CR acumulados (Se llama Inclusión).
Unas 18 a 24 hs post infección, los CR se reorganizan en CE de menor tamaño y 48 a 72 hs dps, la cél se rompe y
libera las bacterias infecciosas (se liberan CE para nuevas céls huéspedes).

Las clamidias son parásitos de energía xq usan el trifosfato de adenosina de la cél huésped para satisfacer sus
necesidades energéticas.

Aislamiento y DX de Chlamydia y Chlamydophila

NO crecen en cultivos habituales xq son parásitos intracelulares obligados. Se requieren células a las cuales infectar,
reproducirse, ampliarse y poder detectarlas mediante distintas técnicas.

- Uso de líneas celulares  McCoy ó líneas celulares de tipo E2 basadas en céls inmortalizantes de líneas
tumorales humanas q permiten el ambiente requerido de utilización energética.
- PCR
- Dosaje de IgM e IgG especificas

Las características de los oligopolisacáridos son comunes a toda la flia pero tienen prots de membrana externa
(dentro de su pared celular) q son únicas de cada especie.
Ej.: C. trachomatis tiene regiones variables en sus prots de membrana externa pero la serovariedad D y K son las más
asociadas a episodios de uretritis; C. trachomatis es la etiología más común de “uretritis no gonocócica”.48

48
La uretritis se divide en gonocócica y no-gonocóccica.
PATOGENIA Y DX

ESPECIE SEROTIPO ENFERMEDAD

C. Psittaci muchos Psitacosis (fiebre del loro)
A, B, Ba, C Tracoma
-Enfermedades del ap urogenital: uretritis no gonocócica, epididimitis, cervicitis,
C. trachomatis D, K endometritis, salpingitis, proctitis.
-Conjuntivitis neonatal49. Neumonía.
L1, L2, L3 Linfogranuloma Venéreo 60
Enfermedad respiratoria Aguda
C. pneumoniae único
Neumonía Intersticial

C. Pittaci
El reservorio natural es casi cualquier ave, lo q pasa q la enfermedad se describió x primera vez en loros. Pueden
infectarse ovejas, vacas, cabras y ser humano. Se considera como un fenómeno de zoonosis.
El mo está presente en sangre, tejs, heces y plumas de animales infectados q pueden parecer ó sanos ó enfermos.
La infección a humanos puede transmitirse x inhalación de excrementos secos, orina o secreciones respiratorias de
aves (loros, periquitos, cacatúas). La transmisión persona – persona es infrecuente.
Personas de riesgo: los veterinarios, cuidadores de zoológico, trabajadores de tientas de mascota, empleados de
plantas de procesamiento de las aves de corral.
La infección penetra a través del ap respiratorio, desde donde las bacterias diseminan a las céls retículo-endoteliales
de bazo e hígado. Los mo se multiplican en esas localizaciones produciendo necrosis focal.
Los pulmones (y otros órganos) se afectan x consecuencia de la diseminación hematógena: se produce una rta
inmune linfocitaria en alveolos y espacios intersticiales. Aparecerá en esos sitios edema, engrosamiento de la pared
alveolar, infiltración de macrófagos, necrosis, a veces hemorragia. En los bronquiolos se forman tapones de
mucosidad q producen cianosis y anoxia.

C. trachomatis
Tracoma  enfermedad de evolución crónica q inicia como conjuntivitis y evoluciona tomando la conjuntiva, córnea
y generando invasión de los vasos corneales. Puede evolucionar a ceguera.
MURRAY: proceso granulomatoso inflamatorio crónico de la superficie del ojo q lleva a ulceración corneal,
cicatrización, formación de pannus y ceguera.

Linfogranuloma Venéreo  es la expresión de la inflamación local a partir de la puerta de entrada del agente
infeccioso q podría ser un chancro inoculatorio con consecuente compromiso a nivel linfático regional con formación
de granulomas en ganglios, pudiendo generarse necrosis. Suele ser indoloro y puede derivar en abcesos.
MURRAY: se desarrolla una úlcera indolora en el lugar de la infección q cicatriza espontáneamente, se sigue de
inflamación y tumefacción de los ganglios linfáticos q drenan la zona y la ulterior aparición de síntomas sistémicos.

C. pneumoniae
Patógeno estricto del ser humano. Causa sinusitis, faringitis, bronquitis, neumonía.
La transmisión sería respiratoria.

49
En caso de infección en persona gestante, puede exister infección ascendente y el compromiso se genera al atravesar el canal
de parto.
La mayoría de las infecciones son asintomáticas ó leves, produciendo malestar y tos persistente.
Las infecciones más graves NO pueden distinguirse de otras neumonías atípicas como las producidas x Mycoplasma
pneumoniae, Legionella neumophila u otros virus respiratorios.
El aumento de IgM marca infección reciente y la IgG aparece 6 a 8 semanas dps (en este caso se realizaría dx
retrospectivo).

61
MYCOPLASMA – UREAPLASMA
Los mo del género Mycoplasma son las bacterias más pequeñas de vida libre y son peculiares xq carecen de pared
celular y tienen muchos esteroles en su membrana celular. La ausencia de pared celular confiere resistencia a la
penicilina, cefalosporinas, vancomicina y otros atb q interfieren en la sintesis de la pared celular.
Inicialmente se pensaban q eran virus (x su pequeño tamaño) PERO se reproducen x fisión binaria, crecen en medios
artificiales acelulares y contienen tanto ARN como ADN.

ESPECIES DE IMPORTANCIA MÉDICA:

• Mycoplasma pneumoniae (aerobio estricto)
• Mycoplasma hominis
• Mycoplasma genitalis

Caracteristicas grales de Mycoplasma spp

- Son las bacterias más pequeñas con vida autónoma
- Carecen de pared celular: no se tiñen con Gram
- Membrana celular trilaminar rica en esteroles
- Sin flagelos ni cilias (inmóviles)
- Anaerobios facultativos, excepto M. pneumoniae q es aerobio estricto
- Desarrollan lentamente en medios enriquecidos con esteroles, bases púricas y bases pirimídinicas, como el Agar -
PPLO
- Crecen formando colonias con aspecto de ¨huevo frito’’

PATOGENIA

Bacteria Sitio Enfermedad

M. pneumoniae Ap respiratorio Neumonía atípica
M. hominis Epi-coriamionitis
M. genitalis Ap. Genito-urinario
Uretritis
Ureaplasma urealiticum

Factores de Virulencia de Mycoplasma pneumoniae

M. pneumoniae es un patógeno extracelular q se adhiere al epitelio respiratorio mediante un “complejo de prots
para adherencia” destacándose la adhesina P1. La adhesina P1 reconoce oligosacáridos q contienen ácido siálico
presentes en el borde apical del epitelio bronquial.50
Las adhesinas se unen específicamente a los Rcs de glucoproteinas sialidadas en la base de los cilios de las céls
epiteliales (así como en la superficie de los eritrocitos). Dps tiene lugar la ciliostasis: son destruidos los cilios y las

50
-Cepas Virulentas: P1 concentradas en una región, hemaglutinantes.
-Cepas no virulentas: P1 distribuidas uniformemente, no hemaglutinantes.
céls del epitelio ciliar. La pérdida de estas céls interfiere en el aclaramiento normal de las vías respiratorias
superiores permitiendo q las vías respiratorias inferiores se contaminen e infecten con mo (ya sea agentes
bacterianos o virales).
M. pneumoniae funciona como un SuperAg y estimula la migración de céls inflamatorias al lugar de la infección y la
liberación de citoquinas como TNF alfa, IL1, IL6. Este proceso participa tanto en la eliminación de la bacteria como en
la enfermedad.
Varias especies de Mycoplasma pueden cambiar las lipoprots de superficie, lo cual es importante para evadir la rta
inmune del huésped y establecer infecciones persistentes ó crónicas.
62

Entonces:
- Citoadhesina P1: reconoce oligosacáridos con ácido sálico presentes en el borde apical del epitelio bronquial
- Pequeño tamaño
- movimiento reptante
- Plasticidad

DX
- Las imágenes de Rx de tórax ó TC no arrojan patrones imagenológicos específicos, o sea son indistinguibles de otras
entidades clinicas
- La microscopía no tiene valor dx xq mycoplasma no se tiñe casi con Gram
- Seguimiento serológico mediante IgM y a los 14 días IgG
- PCR
- Inmunofluorescencia
- Crecimiento a partir de líneas de cultivo celulares

Mycoplasma genitalis y hominis  son causas de uretritis no gonococcica. Estas bacterias pueden colonizar el tract
genital incluso desde los primeros momentos de la vida pero la prevalencia aumenta cuando el sj inicia su actividad
sexual.
Lo mismo respecto de Ureaplasma urealiticum cuya colonización suele ser de mayor prevalencia.

GARDNERELLA VAGINALIS
- Cocobacilo inmóvil, no capsulado ni esporulado
- Anaerobio facultativo
- Microbiota normal de tracto genital femenino (coloniza epitelio vaginal)
- Patógeno oportunista
Es agente etiológico de vaginosis bacteriana q cursa con sintomatología genital como molestias, ardor, prurito, flujo
alterado en sus características físico-quimicas (más verdoso, más grisáceo, con más olor).
Gralmente son clave los cambios de pH ya q si éste se altera (volviéndose más básico) se altera la flora normal.
Aparecen Células Clue (céls epiteliales planas recubiertas de cocobacilos).
En mujeres, es importante contemplar q varias infecciones NO son de origen exógeno (no son ITS): la adquisición
puede ser endógena x algún disbalance del ciclo hormonal, toma inadecuada de atb ó toma de atb x otra infección
ya q el atb puede barrer la mayoría de la flora bacteriana a nivel de la mucosa vaginal generando predisposición del
crecimiento de otras bacterias q están menos presentes (como Gardnerella).
Puede afectar tb a hombres: la bacteria ingresa x uretra. Podría generar daño si alcanza la vejiga ó la próstata.

DX  clínica, cultivo, observación al M.O. de céls Clue

CORYNEBACTERIUM DIPHTERIAE
63
El género Corynebacterium es un cjto amplio y heterogéneo de aprox 150 especies de pared celular con arabinosa,
galactosa, ácido meso-DAP y (en la mayoría de las especies) ácidos micólicos de cadena corta.51
Las corinebacterias son ubicuas en plantas y animales; normalmente colonizan la piel, vías respiratorias altas, ap
digestivo y tracto urogenital en los seres humanos. Todas las especies pueden funcionar como patógenos
oportunistas pero muy pocas se asocian a enfermedad en el ser humano: la más famosa es C. diphtheriae, agente
etiológico de la difteria.

Caracteristicas Grales
- Bacilos gram positivos, pleomórficos, se agrupan en empalizada o formando «letras chinas» y poseen gránulos
metacromáticos
- Catalasa+
- NO esporulados, NO poseen cápsula, inmóviles
- Aerobios estrictos y la mayoría fermenta HdeC generando moléculas de ácido láctico

Dx
- Cultivo en medio de Loeffler (aunque no se recomienda)
- Cultivo en medios selectivos con Telurito de Potasio: el Telurito de Potasio inhibe la proliferación de casi todas las
bacterias de las vías respiratorias superiores y bacilos Gram- , además C. diphtheriae reduce el Telurito de Potasio
produciendo una coloración grisánea / negruzca en el Agar.
- Cultivo en medio no-selectivo: Agar Sangre
- Tinción de Gram
- Prueba de Elek  prueba de referencia para la detección de toxina diftérica. Es un análisis de inmuno-difusión in
vitro
- PCR: para detectar el gen Tox

Factores de Virulencia
- Toxina Diftérica  factor de virulencia más importante. El gen Tox codifica la exotoxina y se introduce en las cepas
de C. diphtheriae mediante un bacteriófago lisogénico (un B-fago).
La exotoxina es de tipo A-B, es secretada x la bacteria en el foco de infección y tiene 3 regiones funcionales:
1) Región Catalítica en la Sub-unidad A
2) Región de unión al Rc
3) Región de translocación en la Sub-unidad B
El Rc para la toxina es el “Factor de Crecimiento Epidérmico de unión a la heparina” presenta en la superficie de
muchas céls eucariotas, particularmente céls nerviosas y cardíacas.52
Cuando la toxina se une a la cél huésped, la región de translocación se inserta en la membrana del endosoma

51
OJO! NO SON BAAR! Solamente los micólicos de cadena media y larga se tiñen con los colorantes ácido alcohol resistentes.
52
Esto explica los síntomas cardiacos y neurológicos en la difteria grave.
facilitando el movimiento de la región catalítica hacia el citoplasma celular. Entonces, la Sub-unidad A finaliza la
sintesis de prots de la cél huésped mediante inactivación del “Factor 2 de Elongación” (EF2).53
Según Murray, el recambio de EF2 es muy lento y se calcula q una molécula de exotoxina puede inactivar el total del
contenido de EF2 en una cél, finalizando completamente la sintesis proteica de las céls huésped.

La sintesis de toxinas está regulada x el “Represor de la Toxina Difterica (DTxR)” q es un elemento codificado
cromosómicamente. Esta proteína se activa en presencia de altas concentraciones de hierro y puede unirse así al
operador del gen de la toxina y prevenir la producción de la toxina.
64
-Fimbrias y moléculas de adherencia para adherirse a la superficie celular eucariótica y a la MEC

Epidemiología – Enfermedades
La difteria es una enfermedad mundial, más prevalente en áreas urbanas pobres, con hacinamiento y cdo hay bajo
porcentaje de vacunación.
C. diphtheriae se mantiene en la población x portadores asintomáticos en orofaringe ó piel de personas inmunes: las
gotitas respiratorias ó el contacto cutáneo transmiten la enfermedad de una persona a otra.
Los seres humanos son el único reservorio conocido de este mo; siendo la difteria ppalmente una enfermedad
pediátrica pero si los niños están inmunizados puede afectar a la gente de mayor edad.
La difteria cutánea tb es posible.

La toxina diftérica se produce en el foco de la infección y dps se disemina mediante la sangre para producir las
manifestaciones sistémicas de difteria (pero no es preciso q el mo entre en la sangre para producir enfermedad).

Difteria Respiratoria  hay un periodo de incubación de 2 a 4 días. Los mo se multiplican localmente en céls
epiteliales faríngeas y/o superficies adyacentes. Inicialmente hay daño localizado x acción de la toxina y el inicio es
brusco con faringitis exudativa, febrícula.
El exudado evoluciona a una PSEUDOMEMBRANA espesa compuesta de bacterias, linfocitos, céls plasmáticas, fibrina
y céls muertas q pueden recubrir las amígdalas, úvula, paladar y puede extenderse hacia nasofaringe ó hacia laringe.
La pseudomembrana se adhiere firmemente al tej subyacente y es muy difícil despegarla xq provoca sangrado (algo
particular de la difteria). Conforme el pte se recupera, al cabo de una semana, la pseudomembrana se despega y se
expectora.
Las complicaciones sistémicas graves comprometen el corazón y sist nervioso:
- Indicios de miocarditis dps de 1 a 2 semanas. Puede progresar a enfermedad grave con insuficiencia cardiaca
congestiva, arritmias, muerte
- Neurotoxicidad: es proporcional a la gravedad de la enfermedad primaria, lo cual depende de la inmunidad del pte.
Inicialmente la neuropatía afecta paladar blando y faringe, dps parálisis oculomotora con progresión a neuritis
periférica.

Difteria Cutánea  se adquiere mediante contacto cutáneo con otras personas infectadas. El mo coloniza la piel y
coloniza el tej subcutáneo a través de las grietas de la piel. Primero, se desarrolla una pápula q evoluciona a una
úlcera crónica q no cicatriza (recubierta a veces de una membrana grisácea).
En la herida, suele haber S. aureus y S. pyogenes.

53
El Factor de Elongación 2 es imprescindible para el movimiento de las cadenas peptídicas nacientes en los ribosomas.
BORDETELLA PERTUSSIS
El género está constituido x varias especies: pertussis, parapertussis, bronchiseptica, holmesii.

Características Grales
- Cococabilos Gram- muy pequeños
- Aerobio estricto
- Inmóvil
- NO fermentan HdeC pero oxidan aa
65

DX y Estudio de Laboratorio
La mejor muestra para cultivar esta bacteria es la secreción de nasofaringe posterior x aspiración ó mediante hisopo
con alginato de calcio (hisopos de faringe y esputo son inadecuados)
B. pertussis es la especie con más requerimientos nutricionales: necesitan medios complejos para su crecimiento con
sangre, carbón ó almidón.
- Medio de Cutivo selectivo: Agar Bordet – Gengou (agar sangre almidón). Se incuba durante 7 a 12 días y deben
controlarse diariamente.
- PCR  de elección; método utilizado en la práctica clínica.

Factores de Virulencia de Bordetella Pertussis

1) Adhesinas  median la adhesión a las céls epiteliales ciliadas
- Hemaglutinina Filamentosa (HAF)
- Fimbrias
- Pertactina

2) Toxina Pertussis  aumenta las secreciones respiratorias al aumentar la secreción de moco, característico de la
fase paroxística de la tos convulsa.
Esta toxina consta de una sub-unidad tóxica F1 y cinco sub-unidades de unión S1 a S5.

3) Toxina Adenilato-Ciclasa  inhibe quimiotaxis, fagocitosis y fc de leucocitos.

4) Citotoxina Traqueal  en bajas concentraciones produce ciliostasis54 alterando los mecanismos normales de
limpieza del árbol repsiratorio promoviendo la acumulación de moco y tos ferina.

5) Toxina Dermonecrótica  a bajas dosis es termolábil. Produce obstrucción tisular localizada.

6) LPS  Lipido A y X, estimulan la Vía Alterna del Complemento y la liberación de citoquinas.

Patogenia
La tos ferina es una enfermedad del ser humano sin otros reservorios animales o ambientales conocidos. Es una
enfermedad altamente contagiosa x via inhalatoria y con peor pronóstico en bebes menores de 02 meses ya q recién
a partir de esta edad pueden darse la vacuna.
1) Adherencia al epitelio traqueal y bronquial mediante adhesinas, hemaglutinina filamentosa y fimbrias
2) La bacteria no se comporta de manera invasiva, no atraviesa la membrana basal del epitelio respiratorio
3) Multiplicación local. Tb genera lesiones marcadas x las toxinas (LPS y citotoxina traqueal) en ap resp sup e inf.

54
Inhibición del movimiento ciliar.
Eventuales manifestaciones sistémicas x intensa reacción inflamatoria.
En niños pequeños puede generar bronquiolitis necrotizante, daño alveolar difuso, hemorragias intra-alveolares y
bronconeumonía. Las formas más severas pueden llevar a la hipertensión pulmonar.

La infección inicia cuando se inhalan los aerosoles infecciosos y las bacterias se adhieren y proliferan sobre las céls
epiteliales ciliadas. Tras aprox 10 días de incubación, el cuadro clínico clásico de la tos ferina progresa en tres
estadios:
- Fase Catarral. Similar a un resfriado común, rinorrea serosa, estornudos, malestar, anorexia, febrícula. Es
indistinguible de otras afecciones virales. 66

Durante este periodo, se produce un pico en el nro de bacterias y como aún no se ha diagnosticado la causa de la
enfermedad, los ptes en esta fase catarral suponen un riesgo elevado para sus contactos.
Dps de 1 a 2 semanas:
- Fase Paroxistica: dura 1 a 4 semanas. Se caracteriza x accesos típicos de tos violentos, espasmódicas, sin
interrupción, con estridor característico (“gallo inspiratorio”). Suele haber vómitos posteriores y agotamiento. En
esta fase es cuando las céls epiteliales ciliadas son forzadas al exterior del árbol respiratorio y comienza a alterarse la
eliminación de moco. En esta fase hay linfocitosis intensa.
Es grave cuando son niños menores de 6 meses y el 70% de estos niños requiere hospitalización.
- Fase de Convalecencia: disminuye el nro y gravedad de los paroxismos pero pueden aparecer complicaciones
secundarias

La infección x B. pertussi y el desarrollo de tos paroxística exige la exposición al mo, el acoplamiento de las bacterias
a las céls epiteliales ciliadas del sistema respiratorio, la proliferación de las bacterias y la producción de una lesión
tisular localizada con toxicidad sistémica.
Las formas atípicas de la tos convulsa suele verse en RN con bajos niveles de Acs transferidos x sus madres ó en
niños vacunados de modo incompleto

HAEMOPHILUS INFLUENZAE
Los géneros más importantes de la familia Pasteurellaceae son: Haemophilus, Aggregatibacter y Pasteurella.

Los mo de Haemophilus son bacilos Gram- pequeños q se encuentra en las mucosas de las personas. H. influenzae es
la especie q se asocia con mayor frecuencia a enfermedad aunq la vacuna contra H. influenzae tipo b redujo
muchísimo la incidencia de enfermedad particularmente en la población pediátrica.

Caracteristicas Grales
- Cocobacilo Gram-
- NO esporulado, inmóvil
- Existen cepas capsuladas (tipificables) y no capsuladas (no tipificables).
Las cepas capsuladas determinan los serotipos: A, B, C, D, E, F.
- Exigentes a nivel nutricional: requieren Factor X (Hemina), Factor V (NAD) ó ambos para su desarrollo.
Prueba de Satelitismo: se realiza con S. aureus; determina el crecimiento de la bacteria x presencia de Factor X y
Factor V. Se forman colonias alrededor del Staphylococcus y crecen gracias a esos factores.
- Crecen en medios enriquecidos, como Agar Chocolate (o sea Agar Sangre calentado).

La estructura de la pared celular de Haemophilus es la típica de otros bacilos Gram-: posee un LPS con actividad de
endotoxina y la membrana ext presenta prots especificas de cepa y especificas de especie.
La superficie de muchas de las cepas de H. influenzae está recubierta de una cápsula de polisacárido identificándose
seis serotipos (a – f).

Factores de Virulencia
1) Polisacárido capsular (a – f)
- TIPO b (Hib): asociado a infecciones sistémicas severas como menigitis, neumonias, artritis sépticas, epiglotitis,
celulitis. Era la causa más frecuente de meningitis bacteriana en niños antes de la incorporación de la vacuna al
calendario nacional obligatorio en el año 1998. 67

2)LipoOligoSacárido

3) IgA Proteasa  promueve la colonización de mucosas

PATOGENIA
BACTERIA ALTAMENTE ADAPTADA AL HUESPED HUMANO, PARÁSITA ESTRICTA DEL HOMBRE.
COLONIZA VÍAS AÉREAS SUPERIORES DE ADULTOS Y NIÑOS.
LA DISEMINACIÓN INTERHUMANA OCURRE POR CONTACTO DIRECTO.

Después de la introducción de la vacuna, la mayoría de las enfermedades se deben a cepas no tipificables, o sea no
capsuladas. Las cepas no capsuladas colonizan las vías resp superiores en casi todos los inidividuos durante los
primeros meses de vida. Estos mo pueden diseminar localmente y producir enfermedad en oídos (otitis media),
senos paranasales (sinusitis), vías respiratorias inferiores (bronquitis, neumonía). Pero la enfermedad diseminada es
infrecuente.

Haemophilus no-tipificables  neumonía, otitis media, sinusitis, mastoiditis, conjuntivitis

H. influenzae con cápsula, ppalmente el serotipo b, suele constituir causa frecuente de enfermedad en niños no
vacunados: meningitis, epiglotitis (laringitis obstructiva), celulitis.
Los pili y adhesinas intervienen en la colonización de la bucofaringe x H. influenzae.
Los componentes de la pared celular bacteriana (glucopolisacáridos y glucopeptidos) alteran la fc ciliar y dañan el
epitelio respiratorio. Dps, las bacterias pueden translocarse a través de céls epiteliales y endoteliales para ingresar al
torrente circulatorio.
En ausencia de Acs opsonizantes específicos dirigidos contra la capsula polisacárida puede producirse bacteriemia
con gran nro de bacterias y diseminación a las meninges u otros focos distales  el ppal factor de virulencia de H.
influenzae tipo b es la CAPSULA ANTIFAGOCITICA.
Los Acs contra la cápsula suponen un gran estimulo para la fagocitosis bacteriana y actividad bactericida mediada x
el Complemento  los Acs se desarrollan x la infección natural y x la vacunación (ó transferencia pasiva de Acs
maternos).
La gravedad de la enfermedad sistémica se relaciona inversamente con la tasa de eliminación de las bacterias del
torrente sanguíneo y el riesgo de meningitis y epiglotitis es mucho mayor en pctes sin vacunación ó con
esplenectomía.

Hib  meningitis, neumonía, epiglotitis, celulitis, artritis séptica

Dx de muestras
- Neumonía  Esputo si el pte está lucido; hemocultivo.
- Meningitis  LCR
- Tinción de Gram
- Cultivo en medios enriquecidos como Agar Chocolate. Las bacterias aparecen como colonias opacas y lisas de 1 a 2
mm dps de 24 hs devincubación.
- Agar Sangre: H. influenzae puede crecer junto con S. aureus. Los estafilococos aportan los factores de crecimiento
al lisar los eritrocitos presentes en el medio, liberar el hemo intracelular (Factor X) y excretar NAD (Factor V). Las
colonias de H. influenzae en estos cultivos presentan menor tamaño q en Agar Chocolate ya q NO se han inactivado
los inhibidores del Factor V.

68

HAEMOPHILUS DUCREYI
H. Ducreyi tiene todas las características de Haemophilus.
Es el agente etiológico del chancro blando ó chancroide, una enfermedad de transmisión sexual. Se asocia a malas
condiciones de higiene y baja condición socioeconómica.
La lesión se torna dolorosa en aprox 2 días: comienza como una pápula y evoluciona hacia una úlcera dolorosa con
márgenes netos pudiendo existir lesiones satélites y linfadenopatías inguinales también dolorosas.
El diagnóstico de la enfermedad es esencialmente clínico pero deben descartarse infecciones con cuadro clínico
similar: Herpes, Sífilis, HIV.

DX
- toma de muestra y trasporte al laboratorio
- bacterioscopía (gram)
- cultivo en Agar GC (microorganismo de difícil cultivo). Murray plantea q se describe q es mejor cultivarlo en Agar
para gonococos complementado con hemoglobina, suero fetal bovino, enriquecimiento con IsoVitaleX y
vancomicina. El cultivo debe mantenerse al menos 7 días en una atmósfera al 10% de CO2.
Los medios de cultivo y condiciones de incubación no se emplean para otros cultivos bacterianos, entonces la
recuperación satisfactoria de H. ducreyi requiere q el microbiólogo investigue específicamente esta bacteria.

Moraxella catarrhalis
- Diplococo gram negativo
- Aerobio estricto
- Oxidasa positivo
- Comensal del tracto respiratorio superior y del 1 al 5% de los adultos sanos están colonizados en las vías
respiratorias altas

- Causa frecuente de bronquitis y bronconeumonía (en ancianos con enfermedades pulmonares crónicas)
- Endocarditis y sepsis en huéspedes especiales (hemocultivo)
- Sinusitis, otitis: fundamentalmente en personas sanas
- Etiología frecuente de otitis media en niños

Diagnóstico microbiológico:
- toma de la muestra y transporte al laboratorio
- bacterioscopía
- cultivo en Agar Sangre, caracterización y antibiograma.

La mayoría de las cepas producen B-lactamasas y son resistentes a la penicilina pero presentan sensibilidad uniforme
a los otros atb: cefalosporinas, eritromicina, tetraciclinas, combinación de penicilina con ácido clavulanico (Inhibidor
de B-lactamasa).