Facultad de Ciencias Naturales
Laboratorio de Biología Celular
Alumno: _______________________________________________ Código: ___________
Alumno: _______________________________________________ Código: ___________
Laboratorio 1: I- Introducción. II- Descubriendo la
célula, una revisión histórica e histológica
OBJETIVOS:
1. Conocer las normas básicas de seguridad para trabajar en el laboratorio,
especialmente en lo relacionado con: el vestuario, comportamiento,
bioseguridad. Manejo de equipos y materiales.
2. Familiarizarse con el uso y función de los equipos de laboratorio,
especialmente con el microscopio y el estereoscopio.
3. Determinar la magnificación de los oculares, los objetivos y calcular la
magnificación total del microscopio óptico.
4. Aprender el protocolo correcto para observar micro-preparados en el
microscopio y reconocer los tipos de muestras que generaron la teoría
celular.
5. Identificar y describir las diferencias entre las células entre las células
animales y vegetales.
ACTIVIDAD 1: LAS MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
A- Normas básicas de seguridad en el laboratorio de biología celular.
El laboratorio de biología celular es un espacio donde se pueden presentar algunos
imprevistos, tales como incendios, intoxicaciones, contaminaciones, quemaduras o heridas.
Sin embargo, estos riesgos se pueden minimizar, si se aplican las debidas normas de
seguridad y se toman las respectivas precauciones para el buen desarrollo de las prácticas.
Para trabajar en un laboratorio, es necesario saber con antelación qué se va a hacer, con
qué materiales se va a trabajar y cómo se deben usar; esto evitará inconvenientes asociados
a la falta de información.
Entre las principales normas de seguridad que deben cumplir los estudiantes, se encuentran:
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Vestuario
✓ Ingresar al laboratorio con la bata puesta y abotonada.
✓ Utilizar siempre zapatos cerrados
NO usar vestimenta corta ni joyas y mantener el cabello recogido
Comportamiento
✓ Utilizar los elementos de Bioseguridad pertinentes (Bata, guantes, gafas,
tapabocas, etc.)
NO fumar, comer, beber o mascar chicle.
NO pipetear con la boca.
NO correr, gritar, empujarse, o causar pánico.
NO arrojarse líquidos o reactivos.
Está PROHIBIDO el uso de teléfonos celulares y computadores portátiles
dentro del laboratorio.
✓ Utilizar los elementos del laboratorio únicamente dentro de este.
✓ Conocer la ficha técnica de un reactivo previa manipulación.
NO utilizar los equipos del laboratorio sin conocer las instrucciones de manejo.
En caso de embarazo NO manipular sustancias tóxicas.
✓ Informar inmediatamente de cualquier derrame ocurrido en el laboratorio.
Bioseguridad
NO es permitido manipular las manijas de las puertas con los guantes puestos.
Desechar los guantes usados ÚNICAMENTE en la bolsa roja.
NO tocarse el rostro, los ojos, la nariz, la boca, el cabello o la piel en general
con los guantes puestos.
✓ Cumplir con el programa de vacunación establecido por la Universidad Icesi,
para el ingreso a los laboratorios (vacuna contra el tétano).
✓ Seguir los procedimientos establecidos por el profesor del laboratorio, para el
manejo de preparados y micro-preparados.
✓ Si sus manos han entrado en contacto con muestra de agua, animales o plantas
acuáticas, al terminar su manipulación, debe lavarse las manos con agua y jabón.
NO introducir ningún elemento a la boca.
✓ Identificar la ubicación de la ducha lavaojos, extintores y salidas de
emergencias.
✓ En caso de emergencia, de aviso al profesor o persona encargada del laboratorio
y comuníquese a la línea #00 para obtener ayuda.
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Manejo de equipos y Materiales
✓ Cada estudiante es responsable de su área de trabajo.
NO trabajar lejos de la mesa de laboratorio, no colocar objetos en el borde
✓ Verificar que el material de vidrio esté en buenas condiciones en el momento de
recibirlo y devolver el material astillado o quebrado a la persona responsable.
✓ Depositar el material de vidrio roto en el lugar apropiado para tal fin (tarro
blanco).
✓ Reportar al profesor el material / equipo: quebrado, extraviado o dañado.
ACTIVIDAD 2: INSTRUMENTOS DEL LABORATORIO Y SU USO
CORRECTO: ESTEREOSCOPIO Y MICROSCOPIO
EL ESTEREOSCOPIO
El Estereoscopio (Microscopio Estereoscópico o Microscopio de disección) es un
instrumento de precisión óptica que permite una visión tridimensional de objetos y
especímenes demasiado pequeños para ser estudiados a simple vista. Su principal
diferencia con el Microscopio Compuesto es que proporciona una menor
magnificación de la imagen (2 - 10 x), lo cual permite observar objetos gruesos y
opacos, de un tamaño mayor a 1 mm, como insectos, hojas, colonias de
microorganismos, entre otros.
Las partes que componen un estereoscopio son:
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EL MICROSCOPIO COMPUESTO
El microscopio es un instrumento óptico que amplifica la imagen de especímenes cuyo
tamaño es inferior a 1mm (células animales, vegetales, bacterias, hongos etc.); esto, gracias
a un sistema de lentes que permiten el paso de los rayos de luz a través del objeto hasta
llegar a los ojos del observador.
Las partes que componen un Microscopio son:
Las partes del microscopio se han agrupado en tres sistemas dependiendo de la función que
cumplen:
Sistema óptico: Comprende el juego de lentes que permiten la magnificación de los
objetos o especímenes. Forman parte de éste sistema: los oculares y los objetivos.
El sistema de oculares viene equipado con un par de lentes que magnifican la imagen
entre 10 y 20 veces (Aumento 10 – 20x). Adicionalmente permite hacer dos tipos de
ajuste: la distancia interocular y el grado de dioptría (grado de miopía o
hipermetropía), permitiendo que cada usuario obtenga la corrección óptica
correspondiente.
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Los objetivos son el grupo de lentes que se encuentra más cerca del micro-preparado;
comúnmente los han clasificado en dos tipos: los Objetivos Secos y el Objetivo de
Inmersión.
Objetivos Secos: Son los objetivos de menor aumento (4x, 10x, 40x) y se utilizan
para realizar enfoques simples. Permiten una magnificación de 4, 10, o 40 veces
el objeto observado, es decir:
Si un objeto mide 0.5 milímetros (500 micrómetros), al verlo con un aumento de
4x se observará de 2 mm, con 10x de 5 mm y con 40x de 20 mm.
0.5 mm x 4 = 2 mm
0.5 mm x 10 = 5 mm
0.5 mm x 40 = 20 mm
Sin embargo hay que recordar que en el microscopio, los oculares introducen otro
aumento a la imagen, si este aumento fuera de 20x lo que obtendríamos sería que
observándolo con el objetivo de 4x se vería de 40 mm, con el de 10x se vería de
100 mm y con el de 40x se vería de 400 mm.
0.5 mm x 4 x 20 = 40 mm (80 veces más grande)
0.5 mm x 10 x 20 = 100 mm (200 veces más grande)
0.5 mm x 40 x 20 = 400 mm (800 veces más grande)
Este tipo de objetivos es de gran utilidad para observar animales pequeños
(copépodos, ostrácodos, pulgas de agua), amebas, ciliados, entre otros.
Objetivo de Inmersión: Es el objetivo de mayor aumento, magnifica la imagen
100 veces (100x). Permite la observación de organismos muy pequeños, tales
como bacterias o protozoarios diminutos. Para usar correctamente el objetivo de
inmersión, es necesario colocar una gota de aceite de inmersión entre el objetivo y
el micro-preparado.
Sistema de iluminación: Comprende los elementos que permiten la incidencia de
la luz sobre el micro-preparado. Estos son:
Fuente de iluminación (lámpara): Foco que dirige los rayos luminosos hacia el
condensador.
Diafragma: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
Sistema Mecánico: Comprende los elementos que sostienen tanto el sistema óptico
como el sistema de iluminación del microscopio, además de permitir el transporte
del mismo y dar soporte a las muestras para observación. Conforman este sistema:
Cabeza binocular: Contiene los sistemas de lentes oculares.
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Revólver: Es la pieza giratoria donde se encuentran los objetivos, permite cambiar
fácilmente de un objetivo a otro.
Platina: Superficie plana en donde se coloca la preparación, se localiza debajo de
los objetivos.
Pinza de la platina: Se localiza en la platina y se utiliza dejar la preparación fija.
Anillo macrométrico: Se utiliza para subir y bajar la platina mediante movimientos
rápidos; es el que aproxima el enfoque.
Anillo micrométrico: Es utilizado para hacer movimientos finos y lograr un
enfoque correcto.
Tornillos para carro de la platina: Permiten el desplazamiento de la platina hacia
los lados (eje x), hacia atrás y adelante (eje y).
Palanca de Diafragma: Se utiliza para abrir y cerrar el diafragma.
Soporte: Está compuesto por la base y el brazo; se utilizan para el transporte del
microscopio.
Tabla 1. Diferencias entre el estereoscopio y el microscopio
Característica Estereoscopio Microscopio
Tamaño aproximado de los ≥ 1 mm (para observar ≤ 1 mm (para observar
organismos (u organelos) a objetos gruesos) sólo objetos o capas
observar delgadas)
Forma de desplazar los objetos Manual Sistema mecánico
Número de objetivos que enfocan 2 1
el espécimen simultáneamente (= visión estereoscópica (= visión plana)
o en 3D)
Vidriería necesaria Caja Petri Portaobjetos y
cubreobjetos
Rango de aumento en los 2x – 10 x 10x – 100x
objetivos
Iluminación La luz es reflejada por el La luz atraviesa el objeto
objeto (luz incidente) (luz transmitida)
Precauciones en el manejo del Microscopio y Estereoscopio
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NO utilizar rímel o pestañina
NO tocar los lentes con los dedos o algún objeto sólido
✓ La limpieza de los lentes se realiza EXCLUSIVAMENTE con papel de arroz.
No encender y apagar repetidamente la fuente de iluminación
No llevar la lámpara al máximo voltaje
✓ Antes de apagar el equipo, disminuya la intensidad de la luz de la lámpara hasta
el mínimo
✓ Una vez apagada la lámpara dejar en reposo mínimo 15 minutos antes de
desplazar el equipo.
II- Descubriendo la célula, una revisión histórica e
histológica
La Biología Celular estudia las propiedades, estructuras, funciones, ciclo de vida e
interacciones existentes entre las células y el medio externo. Para poder hablar de esta
ciencia, es pertinente conocer sus inicios y las observaciones que contribuyeron a descubrir
todo lo que sabemos hoy de las células.
El científico inglés Robert Hooke publicó en 1665 su libro “Micrografía”; en el que
describía sus observaciones microscópicas y telescópicas. En dicha publicación, Hooke fue
el primero en emplear el término célula para referirse a organismos vivos. Con ayuda de un
microscopio compuesto, examinó una muestra de corcho en donde la forma de las células
vegetales le recordó las celdas que habitaban los monjes, razón por la cual, les dio el
nombre de células o cells (en inglés).
A la izquierda, uno de los
microscopios de Robert Hooke que se
encuentra en el Museo Nacional de
Medicina en Washington, DC. A la
derecha el dibujo de Hooke
representando lo que observó al
examinar la muestra de corcho con su
microscopio
El holandés Antonie Philips van Leeuwenhoek fue otro científico del siglo XVII, diseñó
una metodología para producir esferas de vidrio muy pequeñas y de alta calidad, que
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utilizaba como lentes biconvexos; dichos lentes eran instalados en láminas de cobre o plata,
dando lugar a microscopios capaces de magnificar objetos hasta 275 veces.
En 1673 sus observaciones más tempranas, de aguijones y partes
bucales de abejas, fueron publicadas por la Royal Society of
London, la primera academia científica de Inglaterra. A pesar de
su éxito inicial, en 1676 su credibilidad fue duramente
cuestionada cuando envió a la Royal Society una copia de sus
primeras observaciones de organismos microscópicos
unicelulares, algas y protozoarios que observó examinando una
gota de agua de un charco.
Hasta ese momento la existencia de vida microscópica era
totalmente desconocida. Eventualmente la Royal Society envió
una comisión, de la cual formó parte Robert Hooke, para
verificar las observaciones de Van Leeuwenhoek. Finalmente, en
Réplica de un
microscopio construido
1680 sus observaciones fueron totalmente respaldadas por la
por Van Leeuwenhoek. Royal Society y fue nombrado como miembro de la misma.
Sin embargo fue hasta 1838 que se recoció la importancia de las células como
constituyentes de las plantas y los animales, con lo que Matthias Schleiden y Theodor
Schwann (botánico y zoólogo respectivamente) formularon los dogmas de la teoría celular:
“La célula es la unidad estructural de la vida”
“Todos los organismos están compuestos de una o más células”
Seguridad durante la práctica:
Normas de Seguridad: El estudiante debe referirse a lo visto anteriormente.
Elementos de protección personal:
✓ Es INDISPENSABLE utilizar Bata de laboratorio durante el desarrollo de
la práctica.
MATERIALES Y REACTIVOS POR GRUPO DE DOS PERSONAS:
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Equipos Cantidad
Microscopio 1 unidad
Insumos Cantidad
Portaobjetos 1 unidad
Cubreobjetos 1 unidad
Gotero 1 unidad
Recorte de la letra “e” (papel periódico) 1 unidad
Set de láminas preparadas “La célula animal y vegetal típica” de Carolina 1 unidad
Biological Supply con muestras de: corcho, epidermis de cebolla, células
epiteliales de mucosa oral, corte de hígado de Salamandra, corte transversal
de una hoja y células espermáticas humanas.
ACTIVIDAD 3: APRENDER A ENFOCAR Y CALCULAR LA MAGNIFICACIÓN
DE MUESTRAS VISTAS CON EL MICROSCOPIO
Montaje húmedo de la letra “e”
1. Con unas tijeras corte la letra “e” del periódico.
2. Disponga la letra sobre un portaobjetos en la orientación adecuada para leerla.
3. Con ayuda de un gotero, adicione una gota de agua sobre el papel.
4. Cubra la muestra con un cubreobjetos.
5. Ubique el portaobjetos en la platina de forma que la letra esté en la orientación
adecuada para leerla.
6. Con el objetivo de menor aumento en posición (4x), mueva el anillo macrométrico
para subir la platina hasta enfocar la letra “e”. Dibuje lo que observa en el espacio
que se le brinda a continuación.
4x
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7. ¿Qué posición tiene la imagen, con respecto a lo que usted observa sin el
microscopio?
8. Mueva la platina hacia la derecha. ¿En qué dirección se mueve la imagen?
9. Ahora, mueva la platina hacia usted. ¿En qué dirección se mueve la imagen?
10. Vuelva a centrar la muestra. Cambie el objetivo por el de 10x. Utilizando el anillo
micrométrico enfoque la letra y dibuje lo que observa. Ahora, cambie el objetivo
por el de 40x. Utilizando el anillo micrométrico enfoque la letra y dibuje lo que
observa.
10x 40x
11. Al cambiar a objetivos de mayor aumento, ¿Es el campo de observación mayor o
menor?
12. ¿Es la iluminación más o menos fuerte con el objetivo de mayor aumento? ¿Por
qué?
13. Ubique el diafragma y muévalo; ¿Qué ocurre cuando lo abre? ¿Qué ocurre cuando
lo cierra?
Determinación de la magnificación total del Microscopio.
Observe detenidamente los oculares y objetivos, localice los números que indican la
magnificación (aumento) de los mismos. Con ayuda de estos datos determine:
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1. La magnificación total teniendo en cuenta los oculares y el objetivo de MENOR
aumento:
Magnificación del ocular ____ X Magnificación del objetivo ____ = Magnificación total:
_____
2. La magnificación total teniendo en cuenta los oculares y el objetivo de MAYOR
aumento (objetivo de inmersión):
Magnificación del ocular ____ X Magnificación del objetivo ____ = Magnificación total:
_____
3. Explique por qué el microscopio óptico se conoce como microscopio compuesto:
4. Escriba la fórmula para calcular la magnificación total del microscopio compuesto:
ACTIVIDAD 4: OBSERVACIÓN DE LÁMINAS PREPARADAS DE CÉLULAS
VEGETALES Y ANIMALES
Corcho
1. El profesor le entregará una lámina que contiene células de corcho. Ubíquela en la
platina y enfoque en 4x.
2. Una vez la imagen sea nítida, cambie el objetivo por el de 10x y enfoque utilizando
UNICAMENTE el tornillo micrométrico
3. Dibuje lo que observa 10x en el espacio que se indica más adelante.
4. Ahora, cambie el objetivo por el de 40x y enfoque. Dibuje lo que observa.
10X 40X
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La forma de “celdas” fue lo que inspiró a Robert Hooke para utilizar el término
células al describir los compartimentos formados por las células de la corteza de
corcho.
5. ¿Estaban vivas estas células al preparar la muestra? ¿Por qué?
Epidermis de cebolla
1. El profesor le entregará una lámina que contiene células de epidermis de cebolla,
enfoque en 4x.
2. Una vez la imagen sea nítida, cambie el objetivo por el de 10x, enfoque y dibuje lo
que observa en el espacio que se indica más adelante.
3. Cambie el objetivo por el de 40x, enfoque y dibuje lo que observa.
10x 40x
4. ¿Qué diferencia observa entre esta muestra y la de corcho?
5. ¿Estaban vivas estas células al preparar la muestra? ¿Por qué?
Células epiteliales de la mucosa oral:
1. El profesor le entregará una lámina que contiene células de mucosa oral, enfoque
utilizando el objetivo de 4x.
2. Una vez la imagen sea nítida, cambie el objetivo por el de 10x, enfoque y dibuje lo
que observa en el espacio que se indica más adelante.
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3. Cambie el objetivo por el de 40x, enfoque y dibuje lo que observa.
10x 40x
4. ¿Qué diferencia observa entre la forma de estas células y las de la epidermis de la
cebolla?
5. ¿Tienen estas células pared celular?
6. Estas células han sido teñidas para resaltar la presencia del núcleo. En algunos de
los núcleos se alcanza a observar otra estructura dentro del mismo. ¿Cómo se llama
la estructura celular que se encuentra dentro del núcleo?
7. Las estructuras pequeñas que se observan en gran número son bacterias
normalmente presentes en la mucosa oral. ¿Qué diferencia entre las células
procariotas y eucariotas es evidente en esta preparación?
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Corte transversal de una hoja:
La hoja es un órgano vegetal formado por varios tipos de células que componen los
tejidos de la epidermis, el parénquima y el tejido vascular. El profesor le entregará una
lámina que contiene el corte transversal de una hoja, enfoque utilizando el objetivo
de 4x, posteriormente observe con los objetivos de 10 y 40 x.
Las células del parénquima en empalizada tienen una alta densidad de organelos
teñidos de color púrpura. Estos son los cloroplastos, el organelo donde ocurre la
fotosíntesis (que en tejidos vivos son verdes).
En el centro de la muestra se observa el haz vascular central de la hoja; el cual está
conformado por los tejidos xilema y floema que transportan agua y azucares
respectivamente.
1. ¿Qué diferencia observa en la densidad de las células entre la parte superior y la
parte inferior del tejido?
2. ¿Qué diferencia observa en la pigmentación de las células de la epidermis y las
células del parénquima en empalizada?
3. Las células del parénquima esponjoso tienen menor densidad. ¿Qué diferencia
observa en la forma de estas células comparadas con las del parénquima en
empalizada?
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4. Las células oclusivas forman los estomas; estructuras por las que salen y entran
gases (oxígeno y dióxido de carbono) de la hoja. Por los estomas también se pierde
agua por evaporación. Identifique los estomas en su muestra, ¿dónde hay más
estomas, en la parte superior o inferior de la hoja? ¿Por qué?
5. Diría usted que, ¿la hoja tiene muchos o pocos cloroplastos? ¿Tienen cloroplastos
todas las células de la hoja?
Espermatozoides
El semen es una secreción líquida y viscosa producida en el aparato genital masculino
de todos los animales; está compuesto por plasma o líquido seminal y espermatozoides.
Los espermatozoides, son células haploides cuya función es formar un cigoto al
fusionarse con el gameto femenino, dando lugar al embrión y al feto. Su producción se
realiza en los túbulos seminíferos de los testículos y su almacenamiento en el
epidídimo.
Los gametos masculinos fueron identificados por Leeuwenhoek en 1679, y a partir de
la fecha se ha estudiado su estructura, motilidad, función, alteraciones, y el papel que
cumplen todas estas características en la capacidad de fecundar. Las partes de un
espermatozoide son:
Estructura Característica
Formada principalmente por dos partes:
Acrosoma: Es la estructura que favorece la
penetración del espermazoide al óvulo, gracias a
que contiene enzimas como la hialuronidasa y
Cabeza acrosinasa que degradan la pared que rodea el
ovocito.
Núcleo: Es la única estructura que ingresa al
óvulo, y contiene la carga genética del
espermatozoide
Contiene mitocondrias organizadas
Parte
helicoidalmente, que proveen de energía al
Intermedia
espermatozoide para moverse
Cola Proporciona movilidad al espermatozoide.
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1. El profesor le entregará una lámina que contiene células espermáticas humanas,
enfoque utilizando el objetivo de 4x.
2. Una vez la imagen sea nítida, cambie el objetivo por el de 10x, enfoque y dibuje lo
que observa en el espacio que se indica más adelante.
3. Cambie el objetivo por el de 40x, enfoque y dibuje lo que observa. Identifique en su
dibujo las partes que observa
10x 40x
Corte histológico de hígado:
1. El profesor, le entregará una preparación histológica de hígado de Amphiuma (un tipo
de salamandra). El hígado es un órgano formado por varios tipos de célula que
componen los tejidos hepático, conectivo y vascular.
2. Enfoque utilizando el objetivo 4x y realice un recorrido general de la muestra. Los
espacios en blanco rodeados por un tejido rosado son tejido vascular, venas y arterias.
3. Cambie el objetivo por el de 10x. Utilizando el anillo micrométrico enfoque la
muestra. Examine el tejido hepático alejándose de venas y arterias.
4. Ahora, cambie el objetivo por el de 40x. Las células grandes de citoplasma color
rosado y núcleo color púrpura son los hepatocitos. ¿Identifica alguna estructura
dentro del núcleo? Nómbrela.
5. Entre el tejido hepático hay
otras células grandes con una
alta densidad de vesículas llenas
de un pigmento oscuro. Estas
son células pigmentadas,
cromatóforos del tejido
conectivo.
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Ahora, busque los vasos sanguíneos, puede hacerlo volviendo al objetivo 10x.
Observe las paredes de los vasos compuestas de células de músculo liso.
6. ¿Identifica estructuras compuestas de células cuyos núcleos teñidos de azul se
agrupan para formar círculos? Estos son los ductos biliares.
BD: ducto biliar HA: Rama de la arteria hepática
Lectura previa:
Capítulo 1, “Biología Celular y Molecular” de G. Karp. 5 edición.
REFERENCIAS
Guía de estudio para el set de “La célula animal y vegetal típica” de Carolina
Biological Supply, U.S.A.
Imágenes:
Figura 36-5 “Biología” de Curtis.
Banco de recursos digitales para enseñar biología: http://biodidac.bio.uottawa.ca/
http://www.floresdelsureste.org
Elaborado por:
Fecha:
Página | 17
