PERFIL LIPÍDICO

DRA. ISABEL FLORES GUZMÁN

LÍPIDOS

 Provienen por ingesta de alimentos y síntesis del organismo

 Son constituyentes esenciales de las membranas
 Son precursores de hormonas y ácidos biliares
 Insolubles en medio acuoso
 Necesitan sistema de transporte para su distribución en el organismo
 LIPOPROTEÍNAS PLASMÁTICAS

 Estructura esférica cuya parte central es hidrofóbica rodeada

por una capa hidrofilica
QUILOMICRONES

 Lipoproteínas mas grandes con sobre todo triglicéridos

 Son de menor densidad
 La única lipoproteína con que contiene apo B48
 Contiene apo AI, AIV, CI, CII, CIII, E adquiridas de otras lipoproteínas
 Sintetizadas en intestino
 No están presentes en ayunas
VLDL (LIPOPROTEÍNA DE MUY LDL (LIPOPROTEÍNA DE BAJA
BAJA DENSIDAD) DENSIDAD)

 Se sintetiza en hígado  Rica en colesterol

 Es el principal transportador de triglicéridos  Generada del metabolismo del VLDL
endógenos
 Contiene principalmente apo B100
 Contiene mas colesterol y proteínas que los
quilomicrones
 Partículas grandes dispersan la luz
 Cuando hay en exceso de VLDL, el plasma se
observa turbio
 Contiene apo B100, apo E, apo CII
HDL (LIPOPROTEÍNAS DE ALTA DENSIDAD)

 Se sintetiza en el hígado e
intestino
 Lipoproteína mas pequeña y de
mayor densidad
 Rica en proteínas y fosfolípidos
 Contiene apo A1 y AII
ALTERACIONES DEL METABOLISMO LIPÍDICO

 Primarias sin patologías previas

 Hábitos de vida, dieta, sedentarismo
 Secundarias a otras patologías
 Diabetes, hipotiroidismo, síndrome nefrótico y
hepáticos.
 Pueden ser hipercolesterolemias,
hipertrigliceridemias o dislipidemias mixtas
ESTUDIO DE LAS ALTERACIONES
LIPIDICAS EN EL LABORATORIO CLINICO
EL PERFIL LIPÍDICO

 El perfil lipídico es uno de los exámenes de laboratorio mas requeridos. En general se solicita para la pesquisa
inicial del riesgo de desarrollar una ENFERMEDAD CARDIOVASCULAR producto de una dislipidemia (un
trastorno del metabolismo de lípidos).
 CONSIDERACIONES PRE ANALÍTICAS
(VARIABILIDAD INTRAINDIVIDUAL E INTERINDIVIDUAL)

 La variabilidad biológica intraindividual de los lípidos es alta, (6% para colesterol y 20% para triglicéridos), por ello es
necesario confirmar un dislipidemia con dos determinaciones en especímenes obtenidos, al menos con una diferencia de
dos semanas.
Factores pre analíticos que mas influyen en la concentración sérica de lípidos:
- LA INGESTA PREVIA DE ALIMENTOS (rica en grasa) incrementa la concentración de triglicéridos hasta 10 veces mas que
en ayunas. Importante un ayuno de 12 horas previas a la extracción de espécimen.
- EL EJERCICIO disminuye la concentración sérica de triglicéridos y col-LDL, e incrementa la de HDL-colesterol.
- El TABACO incrementa la concentración de triglicéridos y col-LDL.
- LA INGESTA MODERADA DE ALCOHOL incrementa la concentración de col-HDL. El consumo excesivo incrementa la
síntesis hepática de triglicéridos.
- ALGUNAS ENFERMEDADES, como el hipotiroidismo, la diabetes mellitus, la insuficiencia renal, infecciones, etc. elevan de
forma secundaria la concentración de lípidos.
- OTROS FACTORES: Posición y la aplicación del torniquete
OBTENCIÓN Y ASPECTO DEL ESPÉCIMEN

Una vez que se ha centrifugado, el aspecto

macroscópico de la muestra ya proporciona cierta
información.
Los diversos grados de turbidez de la muestra se
relacionan con elevaciones de los niveles de
triglicéridos.
En una muestra de aspecto lechoso se puede observar
la existencia de quilomicrones si se deja reposar el
suero unas 12-16 horas a 4°C (capa cremosa en la parte
superior)
DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS

FUNDAMENTO (REACCION TRINDER).-

Los triglicéridos son determinados después de hidrolisis enzimática con lipasas el indicador es quinoneimina formada a partir
de peróxido de hidrogeno, 4- aminoantipirina y 4- chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa.
El esquema de reacción es el siguiente:

𝑳𝒊𝒑𝒂𝒔𝒂
𝐓𝐫𝐢𝐠𝐥𝐢𝐜𝐞𝐫𝐢𝐝𝐨𝐬 > 𝐆𝐥𝐢𝐜𝐞𝐫𝐨𝐥 + 𝐚𝐜𝐢𝐝𝐨𝐬 𝐠𝐫𝐚𝐬𝐨𝐬
𝑮𝒍𝒊𝒄𝒆𝒓𝒐𝒍𝑲𝒊𝒏𝒂𝒔𝒂
𝐆𝐥𝐢𝐜𝐞𝐫𝐨𝐥 𝟑 + 𝐀𝐓𝐏 > 𝐆𝐥𝐢𝐜𝐞𝐫𝐨𝐥 − 𝟑 − 𝐟𝐨𝐬𝐟𝐚𝐭𝐨 + 𝐀𝐃𝐏
𝑮𝑷𝑶
𝐆𝐥𝐢𝐜𝐞𝐫𝐨𝐥 − 𝟑 − 𝐟𝐨𝐬𝐟𝐚𝐭𝐨 + 𝐎₂ > 𝐅𝐨𝐬𝐟𝐚𝐭𝐨 𝐝𝐢𝐡𝐢𝐝𝐫𝐨𝐱𝐢𝐚𝐜𝐞𝐭𝐨𝐧𝐚 + 𝐇₂𝐎₂
𝑷𝑶𝑫
𝐇₂𝐎₂ + 𝐟𝐞𝐧𝐨𝐥 + 𝟒 − 𝐀𝐦𝐢𝐧𝐨𝐚𝐧𝐭𝐢𝐩𝐢𝐫𝐢𝐧𝐚 >quinoneimina roja + HCL + H₂O + 4 – clorofenol
DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS

PROCEDIMIENTO

BLANCO STANDAR DESCONOCIDO

Reactivo de trabajo 1 ml 1 ml 1 ml

Standard - 10 ul -

Muestra - - 10 ul

• Mezclar e Incubar 5 minutos en baño de agua a 37 ͦ C

• La absorbancia se mide a 500 nm de longitud de onda
DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS
INTERVALOS DE REFERENCIA
Suero o plasma:
SOSPECHOSO: > 150 mg/dl
ELEVADO: > 200 mg/dl

INTERFERENCIAS
-Bilirrubinas
-Acido ascórbico
- Hemoglobina
-Fármacos como los antihipertensivos, inmunodepresores o
esteroides sexuales
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL TOTAL

FUNDAMENTO (REACCION TRINDER).-

El colesterol se determina después de la hidrolisis enzimática y la oxidación, el indicador es la quinoneimina
formada por el peróxido de hidrogeno y 4 aminoantipirina en presencia de fenol y peroxidasa.
La secuencia es la siguiente:
𝒄𝒐𝒍𝒆𝒔𝒕𝒆𝒓𝒐𝒍 − 𝒆𝒔𝒕𝒆𝒓𝒂𝒔𝒂
𝐄𝐬𝐭𝐞𝐫𝐞𝐬 𝐝𝐞𝐥 𝐜𝐨𝐥𝐞𝐬𝐭𝐞𝐫𝐨𝐥 + 𝐇₂𝐎 > 𝐜𝐨𝐥𝐞𝐬𝐭𝐞𝐫𝐨𝐥 𝐥𝐢𝐛𝐫𝐞 + á𝐜𝐢𝐝𝐨𝐬 𝐠𝐫𝐚𝐬𝐨s

𝒄𝒐𝒍𝒆𝒔𝒕𝒆𝒓𝒐𝒍−𝒐𝒙𝒊𝒅𝒂𝒔𝒂
𝐜𝐨𝐥𝐞𝐬𝐭𝐞𝐫𝐨𝐥 𝐥𝐢𝐛𝐫𝐞 + 𝐎₂ > 𝐜𝐨𝐥𝐞𝐬𝐭𝐞𝐧 − 𝟑 − 𝐨𝐧𝐚 + 𝐇₂𝐎₂
𝒑𝒆𝒓𝒐𝒙𝒊𝒅𝒂𝒔𝒂
𝐇₂𝐎₂ + 𝟒 − 𝐚𝐦𝐢𝐧𝐨𝐟𝐞𝐳𝐚𝐧𝐨𝐳𝐚 + 𝐅𝐞𝐧𝐨𝐥 > q𝐮𝐢𝐧𝐨𝐧𝐞𝐢𝐦𝐢𝐧𝐚 + 𝟒 𝐇₂𝐎 𝐚𝐧𝐭𝐢𝐩𝐢𝐫𝐢𝐧𝐚
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL TOTAL

PROCEDIMIENTO

BLANCO STANDAR DESCONOCIDO

Reactivo de trabajo 1 ml 1 ml 1 ml

Standard - 10 ul -

Muestra - - 10 ul

• Mezclar e Incubar 5 minutos en baño de agua a 37 ͦ C

• La absorbancia se mide a 500 nm de longitud de onda
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL TOTAL

INTERVALOS DE REFERENCIA
 Suero o plasma: <200 mg/dl

INTERFERENCIAS
-Bilirrubinas
-Acido ascórbico
- Hemoglobina
-Fármacos como los antihipertensivos, inmunodepresores o
esteroides sexuales
DETERMINACIÓN DE HDL COLESTEROL

FUNDAMENTO.-
Los quilomicrones,VLDL( lipoproteinas de muy baja densidad) y LDL ( lipoproteínas de baja
densidad) se precipitan por adición de acido fosfotungstico y cloruro de magnesio. Después de
centrifugar, el sobrenadante contiene las HDL (lipoproteínas de alta densidad), en las que se
determina HDL colesterol con el reactivo de colesterol total.
DETERMINACIÓN DE HDL COLESTEROL

PROCEDIMIENTO
PASO 1: PRECIPITACION

Reactivo Precipitante (PREC) 1000 ul

Muestra 500 ul

✓ Mezclar en vortex
✓ Incubar 10 minutos a T° Ambiente
✓ Centrifugar 10 min a 4000 g (para obtener el
sobrenadante)
DETERMINACIÓN DE HDL COLESTEROL

PROCEDIMIENTO
PASO 2: DETERMINACION DE HDL colesterol

BLANCO ESTANDAR MUESTRA

Reactivo de Colesterol Total 1000 ul 1000 ul 1000 ul
Agua destilada 100 ul ---- ----
Estándar ---- 100 ul ----
Sobrenadante de HDL ---- ---- 100 ul

✓ Mezclar en vortex
✓ Incubar 5 minutos a 37°C
DETERMINACIÓN DE HDL COLESTEROL

INTERVALOS DE REFERENCIA

HOMBRES MUJERES
Pronóstico favorable > 55 mg/dl > 65 mg/dl
Niveles de riesgo estándar 35 -55 mg/dl 45 – 65 mg/dl
Indicador de riesgo < 35 mg/dl < 45 mg/dl

INTERFERENCIAS
-Bilirrubinas
-Acido ascórbico
- Hemoglobina
DETERMINACIÓN DE LDL - COLESTEROL

El contenido de LDL-col se estima mediante el empleo de la FORMULA DE FRIEDEWALD.

Teniendo en cuenta que el VLDL- col (mg/dl) se estima como:

𝒎𝒈 𝑻𝒓𝒊𝒈𝒍𝒊𝒄𝒆𝒓𝒊𝒅𝒐𝒔
𝑽𝑳𝑫𝑳 =
𝒅𝒍 𝟓
Por ello:
𝐓𝐫𝐢𝐠𝐥𝐢𝐜𝐞𝐫𝐢𝐝𝐨𝐬
𝑪𝒐𝒍𝒆𝒔𝒕𝒆𝒓𝒐𝒍 𝑻𝒐𝒕𝒂𝒍 = 𝑳𝑫𝑳 + 𝑯𝑫𝑳 +
𝟓
Si despejamos LDL-col tenemos:

𝐓𝐫𝐢𝐠𝐥𝐢𝐜𝐞𝐫𝐢𝐝𝐨𝐬
𝑳𝑫𝑳 = 𝑪𝐨𝐥𝐞𝐬𝐭𝐞𝐫𝐨𝐥 𝐭𝐨𝐭𝐚𝐥 − (𝐇𝐃𝐋 + )
𝟓
EJERCICIOS:

 Determine mediante la FORMULA DE FRIEDEWALD:

PACIENTE 1: ¿Qué cifra de Col-LDL tendrá el paciente con Colesterol total de 140 mg/dl, Col-HDL de 30 mg/dl y
Triglicéridos de 120mg/dl?

PACIENTE 2: ¿Qué cifra de Col-LDL tendrá el paciente con Colesterol total de 220 mg/dl, Col-HDL de 25 mg/dl y
Triglicéridos de 370mg/dl?
EJERCICIOS:

 Determine mediante la FORMULA DE FRIEDEWALD:

PACIENTE 1: ¿Qué cifra de Col-LDL tendrá el paciente con Colesterol total de 140 mg/dl, Col-HDL de 30 mg/dl y
Triglicéridos de 120mg/dl?

𝟏𝟐𝟎
𝑳𝑫𝑳 = 𝟏𝟒𝟎 − 𝟑𝟎 + = 𝟖𝟔 𝐦𝐠/𝐝𝐥
𝟓

PACIENTE 2: ¿Qué cifra de Col-LDL tendrá el paciente con Colesterol total de 220 mg/dl, Col-HDL de 20 mg/dl y
Triglicéridos de 370mg/dl?

𝟑𝟕𝟎
𝑳𝑫𝑳 = 𝟐𝟐𝟎 − 𝟐𝟎 + = 𝟏𝟐𝟏 𝐦𝐠/𝐝𝐥
𝟓
DETERMINACIÓN DE LDL - COLESTEROL

FORMULA DE FRIEDEWALD.-
Es importante tener en cuenta que a medida que la concentración de triglicéridos incrementa, también lo hace la
inexactitud de la formula. Así en caso de que la concentración de triglicéridos sea superior a 400 mg/dl, NO se
puede aplica la formula de Friedewald para el calculo de LDL-col.
En estos casos se recurre a la determinación correcta de LDL-col o se estima el riesgo cardiovascular mediante el
colesterol no HDL
DETERMINACIÓN DE LDL - COLESTEROL

FUNDAMENTO.-
Las lipoproteínas de baja densidad (LDL o β-lipoproteínas) se separan del suero precipitándolas
selectivamente mediante el agregado de polímeros de alto peso molecular. Luego de centrifugar, en
el sobrenadante quedan las demás lipoproteínas (HDL y VLDL); el colesterol ligado a las mismas se
determina empleando el sistema enzimático Colesterol oxidasa/ Peroxidasa con colorimetría según
Trinder (Fenol/4-AF). Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en el sobrenadante,
se obtiene el colesterol unido a las LDL.
DETERMINACIÓN DE LDL - COLESTEROL

PROCEDIMIENTO
PASO 1: PRECIPITACION

Reactivo Precipitante 100 ul

Muestra 200 ul
✓ Mezclar en vortex durante 20 segundos
✓ Incubar 15 minutos a T° Ambiente
✓ Centrifugar 15 min a 3000 rpm
(separar inmediatamente el sobrenadante)
DETERMINACIÓN DE LDL - COLESTEROL

PROCEDIMIENTO
PASO 2: DETERMINACION DE LDL colesterol

BLANCO ESTANDAR MUESTRA

Reactivo de Colesterol 2000 ul 2000 ul 2000 ul
Estándar ---- 20 ul ----
Sobrenadante de LDL ---- ---- 100 ul
✓ Mezclar en vortex
✓ Incubar 5 minutos a 37°C
✓ Leer en absorbancia 505 nm
DETERMINACIÓN DE LDL COLESTEROL

INTERVALOS DE REFERENCIA
En relación al riesgo de contraer enfermedad cardiaca coronaria (ECC):

Riesgo bajo o nulo <129 mg/dl

Riesgo moderado a elevado 130 – 189 mg/dl
Riesgo muy elevado ≥ 190 mg/dl

INTERFERENCIAS
-Bilirrubinas
-Acido ascórbico
- Hemoglobina
ÍNDICE DE RIESGO DE ENFERMEDAD CARDIACA CORONARIA
(IRECC)

 Aplicar la siguiente formula

I.R.E.C.C.= 𝐂𝐨𝐥𝐞𝐬𝐭𝐞𝐫𝐨𝐥 𝐭𝐨𝐭𝐚𝐥 /𝐇𝐃𝐋

DETERMINACIÓN DE COLESTEROL NO HDL

 En individuos diabéticos con sobrepeso u obesos, la medida de LDL-col sola puede no ser adecuada para valorar
el riesgo aterogénico, porque no mide el colesterol transportado por las lipoproteínas ricas en triglicéridos.
 La medida de colesterol no HDL es un parámetro lipídico que refleja el colesterol transportado por todas las
lipoproteínas aterogénicas, incluyendo las lipoproteínas ricas en triglicéridos.
 Debido a que el riesgo cardiovascular esta directamente relacionado con el numero de partículas aterogénicas,
estas pueden ser estimadas de forma indirecta por el colesterol no HDL o midiendo los niveles plasmáticos de
apo B presente en las lipoproteínas aterogénicas.
 Se debe tener en cuenta que la existencia de la lipoproteína X en los pacientes con colestasis puede provocar una
sobreestimacion del LDL-col empleando la formula de Friedewald.

𝑪𝒐𝒍𝒆𝒔𝒕𝒆𝒓𝒐𝒍 𝒏𝒐 𝑯𝑫𝑳 = 𝑪𝐨𝐥𝐞𝐬𝐭𝐞𝐫𝐨𝐥 𝐭𝐨𝐭𝐚𝐥 − 𝐇𝐃𝐋 𝐜𝐨𝐥