UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR
CARRERA(S): Enfermería y medicina
PRÁCTICA DE LABORATORIO
CURSO: Química Orgánica
PROFESOR(A): Alzamora Aragón, Carlos Fausto
INFORME DE PRÁCTICA
PRÁCTICA N°: Practica N°6
TÍTULO: Cromatografía
INTEGRANTES: Soto panduro, Diana Brissel -100121531@[Link] -100%
Torres Rodriguez, Hector Jesús - 100131832@[Link] -100%
Ugaz Angeles, Mara Valentina 100125412@[Link] - 0%
HORARIO DE PRÁCTICA
FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 28 de septiembre del 2023
FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: 1 de octubre del 2023
LIMA – Perú
1 Autores: Fukusaki, A.; Curihuamán, J.
ManualdeprácticadeQuímicaOrgánica
OBJETIVOS
● Conocimiento de un método de identificación y purificación de mezclas de compuestos.
● Verificación de un método de separación basado en la distribución o en la diferencia velocidad
con que se desplazan los compuestos entre 2 fases en íntimo contacto.
● Identificación de compuestos en una mezcla. Conocimiento de la versatilidad de las técnicas
cromatográficas
MARCO TEÓRICO
La cromatografía es esencialmente un método de separación en el que
los componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una inmóvil
(fase estacionaria), y otra que se desplaza a lo largo del sistema (fase móvil) la cual percola a través de
la primera
Resultados y evaluación
1. Cromatografía en papel
Muestra problema
Distancia
Compuesto A Compuesto B
(cm)
0.6 cm 4 cm - - -
Muestra
Solvente 1 cm 1 cm - - -
Rf 0.6 cm 4 cm -- - -
2. Cromatografía de capa fina (TLC)
Muestra problema
Distancia
Compuesto A Compuesto B
(cm)
0.4 cm 4.1 cm -- - -
Muestra
Solvente 5 cm 4,1 cm - - -
Rf 0.08 cm 1 cm - - -
EVALUACIÓN
Indique las partes de un cromatograma desarrollado.
Las partes vendrían a ser la línea base, fase estacionaria, fase fija, soporte, y muestra.
2 Autores: Fukusaki, A.; Curihuamán, J.
ManualdeprácticadeQuímicaOrgánica
¿La fase fija o estacionaria es la misma en la cromatografía de papel y en la de capa fina? Indique el
nombre de cada una de ellas.
No porque en la cromatografía de papel arrastra las 2 sustancias más no separa como en la capa fina. El
papel es la fase estacionaria y la capa fina la fase fija.
¿Cuál de sus compuestos tiene mayor afinidad por la fase fija o estacionaria? ¿Cómo se determina
esto?
Aquella que no tenía afinidad por la fase móvil; el azul de metileno tiene mayor afinidad para la fase fija
en vista que fue la que menos se desplazó.
¿Se pudo identificar el número de compuestos contenidos en su muestra problema? ¿Cómo?
Si, fue 2, el azul de metileno y el anaranjado de metileno.
Si un compuesto A tiene un mayor valor de Rf que Z, ¿esto es indicativo de que el primero tiene
mayor afinidad por la fase móvil o por la fase estacionaria? Explique.
A mayor Rf, mayor es la distancia, entonces tendrá más afinidad a la fase móvil
Dibuje los cromatogramas desarrollados en papel y mediante cromatografía de capa fina (TLC).
Con esta información, calcule el valor de Rf en cada caso:
0.6/1= 0.6 cm 0.4/5= 0.08 cm
4/1 = 4 cm 4.1/4.1 = 1 cm
3 Autores: Fukusaki, A.; Curihuamán, J.
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3. Cromatografía en columna
PREGUNTAS QUE GUÍAN LA DISCUSIÓN
¿Cuál de los compuestos eluye primero? ¿Por qué? Bosqueje su experimento y dibuje las
estructuras químicas de sus compuestos.
Eluye primero el anaranjado de metilo+azul de metileno ya que en la fase estacionaria se colocó
primero el solvente etanol con sílica gel, luego echamos 20 gotas del material analito
anaranjado+azul de metileno, y tras esto hubo una separación.
¿Cómo se podría comprobar que los compuestos eluidos son puros?
Sería puros porque no presentaría una separación como tal sino más bien se desplazaría más no
que se separaría.
¿La longitud y el diámetro de la columna cromatográfica son importantes para realizar la
separación de mezclas o no? Explique.
Sí porque así vemos que tanto logró separarse para ver si podemos trabajar con ese método o
utilizamos otro hasta que sea eficiente.
¿Encontró alguna diferencia respecto a la cantidad de muestra sembrada entre las
diferentes formas de cromatografía? ¿A qué atribuye esto? Explique.
Si, que algunos tienen mayor pigmentación o incluso la cantidad de compuesto puro que trae
consigo.
Discusión
En clase se observó las técnicas de cromatografía, en general es un conjunto de técnicas basadas en el
principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla que
permite identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Primero, empezamos con la
cromatografía en el papel, haciendo círculos pequeños de colores a un centímetro de la orilla, luego lo
sumergimos en el alcohol, colocando las tiras de papel encima de la regla y asegurarlas con cinta
adhesiva, después esperar a que el líquido suba poco a poco por el papel, por último, anotamos cuando
subió el alcohol en el papel. Segundo, se realizó el mismo proceso, pero en la capa final.
Los procesos llevados a cabo implican la cromatografía sobre papel, en columna para proteínas y en
capa fina. A lo cual podemos observar una fase fija y otra que es móvil, el cual conserva un patrón .
Cabe resaltar que al calcular el Rf de la muestra se compara con el patrón para afirmar que
componentes tiene, a lo cual es aplicada la cromatografía de adsorción.
4 Autores: Fukusaki, A.; Curihuamán, J.
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CONCLUSIONES
El propósito de la práctica incluye dos métodos de cromatografía, hallar la relación de frente (Rf),
comprender el fenómeno de adsorción y comprobar la eficiencia de la separación de las sustancias.
●En la práctica de cromatografía por columna se analizó la velocidad en la que se desplazan los
componentes de una mezcla. Se necesita agua acidulada para absorber el azul de metileno por la
polaridad que representan ambos compuestos. De la misma manera se necesitó de etanol por su baja
polaridad para absorber el anaranjado de metilo.
●Siendo la fase estacionaria (sílica de gel) muy polar, retendrà componentes polares en el anaranjado
de metilo, recorriendo una menor distancia que la mezcla.
●La práctica de cromatografía tuvo éxito, gracias a que se manejó la parte teórica y práctica con
nitidez y se dispuso de las sustancias que conforman tanto la fase estacionaria como móvil.
CUESTIONARIO N° 06
1. Esboce el esquema de un cromatograma desarrollado e indique cada una de sus
partes.
2. ¿Cuáles son las diferencias entre la cromatografía de capa fina (TLC) y la de papel?
CAPA FINA PAPEL
Uso de portaobjetos Uso de papel
Cámara de desarrollo Tubo de ensayo
Uso de la silica gel y cloroformo. Solo uso de las muestras
5 Autores: Fukusaki, A.; Curihuamán, J.
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3. ¿Cómo se puede determinar las posiciones de sustancias incoloras en un cromatograma?
Si son incoloras hay que someter la placa a algún tratamiento con una sustancia desarrollada (developer) para
poder determinar la presencia de sustancias sobre el silicato. El tipo de desarrollador dependerá del tipo de
moléculas que se analizan.
4. ¿Cómo se determina que un solvente es ideal para realizar una separación cromatográfica en una
muestra desconocida?
Porque se determina y observa si en verdad se separa y así ver si podemos trabajar con tal solvente.
5. Mencione las aplicaciones potenciales que tendría la cromatografía en cada una de sus
especialidades.
La cromatografía es un método que sirve para hacer análisis cualitativo de tierras y compostas y que
puedan ser realizado en cualquier lugar bajo costo y de forma rápida.
6. Explique el significado de los siguientes valores de Rf: 0.05, 0.5 y 0.98.
Rf 0,05: la distancia recorrida por la sustancia es la 20ava parte de la distancia recorrida del solvente.
Rf 0,6: la diferencia de las distancias recorridas entre las sustancias y el disolvente es mínima y muy
cercana.
Rf 0,98: la distancia recorrida de la sustancia es cercana a la del disolvente.
7. Uno de sus compañeros se encuentra realizando cromatografía de capa fina de una muestra
problema y nota que su valor de Rf es de 0.1. ¿Está de acuerdo con que el solvente escogido permite
un buen desarrollo de la cromatografía o no? Justifique apropiadamente.
Si, ya que sus distancias de recorrido entre el disolvente y la sustancia estarían más cercanas.
8. Indague y explique con detalle cuáles métodos utilizaría para localizar las bandas de adsorción
cuando se eluyen sustancias incoloras en una columna cromatográfica.
Técnica de la franja: este método consiste en pintar una franja delgada de un reactivo adecuado, a lo largo de
la columna después que ha sido extraído del tubo de ensayo.
9. Señale algunas aplicaciones prácticas de la cromatografía en columna.
1. Separaciones de componentes de plantas medicinales.
2. Separación de componentes de una síntesis orgánica.
3. Separación de colorantes.
4. Separación e identificación de hioscina y de morfina.
5. Separación de ácido acético, alcohol cetílico y metil-etilcetona.
6 Autores: Fukusaki, A.; Curihuamán, J.
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10. Realice un resumen breve acerca de la cromatografía líquida de alto desempeño o High
Performance Liquid Chromatography (HPLC).
En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que consiste en
la fase fija. La separación cromatográfica en HPPLC es el resultado de las interacciones específicas entre
las moléculas de la muestra en ambas fases, móvil y estacionaria. Es la técnica escogida para aislamiento
y purificación de productos de valor en las industrias químicas y farmacéuticas así como en la
biotecnología
y la bioquímica.
V. BIBLIOGRAFÍA
1- General Q, Materia L, Atómica T, Orgánica Q, Bases Á, Química C et al. ¿Qué es la Cromatografía? » TP - Laboratorio Químico [Internet].
TP - Laboratorio Químico. 2019 [cited 5 May 2019]. Disponible en:
[Link]
2- EducaconBigBang. (2013, noviembre 29). Círculos de cromatografía con rotuladores. Experimentos y actividades
educativas. [Link]
3- Experimento: Cromatografía en papel. (2009, marzo 25). La Ciencia para todos.
[Link]
4- Gómez, H. R. (2018, junio 27). ¿Qué Es Una CROMATOGRAFÍA? + 3 Experimentos Para Hacer En Casa. Ensamble de
Ideas. [Link]
5- PRÁCTICA Cromatografía en papel. (s/f). [Link]. Recuperado el 2 de octubre de 2023, de
[Link]
7 Autores: Fukusaki, A.; Curihuamán, J.
