UNIVERSIDAD CATOLICA DE SANTA MARIA
FACULTAD DE CS. E ING. BIOLÓGICAS Y QUÍMICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
MICROBIOLOGÍA GENERAL
PRACTICA N° 2
DOCENTE:
Eloisa Gabriela Zuñiga Valencia
INTEGRANTES:
Ariana Medina Pacheco
Celi Rosmery Suni Huahuaccapa
Valeria Paola Guerra La Fuente
Christian Oswaldo Vilela Duran
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PROCESO DE ESTERILIZACIÓN DEL MATERIAL PARA USO EN
MICROBIOLOGÍA
I. OBJETIVOS
● Comprender la importancia de la esterilidad del material en el trabajo en
microbiología.
● Reconocer y sustentar los argumentos para los procesos de preparación (limpieza
y acondicionamiento) del material a esterilizar.
● Desarrollar las técnicas de preparación del material a esterilizar según la
naturaleza de estos.
● Aplicar los métodos de esterilización adecuados según las características del
material a trabajar.
II. MARCO TEÓRICO
La actividad básica de un laboratorio de microbiología involucra el aislamiento de los
microorganismos presentes en una muestra recibida y seguidamente su identificación.
Esto forma parte de un trabajo mayor que involucra fases, iniciando con la toma de
muestras hasta finalizar con el reporte al clínico tratante con la debida información sobre
el microorganismo determinado y la sensibilidad antibiótica.
Por tanto, es de suma importancia que el o los microorganismos exclusivos correspondan
exclusivamente a tal muestra. Y solo se puede lograr si todos los materiales con los que
se trabaja se encuentran estériles, es decir, libres totalmente de cualquier forma de vida.
Para ello, se lleva a cabo un proceso de previo de preparación para la adecuada
esterilización que consiste en:
2.1 LIMPIEZA DE MATERIAL
La higiene adecuada del material será en función si esta nuevo o si es de naturaleza
reutilizable y se encuentra con restos de cultivos u otros detritos, ya que, si fuere el caso,
estos deben ser inactivados apropiadamente, lo cuales se logra mediante el método de
de esterilización.
2.2 ACONDICIONAMIENTO
Consiste en dar una ¨condición¨ al material previo a la aplicación de un método de
esterilización. Es básicamente una protección que permite la manipulación del material
ya esterilizado sin temor a que obtenga otra contaminación. La protección puede ser un
envoltorio de papel adecuado, contenedores metálicos, envoltorio de telas adecuadas,
etc. Ese acondicionamiento, no debe ser retirado hasta el uso inminente del objetivo
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esterilizado y debe cumplir con la característica de mantener su esterilidad por periodos
largos de tiempo para permitir su almacenamiento.
2.3 ESTERILIZACIÓN
Es el sometimiento de un material, insumo o producto a condiciones que eliminan toda
forma de vida existente en el mismo. Se encuentra con variedad de métodos para la
esterilización como, calor con humedad, calor seco, radiaciones, etc.
Según cada método a emplear se han diseñado equipos especializados en donde los
materiales u otros a esterilizar son introducidos y expuestos a la naturaleza del método
de esterilización, bajo parámetros determinados.
Al finalizar el proceso, el material ya estéril, es retirado y derivado para su uso inmediato
o almacenamiento en condiciones adecuadas que mantengan su estado estéril.
3. MATERIALES
3.1 EQUIPOS:
Autoclave Estufa de esterilización
3.2 MATERIALES UTILIZADOS:
Placas de Petri Tubos de ensayo
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Matraces 250ml Tijera de papel
Lapiz marcador Mechero – pizeta
3.3 INSUMOS:
Papel craft Gasa - algodón
Pabilo Agua destilada
III. ACTIVIDADES
4.1 LIMPIEZA
1. Se debe verificar cada material donde se puede asumir que estuvo expuesto a
polvos y sustancias contaminantes
2. El autoclave pasa a ser el equipo más seguro para el aseo del material sucio sucio
para así pasar a la procedencia de cultivos microbiológicos
3. Si el material a limpiar presenta restos o sustancias difíciles de retirar, se
recomienda remojarlo con detergente - desinfectante el vidrio por varias horas
hasta que este esté completamente se quite, evitando el refriegue ya que podría
significar la formación de ralladura
4. El enjuague con agua común de caño se realizará una o dos veces
5. Todo material deberá estar esterilizado antes para desarrollar con la limpieza,
finalmente el material limpio con agua común pasa a ser enjuagado con agua
destilada las veces que sea necesario para así quitar sus sales presentes.
6. Proceder al secado de este en la estufa a baja temperatura, tomar en cuenta que
se puede meter en cualquier tipo de horno (húmedo - seco ) poniéndolo a baja
temperatura y corto periodo de tiempo
4.2 ACONDICIONAMIENTO
1. Dependerá de la naturaleza del material: vidrio, líquidos, metal, tela, etc.
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2. Existen variedad de formas de acondicionamiento, durante esta práctica
utilizaremos papel craft para las placas de Petri y sellado de tubos- matraces con
tampones de algodón y gasa
3. Para las placas de Petri, tener en cuenta la porosidad del papel y la posición de la
placa en la envoltura, sujete con pabilo la envoltura
4. Para los matraces o tubos de ensayo, elaboramos un tapón con el algodón y
cubierto con la gasa, teniendo un diámetro adecuado según la apertura del
recipiente cubrir con una pequeña porción del papel craft y sujetarlo con pabilo
4.3 ESTERILIZACIÒN
1. Procederemos al uso del calor a temperaturas elevadas para lograr una
coagulación de las proteínas microbianas y consiguiendo su muerte. Para ese fin
utilizaremos los siguientes equipos:
● Horno o estufa de esterilización: Dando calor seco se esterilizan materiales
que no se dañan en el proceso: vidrio o metal
● Autoclave: Por medio del calor húmedo esterilizamos materiales más
delicados: telas, tapas de goma, etc.
2. Para esta práctica esterilizamos material de vidrio que será utilizado
posteriormente
IV. RESULTADOS
Para el desarrollo de esta práctica se prosiguió a desarrollar las siguientes actividades
descritas anteriormente.
IMPORNTANTE
Cabe mencionar que la doctora nos explicó todos los proseguimientos a desarrollar en
esta práctica, como podemos observar en la imagen
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A continuación, se va realizar una seguidilla de pasos que se realizó para la obtención de
nuestro material en donde se encuentra los siguientes procedimientos.
Limpieza
Acondicionamiento
Esterilización
LIMPIEZA
PASO 1
Se nos entregó el material 3 placas Petri y 3 tubos de ensayo
PASO 2
Se prosiguió a realizar el aseo del material para eliminar el polvo expuesto u otros
organismos y se puso a secar
PASO 3
Seguidamente se puso nuestros materiales ya lavados a la estufa para esterilizarla y
matar los microorganismos presentes que había y podrían dañar nuestro cultivo.
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PASO 4
Materiales ya esterilizados, sacados de la estufa.
PASO 5
Mientras se esterilizaba nuestro material, se prosiguió a realizar 3 tapones de algodón
para que sirva de tapa a nuestros tubos de ensayo.
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PASO 6
Alistando nuestro material de protección para nuestra practica
PASO 7
Se empezó a envolver nuestro material con papel graf para que no se contamine
PASO 8
Finalmente se dejó nuestro material ya envuelto, para su futura manipulación
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V. CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es el motivo por la que se debe acondicionar el material a esterilizar en el
laboratorio?
Se debe acondicionar para brindar protección al material estéril, de manera que
en la próxima manipulación no haya probabilidad de que sufra una nueva
contaminación y así nuestro cultivo pueda trabajar y crecer sin ningún
inconveniente para la formación de colonias. (1)
2. ¿Por qué se requiere el material y condiciones estériles para el trabajo en el
laboratorio?
Porque de esta manera se logrará aislar nuestro material para saber
posteriormente cuál es el organismo que está en la muestra. También es de suma
importancia para los cultivos que se desarrollen en el material sea inocuo y estéril
para la prosperidad de nuestras colonias y para que estas no sufran
contaminaciones, es por ello que nuestro material debe de estar esterilizado.
3. ¿Cuál es la razón del uso de agua destilada o agua desmineralizada en el
enjuague del material de vidrio?
Debido a que anteriormente se usa el agua de grifería convencional (agua de caño)
para el lavado, y obviamente ha quedado las sales presentes en el material de
vidrio, lo cual con el agua destilada o desmineralizada se podrá retirar de forma
absoluta, ya que el agua destilada tiene un tratamiento especial.
4. ¿Que se produce la muerte de los microorganismos en la esterilización por calor?
Esterilización por calor húmedo (autoclave)
El manejo de esterilización por calor húmedo se realiza con la autoclave, es un
mecanismo utilizado que destruye microorganismos por desnaturalización de
proteínas, enzimas y desestabilización de membranas; esto debido a que el
agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son
producidas por la eliminación del agua. Las aguas en altas temperaturas
rompen las estructuras secundarias y terciarias de las proteínas. Y el vapor del
agua posee un nivel de transferencia de calor más elevado que el aire. (2)
Esterilización por calor seco (estufa)
La esterilización que se efectúa en la estufa se denomina de calor seco y se
realiza a 180°C durante 2 horas; la cristalería, al ser calentada por aire a alta
temperatura, absorbe humedad y elimina la posibilidad de que se mantenga
cualquier actividad biológica debido a las elevadas temperaturas y a los tiempos
utilizados. (3)
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VI. BIBLIOGRAFÍA
1. Rivera C. Guía Práctica Microbiología Vterinaria : Universidad Católica de Santa María;
2013.
2.
Tuberculosis F. PREVENTIVE MAINTENANCE [Internet]. [Link]. [citado 25 de
marzo de 2024]. Disponible en:
[Link]
Lab-Equipments-ENGLISH_2022.pdf
3.
Artedinamico. ESTUFA DE SECADO U HORNO DE SECADO. [citado 25 de marzo de 2024];
Disponible en: [Link]
de-secado-u-horno-de-secado
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