Departamento de Ingeniería Bioquímica y Ambiental
Laboratorio de Microbiología
“Práctica No. 8: ”TINCIÓN DE CÁPSULA.”
Domingo 24 de Marzo 2024
PRESENTAN:
Gasca Martínez Jessica Lizet, 17030872
Docente
M.C. Gabriel Márquez Rojas
CELAYA GTO. Ago – Dic 2023
1. INTRODUCCIÓN
La tinción de la cápsula consiste en frotar una muestra bacteriana en una mancha ácida en
un portaobjetos del microscopio. Generalmente, la capsula se pone de manifiesto mediante
una coloración negativa o una modificación de ella.
La cápsula es una capa de un material mucoso o gelatinoso, de
naturaleza polisacarídica que rodea la pared celular de alguna
bacteria y que se altera con el calor, por lo tanto a la hora de
preparar el frotis, NO SE FIJA.
Las cápsulas, debido a que presentan un índice de refracción
muy bajo, se tiñen debilmente con los colorantes y se observan
muy mal al microscopio óptico. Para visualizarlas se utilizan
colorantes que tiñen el fondo resaltando las cápsulas.
TINCION NEGATIVA.
Mediante este procedimiento, las células sin teñir resaltan sobre un fondo
teñido utilizando un colorante acido; la nigrosina, un colorante negro, es el
más comúnmente utilizada. El método sirve para observar bacterias o
estructuras que difícilmente se tiñen con las técnicas directas.
2. OBJETIVOS
• Realizar la tinción de cápsulas mediante la tinción de Burri o de tinta china.
• Teñir la capsula para que se pueda observar adecuadamente.
• Observar algunos componentes de las bacterias, en este caso la capsula, mediante
técnicas especiales.
3. MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIALES REACTIVOS
M.O. en proceso de identificación
• Asa de nicromo
• Portaobjetos • Método de la tinta china
• Microscopio Tinta china o nigrosina
Safranina
• Método de Muir
Fucsina fenicada
Etanol
Mordente de Muir
Azul de metileno
4. METODOLOGÍA
1. Método de la tinta china.
a) Colocar varias asadas de cultivo en un portaobjetos limpio, cerca de uno de
los bordes.
b) Colocar un volumen igual de tinta china cerca del cultivo.
c) Mezclar bien con un asa y luego extender la mezcla a lo largo del
portaobjetos, utilizando la técnica del frotis s1anguineo.
d) Dejar que el frotis se seque.
2. Método de Muir.
a) Cubrir la laminilla con fucsina, fenicada fuerte y calentar ligeramente
durante 1 min.
b) Lavar rápidamente con etanol, después lavar perfectamente con agua.
c) Cubrir con el mordente de Muir durante 30 segundos.
d) Lavar con agua y con etanol durante 30 segundos o hasta que el frotis tome
un color rojo pálido.
e) Lavar perfectamente con agua.
f) Contrastar con azul de metileno durante 30 segundos.
g) Lavar y dejar escurrir o secar en papel secante.
Las bacterias se tiñen de rojo, las capsulas de azul.
5. RESULTADOS
MEDIO COLONIA CÁPSULA
• Agar Agrupación de Tinción de cápsula con tinta china.
sangre microrganismos
• Agar del tipo cocos
nutritivo
Tinción de cápsula con método de
Muir.
6. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
En la tinción de cápsula de tinta china, la cápsula desplaza a las partículas de carbono
coloidal de la tinta china, apareciendo un halo claro alrededor del microorganismo. Se
puede observar sobre un fondo negro a los microorganismos teñidos de rojo y las cápsulas
como un halo blanco que las rodea.
Las cápsulas al presentar un índice de refracción muy bajo, se tiñen debilmente con los
colorantes y se observan muy mal al microscopio óptico. Para visualizarlas se utilizó
colorantes que tiñeron el fondo así las cápsulas. La bacteria se tiñe de violeta-rosado y
presenta un leve halo azulado.
7. CONCLUSIÓN
Este método es muy útil, aunque está limitado por la presencia de un fondo oscuro que no
permitirá la correcta identificación de forma nítida y detallada de los componentes de
dichas estructuras. La principal dificultad con la tinción negativa es que los
microorganismos tienden a contraerse durante el periodo de secado; para evitarlo, se ha
optado por usar la tinción negativa húmeda, en la cual los organismos se suspenden en una
película de tinta china o mancha oscura y el contorno de la cápsula puede ser observado sin
el peligro de contracción. Además de ser una técnica sencilla, es muy barata, ya que no
requiere equipos o material costoso para su realización.
8. CUESTIONARIO
1. ¿Qué función desempeñan las capsulas en la infectividad de un organismo?
Protegen a la bacteria frente a distintos agentes nocivos:
Evitan virus bacterianos y la mayoría de los materiales tóxicos hidrofóbicos, como
detergentes.
2. ¿Se puede correlacionar siempre la presencia de una capsula en una especie
patógena?
Las cápsulas contribuyen a la capacidad de invasión de la bacteria patógena. Las
bacterias con cápsula resisten mejor la acción de las células fagocitarias del sistema
inmunitario, esto se debe a que la cápsula de algún modo impide la adherencia del
fagocito a la célula bacteriana.
La cápsula protege a la bacteria de la fagocitosis, principal mecanismo de defensa
que pone en juego el huésped ante la presencia de bacterias capsuladas.
9. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Brock Biología de los Microorganismos 10ª Edición. Michael T. Madigan, John M.
Martinko, Jack Parker.
2. Microbiología. 5ª Edición. Prescott, Harley, Klein.
3. Microbiología. 2ª Edición. Roger Y. Stanier, John L. Ingraham, Mark L. Wheelis,
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