Ciclo celular. Control.

Duplicación y
reparación del ADN.
El Ciclo de la célula se divide en Dos fases visibles al microscopio
óptico
MITOSIS FASE M, consiste en dos procesos
( cariocinesis –citocinesis )
División Nuclear División Citoplasmática

INTERFASE G1
Fase de crecimiento
S Síntesis del ADN (replicación)
G2
(período de enorme actividad metabólica)
Etapas del Ciclo Celular
Período comprendido
entre la FASE M y el
comienzo de la FASE S
FASE G1
(gap= brecha)

Etapa limitada y concreta

Se sintetizan los elementos

necesarios para la mitosis

En esta fase la célula posee un conjunto

cromosómico por duplicado.
Las diferentes actividades metabólicas a lo largo de la vida de la
célula pueden dividirse en una secuencia de cuatro fases: G1, S, G2
y M ó División celular.
Actividad Metabólica durante el ciclo celular

 Entre 2 Mitosis sucesivas, una célula debe duplicar todos sus componentes
y su masa, de esta manera se asegura que ambas células hijas posean el
material necesario para iniciar su propio ciclo de vida.
 Cuando se mide la producción de ARN o de proteínas se ve que éstas
actividades ANABÓLICAS son CONSTANTES durante todo el período
INTERFÁSICO.
 Durante la MITOSIS desciende la velocidad de síntesis de proteínas y cesa
la de ARN.
 Durante G1 la célula duplica su masa: - Síntesis activa de proteínas y ARN
•Necesita alta Energía que la obtendrá de un
metabolismo activo. - Duplicación de organelas
Alcanza el estado que le permite DUPLICAR el ADN FASE S
El proceso de replicación es una vía ENDERGÓNICA
y ANABÓLICA:
•Variaciones del Ciclo Celular en Unicelulares y en Pluricelulares.
• El ciclo de las células
eucariotas puede variar en su
duración desde 30 minutos a
varios meses.
En las células somáticas
animales se repite cada 18 a 24
horas aproximadamente

G0: se encuentran en activo

metabolismo, pero el ciclo celular
está detenido.
PERÍODO G1

• Transcripción y síntesis
proteica

• Preparación de la célula para

entrar en el período S
Ocupa la mayor proporción del tiempo
del ciclo celular, su duración es
ajustada en respuesta a las condiciones
del entorno del entorno celular.
Inicio de síntesis de histonas Solo en Fase S
Requieren de los ARNm específicos que
luego serán degradados.
 Existen al menos 3
Ciclos celulares atípicos categorías de células con
ciclos atípicos.

Permanecen en GO Permanecen en un
estado similar al G1 pero
( células nerviosas y de
que no progresa al S.
músculos estriados)
Pueden abandonar
GO ante un estimulo Normalmente no se
( celulas hepáticas y dividen, pero pueden
iniciar la síntesis de
linfocitos) ADN cuando se
No hacen GO se enfrentan a un
renuevan estímulo.
constantemente
( gametas ,leucocitos,
eritrocitos celulas
epiteliales, extremos de
raíces y tallos)
 En esta Fase, la célula se
Detención del Ciclo: G0 encuentra en un activo
metabolismo, pero el ciclo
celular está detenido.
 •Su duración está determinada por el tiempo que se
PERÍODO S requiere para la duplicación de todo el genoma.
•No existe retorno, una vez completada la Fase S, se
continúa con G2 y M.
Replicación del ADN

Los cromosomas
pasan a estar formados por dos
cromátides con la misma
información genética
 PERÍODO G2

Es la más corta de la Interfase.

Síntesis de algunas proteínas

necesarias para entrar en el
Período M.

Entre ellas una proteinkinasa

responsable de la fosforilación
de la membrana nuclear y la
histona H1
 Es la de menor duración, es un breve
PERÍODO M período del ciclo.

• No todas las células se dividen por Mitosis.

- CÉLULAS SOMÁTICAS: Aseguran la conservación del número

cromosómico dividiéndose por MITOSIS.
- CÉLULAS GERMINALES: Dan origen a las gametas masculinas y
femeninas, que son células encargadas de participar en la formación
de nuevos individuos.
Para esto deben fusionarse dos de ellas, una
proveniente de un individuo de cada sexo
GAMETAS: Estas células deberán tener la mitad del número cromosómico
de la especie, para que luego de la fecundación se regenere el
número cromosómico característico de la especie.
DIVISIÓN CELULAR MEIOSIS
•La progresión de una célula eucarionte
a través del ciclo celular necesita señales
apropiadas, que si no están presentes

La célula fallará en la transición de

una fase a la siguiente.

Esa transición depende de una serie ordenada de

eventos moleculares, durante la cual

El inicio de uno de ellos depende de la finalización

exitosa de la anterior.
 Hay 2 sucesos en el ciclo de la célula
El control del ciclo celular sobre los cuales se enfocan estos
mecanismos de control de la
•Hay un 3er Punto de control transición: Inicio de la duplicación
entre Fases de la Mitosis, entre del ADN entre G1 y S
Metafase y Anafase. Inicio de la Mitosis
entre G2 y M
•Para que una célula pueda pasar de una fase a la otra deben haberse realizado correctamente todos
los eventos de la etapa anterior con éxito, así como también no debe haber daño en el ADN.
 •Los controles los realizan los factores promotores
•Los factores promotores son proteínas dimericas formadas por una
ciclina y una quinasa CDKs (quinasas dependientes de ciclinas) que son
enzimas que catalizan la fosforilación de proteínas, lo cual produce una
modificación química que puede activar o desactivar la proteína
modificada.

•Hay 2 Factores
Promotores:
FPS Factor promotor de
la fase S (induce la
replicación)
cdK2+ciclinas
Transición entre G1 a S
FPM – Factor promotor
de la mitosis (inicia la
mitosis ) cdK1+ciclinas
Transición entre G2 a M
Ciclinas: La concentración de éstas proteínas se eleva o desciende
siguiendo un patrón predecible, conforme avanza el ciclo de la célula
Ciclinas

Ciclinas:
proteínas de
concentración
variable
(alternan un
ciclo de síntesis
Cdk: proteínas de con otro de
concentración constante degradación)
(constitutivas) cuya
activación depende de las
ciclinas.
•Las quinasas dependientes de ciclinas están en la célula en estado
inactivo.
Las ciclinas cuando están en cantidad suficiente activa el dímero CDK.
•Cuando la concentración de la ciclinas es baja, la
quinasa carece de la subunidad ciclina
QUINASA INACTIVA
•Cuando la concentración de ciclinas es de un
nivel suficiente QUINASA ACTIVA

Desencadena la entrada de la célula a

la fase siguiente correspondiente
La actividad quinasa de las cdK es
dependiente de la presencia de ciclinas.
 La acción del FPS desencadena la replicación de ADN
Se activa la helicasa que comienza el proceso de replicación.
Al ocurrir la replicación los componentes del complejo pre-replicativo
se desorganizan , llevando al cromosoma a un estadio post-replicativo
que impide un nuevo inicio de la replicación y posibilita la transición
hacia la fase M

El FPS está regulado por la presencia de un inhibidor por proteólisis del inhibidor se libera
Cuando se le une lo inactiva el FPS
 Control de la replicacón
•No alcanza con la sola existencia del Factor Promotor de Fase S, y el Factor de
Promotor de Fase M para desencadenar las transiciones entre las distintas fases del
ciclo celular.

El estado de los sustratos sobre los que actúan los factores es muy
importante para determinar si la célula DUPLICA o SEPARA sus
cromátides.

El cromosoma va pasando por distintos estadíos a lo largo del ciclo

que posibilitan la interacción con los Factores Promotores y que
ellos puedan disparar el inicio secuencial de las Fases del ciclo
•Hay 2 Estadíos bien diferenciados en el cromosoma
- PRE-REPLICATIVO que lo capacita para la replicación del ADN, de modo que este
proceso pueda ser disparado por el FPS.
- POST-REPLICATIVO que posibilita la transición hacia la Fase M e impide la ocurrencia
de una nueva replicación del ADN antes de que la célula se divida.
•Los cromosomas heredan sus Complejos Pre-replicativos Para ensamblarlos son necesarios
grupos de proteínas.
La acción del FPM inician y sostienen la Mitosis
La CDK-ciclina de M inicia una cadena de fosforilaciones que llevan a la disolución de la
membrana nuclear, a través de la fosforilación de la lámina nuclear, condensación de
cromosomas, por fosforilación de la H1 , formación del huso acromático, alineación de
cromosomas , formación del anillo contráctil (citocinesis) entre otra funciones.
Una vez que esto se completa el FPM induce su propia desaparición.
- Un Tercer regulador es el complejo promotor de la anafase es un complejo
multiproteico que agrega moléculas de ubiquitina a ciertas moléculas del centrómero,
separando las cromatides hermanas.
 La ACTIVACIÓN de Factor Promotor de la Fase M regula la entrada de
la célula en MITOSIS
Para que pueda formarse deberán sintetizarse ciclinas mitóticas que se
asociarána sus cdK correspondientes (cdK-1)

Una vez formado el FPM

Regulado a su vez por Su activación dependerá de sucesivas etapas de fosforilación y

otras ciclinas de la célula desfosforilación del complejo

Se forma el Huso y los cromosomas

La activación del FPM inicia una cascada de fosforilaciones
se alinean en la placa metafásic, que lleva a la disolución de la membrana nuclear a través de la
formación del anillo contráctil fosforilación de proteínas de la lámina nuclear y a la
(citocinesis = división del citoplasma. condensación de los cromosomas mediante la fosforilación de
la H1
Una vez que este proceso se completa

El FPM induce su propia desaparición al activar el sistema de destrucción de

ciclinas mitóticas.
Niveles adicionales de regulación en
las transiciones del ciclo celular

 Fosforilacion y desfoforilacion de la subunidad de las

CDKs.
 Presencia de proteínas inhibitorias que interactúan con
las CDKs.
 Proteolisis controlada de las ciclinas.
 En células con daño en el ADN

 La scélulas permiten la progresión a la Fase siguiente del ciclo celular sólo luego de
haber finalizado TODOS los eventos asociados con la fase previa.
Para esto
Usan mecanismos de vigilancia que controlan eventos claves del ciclo celular
permiten la tansición solo si éstos han sido completados
Así
Aseguran que: - La Fase M se realice luego de la Fase S
- La Anafase no comience antes de que los cromosomas se hayan
alineados en el plano ecuatorial de la célula.
Desarrollan vías que revisan la integridad del genoma y frenan la progresión si se
detectan daños en el ADN. PUNTOS DE CONTROL: Son vías inhibitorias

El daño genera una señal que Induce un grupo de genes para que repare el ADN
Bloquea la división celular Detiene la célula en G1
Demora la Fase S
y/o Bloquea la finalización de G2
•El punto de control del
ADN dañado bloquea el
ciclo celular hasta que el
daño haya sido reparado.
Introducción a la biologia celular. Cátedra
Capitelli
 Duplicación de ADN
Duplicación
semi conservativa
del ADN Durante la duplicación, se
separan las dos cadenas del
DNA parental de doble
hélice. Los nucleótidos libres
que son complementarios de
los que están en cada cadena
parental se unen para
formar nuevas cadenas hijas.
Cada cadena parental y las
nuevas
cadenas hijas forman luego
dos nuevas moléculas de
DNA.

•La replicación tiene un sitio de origen y ocurre en forma bidereccional.

•La replicación posee sitios específicos (cortas secuencias de nucleótidos) a partir de los cuales se generan, a
ambos lados, las HORQUILLAS DE REPLICACIÓN (por su forma Y) determinando un proceso
bidireccional.
Son los sitios donde la hélice parental rompe los puentes de hidrógeno permitiendo la
entrada del aparato enzimático que iniciará la polimerización de las cadenas hijas usando
como molde las cadenas parentales.
•Solo una hebra hija será sintetizada en forma contínua CADENA ADELANTADA
Usa como moldela hebre parental 3´ 5´
•La otra hebra hija CADENA RETRAZADA debe necesariamente ser sintetizada en
forma de pequeños trozos de 100 a 1000
FRAGMENTOS DE OKASAKI.
La síntesis del ADN se produce
siempre en sentido •Las dos cadenas de DNA de doble hélice son
5 “ - 3 “ determinando que una de las antiparalelas
cadenas se sintetice en forma •Cada una de las HORQUILLAS DE
discontinua REPLICACIÓN se inician a partir de los sitios de
•Todas las ADNpolimerasas poseen un origen
único sentido de síntesis 5´ 3´
 •El ADN integra los los NUCLEOSOMAS y se enrolla hasta generar una estructura
helicoidal que al volver a enrollarse forma LAZOS de diferente longitud, los cuales
emanan de un eje que está constituídompor proteínas no histónicas.
•Los dos extremos de cada lazo se sujetan a su eje por secuencias de ADN llamadas
SAR.

Cada LAZO representa una UNUDAD DE REPLICACIÓN

•El ADN no se sintetizan globalmente sino a partir de

•Cada unidad abarca al ADN múltiples sectores a lo largo de su molécula, cada uno
comprendido entre los puntos de los cuales corresponde a un lazo.
de origen y de llegada del lazo a
su base
Cada una tiene entre
Hacen posible que la Fase S dure
•Están asociadas a un complejo 20 y 80 ORIGENES aproximadamente 7 hs. (y no 30 días)
de proteínas DE REPLICACIÓN
ORC (de reconocimiento) Aunque son todos diferentes entre sí,
contienen una secuencia de 11
•Al comienzo de la Fase S recluta otras proteínas nucleótidos, ARS.
con las que integra un complejo mayor, Pre-
replicativo, que cataliza el inicio de la replicación
después de ser inducido por el FPS
 Origen de Replicación en Eucariontes
REPLICÓN: Segmento de ADN que se sintetiza a partir de un ORIGEN DE
REPLICACIÓN.
REPLICÓN

Cuando en un origen de replicación se abre la doble hélice

del ADN Se forma la BURBUJA DE REPLICACIÓN
Su tamaño aumenta a medida que avanza
la separación de las cadenas en los dos
extremos de la burbuja.

Esto da lugar, en cada

extremo a la
Las horquillas que nacen
en cada origen avanza en
direcciones opuestas

HORQUILLAS

Desaparecen cuando chocan con sus similares de las burbujas

contiguas, al terminar el acercamiento progresivo entre ellas.
No ocurre con la Horquilla que recorre el final del TELÓMERO.
•La REPLICACIÓN TERMINA cuando se conectan entre sí todos los REPLICONES.
•El tramo de cadena hija que crece en dirección 5´ 3´
Su molde es la cadena progenitora
3´ 5´
Se construye por el agregado CONTÍNUO de nucleótidos en su extremo 3´a medida que se
desplaza la horquilla.

•La otra cadena hija, su molde es la cadena 5´ 3´

Se sintetiza en dirección contraria

al avance de la Horquilla de forma
DISCONTÍNUA. Se construyen
pequeños fragmentos de ADN
FRAGMENTOS DE OKASAKI
 •Es BIDIRECCIONAL:
-Porque las dos cadenas se
sintetizan en direcciones
opuestas.
-Las dos horquillas avanzan
en forma divergente
•Es ASIMÉTRICA:
-una misma cadena se replica
en forma continua de un
lado de la burbuja y
discontinua del otro lado.

Introducción a la biologia celular. Cátedra

Capitelli
•Una misma cadena se replica en forma continua de un lado de la burbuja y
discontinua del otro lado.
•Para iniciar la síntesis de la cadena CONTINUA de ADN la ADN-POLIMERASA
necesita: Una cadena de ADN 3´ 5´ molde
Un extremo 3´ para poder colocar el 1er desoxirribonucleótido.

Lo provee una pequeña pieza de ARN de 10 Nuceótidos

CEBADOR Su formación es catalizada por una ARNpolimerasa

específica ADN PRIMASA
Una vez formado, la síntesis del ADN se produce por la acción de la
ADNpolimerasa y la provisión de desoxirribonucleótidos que están en
el núcleo como trifosfatos y se agregan secuencialmente en el extremo
3´ de la cadena en crecimiento siguiendo el orden marcado por los
nucleótidos de la cadena de ADN que sirve de molde.
•Cuando la Horquilla arriba al extremo del REPLICÓN
La cadena continua toma contacto con la cadena discontinua

La ADN LIGASA, une el extremo 3´ de la primera con el 5´ de la

segunda.
El CEBADOR es removido por una NUCLEASA REPARADORA, y reemplazado por
una pieza de ADN generada con la ayuda de la ADN POLIMERASA BETA.
Esta pieza se conecta con el resto de la cadena por la ADN LIGASA.
 •Una de las características de las ADN POLIMERASAS es su tendencia a
DESPRENDERSE del ADN, de la cadena molde.

Una ABRAZADERA DESLIZANTE hace que la ADN polimerasa permanezca unida a él

mientras trabaja.
Se une a la polimerasa y rodea al ADN mientras trabaja
•La cadena DISCONTINUA requiere que la ADN PRIMASA fabrique múltiples
CEBADORES uno para cada Fragmento de Okasaki

Coloca el 1er nucleótido junto La enzima que los sintetiza es la ADN polimerasa
al extremo 3´ del CEBADOR alfa que está unida a la ADN polimerasa sigma.
del Fragmento de Okasaki. Lo
liga a él y agrega los sucesivos Para ello se ubica cerca del ángulo de la horquilla de
desoxirribonucleótidos en el replicación.
extremo 3´ .

•Los Cebadores son removidos de la cadena discontinua por la NUCLEASA

REPARADORA y reemplazados por una porción de ADN continua por la ADN polimerasa
beta, luego actúa la ADN LIGASA, que suelda el extremo 3´ de esas piezas con el 5´ de los
fragmentos de Okasaki precedentes.
 •Fabrica múltiples CEBADORES en la
cadena discontinua, uno para cada
fragmento de Okasaki.

•Inicia la síntesis
Replicación
La replicación se desarrolla en forma bidreccional (las nuevas cadenas tienen
direcciones opuestas) y es discontínua (las cadenas contienen fragmentos).

Una ribonucleasa
(ADNpolimerasa I)
elimina el ARN
cebador. El sector
que éste ocupaba
es rellenado por
d-ribonucleótidos
ubicados por la
ADN-polimerasa.
La ligasa une,
finalmente, todos
los fragmentos de
ADN.
Desarrollo de la Replicación

1- desenrollamiento de la doble hélice en un

sitio determinado de la molécula , constituyendo
el estímulo inicial
2- separación de las dos cadenas y colocación
de ribonucleótidos trifosfatados en forma
complementaria a los d-nucleótidos, formando
el ARN-cebador
3- colocación de los desoxi-ribonucleótidos
trifosfatados en forma complementaria a los de
la cadena a replicar
4- unión de esos d-ribonucleótidos por acción
de la enzima ADN polimerasa en sentido
5‘  3‘ formando la nueva cadena de ADN
5- enlace por puentes de H entre bases
complementarias de ambas cadenas
6- eliminación de los segmentos cebadores
7- unión de los fragmentos de ADN recién
Esquema simplificado de la Replicación sintetizado
Enzimas de la Replicación

HELICASA Rompe los enlaces puente de

hidrógeno entre ambas cadenas
complementarias el ADN
Polimerizan los nucleótidos utilizando
la molécula original de ADN como
ADN Polimerasas molde. Hay tres tipos diferentes de
ADN polimerasas llamadas I, II y III.
Entre éstas, la ADN polimerasa III es
la responsable de la síntesis de ADN
ARN Polimerasa o Sintetiza pequeños fragmentos de
ARN que se utilizan como cebadores
PRIMASA
(iniciadores)

LIGASA Cataliza la formación de enlaces

fosfodiéster entre nucleótidos de
distintos fragmentos (de Okasaki).
TOPOISOMERASAS Alivian la tensión de la molécula de
ADN evitando su hiper-enrrollamiento
ADN polimerasas

Catalizan la unión de los desoxirribonucleótidos para formar así las

cadenas de ADN en crecimiento.
Existen tres variantes: la ADN polimerasa I, II y III.

Todas las ADN polimerasas comparten dos propiedades:

 Sintetizan ADN solamente en dirección 5´3´, agregando

nucleótidos al oxhidrilo libre del carbono 3´ (3'-OH)

 Agregan un nuevo nucleótido solo si cuentan con un extremo 3´

libre, y para iniciar su acción necesita un cebador o iniciador
(pequeño polinucleótido de ARN) formado previamente, unido por
puentes de hidrógeno a la hebra molde.
Burbuja de Replicación

Una vez que la ADN-polimerasa localiza el nucleótido complementario, cataliza

su hidrólisis separando dos grupos fosfato y uniendo el resto
(desoxirribonucleótido-monofosfato) a la cadena de ADN que se está
formando, mediante un enlace fosfodiéster. La energía necesaria para esta
unión se obtiene de la hidrólisis nucleótido tri-fosfato.
Una de las hebras crece en la dirección de apertura de la horquilla: cadena
conductora. La otra lo hace en dirección opuesta y fragmentada:cadena
rezagada o tardía.
RESUMIENDO:Replicación de ADN
 El ADN almacena la información genética y se puede auto duplicar para
traspasarla de una generación a otra. Semi-conservativa
 La auto duplicación se realiza en la fase S.

 La separación de las cadenas parentales del ADN es por ruptura de los

puentes de hidrogeno ,cada cadena parental sirve como molde para la
síntesis de una nueva cadena complementaria siguiendo las reglas de
apareamiento de bases A-T-. C-G
 Los nucleótidos se polimerizan en un proceso endergonico por acción de
la ADN polimerasa (sentido de la sintesis 5-3) que cataliza esta reacción
irreversible.
 La replicación del ADN comienza a partir de un sitio de origen y ocurre
en forma bidireccional .
 La cadena líder es sintetizada en forma continua.

 La cadena retrasada esta formada por fragmentos de Okasaki ( proceso

discontinuo)
Fidelidad del mecanismo de replicación

 Los mecanismos de reparación corrigen con alta fidelidad las pequeñas

y relativamente frecuentes alteraciones que sufre el ADN
 Mecanismo de corrección de pruebas Prácticamente
todas las ADNpol poseen además del sitio activo con actividad
polimerasa 5-3 un sitio activo con actividad nucleasa 3-5 . Cuando se
ubica un nucleótido incorrecto , la enzima “vuelve sobre sus pasos” y
ubica el nucleótido mal apareado removiéndolo ( actividad nucleasa)
luego reinicia su actividad de polimerasa
 Este mecanismo mejora 100 a 1000 veces la tasa de error de estas
enzimas
Cuando los daños no pueden ser reparados
pueden llevar a la aparición de Mutaciones
 PREGUNTAS ORIENTADORAS

 Indique que implica el ciclo celular.

 Indique el periodo activo en la vida de una célula en la cual tienen
lugar muchas reacciones bioquímicas, así como la transcripción y
replicación del ADN.
 Explique cómo las células pueden regular la duración en su interface
(G0).
 Explique los puntos de control del ciclo celular.
 Explique la relación existente entre el cáncer y el ciclo celular.
 Indique por qué la replicación del ADN es semiconservativa.
 PREGUNTAS ORIENTADORAS
 Explique cómo una doble hélice de ADN se forma por medio del
apareamiento de bases complementarias y de puentes de
hidrógeno.
 Explique la importancia del apareamiento de bases
complementarias en la conservación de la secuencia de bases de
ADN.
 Indique en qué dirección se realiza la replicación del ADN.
 Resuma el proceso de replicación del ADN en eucariotas incluyendo
la función de las distintas enzimas (helicasa, ADN polimerasa, ARN
primasa y ADN ligasa) y los fragmentos de Okazaki.
 Indique mecanismos básicos de reparación del ADN.