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ÍNDICE
INTRODUCCIÓN: ........................................................................................................... 3
OBJETIVOS: ................................................................................................................... 4
MARCO TEÓRICO:......................................................................................................... 4
MATERIALES ................................................................................................................. 6
PROCEDIMIENTO: ......................................................................................................... 7
RESULTADOS ................................................................................................................ 8
CONCLUSIONES.......................................................................................................... 10
REFERENCIAS ............................................................................................................. 11
ANEXOS ....................................................................................................................... 11
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INTRODUCCIÓN:
El ciclo celular, un proceso altamente regulado que guía el crecimiento, la
reproducción y la reparación de las células, es un componente fundamental en la biología
y la medicina modernas. Comprender las fases del ciclo celular y, en particular, la
importancia de la mitosis, arroja luz sobre los mecanismos que subyacen a la vida misma
y ofrece perspectivas vitales sobre el desarrollo, la salud y la enfermedad.
El ciclo celular abarca una serie de eventos ordenados y coordinados que
conducen a la duplicación del material genético y la división celular. Estas fases incluyen
la interfase, donde la célula crece y se prepara para la división, y la fase mitótica, donde
se produce la segregación del material genético y la división celular propiamente dicha.
La precisión y la regulación cuidadosa de estas fases son esenciales para mantener la
integridad genómica y el funcionamiento adecuado de los tejidos y organismos.
La mitosis, una de las etapas críticas del ciclo celular, implica la división del núcleo
y la distribución equitativa del material genético entre las células hijas. Durante la mitosis,
los cromosomas se condensan, se alinean en el huso mitótico y se separan hacia los
polos opuestos de la célula antes de la división celular final. Este proceso garantiza que
cada célula hija reciba una copia completa y precisa del genoma original, preservando la
estabilidad genética y la función celular.
La tinción de orceína acética, una técnica utilizada en histología para resaltar los
cromosomas durante la mitosis, proporciona una herramienta invaluable para el estudio
y la comprensión de este proceso. La orceína acética, al teñir selectivamente los
cromosomas y revelar su estructura y distribución en las células en división, permite a
los investigadores y los profesionales de la salud visualizar y analizar con detalle los
eventos mitóticos, tanto en condiciones normales como patológicas.
En esta práctica, explicaremos la importancia de conocer las fases del ciclo
celular, con énfasis en la mitosis, y destacaremos la relevancia de la tinción de orceína
acética en el estudio de este proceso. Al comprender la dinámica del ciclo celular y sus
implicaciones en el desarrollo y la enfermedad, podemos avanzar hacia una mejor
comprensión de la biología fundamental y aplicada, así como hacia el desarrollo de
terapias más efectivas y precisas para trastornos relacionados con la división celular.
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OBJETIVOS:
- Observar las distintas fases del ciclo celular en células germinativas vegetales.
- Reconocer las distintas fases de la mitosis, su distribución cromosómica en la
célula.
MARCO TEÓRICO:
La división celular consta de dos procesos, la mitosis y la meiosis; divisiones que se
especifican en células somáticas y células germinales respectivamente. El proceso de
mitosis produce células hijas con el mismo complemento cromosómico que la célula
original (1), por lo que en caso de organismos unicelulares es un mecanismo de
reproducción y en multicelulares es una forma de producir células somáticas nuevas.
El ciclo celular consiste de una secuencia de eventos en la vida de una célula y se
compone de dos etapas principales: interfase y mitosis. La etapa de no-división de la
célula se conoce como la interfase y se caracteriza porque el núcleo está intacto y es
fácilmente visible. En el interior del núcleo pueden identificarse la cromatina y el nucleolo.
Es durante la interfase que las células llevan a cabo procesos relacionados al
mantenimiento de su homeostasis. La mitosis, etapa de división celular, se divide en
cuatro fases fácilmente identificables: profase, metafase, anafase y telofase. En la célula
que está en profase temprana observarás que la red de cromatina comienza a
condensarse para formar los cromosomas. También observamos que la membrana
nuclear no está completa porque ya había comenzado a desaparecer. En la profase
tardía ya se ven formados los cromosomas y desaparece por completo el nucleolo y la
membrana nuclear. Se puede ver el huso mitótico formado. En la metafase observarás
que los cromosomas están bien condensados y se encuentran todos alineados en el
plano ecuatorial. En esta fase se pueden contar los cromosomas, las células de Allium
cepa tienen 16 cromosomas. En la anafase verás que los cromosomas han migrado
hacia los polos y ha desaparecido parte del huso mitótico. En la telofase ya se observan
las dos células hijas. El citoplasma se divide cuando se forma la placa celular, ésta sólo
se forma en la célula vegetal. Se ha reorganizado el núcleo de la célula y pueden verse
la membrana nuclear y el nucleolo.
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En las plantas superiores el proceso de formación de nuevas células ocurre en regiones
de crecimiento conocidos como los meristemos. Estas se encuentran mayormente en la
punta de los tallos o de las raíces, por lo que concentramos nuestro estudio en la raíz de
la cebolla. La cebolla (Allium cepa) es una buena planta para el estudio de la mitosis ya
que germinan fácilmente y desarrollan raíces que crecen rápidamente.
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MATERIALES
➢ Microscopio Compuesto con
sistema de videocámara.
➢ Pinzas de punta fina.
➢ Luna de Reloj.
➢ Bisturí
➢ Colorante Orceína acética al 2%
➢ Mecheros de alcohol
➢ Papel de filtro
➢ Algodón
➢ Láminas
➢ portaobjeto
➢ Laminillas cubreobjeto
➢ Ácido clorhídrico 1N.
Del alumno (debe traer de casa)
➢ Bulbos de Allium cepa “cebolla” con
germinación de meristemos
➢ Papel secante.
➢ Lápiz con borrador en uno de sus extremos
➢ Mondadientes
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PROCEDIMIENTO:
1. Antes de comenzar, selecciona un bulbo de cebolla de tamaño mediano con
algunos días de anticipación. Retira con cuidado las capas exteriores secas y las
raíces secas, asegurándote de no dañar el extremo germinativo donde se originan
las raíces.
2. Luego, coloca el bulbo en un recipiente, como un vaso o un contenedor, y
asegúralo con tres palillos de dientes.
3. Llena el recipiente con agua, asegurándote de que el agua toque el extremo
germinativo del bulbo.
4. Cambia el agua cada 24 horas.
5. En el día previsto para la práctica, corta aproximadamente 1 centímetro de las
raíces en crecimiento, que contienen los meristemos, y colócalas en una luna de
reloj.
6. Agrega una solución adecuada de orceína acética clorhídrica, cubriendo
completamente el material biológico.
7. Aplica calor con un mechero de alcohol hasta que se liberen vapores, y luego
permite que el sistema se enfríe. Repite este proceso tres veces.
8. Corta las raíces en secciones más pequeñas y añade nuevamente el colorante.
9. Realiza una técnica de aplastamiento (squash), golpeando suavemente con la
parte posterior de un lápiz de grafito para obtener una extensión adecuada del
preparado.
10. Elimina el exceso de colorante con un trozo de papel y ejerce presión con el
pulgar sobre el cubreobjetos.
11. Observa la muestra bajo el microscopio, utilizando tanto aumentos bajos como
altos.
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RESULTADOS
Luego de haber realizado el procedimiento, la muestra se colocó en el microscopio con
una amplitud de 1000x, y se vio lo siguiente.
PROFASE
En ambas imágenes podemos observar células en profase en su mayoría, las cuales se
pueden identificar por la forma esférica que adoptan, en la cual se va a dar la
condensación de la cromatina, en la cual desaparece la envoltura nuclear, para lo cual
los cromosomas tienden a acercarse al borde la membrana nuclear. Durante ese proceso
se forma el huso acromático en el citoplasma, la cual está relacionada también con la
aparición de los dos pares de centriolos. En las células de ambas imágenes se puede
observar como si estuvieran punteadas, pero en realidad se está observando todo ese
proceso para condensar la cromatina.
Por otro lado, en la siguiente de la derecha se puede observar una célula en metafase,
donde claramente se identifica los cromosomas que están alineados en la placa
ecuatorial, donde los centrómeros hijos y las cromátidas se separan y se inicia la
migración polar anafásica. Las fibras del huso conectadas con los cromosomas toman
nombre de fibras cromosómicas, y las que se extienden de polo a polo el de fibras
continuas.
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METÁFASE
La siguiente etapa que es la anafase se puede observar en la imagen, en la cual se
evidencia como los cromosomas han migrado a los polos opuestos, luego de que las
cromátidas se han separado. Así mismo, durante la anafase final ocurre un cambio en el
aspecto del huso, es decir, en la zona situada entre los dos grupos anafásicos, las fibras
se extienden y constituyen las fibras interzonales.
ANAFASE
TELOFASE
La última fase de la mitosis, que es la telofase, también lo podemos observar en las
células de la muestra que hemos obtenido. En esta etapa, los cromosomas hijos
anafásicos continúan su migración hacia los polos hasta confluir en sendos núcleos
telofásicos. Se desespiralizan los cromosomas y luego sigue la reconstrucción nuclear
en un proceso similar que en cierto sentido recapitula la profase en sentido inverso.
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CONCLUSIONES
En conclusión, esta práctica de laboratorio centrada en la observación de fases del ciclo
celular en la cebolla, hemos podido explorar de manera detallada la dinámica y la
secuencia de eventos que ocurren durante el ciclo celular en organismos vegetales.
Utilizando técnicas de tinción y microscopía, hemos podido identificar y caracterizar
distintas fases del ciclo celular, desde la interfase hasta la mitosis.
Nuestra observación reveló la presencia de células en diferentes etapas del ciclo celular,
como la profase. Esta variabilidad en las etapas del ciclo celular dentro de una muestra
de tejido de cebolla nos brindó una visión panorámica de la actividad celular y la
coordinación precisa de procesos como la replicación del ADN, la condensación
cromosómica, la alineación y separación de cromosomas, y la formación de nuevas
membranas celulares.
Al estudiar las fases del ciclo celular en células de cebolla, hemos podido apreciar la
importancia de la regulación y la sincronización de estos eventos para mantener la
integridad genómica y garantizar la correcta división celular.
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REFERENCIAS
1. De Robertis, Edward.Mitosis, control del ciclo celular. En: Biología Celular y
Molecular. 16va. Ed. Argentina: Editorial Promed; 2012.pp. 332-344.
ANEXOS
Ciclo celular - figura 1
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