Biocompuestos
José Luis Balcucho Parra – 2241601
Juan Diego Pabón Fuentes - 2241600
Isabella Villamizar Uribe - 2241695
Universidad Industrial de Santander
Facultad de Salud
Microbiología y Bioanálisis
Lic. Nasser Guerrero Bermúdez
Bucaramanga
Marzo 10 de 2024
Introducción
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas en gran
cantidad: Carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas moléculas contienen:
carbono, hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas contienen Nitrógeno y Azufre, y los
nucleótidos, así como algunos lípidos contienen Nitrógeno y Fósforo.
De ahí la importancia de la aplicación de los diversos análisis de laboratorio que permitan
reconocer la presencia de estas moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la
constitución química de los compuestos y su reacción con algunos reactivos.
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas
en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución química
de los compuestos y su reacción con algunos reactivos y colorantes
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas
en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución química
de los compuestos y su reacción con algunos reactivos y colorantes
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas
en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución química
de los compuestos y su reacción con algunos reactivos y colorantes
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas
en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución química
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas
en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución química
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas
en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución
Objetivos
Objetivo General
Establecer la presencia o la ausencia de biocompuestos de diferentes muestras de origen
orgánico y biológico, mediante la aplicación de diferentes pruebas.
Objetivos Específicos
Reconocer algunos biocompuestos mediante sus reacciones específicas
Identificar algunas reacciones utilizadas para el reconocimiento de proteínas y de
carbohidratos.
Determinar la presentación de biocompuestos en las muestras.
Materiales y Métodos
Materiales
Instrumental Reactivos y Material Biológico
soluciones
Tubos de ensayo Alcohol Isopropilico Albumina
Gradillas Ácido Nítrico Papa licuada
Mechero de Alcohol concentrado Fruta licuada
Pipeta Pasteur Nitrato de Plata (Manzana)
Sulfato cúprico Leche
Hidróxido de sodio Aceite Vegetal
Agua destilada Coca cola Zero
Reactivo Benedict Coca cola Normal
Lugol Gatorade
Solución
glucosa0.5%. 5 % y
10%
Almidón
Sudán
Aceite
Métodos
Carbohidratos
Prueba de Benedict
Los monosacaridos y los disacaridosson grupos aldehídoso cetónicoslibres que
presentan propiedades reductoras en soluciones alcalinas. En esta prueba específica para
azucares reductores,el grupo carbonilolibre se oxida por calentamiento y cede electrones para
la reducciónmde los iones Cu ++ a iones Cu+del oxido cuproso, responsablesde los cambios
de coloración. Los diversos colores formadosdan una indicación semicuantativa del azúcar
reductor presente. Por lo tanto, en función de la cantidad del azúcar reductor, los colores
varían del azul verdoso hasta el rojo ladrillo, pasando por el amarillo y el rojo naranja.
(Chacón, 2019)
Suero Fisiologico
Fotografia No. 1 Prueba de benedict en suero fisiológico
Bebida Energizante ( Gatorade con azucar)
Fotografia No. 2 Prueba de Benedicten bebida energizante ( Gatorade con
azucar)
Fotografia No. 3 Prueba de benedict en gatorade
Leche
Fotografia No. 4 Prueba de benedict en leche
Coca cola
Fotografia No. 5 Prueba benedict en una cocacola normal
Coca cola Zero
Fotografia No. 6 Prueba de Bendict a Coca cola Zero
Procedimiento
Fotografía No. 7 Prueba Benedict: 2 ml de glucosa + 10 gotas Benedict + calor
Se tomaron 5 tubos de ensayo rotulados y en cada uno de ellos colocar 2ml del
reactivo Benedict
Se adicionó a cada uno de ellos 1 ml de las diferentes soluciones de glucosa
( solo se hizo en la presentacion del tema en las reacciones)
Se calentaron los tubos al mechero hasta que se observólos cambios de
coloración.
Prueba de Lugol
El fundamento de esta prueba se basa en la formación de complejos coloreados de
absorción entre el iodo metálico y las cadenas de polisacáridos. Con el almidón vegetal se obtiene
el azul violeta, mientras que el glucógeno y las heritrodextrinas conducen a un color rojo.
(Chacón, 2019)
Almidón
Fotografía No.8 Prueba de Lugol: 2 ml de almidón + 10 gotas de Lugol
Papa
Fotografía No.9 prueba de Lugol en una porción de papa
Fruta (Manzana Licuada con Agua)
Fotografía No. 10 Prueba de Lugol en licuado de fruta con agua
Procedimiento
Se toma un tubo de ensayo rotulado y se deposita en este5 ml de solución de almidón
Se añada dos gotas de ácido clorhídrico
Se añada dos gotas de Lugol
Se registra los resultados
Proteínas
Prueba Xantoprotéica: Aminoácido Tirosina
En la reacción se consigue la nitración de los aminoácidos con núcleo aromático,
formándose nitro derivados de color amarillo por calentamiento, las sales de estos derivados son
de color amarillo.
Durante el desarrollo de la prueba ocurre también la desnaturalización de la proteína,
como resultado de la ruptura de los puentes de hidrógeno debido al bajo pH creado por el ácido
nítrico concentrado
Fotografía No.11 Prueba Xantoprotéica: Albumina de huevo + 10 gotas HNO3
Procedimiento
Coloque en un tubo de ensayo 3 ml de solución de albúmina
Añada 3 ml de ácido nítrico
Dejar en reposo 5 minutos
Registre resultados
Prueba de Biuret
La prueba o reacción de Beureth se empleará en el laboratorio para reconocer la presencia
de los enlaces peptídicos de las proteínas. En ella el sulfato cúprico alcalino reacciona con los
enlaces de unión entre los aminoácidos, lo que produce complejos de coloración violeta
Con base de cobre bivalente. El carácter positivo de la prueba se obtiene con un mínimo
de dos enlaces peptídicos y la intensidad de color depende del número de estos. (Chacón, 2019)
Albumina (Huevo) (NaOH + CuSO4)
Fotografia No.12 Prueba de Biuret en Albumina
Fotografía No.13 Prueba de Biuret en leche
Procedimiento
Se depositó 2ml de solución de albuminaen un tubo de ensayo
Se Agregó 2 ml de hidróxido de sodio 10% y mezcle
Se adicionó sulfato cúprico gota a gota, agitando constantmente has que aparezca
la coloracion
Se registran los resultados
Prueba de reconocimiento de grasas: Sudam III
La prueba de Sudam III se realiza para el reconocimiento de grasas por medio de la
solubilidad del Sudam III con las sustancias. El Sudam III es hidrofóbica, por lo tanto no se
solubiliza con el agua.
Fotografía No.14 Tubos de ensayo con agua y aceite para realizar la prueba Sudam III
Fotografía No.15 Tubos de ensayo con Sudam III (el rojizo se disolvió el Sudam III)
(El transparente no se solubilizó)
Procedimiento
Agregue en el primer tubo 3ml de agua y Sudám III en polvo; realice
observaciones
Agregue en el segundo tubo 3ml de aceite vegetal y Sudám III en polvo; realice
observaciones
Si se solubilizó el Sudam III volviendose rojo, contiene lípidos
Si no se solubilizó el Sudam III, no contiene lípidos
Prueba de reconocimiento de cloruro sodio
Fotografía No.16 Prueba de AgNO3 en NaCl (hay reacción)
Fotografia No. 17 prueba de Ag NO3 en Agua (no hay reacción)
Suero fisiológico
Fotografia No.18 Prueba de Sal de suero fisiologico
Gatorade (sal)
Fotografia No. 19 Prueba de Sal en gatorade
Procedimiento
En un tubo de ensayo rotulado se tomó 2 ml de la solución a analizar
Agregue 5 gotas de nitrato de plata
Si contiene sales, habrá un precipitado blanco o producción de escarchado metálico
Resultados y Discusión
Tabla No. 1 Pruebas
BENEDICT LUGOL XANTOPROTEICA BIURET SAL
-------- AgNO3
Pruebas
Sustancias
Fruta Positivo Positivo
Papa Positivo
Leche Positivo Positivo
Coca cola Positivo
Coca cola Negativo
Zero
Suero Negativo Positivo
Fisiológico
Gatorade Positivo Positivo
Tabla No. 2 Resultados de Coloración según la prueba
Prueba Benedict Biuret Lugol Sal
AgNO3
Muestra
Gatorade Naranja X X Rosado
Leche Amarillo Azulado
Frutas Naranja X Marrón
Coca cola Verde X X X
Zero (No reacción)
Papa X X Marrón X
fondo blanco
Coca cola Naranja X X X
Suero Azul (No X X Blanco
Fisiológico reacción)
Es importante mencionar que la solución de Benedict se utilizó para detectar azúcares
reductores, normalmente monosacáridos o disacáridos. Proporcionó un resultado positivo para los
azúcares reductores como la glucosa, la fructosa, la lactosa, la maltosa y la galactosa, como pasó
en la fruta y el Gatorade. A su vez, Proporcionó un resultado negativo para los azúcares no
reductores, como la sacarosa o el almidón, como sucedió en el suero fisiológico y en la coca cola
Zero (Labster, 2023)
Es así como cuando se añade el reactivo de Benedict al azúcar reductor, y se aplica calor,
el color de la mezcla cambia a naranja o ladrillo intenso mientras mayor sea la abundancia de
azúcares reductores. Un cambio a color verde indica la presencia de menos azúcares reductores.
(Lastar, 2023).
Con Respecto a la prueba de Lugol se puede utilizar para reconocer la presencia de
almidón, porque esta sustancia adsorbe el yodo produciendo una coloración azul intensa,
coloración que desaparece al calentar, porque se rompe la estructura que se ha producido, pero
vuelve a aparecer al enfriar, como sucedió con la fruta y la papa.
En cuanto a la prueba de Biuret, el reactivo de Biuret se compone de hidróxido de sodio y
sulfato de cobre. Es por ello por lo que, el grupo amino de las proteínas reacciona con los iones
de cobre del reactivo de Biuret y el reactivo cambia de azul a violeta, como sucedió con la leche.
En el caso de la prueba Xantoprotéica, el reactivo de ácido nítrico desnaturaliza la
proteína por el bajo pH que produce, además de esto, se consigue la producción de colores
amarillos, donde se encuentra en mayor concentración el aminoácido Tirosina.
Para la prueba Sudán III, nos permite diferencias las sustancias por medio de la
solubilidad del Sudán III con respecto a los lípidos que contenga la sustancia; si se solubiliza,
produciendo rojo, es porque se encuentran los lípidos en la reacción; en el caso de no encontrarse
solubilización, es por la ausencia de lípidos en la sustancia.
En consideración a la prueba con (AgNO3) es una prueba para reconocer si las muestras
contienen sales. Es así como se observó en el suero fisiológico y en el Gatorade el cambio de
color.
Conclusiones
En general se estableció la presencia o la ausencia de biocompuestos de diferentes
muestras de origen orgánico y biológico, mediante la aplicación de diferentes pruebas como
fueron las de Benedict, Biuret, Lugol entre otras.
Por otra parte, se logró identificar algunas reacciones utilizadas para el reconocimiento de
proteínas y de carbohidratos con las pruebas usadas.
Bibliografía
Chacón Méndez, Juan Carlos (2019). Manual de prácticas de laboratorio de Biología
General. Escuela de Biología. Universidad Industrial de Santander.
Manual de laboratorio. Moléculas para la vida. Capítulo 4. Recuperado en:
https://www.uprm.edu/labs3051-3052/wp-content/uploads/sites/168/2018/08/labmoleculas.pdf
Labster. Prueba de Benedict. Recuperado en: https://theory.labster.com/es/benedict/