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Análisis de Biocompuestos en Muestras

El documento describe diversas pruebas para identificar biomoléculas como carbohidratos, proteínas y lípidos en muestras biológicas. Explica que en los organismos hay cuatro tipos principales de moléculas (carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos) y que las pruebas se basan en sus propiedades químicas. Luego detalla procedimientos como la prueba de Benedict para carbohidratos y las pruebas xantoprotéica y de Biuret para proteínas. El objetivo es est

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Análisis de Biocompuestos en Muestras

El documento describe diversas pruebas para identificar biomoléculas como carbohidratos, proteínas y lípidos en muestras biológicas. Explica que en los organismos hay cuatro tipos principales de moléculas (carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos) y que las pruebas se basan en sus propiedades químicas. Luego detalla procedimientos como la prueba de Benedict para carbohidratos y las pruebas xantoprotéica y de Biuret para proteínas. El objetivo es est

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Biocompuestos

José Luis Balcucho Parra – 2241601

Juan Diego Pabón Fuentes - 2241600

Isabella Villamizar Uribe - 2241695

Universidad Industrial de Santander

Facultad de Salud

Microbiología y Bioanálisis

Lic. Nasser Guerrero Bermúdez

Bucaramanga

Marzo 10 de 2024
Introducción

En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas en gran

cantidad: Carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas moléculas contienen:

carbono, hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas contienen Nitrógeno y Azufre, y los

nucleótidos, así como algunos lípidos contienen Nitrógeno y Fósforo.

De ahí la importancia de la aplicación de los diversos análisis de laboratorio que permitan

reconocer la presencia de estas moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la

constitución química de los compuestos y su reacción con algunos reactivos.

En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas


en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución química
de los compuestos y su reacción con algunos reactivos y colorantes
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas
en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución química
de los compuestos y su reacción con algunos reactivos y colorantes
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas
en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución química
de los compuestos y su reacción con algunos reactivos y colorantes
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas
en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución química
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas
en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución química
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas
en gran cantidad: carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas
moléculas contienen Carbono, Hidrógeno y Oxígeno. Además, las proteínas
contienen Nitrógeno y Azufre, y los nucleótidos, así como algunos lípidos,
contienen Nitrógeno y Fósforo.
Diversos análisis de laboratorio permiten reconocer la presencia de estas
moléculas en muestras biológicas, los cuales se basan en la constitución
Objetivos

Objetivo General

Establecer la presencia o la ausencia de biocompuestos de diferentes muestras de origen

orgánico y biológico, mediante la aplicación de diferentes pruebas.

Objetivos Específicos

 Reconocer algunos biocompuestos mediante sus reacciones específicas

 Identificar algunas reacciones utilizadas para el reconocimiento de proteínas y de

carbohidratos.

 Determinar la presentación de biocompuestos en las muestras.


Materiales y Métodos

Materiales

Instrumental Reactivos y Material Biológico

soluciones

 Tubos de ensayo  Alcohol Isopropilico  Albumina

 Gradillas  Ácido Nítrico  Papa licuada

 Mechero de Alcohol concentrado  Fruta licuada

 Pipeta Pasteur  Nitrato de Plata (Manzana)

 Sulfato cúprico  Leche

 Hidróxido de sodio  Aceite Vegetal

 Agua destilada  Coca cola Zero

 Reactivo Benedict  Coca cola Normal

 Lugol  Gatorade

 Solución

glucosa0.5%. 5 % y

10%

 Almidón

 Sudán

 Aceite

Métodos

Carbohidratos
Prueba de Benedict

Los monosacaridos y los disacaridosson grupos aldehídoso cetónicoslibres que

presentan propiedades reductoras en soluciones alcalinas. En esta prueba específica para

azucares reductores,el grupo carbonilolibre se oxida por calentamiento y cede electrones para

la reducciónmde los iones Cu ++ a iones Cu+del oxido cuproso, responsablesde los cambios

de coloración. Los diversos colores formadosdan una indicación semicuantativa del azúcar

reductor presente. Por lo tanto, en función de la cantidad del azúcar reductor, los colores

varían del azul verdoso hasta el rojo ladrillo, pasando por el amarillo y el rojo naranja.

(Chacón, 2019)

Suero Fisiologico

Fotografia No. 1 Prueba de benedict en suero fisiológico

Bebida Energizante ( Gatorade con azucar)

Fotografia No. 2 Prueba de Benedicten bebida energizante ( Gatorade con


azucar)
Fotografia No. 3 Prueba de benedict en gatorade

Leche

Fotografia No. 4 Prueba de benedict en leche


Coca cola

Fotografia No. 5 Prueba benedict en una cocacola normal


Coca cola Zero

Fotografia No. 6 Prueba de Bendict a Coca cola Zero

Procedimiento

Fotografía No. 7 Prueba Benedict: 2 ml de glucosa + 10 gotas Benedict + calor

 Se tomaron 5 tubos de ensayo rotulados y en cada uno de ellos colocar 2ml del

reactivo Benedict

 Se adicionó a cada uno de ellos 1 ml de las diferentes soluciones de glucosa

( solo se hizo en la presentacion del tema en las reacciones)

 Se calentaron los tubos al mechero hasta que se observólos cambios de

coloración.

Prueba de Lugol

El fundamento de esta prueba se basa en la formación de complejos coloreados de

absorción entre el iodo metálico y las cadenas de polisacáridos. Con el almidón vegetal se obtiene
el azul violeta, mientras que el glucógeno y las heritrodextrinas conducen a un color rojo.

(Chacón, 2019)

Almidón

Fotografía No.8 Prueba de Lugol: 2 ml de almidón + 10 gotas de Lugol

Papa

Fotografía No.9 prueba de Lugol en una porción de papa

Fruta (Manzana Licuada con Agua)


Fotografía No. 10 Prueba de Lugol en licuado de fruta con agua

Procedimiento
 Se toma un tubo de ensayo rotulado y se deposita en este5 ml de solución de almidón

 Se añada dos gotas de ácido clorhídrico

 Se añada dos gotas de Lugol

 Se registra los resultados

Proteínas

Prueba Xantoprotéica: Aminoácido Tirosina

En la reacción se consigue la nitración de los aminoácidos con núcleo aromático,

formándose nitro derivados de color amarillo por calentamiento, las sales de estos derivados son

de color amarillo.

Durante el desarrollo de la prueba ocurre también la desnaturalización de la proteína,

como resultado de la ruptura de los puentes de hidrógeno debido al bajo pH creado por el ácido

nítrico concentrado
Fotografía No.11 Prueba Xantoprotéica: Albumina de huevo + 10 gotas HNO3

Procedimiento

 Coloque en un tubo de ensayo 3 ml de solución de albúmina

 Añada 3 ml de ácido nítrico

 Dejar en reposo 5 minutos

 Registre resultados

Prueba de Biuret

La prueba o reacción de Beureth se empleará en el laboratorio para reconocer la presencia

de los enlaces peptídicos de las proteínas. En ella el sulfato cúprico alcalino reacciona con los

enlaces de unión entre los aminoácidos, lo que produce complejos de coloración violeta

Con base de cobre bivalente. El carácter positivo de la prueba se obtiene con un mínimo

de dos enlaces peptídicos y la intensidad de color depende del número de estos. (Chacón, 2019)

Albumina (Huevo) (NaOH + CuSO4)


Fotografia No.12 Prueba de Biuret en Albumina

Fotografía No.13 Prueba de Biuret en leche


Procedimiento
 Se depositó 2ml de solución de albuminaen un tubo de ensayo

 Se Agregó 2 ml de hidróxido de sodio 10% y mezcle

 Se adicionó sulfato cúprico gota a gota, agitando constantmente has que aparezca

la coloracion

 Se registran los resultados

Prueba de reconocimiento de grasas: Sudam III


La prueba de Sudam III se realiza para el reconocimiento de grasas por medio de la
solubilidad del Sudam III con las sustancias. El Sudam III es hidrofóbica, por lo tanto no se
solubiliza con el agua.
Fotografía No.14 Tubos de ensayo con agua y aceite para realizar la prueba Sudam III

Fotografía No.15 Tubos de ensayo con Sudam III (el rojizo se disolvió el Sudam III)
(El transparente no se solubilizó)

Procedimiento
 Agregue en el primer tubo 3ml de agua y Sudám III en polvo; realice
observaciones
 Agregue en el segundo tubo 3ml de aceite vegetal y Sudám III en polvo; realice
observaciones
 Si se solubilizó el Sudam III volviendose rojo, contiene lípidos
 Si no se solubilizó el Sudam III, no contiene lípidos

Prueba de reconocimiento de cloruro sodio


Fotografía No.16 Prueba de AgNO3 en NaCl (hay reacción)

Fotografia No. 17 prueba de Ag NO3 en Agua (no hay reacción)

Suero fisiológico

Fotografia No.18 Prueba de Sal de suero fisiologico


Gatorade (sal)

Fotografia No. 19 Prueba de Sal en gatorade

Procedimiento

 En un tubo de ensayo rotulado se tomó 2 ml de la solución a analizar

 Agregue 5 gotas de nitrato de plata

 Si contiene sales, habrá un precipitado blanco o producción de escarchado metálico

Resultados y Discusión

Tabla No. 1 Pruebas

BENEDICT LUGOL XANTOPROTEICA BIURET SAL

-------- AgNO3

Pruebas

Sustancias
Fruta Positivo Positivo

Papa Positivo

Leche Positivo Positivo

Coca cola Positivo

Coca cola Negativo

Zero

Suero Negativo Positivo

Fisiológico

Gatorade Positivo Positivo

Tabla No. 2 Resultados de Coloración según la prueba

Prueba Benedict Biuret Lugol Sal

AgNO3

Muestra

Gatorade Naranja X X Rosado

Leche Amarillo Azulado

Frutas Naranja X Marrón

Coca cola Verde X X X

Zero (No reacción)

Papa X X Marrón X

fondo blanco

Coca cola Naranja X X X

Suero Azul (No X X Blanco


Fisiológico reacción)

Es importante mencionar que la solución de Benedict se utilizó para detectar azúcares

reductores, normalmente monosacáridos o disacáridos. Proporcionó un resultado positivo para los

azúcares reductores como la glucosa, la fructosa, la lactosa, la maltosa y la galactosa, como pasó

en la fruta y el Gatorade. A su vez, Proporcionó un resultado negativo para los azúcares no

reductores, como la sacarosa o el almidón, como sucedió en el suero fisiológico y en la coca cola

Zero (Labster, 2023)

Es así como cuando se añade el reactivo de Benedict al azúcar reductor, y se aplica calor,

el color de la mezcla cambia a naranja o ladrillo intenso mientras mayor sea la abundancia de

azúcares reductores. Un cambio a color verde indica la presencia de menos azúcares reductores.

(Lastar, 2023).

Con Respecto a la prueba de Lugol se puede utilizar para reconocer la presencia de

almidón, porque esta sustancia adsorbe el yodo produciendo una coloración azul intensa,

coloración que desaparece al calentar, porque se rompe la estructura que se ha producido, pero

vuelve a aparecer al enfriar, como sucedió con la fruta y la papa.

En cuanto a la prueba de Biuret, el reactivo de Biuret se compone de hidróxido de sodio y

sulfato de cobre. Es por ello por lo que, el grupo amino de las proteínas reacciona con los iones

de cobre del reactivo de Biuret y el reactivo cambia de azul a violeta, como sucedió con la leche.
En el caso de la prueba Xantoprotéica, el reactivo de ácido nítrico desnaturaliza la

proteína por el bajo pH que produce, además de esto, se consigue la producción de colores

amarillos, donde se encuentra en mayor concentración el aminoácido Tirosina.

Para la prueba Sudán III, nos permite diferencias las sustancias por medio de la

solubilidad del Sudán III con respecto a los lípidos que contenga la sustancia; si se solubiliza,

produciendo rojo, es porque se encuentran los lípidos en la reacción; en el caso de no encontrarse

solubilización, es por la ausencia de lípidos en la sustancia.

En consideración a la prueba con (AgNO3) es una prueba para reconocer si las muestras

contienen sales. Es así como se observó en el suero fisiológico y en el Gatorade el cambio de

color.

Conclusiones

En general se estableció la presencia o la ausencia de biocompuestos de diferentes

muestras de origen orgánico y biológico, mediante la aplicación de diferentes pruebas como

fueron las de Benedict, Biuret, Lugol entre otras.

Por otra parte, se logró identificar algunas reacciones utilizadas para el reconocimiento de

proteínas y de carbohidratos con las pruebas usadas.


Bibliografía

Chacón Méndez, Juan Carlos (2019). Manual de prácticas de laboratorio de Biología

General. Escuela de Biología. Universidad Industrial de Santander.

Manual de laboratorio. Moléculas para la vida. Capítulo 4. Recuperado en:

https://www.uprm.edu/labs3051-3052/wp-content/uploads/sites/168/2018/08/labmoleculas.pdf

Labster. Prueba de Benedict. Recuperado en: https://theory.labster.com/es/benedict/

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