Sistema de Control de pH
El sistema controla el pH del medio de cultivo; que es generada por los productos de desecho y el metabolismo propio del cultivo celular o microorganismos. Un sistema de control de acidez consta de: Dos subsistemas mecnicos servo controlados 1. Sistema Dispensador de cido: que consta de:
Dispensador asptico de cido (HCl); Filtro microporo en lnea; Manguera flexible resistente al cido; Bomba peristltica;
1. Sistema Dispensador de lcali: que consta de:
Dispensador asptico de lcali (NaOH); Filtro microporo en lnea; Manguera flexible resistente al lcali; Bomba peristltica;
Nota: recuerde que las mangueras flexibles se deben conectar al sistema (biorreactor) mediante un tubo de adicin de reactivo para cada una de ellas. Un sistema de control formado por:
Controlador de pH: ordena y regula la accin del motor que controla a las bombas peristlticas que suministran el cido y el lcali.
Un sistema de medicin: formado por:
Sensor de pH: sonda o probeta electroqumica que mide la acidez y dice al controlador de pH, la situacin del medio. pH ptimo: toda clula y microorganismo poseen un rango de acidez (pH) dentro del cual, es posible su crecimiento con normalidad; dentro de ese rango, existe un pH ptimo en el cual el crecimiento es mximo y muy bien definido.
Al crecer los microorganismos en ambientes naturales, su rango de pH se acerca a los valores del hbitat en que se desarrolla; el rango normal de acidez en que pueden sobrevivir la mayora de los microorganismos es 2,0 pH 10,0. La mayora de los hbitats tienen valores de pH de 5,9 por lo que, los microorganismos que viven en esos hbitats tienen un pH ptimo equivalente (5,9).
Algunos rangos de pH ptimo son: para levaduras entre 3,5 y 5,5; para bacterias entre 6,0 y 7,5; para mohos, segn la cepa, se extiende entre 3 y 7; para clulas en cultivo entre 6,0 y 7,5. La forma exacta de la curva de acidez es muy variada y depende del metabolismo propio de cada microorganismo o clula por lo que, no se ha formulado un modelo general y simple para representarla.
[editar] Sistema de Control de Temperatura
Mantiene estable y dentro de un rango ptimo requerido por el cultivo para su mximo crecimiento, la temperatura interna del sistema. Un sistema de control de temperatura consta de: Dos sistemas de intercambio trmico:
Intercambiador de Calor: dispositivo de intercambio trmico que genera calor o absorbe el calor excedente. El intercambiador de calor de caso y tubos es el ms usado y se define por su rea de transferencia de calor; a mayor rea de transferencia de calor, mayor capacidad de absorber calor. Serpentn: medio fsico por el cual el calor es absorbido o transmitido al fluido. El tubo del serpentn debe ser de acero inoxidable 304 o 316 (preferiblemente) y se recomienda que sea delgado para una mejor transferencia de calor.
Un sistema de control:
Controlador de Temperatura: sistema que ordena y regula la accin del motor que controla las servo vlvulas que regulan el flujo de lquido fro o caliente.
Un sistema de medicin:
Sensor de temperatura: sonda (termocopla) que mide la temperatura.
Un servo control:
Servo Controlador de Temperatura: controla la temperatura a la que debe abrir o cerrar la vlvula solenoide.
Un sistema regulador de paso de flujo:
Vlvula Solenoide: servo mecanismo actuador que regula el flujo (paso) de lquido por la tubera o lnea de paso (abre o cierra el flujo del lquido)
Un sistema de conduccin de fluido:
Tuberas de Conduccin de Agua: el agua es fluido trmico por excelencia para la transferencia de calor por conduccin a travs de las paredes metlicas de la tubera. stas deben ser de acero inoxidable.
Nota: las tuberas deben anclarse al cuerpo del biorreactor mediante un puerto de entrada que es soporte hermtico que la sujeta a la superficie plana. Temperatura ptima: la temperatura es otro factor ambiental que influye y que afecta el crecimiento del cultivo microbiano y celular; poniendo el juego, la propia supervivencia de la clula o microorganismo. La temperatura afecta a las clulas y microorganismos cultivados de dos formas distintas: 1. Conforme aumenta la temperatura, aumenta tambin la velocidad de las reacciones enzimticas y el crecimiento se hace ms rpido; 2. Por encima de un mximo temperatura, se produce la desnaturalizacin de las protenas celulares y la descomposicin de los componentes celulares esenciales para mantener la vida, causando la muerte de las clulas o microorganismos en cultivo. En este punto analizaremos nicamente el primer tem; ms adelante veremos el segundo. Para cada clula y microorganismo existe una temperatura mnima por debajo de la cual, no hay crecimiento; es decir se inhibe el crecimiento celular. Y una temperatura mxima por encima de la cul, la clula o microorganismo muere. Entre ese rango de temperaturas existe una temperatura ptima para la cual, el crecimiento es el ms rpido posible. Estas tres temperaturas son caractersticas de cada clula y microorganismo y pueden variar ligeramente con la composicin del medio de cultivo. [editar] Clasificacin de los microorganismos de acuerdo a sus temperaturas Tipo de microorganismo Temp. Mnima (C) Temp. ptima (C) Temp. Mxima (C) Psicrfilo -5 +5 12 - 15 15 - 20 Psicrtrofo -5 +5 25 - 30 30 - 35 Mesfilo 5 - 15 30 - 45 35 - 47 Termfilo 40 - 45 55 - 75 60 - 90 Determinacin de la Temperatura ptima de Crecimiento: se realiza desde el punto de vista cintico, aplicando la Ley de Arrhenius para el crecimiento y la muerte de clulas o microorganismos: dln (k)/dt = Ea/RT2; dln (k) = -(Ea/R)*d(1/T) Donde: k = mx (para el crecimiento), k = mx (para la muerte), T = temperatura absoluta, R = constante general de los gases ideales, Ea = energa de activacin del proceso: EC para el crecimiento, Em
para la muerte; EC = 8 12.000 cal/g-mol K (crecimiento), Em = 50 100.000 cal/g-mol K (muerte). La realizacin de la curva de crecimiento EC en conjunto a la curva de muerte Em representada por su logaritmo ln (k) versus el inverso del tiempo 1/T conduce a la determinacin grfica de la temperatura ptima.
