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Tema 24-Raúl

Este documento describe las bacterias del filo Actinobacteria, incluyendo Corynebacterium, Nocardia, Mycobacterium y Rhodococcus. Son bacterias Gram positivas con alto contenido en G+C que forman parte de la microbiota normal pero también pueden causar enfermedades. Algunas especies producen toxinas y son patógenas oportunistas de humanos y animales.

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Tema 24-Raúl

Este documento describe las bacterias del filo Actinobacteria, incluyendo Corynebacterium, Nocardia, Mycobacterium y Rhodococcus. Son bacterias Gram positivas con alto contenido en G+C que forman parte de la microbiota normal pero también pueden causar enfermedades. Algunas especies producen toxinas y son patógenas oportunistas de humanos y animales.

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Tema 24

BACTERIAS GRAM (+)


CON ALTO CONTENIDO EN G+C
Clase Actinobacteria
Actinobacteria (actinomicetos)

Dominio: Bacteria
Filo: Actinobacteria
Clases: Rubrobacteria
Thermoleophilia
Coriobacteriia
Orden: Actinomycetales
Acidimicrobiia Bifidobacteriales
Nitriliruptoria Coriobacteriales
Actinobacteria Acidomicrobiales
Rubrobacterales
Actinomycetales

• Diversos.
• Algunos pendientes de clasificar.
• Generalmente aerobios.
• Mayoría asociadas a ciclos biogeoquímicos.
• Utilidad industrial: antibióticos, antivirales, etc.
• Patógenos.
• Pleomórficos, y muchos forman filamentos a modo de “hifas”.
• Algunas especies son ácido-alcohol resistentes.
Actinomycetales
GRUPO CNM: Corynebacterium/Nocardia/Mycobacterium (y Rhodococcus).

Características comunes
 Alto contenido en G+C.
 Estructura de la pared:

• Peptidoglicano.
• Arabinogalactano.
• Ácidos micólicos.
• Lipoarabinomanano.
• Además se incluyen lípidos de superficie.

ÁCIDO-ALCOHOL RESISTENTES
Tinción de Ziehl-Neelsen
Pasos:

1. Tinción con fucsina-fenol en caliente.

2. Agente decolorante (solución de ác.


clorhídrico en etanol).

3. Tinción con colorante de contraste


(azul de metileno).

Mycobacterium tuberculosis
Corynebacterium

Filo: Actinobacteria
Clase: Actinobacteria
Orden: Actinomycetales
Familia: Corynebacteriaceae
Género: Corynebacterium
Especies (246): C. diphtheriae
C. bovis
C. pseudotuberculosis
C. renale, …

Bacterio.net. 2023
Corynebacterium
• Pleomórficos (“morfología corineforme”, “letras chinas”) 0,5 x 2-6 μm.
• Gram +.
• Catalasa +.
• Oxidasa –.
• Inmóviles.
• No esporulado.
• Sin cápsula.

• Aerobios (anaerobios facultativos).


• Fermentan azúcares y producción ácido  variable (diferencia grupo C.
renale).
• Reducción de nitratos: diferencia 2 biotipos de C. pseudotuberculosis
o Reductores bovinos y caballos: “linfangitis ulcerativa” y abscesos.
o No reductores  en ovejas y cabras: “linfadenitis caseosa”.
• Ureasa + (excepto C. bovis).
Corynebacterium
• Muchas especies.

• Hábitat: comensales mucosas, microbiota, piel, ambiente.

• Pocas patógenas (oportunistas)  grupo de “bacterias piógenas”

C. diphtheriae
(difteria)

Nico - Neiker

Difteria C. pseudotuberculosis
“El garrotillo-Goya”
(linfadenitis caseosa)
Corynebacterium
Medios de cultivo

• Exigente requiere enriquecimiento.

C. renale
• Medios generales: Agar sangre.
o C. bovis es lipofílica (se favorece con leche de vaca en el medio).

• Medios específicos: de Loeffler (glucosa y suero), soja-tripticasa.

• Aspecto colonias: pequeñas y blanquecinas, lisas y brillantes.


o Hemólisis β pequeña (a veces solo a las 72h): C. pseudotuberculosis.
o Test de CAMP +  C. pseudotuberculosis con Rhodococcus.
o No hemolíticas las otras especies.

o Presencia de pigmento amarillo en el grupo C. renale.


Corynebacterium
Factores de virulencia

• C. pseudotuberculosis (sobrevive y multiplica en células fagocíticas):


o Lípidos (ác. micólicos) de la pared  resistencia a fagocitosis.
o Exotoxina fosfolipasa D (PLD)  destrucción celular.
o Proteasa 40 (CP40: corynebacterial secreted protease 40). Induce
anticuerpos (vacuna).

• C. ulcerans, C. diphtheriae y C. pseudotubersulosis:


o Toxina diftérica (exotoxina AB)  inhibidor traducción de ARN.

• Grupo C. renale
o Fimbrias para unirse al epitelio renal. Inmunosupresión
o Ureasa. Daños postparto
Corynebacterium
De interés veterinario

• C. pseudotubeculosis
o Ovejas y cabras: “linfadenitis caseosa”.
o Bovino y equino: “linfangitis ulcerativa”, abscesos.
•C. bovis: mamitis subclínica en bovino.
•Grupo C. renale
o C. renale (tipo I): cistitis y pielonefritis en bovino.
balanopostitis en ov./caprino.
o C. pilosum (tipo II): cistitis y pielonefritis en bovino.
o C. cystitidis (tipo III): cistitis y pielonefritis en bovino.
• C. ulcerans: mamitis en bovino, difteria en humana.
________________________________
• C. diphtheriae: difteria en humana.
• C. kutscheri: abscesos en roedores de laboratorio.
Nocardia

Filo: Actinobacteria
Clase: Actinobacteria
Orden: Actinomycetales
Familia: Nocardiaceae
Género: Nocardia
Especies (145): N. asteroides,
N. africana
N. alba, …

Bacterio.net. 2023
Nocardia
• Bacilos filamentosos.
• Gram +.
• Catalasa +.
• Oxidasa +.

• Inmóviles.
• No esporulados. Tinción de Kinyoun

• Sin cápsula.

• Aerobios estrictos.
• No fermentan azúcares (si oxidan).
• Ácido micólico en la pared (grupo CNM)  Ziehl-Neelsen
(débil).
Nocardia
Medios de cultivo

• Fácil (mejor con CO2).


• Crecimiento lento (5 días, hasta 21) y Tª de 27-32o.

• Medios generales:
o Agar sangre.
o Crece en Saboureaud con color naranja (diferencial con Actinomyces).
o Medio de micobacterias (Lowestein-Jensen).

• Aspecto colonias: variable, blanquecina o naranja, aspecto pulverulenta,


irregular, o tipo “miga de pan”.

• Presentan “hifas aéreas” (diferencial con Actinomyces).


Nocardia
• Actinobacterias saprófitas (suelo y vegetación en descomposición).
• Patógenos oportunistas en humanos y animales (inhalación, heridas).
• Lesiones piogranulomatosas (“gránulos de azufre”).

Factores de virulencia
• Supervivencia intracelular.
 Resistentes a macrófagos Multiplicación intracelular (CNM).
 Enzimas: catalasa y superóxido dismutasa.
 Induce granulomas.

Diagnóstico presuntivo:
• Gram +
• Filamentosa ramificada
• Aerobia
• Inmóvil
• Catalasa +
• Tinción Kinyoun +
Pleuritis en perro
Nocardia
De interés veterinario
Nocardia asteroides  nocardiasis en animales.

o Perros:
 Forma cutánea: piogranulomas.
 Forma torácica: pleuritis piogranulomatosa con piotórax.
 Forma diseminada.
o Bovino: mamitis crónica, abortos.
o Porcino: abortos.
o Ovejas, cabras, caballos: mamitis, neumonía, lesiones multifocales.
o Hombre: pleuritis, celulitis, diseminada.
Rhodococcus

Filo: Actinobacteria
Clase: Actinobacteria
Orden: Actinomycetales
Familia: Nocardiaceae
Género: Rhodococcus
Especies (76): R. equi,…

Bacterio.net. 2023
Rhodococcus
• Pleomórficos (cocos y bacilos hasta 5 μm, según cepas).
• Gram +.
• Catalasa +.
• Oxidasa –.

• Inmóviles.
• No esporulados.
• Cápsula.

a) Células en forma de bastón en fase


exponencial de crecimiento. b) células
• Aerobio estricto. cocoides en fase estacionaria. En el
curso de su crecimiento presentan un
• No fermentan ni oxidan verdadero ciclo morfológico, formas
cocobacilares que dan lugar a bacilos

azúcares. cortos y posteriormente a filamentos


más o menos ramificados que, por
fragmentación rodean a los bacilos o
cocobacilos.

http://fundacionio.org/img/bacteriology/cont/Rhodococcus.html
Rhodococcus equi
Medios de cultivo • Agar colistina-ácido nalidixico (CNA).
• Agar ceftazidima-novobiocina (CAZ-
NB).
• Etc.
• Fácil. No requiere enriquecimiento.
• Medios generales  agar sangre. No hemolítica pero positiva a test de
CAMP (S. aureus, C. pseudotuberculosis, L. monocytogenes)  Factor equi.
• Aspecto colonias: mucoides, color salmón (4º día)
Rhodococcus equi

Rhodococcus equi: ASPECTOS MICROBIOLÓGICOS Y CLÍNICOS Isabel Garcia Bermejo


Servicio de Microbiología. Hospital Universitario de Getafe. Madrid
Rhodococcus
• Muchas especies  una especie patógena: R. equi (anteriormente
denominado Corynebacterium equi).

• Zoonótica (oportunista).

• Hábitat: suelo, intestino de animales.

• Grupo de “bacterias piógenas”.

• Importancia en potros (<4 meses). Neumonía granulomatosa.

• Vía: inhalación/digestiva

_________________________________________
• Linfadenitis en cerdos (nódulos retrofaríngeos).

• Infecciones purulentas oportunistas en animales.


Rhodococcus equi
Factores de virulencia

• Crecimiento intracelular dentro de macrófagos alveolares.


o Ácido micólico (grupo CNM).
o Superóxido dismutasa, catalasa.

• Patogenia debida a un plásmido, de gran tamaño  codifica para


proteínas relacionadas con la virulencia (vapA, vapB y VapN).

• Otras
• Cápsula (27 serotipos)  Inhibe fagocitosis.
• Exoenzimas: colesterol-oxidasa.
Mycobacterium

Filo: Actinobacteria
Clase: Actinobacteria
Orden: Actinomycetales
Familia: Mycobacteriaceae
Género: Mycobacterium
Especies (272): M. tuberculosis,
M. bovis
M. leprae,
M. avium, …

Bacterio.net. 2023
Mycobacterium
• Bacilos (1-10µ).
• Gram + (no se tiñen).
• Catalasa +.
• Oxidasa –.

• Inmóviles.
• No esporulados.
• Sin cápsula.

• Aerobio estricto.
• No fermentadores de azúcares (si oxidan).

• Pared con gran cantidad de lípidos y ácido micólico.


(grupo CNM)  tinción Ziehl-Neelsen (bacteria ácido-alcohol
resistente).
https://es.wikipedia.org/wiki/Mycobacterium#/media/Archivo:Mycobacterial_cell_wall_diagram.svg
Mycobacterium

Pared celular micobacterial: 1-


lípidos externos, 2-ácido micólico,
3- polisacáridos (arabinogalactano),
4-peptidoglicano, 5-membrana
plasmática, 6-lipoarabinomanano
(LAM), 7-fosfatidilinositol manosido,
8-esquema de la pared celular.

 Hidrofóbica
 Muy resistentes en el medio y a tratamiento antibiótico.

 Saprófitos, oportunistas y patógenos obligados  Infecciones crónicas.


 Importantes patógenos en humana y animales  Tuberculosis, paratuberculosis.
Mycobacterium
Medios de cultivo

• Exigente.
• Medios selectivos: medios de micobacterias: Lowestein-Jensen, Coletsos

• Tª de crecimiento:
• 37 °C en mamíferos (M. tuberculosis, M. bovis, M. avium sub.
paratuberculosis)
• 37 °C - 43 °C en aves (M. avium)
• Tiempo de crecimiento:
• Rápido (1 semana)  micobacterias oportunistas (grupo M. chelonae,
grupo M. fortuitum, M. phlei, M. smegmatis).
• Lento (2-8 semanas)  M. tuberculosis, M. bovis, M. avium.
• Muy lenta (hasta 16 semanas)  (M. avium sub. paratuberculosis).
Mycobacterium
• Producción de pigmentos:
o No pigmento complejo M. avium, M. genavense, M. tuberculosis.
o Color naranja por carotenoides  micobacterias oportunistas.
 Fotocromógenos en presencia de luz (M. kansaii, M. marinum).
 Escotocromógenos en presencia de luz u oscuridad (M.

icle/pii/S1761289605442673
http://www.sciencedirect.com/science/art
scrofulaceum).

• Otras características (metabólicas) diferenciales:


o Suplemento de micobactina  solo para M. avium sub. paratuberculosis.
o Suplemento de glicerol  estimula crecimiento de M. tuberculosis y
complejo M. avium. Inhibe M. bovis.
o Suplemento de piruvato  estimula M. bovis.
Mycobacterium
• Aspecto colonias: color blanquecino a cremoso, pigmentadas algunas (M.
paratuberculosis), adherentes, rugosas, fácil de romper algunas (M. bovis,
M. paratuberculosis). Hemiesféricas (M. paratuberculosis).

http://www.uaz.edu.mx/histo/pathology/ed/ch_9b/c9b_mtb_mac.jpg

https://slideplayer.es/slide/8628242/
Mycobacterium
Factores de virulencia
https://www.uaz.edu.mx/histo/Webpa
• No toxinas (excepto M. ulcerans). tutah/infehtml/INFEC037.HTM

COMPONENTES PARED BACTERIANA  hidrofobicidad, resistencia a antibióticos

• Lipoarabinomanano: previenen la fusión fagosoma-lisosoma (supervivencia


intracelular).
• “Cord Factor” (glicolípido de pared trehalosa + ac. micólico)  tóxico para
leucocitos, interfiere función mitocondrial, inflamación y desarrollo lesiones
granulomatosas.
• Capacidad de adquisición de hierro
extracelular (micobactina).

• Proteína ESAT-6  granulomas.

Respuesta inmune
• Modula la enfermedad y el tipo de lesiones (localizadas o generalizadas).
• Importante la inmunidad celular (linfocitos T).
• Hipersensibilidad retardada prueba de la tuberculina (extracto de la pared).
“Cord Factor”

Cecilia H. Toledo Brambilla, 2015


Mycobacterium Nico - Neiker

• M. tuberculosis complex
o M. tuberculosis tuberculosis en humana, otras especies.
o M. bovis tuberculosis bovina, otras especies.
o M. caprae tuberculosis caprina, otras especies.
o Otras:  tuberculosis en varias especies.

• M. avium complex  tuberculosis en aves.


o M. avium subsp. paratuberculosis paratuberculosis.
ovina/caprina/bovina (¿Enfermedad de Crohn?).

• M. leprae  lepra humana.


• M. lepraemurium lepra en roedores y gatos.
• Otras especies oportunistas: lesiones granulomatosas. Engrosamiento de la
mucosa intestinal
- M. ulcerans úlcera de Buruli
Actinomyces

Filo: Actinobacteria
Clase: Actinobacteria
Orden: Actinomycetales
Familia: Actinomycetaceae
Género: Actinomyces
Especies (60): A. bovis
A suis
A. viscosus
A. canis, …

Bacterio.net. 2023
Actinomyces
• Bacilos filamentosos y ramificados: largos y cortos (formas en
V, T o Y) (0,5 x 10 μm).
• Gram +.
• Catalasa variable (A. bovis -).
• Oxidasa –.

• No móviles.
• No esporulado.
• Sin cápsula.

• Anaerobio-microaerófilo (mejor a 5-10% de CO2).


• Fermentación azúcares y producción ácido  variable.
• “Gránulos de azufre” en zonas afectadas por Actinomyces bovis
(colonias).
Actinomyces
Medios de cultivo
• Exigente requiere enriquecimiento (crecimiento 3-14 días).

• Medios generales:
o Agar sangre. Ligera hemólisis beta algunas especies o cepas (A. bovis).
o Caldo tioglicolato.
o Agar infusión cerebro y corazón (BHI).
o Aspecto colonias: grandes, irregulares (aspecto de “muela” ),
blanquecinas, brillantes, adheridas al agar.

A. viscosus: dos tipos de colonias: una grande y lisa (MO: formas en V,T e
Y) y pequeña y rugosa (MO: pequeños filamentos ramificados).
Actinomyces
• Género con bastantes especies.
• Pocas productoras de enfermedades en hombre y animales.
• Hábitat: mucosas (especialmente digestivas superiores), microbiota,
suelo.
• Oportunistas.

Factores de virulencia
• No definidos.
Patología Nico - Neiker

• Reacciones piogranulomatosas como respuesta del hospedador a


una infección crónica.

Actinomicosis
bovina
Actinomyces
De interés veterinario

• A. bovis: actinomicosis bovina (“lumpy jaw”).


• A. viscosus:
• Perros: actinomicosis canina: dermatitis y
pleuritis.
• Caballos: dermatitis.
• Bovinos: abortos.
• A. canis y A. hordeovulneris: : inflamaciones
purulentas en diferentes localizaciones (perro).

Gato
Arcanobacterium/Trueperella

Filo: Actinobacteria
Clase: Actinobacteria
Orden: Actinomycetales
Familia: Actinomycetaceae
Género: Arcanobacterium
Especies (18): A. haemolyticum, …

Bacterio.net. 2023
Arcanobacterium/Trueperella

Filo: Actinobacteria
Clase: Actinobacteria
Orden: Actinomycetales
Familia: Actinomycetaceae
Género: Trueperella
Especies (7): T. pyogenes, …

Bacterio.net. 2023
Arcanobacterium/Trueperella
• Corineforme  pleomórficos (cocos, bacilos y porra; formas en
V: aspecto letras chinas) (0,5 x 2 μm).
• Gram +
• Catalasa +
• Oxidasa –

• No móviles
• No esporulados
• Sin cápsula

• Anaerobia facultativa.
• Fermentación azúcares (ácido)  variable
Arcanobacterium/Trueperella
Medios de cultivo
• Exigente (enriquecimiento).

• Medios generales:
o Agar sangre  Hemólisis β (48h)
o Medio de Loeffler (clásico de Corynebacterium)

• Aspecto colonias: pequeñas y blanquecinas.


Arcanobacterium/Trueperella
• Arcanobacterium (hasta 1982 Gº Corynebacterium -C. haemolyticum-)
• 2011: dos géneros: Arcanobacterium y Trueperella
• Trueperella pyogenes (antes Arcanobacterium pyogenes)

• Oportunistas
Nico - Neiker Absceso
• Grupo de “bacterias piógenas”
• Infecciones en hombre y animales
• Hábitat: mucosas y medio ambiente

Factores de virulencia
• Trueperella pyogenes:
o Piolisina  Hemolisina.
o Neuraminidasas: adherencia a células.
o Adhesinas fimbriales.
Arcanobacterium/Trueperella
De interés veterinario
• Trueperella pyogenes: la más importante. Infecciones piógenas
multifocales. Afecta a numerosas especies animales.

• Otras: infecciones esporádicas piógenas en múltiples especies:


o Arcanobacterium pluranimalium.
o A. phocae: en focas y delfines.
o A. haemolyticum: en el hombre (faringitis).

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