360 Información genética SECCIÓN 3

REPLICACIÓN DEL DNA

Una propiedad esencial del material genético es su capacidad para h

·
exactas de sí mismo: ·Sansface e 1 mo d e1O d e W atson Y C ne · k este requi acer
· e0 Ptas·
< . k .b. . "N sito: t
trabajo publicado, Watson y Cnc escn ieron. o escapa a nuestro nsu
miento que el apareamiento específico que hemos postulado sugiere i co~ºci.
. . d . d d 1 .al , . ,, nn1ed1
mente un posible mecanismo e copia o e maten genenco . lmplí . ata.
estructura doble y complementaria de la hélice de DNA está el mecanis~to en la
. ·'
cual puede reproducirse. En el momento d_e 1a rep l1cac10n cromosómic I e
"'º Por l
- d" , d 1 b a, a rn
~ula de DNA se ab~ 1:2or el m~_.!_O, SfP.iJ.@[l _~ ~ as ªses apareadas al nivel~-
lo~ puentes de_bid!-Qgen~--~_ 1!1ed~~,a_g_~~ 1~ dos cªdep.as se separan, actúan corn~
moldes Q_guías_; cada 11na..4!_~1~~ la s_11:tes1s de una nue:a ca~ena complementaria a
lo largo de coda ~ c::xtension, ~nh~~ndo las matenas ~nmas de la célula (fi
14-11). Este mecanismo de rephcac1on del DNA, sugendo por Watson v C _gk
sobre la base de su modelo estructural . del DNA,, se llama replicación semico . ne
nser-
vativa
-='
dado que se conserva \a m1cad__de la molecula. .
Cada cadena v1e1·a conStl-.
tuye el molde para la producción de una nueva. S1 hay una T presente en la ca-
dena vieja, solamente puede ubicarse una A en el lugar adecuado de la caden
, . D a
nueva; una G sólo se apareará con una C , y as1 sucesivamente. e esta manera
cada cadena forma_l!na CQpia _d~ su cadena complementaria original y se produ~
cen dos réplicas exact~e la molé~u.!.a. Esta era, aparentemente, la respuesta~
antiquísima pregunta acerca de cómo se duplica la información hereditaria y pa-
sa de generación en generación.

Una confirmación de la replicación semiconservativa

Fig. 14-11. Replicación de la molécula de
DNA, predicha por el modelo de Wátson y
Crick. Las cadenas se separan al romperse los El modelo de Watson y Crick de replicación del DNA, no obstante, no era el
puentes de hidrógeno que mantenían unidas único mecanismo propuesto (fig. 14-12). Matthew Meselson y Franklin W
las bases. Cada una de las cadenas originales Stahl, del Instituto de Tecnología de California, EE.UU., desarrollaron un ele-
sirve luego como molde para la formación de
una cadena complementaria nueva con los gante experimento para decidir entre los tres modelos posibles.
nucleótidos disponibles en la célula. Investiga- Al diseñar su experimento, utilizaron un isótopo pesado del nitrógeno (1 5N) y
ciones_posteriores han dado como resultado la un método muy sensible para separar macromoléculas según su densidad. El mé-
modificación de parte de los detalles de este
proceso, como veremos en breve, pero el prin- todo, que había sido ideado por Meselson cuando era un estudiante graduado,
cipio subyacente no ha cambiado. consiste primero en colocar una solución de cloruro de cesio (CsCl) en un rubo
y luego ultracentrifugarla. Las moléculas pequeñas y densas de CsCl forman un
gradiente de densidad menos concentrado hacia la boca del cubo y más concen-
trado hacia el fondo. Cuando las moléculas de DNA se centrifugan en esta solu-
ción, forman una banda en el punto del gradiente en el que el DNA y el CsCI
tienen densidades iguales.
Para el experimento (fig. 14-13), se cultivaron células de E. coli durante varias
generaciones en un medio cuya única fuente de nitrógeno contenía 15N, p~r ,
10
que el DNA de esas bacterias finalmente contenía una gran proporción de nicri-
geno pesado. Aunque la densidad de este DNA era sólo aproximadamente .
mayor que la del DNA normal, formó una banda separada cuando fue cenen é
1
i~
· de e -
gada en e1gradiente de CsCl. Luego, los científicos colocaron una muestrª , ni-
lulas que contenían DNA con nitrógeno pesado en un medio que conrenia
,
trogeno 1·1v1ano,
. 14N . L as cé1ulas quedaron en este medio sólo lo sur1c
c. 1. 0 re corno
~ . , del
para que el DNA se replicase una vez (según se determinó por la duplicaci~~ ¡ 5•
número de células) y luego se centrifugó una muestra del DNA de estas c~ uª 11
e on postenon · "dad se h.izo crecer una segunda muestra de células en e1medio co
14
N durante dos generaciones. Su DNA también fue centrifugado. .· 0
,
e orno ca.b 1a d , DNA [¡via 11
esperar, ca a nueva muestra de DNA contenía mas
. ¿·
¡ 14:N 1sp 0 ,
que el antenor ya que el DNA recién formado tenía que incorporar e l ri-
nible. Además, y esto fue de importancia crucial, la densidad del DNA de ª P
 C AP Í TU LO l 4 El DNA, el código genético y su traducción 361

(b) (c)

Progenitor Proge nitor Progenitor

F¡

F2

Fig. 14-12. Los tres modelos hipotéticos de replicación del DNA. El experimento de Meselson y Stahl
(que se describe en la figura 14-13) fue realizado para determinar cuál de estas tres posibilidades era la
correcta. En este diagrama, las cadenas originales se muestran en color violeta y las cadenas recién re-
plicadas se muestran en pardo. a) Replicación conservativa. Cada una de las dos cadenas del DNA
progenitor se replican, sin separación de las cadenas. En la primera generación, una molécula hija es
todo DNA viejo y la otra es todo DNA nuevo. La segunda generación contiene una doble hélice com-
puesta por las dos cadenas viejas y tres dobles hélices compuestas por cadenas completamente nuevas.
b) Replicación semiconservativa. Las dobles hélices progenitoras se abren y cada una de las dos cadenas
sirve como un molde para una cadena nueva. En fa primera generación cada doble hélice hija tiene
una cadena vieja y una nueva. La segunda generación está formada por dos moléculas de DNA híbri-
das (una cadena vieja y una nueva) y dos moléculas de DNA constituidas completamente por cadenas
nuevas. c) Replicación dispersiva. Durante la replicación, las cadenas progenitoras se rompen a interva-
los y los segmentos replicados se combinan en cadenas con segmentos de las cadenas progenitoras. Todas
las dobles hélices hijas son en parte viejas y en parte nuevas. De los tres modelos, Wátson y Crick ha-
bían predicho que el correcto era el b).

mera generación era exactamente intermedia entre la densidad del DNA proge-
nitor pesado y la del DNA liviano común, como resultaría si cada molécula con-
tuviese una cadena vieja (pesada) y una cadena nueva (liviana). En la segunda ge-
neración, la mitad del DNA era semipesado y el resto era liviano, lo cual nueva-
mente confirmaba la hipótesis de Watson y Crick de replicación semiconservati-
va (fig. 14-12 b).

El mecanismo general de la replicación del DNA

y repli~ción d~l D~A_~ un _proceso que oc_uge sólo una vez en cada genera-
ción celular y resulta esencial en la duplicación de los cromosomas. En la mayoría
de las células eucarióticas, la replicación del DNA-que ocurre durante la fase S del
ciclo celular (cap. 10, pág. 274)- conduce finalmente a la mitosis, pero en los es-
permatocitos y ovocitos primarios conduce en cambio a la meiosis. La replicación
es un proceso notablemente rápido; en los humanos y otros mamíferos, la veloci-
dad de síntesis del DNA es aproximadamente de 50 nucleótidos/segundo. En los
procariotas es aun más rápida: alrededor de 500 nucleótidos/segundo.
El principio de la replicación semiconservativa, en la que cada cadena de la do-
ble hélice de DNA sirve como molde para la formación de una nueva cadena, es
362 Infonnación genética SECCIÓN 3

Densidad creciente
Fig. 14-13. El experimento de Meselson y
Srahl. a) El DNA Liviano normal fonna una
banda ubicada en un lugar preciso cuando se
ultracentrifuga en un gradiente de densidad
de CsCL. 6) Células de E. coli cultivadas en
(a)
) DNA
livia no DNA con d
cadenas os
livianas
un medio con nitrógeno pesado (1 5N) acumu-
lan un DNA pesado que, al ser centrifugado

~
en un gradiente de densidad de CsCl, forma
una banda separada y distinta. c) Cuando se
centrifi,ga una mezcla de DNA pesado y li-
viano en un gradiente de densidad de CsCl,
los dos tipos de DNA se separan en bandas
distintas. d) Cuando las células que fueron
(b)
1 ) DNA
pesado
DNA pro .
(ambas ca~cn1101
pesadas) enas

cultivadas en un medio con nitrógeno pesado

1
(1 5N) se multiplican durante una generación
Mezcla de DN
en un medio con nitrógeno liviano común
(14N), el DNA de las células hijas forma una
banda en el gradiente de densidad de CsCI
que se localiza a mitad de camino entre las
(e)
1 ) Mezcla de
DNA pesado
y liviano
de cadenas A.
r ~adas y
IVJanas

bandas de DNA pesado y DNA liviano.

e) Cuando las células que contienen DNA

s
(

~)
pesado se cultivan durante dos generaciones en

! )
el medio con 1·W, el DNA de las células hijas DNA después
forma dos bandas en el gradiente de densidad: (d) de una
generación F¡
una banda de DNA liviano y una b_anda de
DNA semipesado. La columna de la derecha
muestra las interpretaciones de los investiga-
dores. Como se puede ver, este experimento

s ~
confirmó la hipótesis de Wátson y Crick acerca
de que la replicación es semiconservativa.
(e)
1 ) DNA después
de dos
generaciones ~
)
F2

relativamente simple y fácil de comprender. Sin embargo, el proceso real por el

cual la célula lleva a cabo la replicación es considerablemente más complejo. Igual
que en otras reacciones bioquímicas de la célula, la replicación del DNA requie-
re un número de enzimas diferentes, cada una de las cuales cataliza un paso par-
ticular del proceso. La identificación de las principales enzimas, sus funciones
precisas y la secuencia de hechos de la replicación han requerido años de estudio
y el esfuerzo de muchos científicos de diferentes laboratorios. Aunque nuestra
comprensión aún no es completa, los rasgos generales del proceso están más cla-
ros ahora.
El proceso general de la replicación es común a las células procarióticas y eu-
carióticas; sin embargo, el mecanismo difiere en algunos aspectos. La iniciación
d_e ht replicación del DNA, tanto en P..!QCar_iotas como en eucariotas, siempre co-
mienza en una secuencia específi_ca de nucleótidos con~cida como el origen de la
replicáción. Requiere proteínas iniciadoras-- especiales, además de varias enzima§
diferentes. Entre ellas, las helicasas r9mpen los pu~ntes de hidrógeno qµe unen la§
b-ª5es C:_omplell!_enté!rias_y abr~n Ja hélice en el origen de la replicació!}. Pero, a me-
dida que las cadenas de la hélice se separan, las porciones contiguas de la doble
hélice corren el peligro de enrollarse más y más -es decir superenrollarse-. Otr~
~nzimas, las topoisomerasas, ~ompen y reconectan una o ambas cadenas de la he-
lic~1 _perf!).i_t:iendo que giren y se aliviane la tensi<:m. ..
Una vez que se separan las dos cadenas de la doble hélice, proteínas ~~ici~a-
les -las proteínas de unión a la cadena simple- ~ ul)en a las cadenas ind1v1?u . es,
manteniéndolas separadas y evitando que se retuerzan. Esto pos1·b·1· 11ta e1si gu1en-.
te paso, la síntesis real de las nuevas cadenas, catalizada por las enzimas conoci-
das como DNA polimerasas. de
Si se observa el DNA en replicación con el microscopio electrónico, la zona de
~íntesis_aparece como un '~qjo'~.9 kwbyja ck r_e;Jj.cacióp. gn cualquier extr~-~~a y
1
la burbuja, donde las gdenas viejas co_mienzan a ser separadas por la he
 CA P f T U LO 1 4 El DNA, el código genético y su traducción 363

Horquilla de
replicación

eplicación
Burbuja de
idireccional -
replicación
esde el origen

Horquilla de
replicación

(a) (b) (c) (d)

Fig. 14-14. Un panorama de la replicación del DNA. a) Las dos cadenas de·la molécula de DNA se sepa-
ran en el origen de replicación, como resultado de la acción de proteínas iniciadoras y enzimas conocidas
como helicasas. b) y c) Las dos horquillas de replicación que se forman en el origen se separan, avanumdo
en direcciones opuestas. A medida que se produce la replicación van formand.J una burbuja de replicación
que se extiende bidireccionalmente. d) Cuand.J la síntesis de las nuevas cadenas de DNA se completa, las
dos cadenas de la doble hélice se separan en dos nuevas dobles hélices. El DNA se ha replicado en forma se-
micomervativa, o sea, cada doble hélice nueva está formada por una cadena vieja y una cadena nueva.

las nl}~v~adenas co!!!Plemen1ª-ri~s esfán siendo sinte_!!:?,adas, la molécula parece

formar una estructura en Y conocida como horquilla de replicación. Ltreplicación
es bidireccional y hay dos horquillas de replicación que se mueven en direcciones
opuestas desde el origen (fig. 14-14).
En los procariotas hay un único cromosoma con un único origen de replica-
ción localizado dentro de una secuencia específica de nucleótidos de aproximada-
mente 300 pares de bases. Cuando las cadenas replicadas comienzan a separarse,
se forma una estructura que recuerda la letra griega theta (0), y finalmente se ori-
ginan dos DNA circulares (fig. 14-15). En los eucariotas, en cambio, hay muchas
moléculas de DNA lineales, cada una con varios orígenes de replicación. La repli-
cación sepro4_uce a lg largo de la~ moléc~}é!s ~e DNA lin~ales é! m~dida_g_l}_e_gl-
da burbt1ja se expande bidire_s:cionalm~nte, hasta que alcanza a una burbuja adya-
cente (fig. 14-16). CllªndQ__estas_ burbujas §.e fusiQ_n_pi, t_oqo el cromosoma ha que-
dado replicad~.
Se cree que, en el curso de la evolución, la existencia de múltiples orígenes de
replicación habría favorecido, en los eucariotas, la adquisición de una mayor can-
tidad de DNA total que en los procariotas. La evolución posterior de los eucario-
tas se habría visto beneficiada por este aumento de la cantidad de DNA. El esta-
blecimiento de un sistema de división organizada, como la mitosis, habría permi-
tido mantener el aumento de complejidad del material genético y del número de
cromosomas (véase cap. 10, pág. 273).

Cebadores de RNA y la dirección de la síntesis

Como vimos recientemente, _p_aJ:_a.Q_ye_ocurrc! la síntesis de una nueva cadena

complementa!_Ía_cie Q_NA es necesariaJ~ _P!ese_ncia de la cadena_vieja q_ue_sirve_de
molde, pero ª9-e~ás debe estar p;:esente una S<:'.cuencia de inicio para_la nueva ca-
 364 Información genética SEC : C I ÚN J

~
~-~
.... ·~Mi;,.~¡~·-• ~•~•
:..c<.;"l')?l
.,..;;_.,.:e .,. ,~h~,.~ ;•; .,J':r-...h ~ .... -..
'""/1~
Fig. 14-15. J\lficrofiJtogmjl11 clf'rtró111c11 de ~~::-::;1t0i-í· li 's.tf~"{~\::;,·,,:.~<¡:l{ii:''-':~i(i'.•.' ,
(l: 0~.~ .~ Í~~~ •••~~:,'.f.7•Á1 '1'.l'•,•••/ 1 , -: ,•!.~• '. .•-',;' .l¡ l~I,\
d1sti111os momellfos de /11 r<'plic11ción del cro-
mosoma circul11r ri<' E. co li . El p roaso ro-
mirnz 11 rn u11t1 seruenci11 esp<'Cíjic11 de 1111cleó-
tll.los, el origm de replimción, .JI 11v1111zn t'n di-
recciones op11est11s desde ese punto. 11) En lns
et11p11s tm1pmnas de lt1 rep!imción bidireccio-
111d, !t1 burbujt1 de replicnción qu<' vn 11umen-

j t1111do d e t11m111ío se t1semej11 11 un ojo. b) Pos-

teriormente, el cromosoma que se replica tomrl
/,-¡ forma de úz letra grieg11 theta. c) la repli-
cación bidireccional contimía hasta que todo
(a) (b) . ·"''.\'.1:4:;:
el cromosoma se ha replicado. d) los dos cro-
mosomas recién formados se separan luego uno
de otro (vétlSejig. 10-3).

(c)

dena. Esta secuencia de inicio es provista por un cebador o "primer ", foimad
e_or nucleótidos de ácido ribonucleico (RNA). Como se recordará del capíLUlo ~
(pág. 95), el RNA es un ácido nucleico estrechamente relacionado con el DNA
que se diferencia de este último en que contiene el azúcar de cinco carbonos ri'.
bosa en lugar de desoxirribosa y la base nitrogenada uracilo en lugar de rim ina.
Los nucleótidos de RNA pueden formar puentes de hidrógeno con los nucleóri-
dos de la cadena de DNA; siguiendo un principio de complemenrariedad similar
al del DNA, la guanina se aparea con la citosina, la adenina del RNA se aparea
con la timina del DNA y el uracilo del RNA se aparea con la adenina del DNA.
Tui:i_t_o en procariotas como e~ eucariotas, los cebadores de RNA tienen típica-
m<:_nte diez nucleótidos de largo.

Fig. 14-16. la replicación de los cromosomas

eucarióticos se inicia en orígenes múltiples.
Cada burbuja de replicación individual se ex-
tiende hasta que fina lmente se encuentra con
otra y ambas se unen. En esta microfotografla
electrónica de una céluúz embrionaria de
Drosophila melan ogaster, los centros de las
burbujas de replicación están indicados con
flechas.
 C AP f TU LO 1 4 El DNA, el código genético y su traducción 365

En la cadena sim ple abierta de DNA, ~ íntesis del cebador de RNA es cata-
lizada_.e_~ una en~i_.!_~ª conocida como RNA primasa. Co n los cebadores de RNA
~ locados en el l~gar correcto y apareados a la cadena complementaria, las DNA
', j , r , polimerasas comienza_n -a sini_etizar nuevas cadenas complementarias de DNA a lo
larg~ d~ las cadenas moldeLañadiend~ n_ucleótidos, uno e_or uno, a las cadenas en
crec1m1ento.
Cuando se analizaron las primeras DNA polimerasas, se comprobó que ~in-
• ._,, , , ~- ,, 0,, tetizaban nuevas cadenas de DNA solamente en la dj rección 5' a 3'; o sea, Los

nucleótidos entrantes eran añadidos solamente al extremo 3' de la cadena. Es-

w creó un- gra~ problema. o-;da la estructura intipiralela de la doble hélice de
DNA, la replicación de las dos nuevas cadenas de DNA sobre los dos brazos de
la horquilla de replicación en Y parecía requerir no sólo la síntesis en la direc-
ción 5' a 3', sino también en la dirección 3' a 5'. Durante varios años, los in-
vestigadores trataron infructuosamente de identificar otra DNA polimerasa que
pudiera funcionar en la dirección 3' a 5'. La manera en que la célula "resuelve"
este problema fue revelada, finalmente, por el científico japonés Reiji Okazaki,
quién encontró que, aunque la cadena 5' a 3' se sintetiza contin_uam~ re como
una sola unidad, la cadena 3' a 5' se sintetiza de manera discontinua, como una
serie de fragmentos, i:_ada uno de los _c:u~s es sintetizado_enJª g_ireccióll5~ a)'.
La cadena que se sinteriza de manera conti~ conQfe _fomo cack_na addan-
taaa, y la ca.denaguesesmreuza m o_una .s.erie_de fragmentos_se conoce co-
mo cadena rezagada. Para la síntesis de la cadena adelantada es necesaria la pre-
sencia de un único cebador en un único sirio. Pero para la síntesis d_s'. Los frag-
mentos que forman la cadena rezaga~ los fragmentos de Okazaki, se necesi-
tan múltiples cebadores,_djspuestos a intervalos (fig. 14-1 7) . Los fragmentos de
Okazaki típicamente constan de 1.000 a 2.000 nucleóridos en procariotas y de
100 a 200 nucleóridos en eucarioras.
El papel de los cebadores de RNA, tanto en la cadena adelantada como en la
cadena rezagada, es suministrar cadenas ~ nuª"eótidos correctamente apareadas,
con grupos 3'OH expuestos a los cuales las DNA polimerasas puedan comenzar
a unir nucleóridos de DNA en forma secuencial. La DNA polimerasa, tanto la
que sinteriza la cadena adelantada como la rezagada, comienza en un cebador de
RNA y se mueve a lo largo de una cadena de DNA, añadiendo nuckóridos al ex-
13
tremo 3' de ~ dena en crecimien_to2 has_ta que encuentra el~ r~mo 5' de otro
cebador d~ ~fi.- En la cadena rezagada, en la cual la síntesis se produce desde la
horquilla de replicación, este cebador representa el inicio de otro fragmento de
Okazaki. ~a_§Ín~sis ge la cadena adelantada, por otra parre, se produce en la mis-
ma dirección que avanza la horquilla de replicación y progresa hasta que su exrre-
illº-3' ~e topa con el cebador del primer fragmento de Okazaki de la siguiente
_burbuja de replicación. ~ uando la DNA polim~ra~a_ha~e cont~C_!:O con el extre-
ma 5' de 110 cehadru...de__RNA, otra DNA polimerasa eliminª Jos nucleóridos ~e
RNA y los reemplazª-_con_nucl~{>ridos de DN_!\.. Otra ~nzima, la DNA ligasa, f O-
necra los sucesivos fragmentos, caralizando la reacción de condensación que une
gr~~~ fosfato _r_ a_z~car contiguos. ~~e complejo proceso de replicación del DNA
ocurre anees de cada división celular.
L~ res~ 1cc iones de las DNA polimerasas para sinterizar DNA -necesidad de
un cebador apareado a la cadena molde y dirección 5' a 3' de síntesis- hacen
que estas enzimas no puedan completar la síntesis de los extremos de las molé-
culas de DNA lineal. Este problema se evidencia en la cadena rezagada, cuan-
do se remueve el cebador apareado al extremo 3' de la cadena molde. És te no
puede ser sustituido por DN~ -como ocurre en cualquier otra porció n del cro-
mo -soma-=. -Esto se debe a que, por tratarse del extremo del cro moso ma, no pue-
de haber otro cebado~revio__para que la DNA polimerasa_ inicie ~ síntesis de
es; secu~-nci; Por esca razó~, l_Qs extremos de los cromosomas se acorran en ca-
dá cido de replicación.
366 Información genética SE CC IÓN 3

Dirección
general de la
replicac ió n
í To poiso merasas

H elicasa - - =--H.c/=-,,..J Proteínas de uni ón

a la cadena simple

DNA

RNA
primasa

DNA
polimerasa

DNA

5' 3'

ead ena retrasada ';'.; .' 'l,"'''í:.,

' . .) r\.D
- C adena
con fragmentos adelantada
de Okazaki

Fig. 14-17. Replicación del DNA. Las dos cadenas de la doble hélice de DNA se sep aran y sirven co-
mo moldes para la síntesis de nuevas cadenas complementarias.
Las helicasas, enzimas que operan en las horquillas de replicación, separan las dos cadenas de la doblt
hélice original. Las topoisomerasas, evitan el superenrollamiento, cata/izando la formación y el resella-
do de cortes en una o ambas cadenas delante de las horquillas de replicación. Las proteínas de unión a
la cadena simple estabilizan las cadenas abiertas. La DNA polimerasa cata/iza la adición de nucltóti-
dos a ambas cadenas operando sólo en dirección 5' a 3 '. Para comenzar a añadir nucleótidos, esta en-
zima requiere la presencia de un cebador de RNA, unido por puentes de hidrógeno a la cadena molde
y que luego es reemplazado por nucleótidos de DNA. El cebador de RNA es sintetizado por la RNA
primasa. La cadena adelantada se sintetiza en la dirección 5 ' a 3 ' en forma continua. En este caso, el
único cebador de RNA estd situado en el origen de replicación, que no es visible en este esquema. La
cadena rezagada también se sintetiza en la dirección 5 ' a 3 : a pesar de que esta dirección es opuesta~
la del movimiento de la horquilla de replicación. El problema se resuelve mediante la síntesis d1scontz·
nua de una serie de fragmentos, los fragm entos de Okazaki. Cuando un fragmento de Oka~k1 ha cre-
cido lo suficiente como para encontrar un cebador de RNA por delante de él otra DNA poli,:nerasa
reemplaza a Los nucleótidos de RNA del cebador con nucleótidos de DNA. Luego, la DNA ltgasa co-
necta cada fragmento con el fragmento contiguo recién sintetizado en la cadena.

.
L os orgamsmos ., .
procanottcos .
no tienen este pro 61 ema, ya que su cromosoma
. al re-
es circular,_ Los cromosomas eucarióticos, que son moléculas de DNA )¡~e Peis d
_sen tan secuencias especiales en sus extremos, repeticiones de una secuencia ens en
nucleótidos llamadas telómeros que, en la mayor parte de las células, se ac~rra al-
J as _suc:_esivas divisiones x_ se V<!n _perdien~o. Como vimos en el capítulo \di~: de
gunos tipos celulares, como las células germinales, tl_problema ~e-¡~ pe elula-
nucleótidos de los extremos de los cromosomas en las sucesivas diviswnes ~ re en
res "s~ res!J.elve" mediante la actividad de la telomerasa. Est-ª._ enzim~~t'~e lle-
una proteína con actividad de DNA polimerasa y una molécula de I q 1 eraSª
- en su secuencia
va · 1os seis
· nuc leon ' ·d os repen·dos en los te1'om eros · La re ondo
- - usan co·
agrega nucleótidos a una de las cadenas del extremo del cromosoma, íre va·
mo molde la molécula de RNA que porta (fig. 14-18). Este proceso se rep
 CAP f TUL O 1 4 El DNA, el c6digo genético y su traducci6n 367

---
' ¡4-JB. Alargamiento de los extremos de
f,º1~romosomas eucarióticos por la enzima te-
•asa. a) El fragmento de RNA que porta
l,ome"/.omerasa se aparea con los u•¡timos
· nucte, ó-
(a) Telómero

i~d: del telómero. b) La porción proteica de

;nzima cata/iza la síntesis del DNA ~om-
l nentario al molde de RNA (secuencia
J Tdom,ma
~-e;etitíva telomérica), elongando de este modo
¡ extremo del cromosoma. e) La RNA prima-
:0 y /J¡ DNA polimerasa sintetizan la cadena
i omplementaria a la sintetizada por la telo-

~nerasa. El cebador sintetizado por la primasa

luego es removido.

(e)

DNA polimerasa

rias_veces. La elongación del cromosoma se completa por la actividad de la RNA

primasa y de la DNA polimerasa.
Estudios actuales sugieren una correlación entre el acortamiento de los telóme-
ros y el número de divisiones que puede sufrir una célula. En ese caso, los teló-
meros podrían desempeñar el papel de relojes biológicos celulares, impidiendo di-
visiones ilimitadas. Es interesante notar que las células cancerosas, que pueden di-
vidirse ilimitadamente, poseen una telomerasa activa.

Corrección de errores

Si bien la supervivencia a largo plazo de una especie puede verse favorecida

por cambios en su información genética, a_~ orto plazo se req~iere que esta in-
formación se conse~ve. Para _esto~ s necesario un mecanismo preciso de copia-
qo previo a la división celular y también un mecanismo de reparación de los
daños c!_~g_dentales que pueden ocurrir en el DNA. Muchos de estos cambios
espontáneos son transitorios ya que inmediatamente son "reparados". Ya men-
cionamos que en la replicación del DNA, la DNA polimerasa sólo puede aña-
dir nucleótidos al extremo 3' de una cadena si los nucleótidos previamente
añadidos están correctamente apareados con sus nucleótidos complementarios
en la cadena molde. Como hemos visto, la función del cebador de RNA es su-
ministrar una secuencia de nucleótidos correctamente apareada en la que pue-
da comenzar la síntesis de DNA. !)_urante la síntesis, se pueden cometer erro-
res al añadirse un nucleótido incorrecto a la nueva cadena en formación, es de-
cir, ~~~udeótido ~o- c~~plemen~ai~~ al de la cadena molde. Cuando es~o
ocwreJa_DNA poli~erasa retrocede y elimina nucleótidos hasta que encu~n-
trª _un I}ucleótido corre':.~am~nte aparead() (se dice entonces que esta enzima
tiene actividad de exonucleasa 3' a 5'). Entonces, .QJ.aDW akarna_el último nu-
cleótido apareado correctamente, la enzima detiene su movimiento de retroce-
368 Información genética SECC I Ó N 3

so y r~ ni c:ia el_l!l oy imieQto ~n la. dirección 5' a 3', añadiendo nucJe'.

0
caden a en crecimiento mientras avanza. Esta capacidad de corree . , t 1dosaJ
asegura la precisión de la replicación del D NA. Las polimerasas czon de errora
la actividad exonucleasa 3, a 5', como es e1 caso de Ias RNA polille no Poseeis
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, la transcriptasa inversa (cap. 16 , pag. , 420) no son capaces de repa. me~1as y den
na en crecimiento y, por lo tanto , la frecuen cta e errores durante "ªr
• d 1
l
, ª cade.
-- -- - - - - .. a ~1nr .
mucho mayor. esise1
Además de la corrección de errores que ocurre durante la replicació,1 d
1
otros controles son permanentemente realizados por un grupo de en2 1• e DNA
. n1a1 d '
te otras etapas de la vida de la célul~ ..Est~s enzimas de reparación del DNA uran.
dequiera que encuentran un nucleoudo incorrectamente apareado lo ' don.
- ~~
)

reemplazan por el nucleótido correcto. Este proceso es esencial para rna Ylo
- ~· cr· ntcnerJ
integrida del DNA. a
. Sin embargo, todos estos controles ~o siempre son eficientes y algú n nucl ,
q C_ÍQ 12uede quedar mal apareado, consmuyendo lo que conocemos como ·ltó.:.
d_q_n. Estas alteraciones pueden deberse a un mal desempeño de la DNA po7llta.
rasa en la corrección de errores o a daños posteriores a la replicación sufrid rrne.
el DNA. En general, los daij_os más frecuent~s que impiden el correcto por
. de Ias bases mtrogena
. das son ~1 per' dºd • d
/s
parea.
miento 1 a esponta_nea e purinas, la fo .....
ción de enlaces covalentes entre pirimidinas ~qyacentes (formación de dím~~ªj
y.: el a~ ¡2os químLco__s volum_inosos. La formación de dímeros de ;:.
rimidinas (principalmente de timina) se produce frecuentemente por exposici '
a la luz ultravioleta. En los casos en que la maquinaria de reparación fu nciona ~n
modo eficiente, estos dímeros son removidos por enzimas que reconocen la ano~
malía y cortan el fragmento de la cadena dañada. La interrupción en la cadena
luego es completada por la DNA polimerasa, usando la cadena sana como mol-
de. En aquellos individuos cuya maquinaria de reparación es defectuosa, las mu-
taciones surgidas, por ejemplo, por exposición a la luz solar, se acumulan a lo lar-
go de su vida y pueden provocar lesiones en la piel que con frecuen cia evolucio-
nan hacia un cáncer.

Energética de la replicación del DNA

Todos los nucleótidos -independientemente de las funcion es celulares en las

que intervengan- son fabricados por las mismas vías biosintéticas. Sin embargo,
1º.Lnuclei tid~s req_~ ridos como sust!ato para la síntesis de DNA no son mono-
fi,sfatos, como los que se muestran en la figura 14-3, sino .. rrifosfatos; es decir, la
adenina se encuentra como trifosfato de desoxiadenosina (dATP), la guanina co-
mo el análogo rrifosfato de desoxiguanosina (dGTP), et~ Los g~upos P~Pde los
rrifosfatos aportan la energía pag im¡mlsar la~ r~~~~i~~:mes~ atalizadas por la DNA
_ polimerasa. .
De la misma manera que el ATP proporciona la energía para una gran vane-
dad de reacciones de síntesis, los nucleósidos rrifosfaro dATP, dGTP, dCTP Y
dTTP pr2 porcionan la ~n~ gía para la síntesis del O~¿\. A medida que cada
nucleótido se coloca en la cadena de DNA activa, el grupo P~P se separa y se
divide inmediatamente en dos iones fosfato. La energía que se desprende en es·
te proceso permite poner en marcha las reacciones controladas por la DNApo·
limerasa.

EL DNA COMO PORTADOR DE INFORMACIÓN

in·
Como ya mencionamos, el material genético debe ser capaz de almace;ar ue·
formación. El modelo de Watson y Crick mostró que la molécula de DN P