Universidad Nacional Autónoma de Honduras
Facultad de ciencias
Escuela de Biología
Laboratorio
Fisiología animal BI-327
Práctica de Laboratorio Nº1:
Bioética, manejo y vías de administración
en animales de laboratorio
Integrantes:
Kimberly Celeste Escobar Rodríguez 20191031153
Allison Monserrath Orellana Chámale 20201002785
Flavio Jose Dávila Ramos 20211002187
Jennyfer Alejandra Rodríguez Flores 20201001774
Docente:
Selene Fernández
Instructor de laboratorio
María Zepeda
Tegucigalpa M.D.C 22 de febrero 2024.
Página 1 de 18
Tabla de contenido
Resumen .............................................................................................................................................................. 3
Introducción ....................................................................................................................................................... 4
Objetivos .............................................................................................................................................................. 5
Materiales y métodos ..................................................................................................................................... 5
Metodología........................................................................................................................................................ 6
Vías de administración. ................................................................................................................................. 7
Vía Intraperitoneal: .................................................................................................................................... 7
Vía intramuscular........................................................................................................................................ 8
Vía subcutánea ............................................................................................................................................. 8
Vía cardiaca.................................................................................................................................................... 9
Cuadro de Resultados................................................................................................................................... 11
Discusión ........................................................................................................................................................... 13
Preguntas de investigación ........................................................................................................................ 14
Conclusiones .................................................................................................................................................... 17
Bibliografía ....................................................................................................................................................... 18
Página 2 de 18
Resumen
La práctica 1 “Bioética, manejo y vías de administración en animales de laboratorio”
aborda el estudio de los procesos funcionales de todos los organismos vivos, la
manipulación de animales que generan información en la práctica de laboratorio al
manipularlos se toman medidas de bioseguridad las técnicas de manipulación y sujeción
son consideradas como no invasivas, el objetivo de esta práctica es reconocer la
importancia en el manejo de animales de laboratorio el desarrollo de habilidades básicas
y manipulación de ratones de laboratorio y el procedimiento de vías de administración
de sustancias se utiliza un equipo y materiales especializado y equipo de bioseguridad
y el material de laboratorio que se utiliza para realizar esta práctica esto se lleva a cabo
con una metodología de manipulación de ratones de laboratorio realizando ciertos
pasos para tanto agarre, sujeción del organismo y sus tipos de administración como
resultado se pone aprueba toda la teoría, siguiendo en cuenta los pasos a realizar
aplicando el método de eutanasia con los respectivos materiales se fueron tomando
apuntes sobre cada actividad, se tomaron frecuencias cardiacas entre cada dosis de
lidocaína realizando observaciones al realizar todos los métodos se toma el método de
vía cardiaca utilizando una dosis letal en nuestro sujeto de prueba (rata de laboratorio),la
discusión de la practica trata sobre la eutanasia en organismos vivos, se discuten
diferentes métodos, tanto químicos como físicos, para lograr una muerte efectiva y sin
sufrimiento innecesario. Se mencionan vías de administración de sustancias, como la
oral, intraperitoneal e intramuscular, y se comparan con métodos físicos como el
desnucado y la decapitación. Se destaca la importancia de la experiencia profesional en
la elección y aplicación del método adecuado, garantizando el respeto y el cuidado del
organismo, en conclusión de la práctica se resalta la importancia de la bioética en la
investigación científica, tanto en el campo laboral como en laboratorios y trabajo de
campo. Se enfatiza en considerar los valores y derechos fundamentales de los
individuos y la sociedad, además de los avances científicos, para garantizar una práctica
responsable y ética. Se destaca la necesidad de una sólida formación en bioética para
los científicos y profesionales de laboratorio, con el fin de tomar decisiones éticas
fundamentadas. Además, se menciona la importancia del manejo adecuado de
reactivos biológicos para garantizar la calidad de los resultados y la seguridad en el
trabajo de laboratorio.
Palabras clave: Bioética, Bioseguridad, Vías de administración y Manipulación.
Página 3 de 18
Introducción
La Fisiología animal se dedica al estudio de los procesos funcionales de todos los
organismos vivos, incluyendo todos aquellos esenciales para la supervivencia de la
especie. Los estudios fisiológicos requieren en la mayoría de los casos el uso de
reactivos biológicos para llevar a cabo las experimentaciones y profundizar la
comprensión en cuanto a fisiología animal. El uso de reactivos biológicos y docencia
debe ser realizado con respeto y teniendo en cuenta las reacciones del animal y su
propia etología, se han creado a lo largo del tiempo normas y reglamentaciones que han
sido promulgadas en el mundo.
La manipulación de animales requiere de un cuidado ético y profesional al momento de
trabajar con ellos, ya que son organismos vivos que generan información al momento
de estudio y que requiere respeto por la vida misma. Entre los animales más utilizados
de laboratorio se encuentran: conejo, ratón, rata, cuyos, hámster, aves. Otros animales
que se usan como modelos experimentales son: Gato, perro, peces, tortugas, cerdos,
ranas, hurones, cabras, chimpancés, cabras, ovejas, bovinos, equinos, chinchilla y
armadillos. Al momento de manipular los animales de laboratorio se requiere tomar
medidas de bioseguridad para el manipulador y el reactivo biológico, parte de las cuales
conlleva al uso de Equipo de Protección Personal (EPP) incluyendo guantes, gabachas,
mascarillas, cofias.
Se debe evitar trabajar bajo condiciones de miedo y ansiedad al manipular los reactivos
biológicos, si el sujetador no está tranquilo, tampoco lo estará el reactivo biológico
provocando niveles de estrés altos en los mismos. Las técnicas de manipulación y
sujeción son consideradas como no invasivas, pero el impacto de una mala técnica de
manipulación y sujeción en los resultados experimentales puede ser significativo. Los
animales que son maltratados toman actitud defensiva que se manifiesta ya sea con
mordeduras o escapando, por ende, se han establecido métodos en donde se es más
cuidadoso al momento de hacer experimentación en donde se implementan pequeñas
dosis de lidocaína por medio de inyecciones mediante vía intraperitoneal, intramuscular,
subcutánea y cardiaca.
En el caso de la experimentación con animales, las prescripciones bioéticas se han
contrapuesto al trato ofrecido por los modelos experimentales, en particular el sacrificio,
sufrimiento y muerte de algunos animales, en la búsqueda de opciones que den
respuesta a exigencias de vida, generando una contradicción ante tales prescripciones.
El objetivo de la investigación fue: analizar la experimentación con animales desde la
bioética, para derivar valores e indicadores de comportamiento que subyacen en esta
práctica.
Página 4 de 18
Objetivos
1. Reconocer la importancia de la bioética en el manejo de animales de
laboratorio.
2. Desarrollar habilidades técnicas básicas de sujeción y manipulación en
ratones de laboratorio.
3. Practicar los procedimientos y vías de administración de sustancias en
animales de laboratorio.
Materiales y métodos
· Bandejas
· Jeringas
· Kit de disección
· Hojas de bisturí
· Lidocaína 2%
· Gabacha blanca y manga larga
· Mascarilla
· Guantes de látex
Página 5 de 18
Metodología
Del análisis de los resultados obtenidos de las experiencias e información aportada de
la práctica de la experimentación con animales, se derivaron los siguientes hallazgos:
Como primer procedimiento se practicó la manera para tomar al ratón para poder aplicar
las 4 inyecciones de la siguiente manera:
Se levantó el ratón por la base de la cola y se colocó sobre la tapa de la jaula con barras
o una superficie rugosa, esto provocó que el animal se sujetara y facilitara el posterior
manejo. Una vez sobre la jaula, se tira suavemente hacia atrás de la cola y el ratón
agarrará la superficie con cuatro patas y tirará hacia adelante.
Ilustración 1 Sujeción del organismo
Se tomó la frecuencia cardiaca del ratón con un estetoscopio
Ilustración 2 Medición de frecuencia cardiaca
Página 6 de 18
Se tomó el peso corporal del ratón, tomando el dato de 29.8 gramos
Ilustración 3 Medición del peso corporal
Vías de administración.
Vía Intraperitoneal:
Sujetar el organismo con la nariz apuntando hacia arriba, exponiendo el área abdominal
del animal para la inyección. Localizar la línea media del organismo y dividir el abdomen
en cuadrantes. Los cuadrantes inferiores (especialmente el cuadrante inferior derecho),
son los lugares apropiados para la inyección intraperitoneal. El cuadrante inferior
derecho se elige debido a la ausencia de estructuras anatómicas importantes. Con una
jeringa y aguja de tamaño apropiado, inyectar el material en el organismo.
Ilustración 4 Aplicación de lidocaína en el cuadrante inferior derecho.
Página 7 de 18
Vía intramuscular
Una vez sujeto el animal, asegurarse que una de las patas traseras del animal esté libre
y estabilizada para la inyección. Esta vía puede requerir de 2 personas ya que el animal
puede patear durante la inyección y la aguja dañará los músculos
La aguja debe insertarse de forma perpendicular a la piel del animal. Con una jeringa y
una aguja del tamaño adecuado (dependerá del tamaño del organismo), insertar el bisel
de la aguja e inyectar el material en el cuádriceps del animal (la parte delantera del
muslo) o en la masa muscular lateral del muslo. Evitar la zona que corre con el fémur
ya que es posible dañar el nervio ciático.
Ilustración 5 Aplicación de la lidocaína en el área muscular.
Vía subcutánea
Sujetar el organismo sin levantarlo del mesón. El animal debe ser restringido sin apretar
lo suficiente para que la piel pueda movilizarse. Tomar la piel y tirar de ella hacia arriba.
Con una jeringa y aguja de tamaño apropiado, insertar la aguja en un ángulo de 30-45
° en la piel holgada e inyectar el material. La inyección debe ser en paralelo y lejos de
los dedos que sostienen la piel.
Ilustración 6 Aplicación de lidocaína en el área subcutánea.
Página 8 de 18
Vía cardiaca
Una vez sujetado el organismo, se tenía preparada una dosis de 40 para esta vía con
una aguja se aplicó por debajo de las costillas para poder llegar al corazón con cuidado
para no dar otro tejido.
Ilustración 7 Aplicación de lidocaína debajo de la 3era costilla para la zona cardiaca.
Se realizó una disección para poder visualizar los órganos internos del roedor
Para tener mayor facilidad a la hora de hacer el corte se retiró con una navaja el pelaje
de la parte abdominal del ratón.
Ilustración 8 Sujeción del organismo con alfileres. Ilustración 9 Corte de la piel
Página 9 de 18
Ilustración 10 Corte del tejido conectivo epitelial que recubre a los
órganos
Disección del organismo
Hígado
Estómago
Intestino grueso y delgado
Riñones
Pulmones
Corazón
Ilustración 11 Disección completa del organismo.
Página 10 de 18
Cuadro de Resultados
Actividad Frecuencia Observaciones Imagen evidencia
cardiaca
Vía 220 latidos Al comienzo de
intraperiton x minuto la práctica el
eal ratón se
encontraba en
movimiento
constante,
luego de
aplicar la
primera dosis
su
comportamient
o se vio
alterado a
manera que se
quedó inmóvil
en un solo
lugar.
Vía 136 latidos Su ritmo
intramuscul x minuto cardíaco
ar comenzó a
incrementar
sin realizar
aparentes
movimientos,
comenzó a
perder
movilidad en la
pata derecha
posterior.
Página 11 de 18
Vía 168 latidos En este punto
subcutánea x minuto cuando el
ratón intentaba
moverse de
lugar era
evidente que
estaba
perdiendo la
actividad de su
cuerpo
entrando a un
estado de
relajamiento
mayor, su
ritmo cardíaco
comenzó a
elevarse.
Vía cardiaca 192 latidos En este
x minuto momento su
ritmo cardiaco
se iba
debilitando
poco a poco,
estaba en
estado de
estrés por lo
que se orino
antes del
momento del
deceso, siendo
la hora de
muerte a las
12:10 pm.
Género: hembra Peso: 29.8 gr
Tabla 1 Cuadro de resultados obteniendo mediciones y observaciones del organismo.
Página 12 de 18
Discusión
Para la realización de eutanasia en organismos vivos, se habló de utilización de
químicos para una muerte más efectiva y a su vez una en la que el organismo
no sufra durante más tiempo que el necesario. Por ello, se menciona las distintas
vías de administración de sustancias a organismos vivos. Entre ellas
encontramos: Vías orales, Vía intraperitoneal, intramuscular entre otras. Aunque
se menciona este método como el más utilizado, no es el único existente. Para
la eutanasia de organismos existen métodos tanto físicos como químicos.
La aplicación de sustancias químicas en organismos de laboratorio para su
deceso y posterior estudio genera cierto grado de estrés al mismo a la hora de
ser manipulado en la administración del químico, sin embargo, podríamos
recurrir a otros métodos quizá más eficaces a la hora de practicar la eutanasia
en estos organismos, cabe destacar que los métodos difieren su aplicación
determinando el estudio a realizar en que se involucran estos animales. Por
ejemplo, en el caso de métodos físicos podemos mencionar: Desnucado,
decapitación y aturdimiento. Estos métodos sólo deben utilizarse para sacrificar
animales que pueden manejarse con facilidad y que tengan el cráneo
relativamente fino. A menudo la práctica de estos métodos son menos
angustiosas para el animal que otros procedimientos más complicados con el
uso de productos químicos y otros medios. ( Hernández, 1990)
Los métodos físicos de eutanasia provocan un menor grado de estrés y
sufrimiento en los organismos, a su vez solicitan mayor experiencia de la persona
que lo pondrá en práctica en comparación a los métodos químicos. Cada una de
las prácticas a realizarse deben ser ejecutadas por un profesional para no
ocasionar traumas en el organismo y evitar el sufrimiento, todo ello con el grado
de respeto y profesionalismo que el estudio requiere. Ambos métodos son
aceptados y se consideran éticos, siempre recordando que según el organismo
que se esté utilizando para experimentación, para cada tipo de organismo habrá
un método que se adecué de mejor manera a la biología de este. En este caso
se utilizó inyección de lidocaína vía inyección (método químico) en otros
organismos serán más efectivos los métodos físicos u otras vías de
administración química.
Página 13 de 18
Preguntas de investigación
1. Importancia de los modelos experimentales
Según Research Gates (2015), los modelos experimentales en animales son los
principales estudios que permiten el aumento del conocimiento científico a pasos
agigantados, ya que constituyen el primer paso antes de la investigación clínica,
observando mediante estos la fisiopatología, patogenia, tratamiento y prevención de las
enfermedades. Sin embargo, en la mayoría de los países latinoamericanos se tiene poca
experiencia con el área experimental. Por lo que es importante tener en cuenta una serie
de recomendaciones y pautas a seguir en su realización. Debemos saber que todo
trabajo experimental debe cumplir con los 3 principios de Russel (3R´s), además de
evitar los sesgos a los que están expuestos, asegurando la validez interna y externa.
Así mismo la metodología utilizada en cada grupo de experimentos es un punto clave
para la reproductibilidad de estos estudios a posterior, conociendo que un buen diseño
experimental nos augura un éxito en los ensayos clínicos en humanos.
2. Desventajas en la experimentación con animales
1. Según Petalatino (2020), las enfermedades que son inducidas en los animales de
manera artificial fuera de un entorno natural nunca serán iguales a las que ocurren
naturalmente en los seres humanos. Más del 95% de los nuevos medicamentos que se
prueban de forma segura y eficaz en animales fracasan en ensayos clínicos en
humanos. Para algunas enfermedades, la tasa de fracaso es aún peor: los estudios de
fármacos contra el cáncer tienen una tasa de fracaso del 96,6% y estudios de fármacos
contra la enfermedad de Alzheimer tienen una tasa de fracaso del 99,6%.
2. Según (s.f.), duda sobre la validez científica: Existen argumentos que cuestionan la
relevancia y aplicabilidad de los resultados obtenidos mediante la experimentación
animal en humanos. Debido a las diferencias biológicas entre especies, los
resultados pueden no ser extrapolables a los seres humanos.
3. Problemas éticos y morales: La experimentación animal involucra el sufrimiento y
la muerte de seres vivos, lo cual genera controversia desde un punto de vista ético
y moral. Algunas personas consideran que el uso de animales para el beneficio
humano es injustificado y cruel.
4. Alternativas disponibles: Con los avances en la tecnología y la ciencia, existen cada
vez más alternativas de investigación que no requieren el uso de animales. Estas
alternativas incluyen modelos in vitro, simulaciones por computadora y estudios
epidemiológicos, entre otros.
5. Limitaciones en la reproducción de enfermedades humanas: Aunque se intenta
recrear condiciones similares a las enfermedades humanas en animales, muchas
veces es difícil lograr una reproducción precisa. Esto puede llevar a resultados
engañosos o que no reflejan fielmente la realidad en seres humanos.
6. Costos económicos y temporales: La experimentación animal puede ser costosa
en términos económicos y requerir mucho tiempo. Además, los resultados pueden
Página 14 de 18
tardar en obtenerse y la investigación puede requerir grandes cantidades de
recursos financieros.
3. Realice un cuadro comparativo en base a sus resultados mostrando los
valores reportados entre humanos.
Investigación Resultados de Investigación Resultados de
la investigación del laboratorio laboratorio
de Fisiología Fisiología
Animal Animal
Frecuencia Frecuencia
cardiaca: 80 cardiaca: 220
latidos X minuto latidos X minuto
Suministro de Suministro de
lidocaína: 5 ml lidocaína: 10 ml
Vía mandibular Vía
Intraperitoneal
Frecuencia Frecuencia
cardiaca: 95 cardiaca: 136
COMPARACION DE latidos X minuto MANEJO Y VÍAS DE latidos X minuto
LA EFICACIA DE Suministro de ADMINISTACIÓN Suministro de
SOLUCIONES lidocaína: 10 ml EN ANIMALES DE lidocaína: 10 ml
ANESTÉSICAS: Vía sanguínea LABORATORIO. Vía
LIDOCAINA AL 2% Intramuscular
EN HUMANOS
Frecuencia Frecuencia
cardiaca: 100 cardiaca: 168
latidos X minuto latidos X minuto
Suministro de Suministro de
lidocaína: 0,5 ml lidocaína: 10 ml
Vía renal Vía Subcutánea
Frecuencia
cardiaca: 192
latidos X minuto
Suministro de
lidocaína: 40 ml
(deceso).
Vía Cardiaca.
4. Investigar sobre la cepa CD1 en ratones y en qué estudios es incluida
Cada año en el mundo se producen al menos 421 000 envenenamientos y 20.000
muertes, algunas estimaciones marcan que pueden incluso alcanzar los 1 841 000 y las
94 000, respectivamente. Las serpientes venenosas abarcan aproximadamente 300
especies en todo el mundo, estando distribuidas en 4 familias: Viperidae, Elapidae,
Hidrophiiidae y Colubridae, teniendo esta última solo unas pocas especies venenosas.
Las serpientes que ocasionan mayor incidencia de envenenamientos pertenecen a las
familias Elapidae y Viperidae siendo estas las responsables de más del 90% de los
accidentes ofídicos. En el caso de los venenos de serpientes de la familia Viperidae, los
Página 15 de 18
principales efectos tóxicos que inducen son, a nivel local, hemorragia, mionecrosis y
edema y, a nivel sistémico, hemorragia y coagulopatías, especialmente
desfibrinogenación. En el caso de las serpientes de la familia Elapidae, el efecto
predominante es la neurotoxicidad, la cual se ve reflejada en la prueba de letalidad.
(Gene y col., 1989). Estudios efectuados por diversos grupos durante las últimas
décadas han demostrado que una evaluación más completa y rigurosa de la capacidad
neutralizante de los antivenenos debe basarse en el análisis de la neutralización no sólo
de la letalidad, sino además de otras actividades toxicológicas relevantes que participan
en la fisiopatología de estos envenenamientos. El adecuado manejo y uso de animales
de investigación proporcionados por las instalaciones de la UPEAL- Bioterio UAM
Xochimilco permitió establecer una Dl50 y neutralización de cada anti veneno inoculado
en esta investigación, ya que la cepa de ratones CD-1 utilizadas contaban con las
características fisiológicas adecuadas para este estudio.
Página 16 de 18
Conclusiones
1. La bioética es fundamental para garantizar que la investigación científica
se lleve a cabo de manera responsable y ética, tanto en el campo laboral,
trabajo de campo como en los laboratorios; considerando no solo los
avances científicos, sino también los valores y derechos fundamentales
de los individuos y la sociedad en su conjunto. Su práctica adecuada es
esencial para el progreso sostenible y responsable en el campo de la
biología y la medicina.
2. Es esencial proporcionar a los científicos y profesionales de laboratorio
una formación sólida en bioética para que puedan tomar decisiones éticas
fundamentadas en su trabajo diario.
3. El manejo adecuado de reactivos biológicos es esencial para garantizar
la calidad y la integridad de los resultados en el laboratorio. Cumplir con
prácticas seguras y éticas en la manipulación y almacenamiento de estos
es fundamental para el éxito de la investigación, práctica de laboratorio o
muestreo y la preservación de la seguridad e incluso la conservación.
Página 17 de 18
Bibliografía
(s.f.). Obtenido de [Link]
de-la-experimentacion-animal/
Petalatino. (2020). Obtenido de [Link]
experimentacion-animal/
Research Gates. (23 de 6 de 2015). Obtenido de
[Link]
_investigacion_en_modelos_Experimental_que_sesgos_debemos_de_
evitar_para_poder_publicar
Saucedo Durán, K. C. (2021). Manejo y reproducción de ratones CD1 para
pruebas de letalidad en venenos y neutralización de antivenenos
provenientes de serpientes Bitis arientans, Echis ocellatus y Naja haje.
Obtenido de
[Link]
Luz, R., Julio, C., & Dalia, P. (s/f). Bioética de la Investigación en
Experimentación con Animales. [Link]. Recuperado el 21 de
febrero de 2024, de [Link]
Página 18 de 18