Enzimas alostéricas
Zulma Casas Ms. C.
Pontificia universidad Javeriana
Departamento de Nutrición y Bioquímica
Bioquímica Básica
Enzimas alostéricas
Una de las primeras proteinas alostéricas estudiadas fue la hemoglobina.
El fenómeno del alosterismo fue descrito formalmente por Monod y Jacob, con las primeras estructuras
cristalinas de proteínas de mioglobina y hemoglobina reportadas. (Hasem et al ., 2014)
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Enzimas alostéricas
✓Las enzimas alostéricas contienen distintos
centros reguladores y múltiples centros
funcionales
✓La unión de pequeñas moléculas señal a los
centros reguladores constituyen una forma
significativa de controlar la actividad de estas
enzimas
✓Las enzimas alostéricas exhiben una propiedad
denominada cooperatividad
Hilser VJ et al., 2012
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Enzimas alostéricas
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Enzimas alostéricas
Unión de oxigeno a la hemoglobina
Stryer, L.L. 2015 5
Enzimas alostéricas
La regulación alostérica, aplicada al estudio de las enzimas, ha tenido tres
características :
✓El efector no es químicamente idéntico al sustrato.
✓El efector provoca un cambio en una propiedad funcional de la proteína (p.
de un segundo ligando o propiedades catalíticas alteradas).
✓El efector se une a un sitio que es topográficamente distinto del sitio activo.
Fenton AW. 2008.
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Enzimas alostéricas
Las propuestas iniciales para explicar el alosterismo se centraron en dos
modelos diferentes
✓El modelo secuencial o KNF (Koshland- Nemethy -Filmer)
✓El modelo concertado o MWC (Monod- Wyman -Changeux)
Los modelos son similares, ya que ambos emplean dos estados
conformacionales principales de la proteína alostérica, una forma de
baja afinidad y una forma de alta afinidad.
El cambio conformacional alostérico se favorece cuando se une el
ligando.
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Modelos esquemáticos de alosterismo de proteínas
Modelo secuencial
La unión de un ligando cambia la conformación de la subunidad a la que se une. Este cambio conformacional
induce cambios en las subunidades vecinas que incrementan su afinidad por el ligando
Stryer, L.L. 2015
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Modelos esquemáticos de alosterismo de proteínas
Modelo concertado Transición del estado T al R
Curva que se obtiene si todas las moléculas
Todas las moléculas están, bien sea en el estado T o en el estado R permanecen en estado T, o si todas las moléculas
Stryer, L.L. 2015 estuvieran en estado R.
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Modelos esquemáticos de alosterismo de proteínas
Cada panel representa todos los microestados posibles
del conjunto de una proteína alostérica de dos dominios
(hemoglobina dimérica de invertebrado).
Cada subunidad de la proteína puede adoptar dos
conformaciones distintas, tensa (cuadrados) o relajada
(círculos).
Dos modos distintos de unión de ligandos, libre (formas
abiertas) o unido (formas llenas).
Modelo concertado Los cuadros discontinuos indican los posibles
microestados permitidos bajo los postulados de cada
(a) Modelo de Monod, Wyman, Changeux (MWC).
modelo.
Hilser VJ, et al., 2012.
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Modelos esquemáticos de alosterismo de proteínas
El cambio conformacional en el modelo concertado solo
necesita afectar el equilibrio entre los estados de baja y alta
afinidad.
El cambio conformacional también es multiplicativamente
proporcional al equilibrio entre los estados de baja y alta
afinidad.
Las conformaciones activas e inactivas preexisten en
equilibrio, incluso en ausencia de ligando
Modelo concertado
(a) Modelo de Monod, Wyman, Changeux (MWC).
Hilser VJ, et al., 2012.
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Modelos esquemáticos de alosterismo de proteínas
El cambio conformacional en el modelo secuencial
afecta la afinidad del ligando presumiblemente a
través de la alteración directa de los sitios de unión
El modelo secuencial predice que los cambios
conformacionales deben ser directamente
proporcionales a la cantidad de ligando unido .
Postula el ajuste inducido para que la conformación
activa solo se adopte en la presencia de ligando
Modelo secuencial
(b) Modelo de Koshland, Nemethy, Filmer (KNF).
Hilser VJ, et al., 2012
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Regulación alostérica
La actividad de las enzimas debe regularse de modo
que funcionen en el tiempo y lugar adecuado.
Esta regulación es clave para coordinar el gran
número de procesos bioquímicos que suceden en un
instante en cualquier organismo.
Las enzimas alostéricas son transductores de
información: su actividad puede modificarse en
respuesta en a las moléculas señal o la información Stryer, L.L. 2015
compartida entre los sitios activos
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Regulación alostérica
Stryer, L.L. 2015
La vía glucolítica tiene una función doble: degradar la glucosa para generar ATP y aportar
precursores para reacciones de síntesis.
La velocidad de conversión de la glucosa en piruvato esta regulada para cubrir estas necesidades.
En las vías metabólicas, los enzimas que catalizan reacciones esencialmente irreversibles son los
puntos de control más probables.
Fosfofructoquinasa y piruvato quinasa 14
Regulación alostérica
Estructura de la fosfofructoquinasa
Regulación alostérica de la fosfofructoquinasa
La estructura de la fosfofructoquinasa de E. coli comprende
un tetrámero de cuatro subunidades idénticas
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Stryer, L.L. 2015
Regulación alostérica
Efector positivo: Fructosa 1,6-bisfosfato
Stryer, L.L. 2015 Efector negativo: ATP y Alanina
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Regulación alostérica
Activación de la fosfofructoquinasa por la fructuosa 2,6-bifosfato.
Stryer, L.L. 2015
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Regulación alostérica
Los enzimas alostéricos se distinguen por su respuesta a los cambios en la concentración de sustrato, además
por su susceptibilidad a ser regulados por otras moléculas.
ATCase
Aspartato transcarbamilasa
Stryer, L.L. 2015
Cataliza una etapa limitante para la síntesis de pirimidinas
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Regulación alostérica
Aspartato transcarbamilasa
Subunidades reguladoras (r) y subunidades catalíticas (c)
Stryer, L.L. 2015
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Regulación alostérica
Aspartato transcarbamilasa
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Regulación alostérica
Aspartato transcarbamilasa
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Regulación alostérica
Aspartato transcarbamilasa
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Bibliografía
Fenton, A. W. (2008). Allostery: an illustrated definition for the ‘second secret of life’. Trends in
biochemical sciences, 33(9), 420-425.
Hilser, V. J., Wrabl, J. O., & Motlagh, H. N. (2012). Structural and energetic basis of allostery. Annual
review of biophysics, 41, 585-609.
Stryer, L.L. (2015). Bioquímica. Reverté
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