UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIHUAHUA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
Práctica 3
Determinación de coliformes fecales
Microbiología de Alimentos, 4L (Equipo 1)
Julieta Yamileth Cruz Trillo (179473)
Docente, Juan Guillermo Ayala Soto
Resumen
Los coliformes son indicadores de contaminación del agua y los alimentos. El objetivo del
trabajo fue la detección de coliformes fecales en las aguas de expendios de bebidas de
sabores, algunas hechas a base de frutas y otras con saborizantes y colorantes artificiales.
Los resultados no reflejaron la presencia de coliformes fecales en nuestra muestra, indicando
que es apta para consumo humano y cumple con los requisitos sanitarios.
Palabras clave: coliformes fecales, agua, consumo.
Abstract
Coliforms are indicators of water and food contamination. The objective of the work was the
detection of fecal coliforms in the water of flavored beverage stores, some made from fruits
and others with artificial flavors and colorings. The results did not reflect the presence of fecal
coliforms in our sample, indicating that it is suitable for human consumption and meets health
requirements.
Keywords: fecal coliforms, water, consumption.
Introducción
Existen diversos métodos para cuantificar el número de microorganismos presentes en
muestras líquidas y sólidas. Dentro de las técnicas más comunes se encuentra el recuento
directo por microscopia de fluorescencia, así como los procedimientos basados en diluciones
en serie, haciendo crecer microorganismos en medios de cultivo sintéticos sólidos o líquidos,
como el recuento en placa de unidades formadoras de colonias (UFC) o la estimación por el
método del número más probable (NMP).
El método del número más probable fue descrito por McCrady en 1915 y actualmente sigue
siendo ampliamente utilizado. En un principio este método fue empleado para estimar el
número de microorganismos en muestras de alimentos y aguas. Sin embargo, se ha
demostrado que también puede ser aplicado para la determinación de microorganismos
aerobios y anaerobios en lodos, sedimentos marinos y suelos contaminados, por tanto, este
método es aplicable para estimar el número de microorganismos en muestras de suelo y
agua, tanto para bacterias aerobias como anaerobias.
Las coliformes fecales son un subgrupo de los coliformes totales, capaces de fermentar la
lactosa a 44ºC en vez de 37ºC como lo hacen los totales.
Aproximadamente el 95% del grupo de los coliformes presentes en heces están formados por
Escherichia coli y ciertas especies de Klebsiella. Ya que los Coliformes fecales se encuentran
casi exclusivamente en las heces de los animales de sangre caliente, se considera que
reflejan mejor la presencia de contaminación fecal. Estos últimos se denominan
termotolerantes por su capacidad de soportar temperaturas más elevadas. Esta es la
característica que diferencia a coliformes totales y fecales. La capacidad de los Coliformes
fecales de reproducirse fuera del intestino de los animales homeotérmicos es favorecida por
la existencia de condiciones adecuadas de materia orgánica, pH, humedad. Desde hace
mucho tiempo se han utilizado como indicador ideal de contaminación fecal. Su presencia se
interpreta como una indicación de que los organismos patógenos pueden estar presentes y
su ausencia indica que el agua o el alimento estudiado se hallan exentos de organismos
productores de enfermedades.
Objetivo
Que el alumno se familiarice con los métodos de recuento y detectar las bacterias coliformes
totales y fecales, así como determinar si la muestra traída es apta para el consumo humano.
Metodología
Pesar 10 gr o 10 ml según sea el caso de una muestra de un producto destinado al
consumo humano, en este caso fue una muestra de agua de limón de un expendio
de bebidas, adicionar en una bolsa de plástico previamente esteril, 90 ml de agua
peptonada, llevar nuestra muestra al stomacher durante 2 minutos hasta obtener una
suspensión completa y homogénea según se indique la técnica correspondiente para
cada alimento. Permitir que las partículas grandes se sedimenten, y transferir la
cantidad deseada a las capas superiores de la suspensión.
Transferir 1 ml de la dilución primaria, en otro recipiente contenido 3 veces al volumen
del diluyente esteril, evitando el contacto entre diluyente y pipeta, utilizando 1 pipeta
por dilución.
Mezclar cuidadosamente cada botella de diluyente siempre de la misma manera y
tomar 1 ml de la muestra.
Inocular en las cajas que se hayan seleccionado. El volumen que se transfiera nunca
debe ser menor al 10% de la capacidad total de la pipeta.
Distribuir las cajas estériles en la mesa de trabajo de manera que la inoculación; la
adición de medio de cultivo y homogenización, se puedan realizar cómoda y
libremente. Marcar las cajas en sus tapas con los datos pertinentes previamente a
su inoculación y correr por duplicado.
Después de inocular las diluciones de las muestras preparadas en las cajas Petri,
agregar de 12 a 15 ml del medio preparado, mezclarlo mediante 6 movimientos de
derecha a izquierda, 6 en el sentido de las manecillas del reloj, 6 en sentido contrario
y 6 de atrás a adelante, sobre una superficie lisa y horizontal hasta lograr una
completa incorporación del inóculo en el medio; cuidar que el medio no moje la
cubierta de las cajas. Dejar solidificar.
Incubar las cajas en posición invertida (la tapa hacia abajo) por el tiempo y la
temperatura que se requieran, según el tipo de alimento y microorganismo de que se
trate.
Resultados y discusión
Conclusiones
Para nuestra prueba de coliformes fecales, no obtuvimos ninguna muestra de estas bacterias,
pudiendo concluir que el agua es apta para el consumo humano, sin embargo, si se hiciera
la prueba con diferentes tipos de agar y/o caldos podríamos descubrir si existe algún otro
microorganismo que nos perjudica a la salud.
Referencias bibliográficas
● L. ORTIZ, M. (2003) Material didáctico de Microbiología de alimentos: recuento de
enterobacterias. Feb 2008
● MICROBIOLOGÍA APLICADA: Manual de laboratorio (2006) Coliformes totales y
fecales en agua de consumo humano. Fe. 2008
