Universidad San Francisco de Quito
Laboratorio de Biología General
Reporte No. 4
Aplicación de la microscopía
Nombres y Apellidos: Lorien Beltrán Mejía Profesora: Ma. Isabela Ojeda García
Código: 00335068 Sección: jueves 1 pm
Fecha: 7 de marzo del 2024
Objetivo
Objetivo General: Aprender a usar el microscopio correctamente en cuanto a iluminación,
enfoque, montaje en portaobjetos y tinción para resaltar las estructuras celulares y de esta
manera reconocer las diferencias y similitudes entre células de organismos vegetales y
animales.
Objetivo 1: Reconocer las estructuras de 3 células vegetales de diferentes especies, mediante
las diferentes tinciones de azul de metileno, Lugol y agua destilada.
Objetivo 2: Identificar las estructuras de las células animales mediante suero fisiológico en
la sangre y safranina en el epitelio bucal.
Pregunta 1: Dibuje las células vegetales (cebolla), estomas (suculenta), cloroplastos
(elodea), en 40x y rotule 4 estructuras observadas.
40x
Pared celular
Membrana
Citoplasma
Nucléolo
400x
Dibujo 1. Observación montaje húmedo de cebolla con con Lugol en 40x.
40x
Cloroplastos
Citoplasma
Membrana celular
Vacuola
400x
Dibujo 2. Observación montaje húmedo de Elodea densa en 40x.
40x
Núcleo
Citoplasma
Ostiolo
Células oclusivas
400x
Dibujo 3. Observación de montaje húmedo de planta suculenta en 40x.
Pregunta 2: En base a las células animales:
Dibuje las células epiteliales en 40x.
40x
Citoplasma
Membrana
celular
Núcleo
400x
Dibujo 4. Observación de células epiteliales humanas preparadas en 40x
Dibuje 5 células sanguíneas en 100x en un solo campo óptico.
100x
Linfocito
Neutrófilos
Eritrocitos
Plaquetas Eosinófilo
1000x
Dibujo 6. Observación de placa preparada de sangre con tinción de Wright en 100x
Pregunta 3. Investigue y explique por qué se usan diferentes tinciones celulares (azul de
metileno, Lugol, safranina, Wright, suero fisiológico)
Existen distintos tipos de tinciones, como lo son las simples, diferenciales o específicas. Al
hablar de la tinción de Gram se puede clasificar a esta como básica en la valoración inicial de
muestras para análisis bacteriológico. En primer lugar, la tinción Wright es una técnica
utilizada para la diferenciación de elementos celulares de la sangre, se clasifica como una
tinción policromática, ya que puede teñir compuestos ácidos o básicos presentes en una
célula. Este reactivo está compuesto por eosina y azul de metileno. La eosina es un colorante
ácido y es la más utilizada en componentes rutinarios, su tonalidad varía dependiendo de en
qué se tiñe, por ejemplo, en el caso de los núcleos celulares, es mayoritariamente morado, por
la interacción molecular entre eosina y un complejo de azul de metileno-DNA. Las distintas
coloraciones observadas en la célula provocan el efecto Romanowsky; el cual se encarga de
teñir de púrpura a los núcleos. (Jácome et al., 2014))
Por otro lado, el azul de metileno es el cloruro de tetrametiltionina, un colorante básico
derivado de la fenocitina que forma parte en la tinción de Wright, un tipo de tinción
Romanowsky. Se encarga de teñir los filamentos para una mejor observación de estos. El
Lugol es una disolución compuesta por yodo molecular I y yoduro potásico KI en agua
destilada y es de coloración rojiza; su obtención sirve como ejemplo de solubilidad de una
sustancia en agua según su enlace químico. Entre sus funciones está reconocer la presencia de
granos de almidón en los tejidos vegetales debido a que absorbe el yodo produciendo una
coloración azul intensa, la cual desaparece al calentarse y reaparece al enfriarse; sirve para
reconocer alimentos antioxidantes, por ejemplo, en el caso del ajo decolora el reactivo de
Lugol. (Pinto, et al., 2012)
Al hablar de safranina, se puede explicar a la safranina O como un colorante de tejidos
biológico y sirve como herramienta para detectar las estructuras en células eucariontes y
procariontes. Este colorante O es conocido como de contraste ya que se usa en la
diferenciación de una estructura celular previamente teñida con otro colorante; por ejemplo,
es usada en el método de tinción de Gram para la bacteriología. Mediante la tinción de Gram
se permite la rápida diferenciación de bacterias positivas y negativas; con la estructura de la
mureína, las paredes de las bacterias serán la base de la afinidad de color, y por eso las
bacterias se teñirán como una solución de cristal violeta de Gram. En el caso de las bacterias
Gram positivas aparecerá azul violeta; en las negativas hay decoloración, por lo que se
teñirán con safranina, ya que es una molécula cargada positivamente de cationes, y se
obtendrá un color de rosa a rojo. (Sánchez, 2012)
Por último, el suero fisiológico o solución salina es una solución acuosa de sales de cloruro
de sodio; tiene un amplio uso en la medicina, desde aplicaciones clínicas hasta laboratorios
médicos. Es fundamental al emplear una muestra de sangre, ya que, al usarse como diluyente,
ajusta la concentración de una muestra a un nivel apropiado para de esta manera obtener
resultados precisos. (Meléndez et al., 2020)
En base a la información brindada, se puede concluir que cada tinción cumple una función
específica, por eso al realizar los experimentos en laboratorio, tanto las células vegetales
como animales participaron con diferentes tinciones.
Pregunta 4. Explique cuál es la función de los estomas.
Los estomas sirven como un poro para intercambio gaseoso; estos poros se encuentran en la
superficie de las plantas, principalmente en las hojas y en menor medida en tallos y otros
órganos. Tienen dos funciones principales: permitir el intercambio gaseoso al dar la entrada
al CO2, el cual se utiliza como combustible para llevar a cabo el proceso de fotosíntesis; las
células guardia se encargan de este proceso al expandir o contraer los estomas donde se
genera O2 y posteriormente liberarlo a la atmósfera. La segunda función es regular el
movimiento del agua a través de la transpiración, promoviendo la absorción del agua por las
raíces para el proceso de fotosíntesis, ya que la planta necesita seis moléculas de agua y seis
moléculas de CO2 para generar glucosa y O2. Por esta razón los estomas son vitales en el
proceso fotosintético de las plantas. (Martínez et al., 2004)
Conclusión 1: En conclusión, se reconoció las estructuras de las 3 células vegetales mediante
las diferentes tinciones de azul de metileno, Lugol y agua destilada.
Conclusión 2: En conclusión, se identificó las estructuras de las células animales mediante el
uso de suero fisiológico en las células sanguíneas y safranina en la mucosa oral.
Referencias
Jácome, L. E. L, Durán, H. M, Castro, C. A. C., Peña, S. O, González, C. G y Cendejas, F. R.
(2014). Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología. Artículo de revisión, 3
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Martinez, P. J, Arizaleta, M, Sanabria, E. M., y Brito, L. (2004). Características de los
estomas, densidad e índice estomático y su variación en función a la injertación.
Bioagro,16 (3), 213-218. https://www.redalyc.org/pdf/857/85716309.pdf
Meléndez, G., Cuevas, E. B, Cruz, C. E. M., Sánchez, O. M. (2020). Las tinciones básicas en
el Laboratorio de Microbiología: Un enfoque gráfico. Universidad Nacional Autónoma de
México, 66 (2), 1-4.
https://www.zaragoza.unam.mx/wp-content/Portal2015/publicaciones/libros/cbiologicas/
libros/Tinciones.pdf
Pinto, G., Sánchez, M. T. M., Sánchez, M. M. (2013). Reactivo de Lugol: Historia de su
descubrimiento y aplicaciones didáctica. Universidad Nacional Autónoma de México, 24
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Sánchez, A. H. I. (2012). Colorante safranina O. Revista Mediagraphic, 1 (2), 83-85.
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